卵巢粒层细胞瘤与纤维卵泡膜细胞瘤蛋白质组学研究

目的:卵巢粒层细胞瘤(ovary granulosa cell tumor,OGCT)与纤维卵泡膜细胞瘤(ovarian fibrothecoma,OF)是卵巢性索间质肿瘤较为常见的类型。由于二者均含有卵泡膜细胞且OGCT呈弥漫性生长模式时与富于细胞的OF和黄素化的OF组织学形态具有相似性,造成二者在病理诊断过程中鉴别困难。本文旨在通过探究OGCT与OF蛋白质组学差异、筛选二者间差异表达蛋白质(differentially expressed proteins,DEPs),发现鉴别诊断二者的生物学标志物。方法:选取5例OGCT和5例OF患者的新鲜肿瘤样本组织,采用蛋白质消化、肽段纯化技术及液相色谱-质谱/质谱分析进行蛋白质定量。运用软件对OGCT和OF的蛋白质进行DEPs分析;对DEPs进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,并在生物过程(bioprocess,BP)、分子功能(molecular function,MF)和细胞组分(cell component,CC)方面对蛋白质/基因进行功能注释,探讨DEPs显著富集的信号通路;通过检索基因/蛋白质相互作用(search tool for the retrieval of interacting genes/proteins,STRING)数据库获得筛选出的DEPs相互作用信息,构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。选取26例OGCT和28例OF石蜡包埋组织,通过组织芯片技术和免疫组织化学染色法验证筛选出的DEPs在OGCT和OF中的表达情况。结果:共筛选出24个OGCT与OF显著DEPs,其中13个蛋白质在OGCT中表达量显著上调,11个蛋白质在OF中表达量显著上调。GO富集分析结果显示:富集到BP上的通路包括细胞外基质(extracellular matrix,ECM)处理过程,细胞外结构组织,有机酸、羧酸、脂肪酸和单羧酸分解代谢过程;富集到CC上的通路包括含胶原蛋白的ECM、内质网腔和线粒体基质;富集到MF上的通路包括硫化物结合、ECM结构成分、酰胺结合、胶原结合、转移酶活性和转移酰基。KEGG富集分析结果显示:上调的DEPs主要富集于缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸降解途径;下调的DEPs主要富集于先天性谷胱甘肽代谢缺陷症、朊病毒疾病、花生四烯酸代谢途径、补体系统、细胞色素P450对异种生物的代谢作用和药物代谢-细胞色素P450。PPI结果显示24个DEPs与多种蛋白质存在相互作用关系。组织芯片免疫组织化学染色显示:PLOD3在OGCT中高表达,在OF中低表达,与富集分析结果一致。结论:通过蛋白质组学技术和生物信息学分析方法共筛选出24个DEPs,经免疫组织化学验证,PLOD3在OGCT与OF鉴别诊断中具有一定的临床应用价值,有望成为OGCT与OF鉴别诊断的生物学标志物。

卵巢卵泡膜-纤维细胞瘤的多层螺旋CT诊断

目的探讨卵巢卵泡膜-纤维细胞瘤的多层螺旋CT(MSCT)诊断及鉴别诊断。方法收集12例经手术病理证实的卵泡膜-纤维细胞瘤患者的MSCT检查资料,并进行影像学征象分析。结果 12例患者中,左侧病灶居多(7/12),以类圆形为主(8/12),均边界清楚,部分伴盆腔积液(10/12),病灶以实性为主(9/12),未见钙化出血坏死,增强扫描无强化(1/12)或轻度强化(11/12)。结论卵泡膜-纤维细胞瘤具有一定的临床及影像特点,综合这些特征,有助于提高该肿瘤的诊断及鉴别诊断。

卵巢卵泡膜-纤维瘤和卵巢颗粒细胞瘤的超声征象比较

目的对比分析卵巢卵泡膜-纤维瘤(OFMF)和卵巢颗粒细胞瘤(OGCT)的超声征象。方法回顾性分析2017年9月至2019年9月沧州市人民医院收治且经手术病理证实的OFMF患者与OGCT患者的超声检查等临床资料。共126例患者,OFMF患者59例,作为OFMF组;OGCT患者67例,作为OGCT组。对比分析2组病灶位置及大小、肿瘤边界及形态、内部回声改变及腹水情况、内部血流情况以及收缩期峰值流速(PSV)、内部阻力指数(RI)、搏动指数(PI)。结果OFMF组与OGCT组均为单发病灶,2组病灶位置及直径比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2组边界均较清晰,形态均较规则,呈类椭圆形,2组肿瘤边界及形态比较差异无统计学意义(P>0.05)。OFMF组实性回声明显多于OGCT组,囊实性回声、囊性回声均明显少于OFMF组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组多无腹水情况出现,2组腹水情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。OFMF组丰富血流信号明显少于OGCT组,中等血流信号、少量血流信号均明显多于OGCT组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组PSV、RI、PI比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论OFMF与OGCT超声征象较为相近,临床上易混淆出现误诊,但2者内部回声及内部血流情况存在显著差异,可以此为据,并结合患者年龄与临床症状,作综合性判断从而有效鉴别。

MRI在卵巢纤维-卵泡膜细胞瘤诊断中应用的价值

目的探讨MRI在卵巢纤维-卵泡膜细胞瘤诊断中应用的价值。方法选取我院2014年1月—2016年12月经手术和病理证实为卵巢纤维-卵泡膜细胞病例32例,分析患者的MRI表现,并与病理结果进行比较。结果 MRI表现:32例卵巢纤维-卵泡膜细胞瘤病例均单侧肿瘤,边界清楚,表现圆、椭圆形、部分哑铃形或分叶状。4例表现为囊实性,28例为实性。T1WI上31例实性肿块或实性成分显示低或等信号,仅1例表现稍高信号;T2WI上实性肿块或实性成分信号多样:6例为均匀或不均匀稍低信号,增强无明显强化;18例呈低及稍高信号混杂,无明显强化或延迟轻度强化;4例以稍高信号或高信号为主,夹杂斑点、编织索条影,增强斑点、索条影强化明显,余部无明显强化或略强化;4例呈等及稍高信号、DWI上明显高信号,增强明显强化。4例囊实性肿块囊性成分囊壁略强化。22例检出腹水,大量腹水6例。病理结果 :32例均为良性。肿瘤形态同MRI表现,包膜均完整。4例表现出囊实性,32例实性瘤或实性成分剖面呈灰黄色或灰白色或黄白交织。镜下,瘤细胞呈梭形,有网状纤维包绕,且出现大的形变细胞核。术中22例有腹水,大量腹水6例。MRI与病理表现相比,差异无统计学意义。结论卵巢纤维-卵泡膜细胞瘤MR表现为边缘清楚的类圆形、椭圆形、较大的可为哑铃形或分叶状的实性或囊实性肿块。实性肿块或实性成分典型表现为T2WI上及T1WI上为低信号,增强无强化或轻度延迟强化;非典型表现T2WI上信号多样化,随卵泡膜细胞成分增多,信号增高,T1WI增强强化成分逐渐增多;囊性部分仅囊壁略强化。这些特点有助于提高对卵巢纤维卵泡膜细胞瘤的认识和诊断水平,MRI可以反映病理特征。

绝经期巨大卵巢颗粒细胞-卵泡膜细胞瘤伴黄素化

病历资料 患者,女,68岁,下腹坠痛10个月余,曾到当地反复就诊给予消炎、止痛治疗有所缓解。近1个月症状加重,同时伴有腹胀、恶心、尿频尿急、里急后重、大便难解、食欲减退、体重减轻、睡眠差,2007年10月22日入保山仁济医院。

卵巢卵泡膜细胞瘤的MRI表现

目的探讨分析卵巢卵泡膜细胞瘤的MRI表现特征。方法收集12例经手术病理证实的卵巢卵泡膜细胞瘤,行MRI平扫及增强扫描,分析病灶部位、边界、形态、信号、增强表现及时间-信号曲线。结果 12例均为单发,边界清楚,类圆形或分叶状实性肿块,T1WI呈等或稍低信号,T2WI等或稍高信号,DWI呈稍高信号,其中5例伴内部囊变,1例伴周边囊变,12例增强扫描病灶实性成分呈渐进性缓慢轻度强化,时间-信号曲线呈缓慢上升型,信号强度及上升幅度较子宫肌层低,12例患者均合并腹盆腔积液。结论卵巢卵泡膜细胞瘤MRI表现为边界清楚的实性肿块,部分伴囊变,增强后呈缓慢渐进性强化,且增强信号强度低于子宫肌层信号,时间-信号曲线为缓升型。

卵泡膜细胞瘤-纤维瘤组肿瘤超声造影特征

目的观察卵泡膜细胞瘤-纤维瘤组(OTFG)肿瘤的CEUS特征。方法回顾性分析11例经手术和病理证实的OTFG患者(OTFG组)和同期手术的15例附件区恶性实性肿瘤患者(恶性组)CEUS资料。结果 OTFG组中,卵泡膜细胞瘤6例、卵泡膜细胞纤维瘤2例、纤维瘤3例,肿瘤最大径(4.12±1.32)cm,术前CEUS诊断准确率为63.64%(7/11)。CEUS表现:OTFG组肿瘤多呈规则(10/11,90.91%)、有包膜(10/11,90.91%)、内部有造影剂灌注(10/11,90.91%)的实性肿块,OTFG组造影剂开始灌注时间及达峰时间均晚于恶性组[(3.55±0.93)s vs(1.31±1.55)s、(13.91±1.97)s vs(9.31±1.97)s,P均<0.05]。OTFG组造影剂灌注强度以稀疏、弱灌注为主(9/11,81.82%),多呈周边向中央灌注(10/11,90.91%),而恶性组造影剂灌注增强快而强(13/15,86.67%),多呈中央向周边灌注(13/15,86.67%);二者差异有统计学意义(P均<0.05)。三维能量多普勒CEUS血管分型显示,OTFG组与恶性组比较肿瘤内部血管分支少、走形较平直(P<0.05)。结论 OTFG肿瘤CEUS具有一定特征,符合良性肿瘤表现。

FOXL 2基因检测对卵巢成年型粒层细胞瘤诊断与鉴别诊断的价值

目的探讨FOXL 2基因突变在卵巢成年型粒层细胞瘤(AGCT)病理诊断及鉴别诊断中的意义。方法收集2012年1月—2018年12月于中国人民解放军总医院第一医学中心及航空总医院病理科同期诊断为卵巢AGCT及卵泡膜-纤维瘤患者的标本各26例,对标本进行形态学观察及免疫组织化学检测,并行Sanger测序检测FOXL 2基因突变情况。结果26例AGCT镜下瘤细胞呈弥漫型、条索状、缎带状和岛状结构排列,可见微滤泡结构(Call-Exner小体);肿瘤细胞界限不清,胞浆稀少,细胞核圆形、卵圆形,可见核沟。卵泡膜-纤维瘤镜下肿瘤细胞呈编织状、旋涡状排列;细胞以肥胖的短梭形细胞为主,核卵圆形,胞浆呈空泡状,富含脂质。免疫组织化学检测结果显示,波形蛋白(Vimentin)、抑制素a(Inhibin-a)、钙网膜蛋白(Calretinin)、CD56、CD99在AGCT中阳性表达率分别为100%、88.0%、92.8%、62.5%、40.0%;在卵泡膜-纤维瘤中阳性表达率分别为100%、76.9%、73.1%、0、0,其中两组间性索间质标记物Inhibin-a、Calretinin的表达比较无显著性差异(P>0.05)。Sanger测序检测显示,73.1%(19/26)的卵巢AGCT患者的标本中检测到FOXL 2402c.C→G突变,而卵泡膜-纤维瘤患者的标本中未检测到该突变,两者比较差异有显著意义(χ^2=8.089,P<0.05)。结论FOXL 2基因突变可用于AGCT诊断,组织学不典型病例进行基因突变和相应的免疫组化标志物检测,可以提高AGCT鉴别诊断的准确性。

卵巢颗粒细胞瘤的影像学特征性表现

卵巢颗粒细胞瘤是指在纤维卵泡膜瘤样间质内超过10%细胞在形态上与发育中的卵泡颗粒细胞十分相似的肿瘤[1],来源于具有性激素分泌功能的卵巢性索-间质肿瘤,颗粒细胞瘤约占12%,是除卵巢纤维-卵泡膜细胞肿瘤之外的第二常见的性索-间质肿瘤,分为成年型和青少年型,本研究将2013年2月至2018年2月在我院接受治疗的15例患者作为研究对象,进一步探讨、学习其CT、磁共振成像(MRI)特征性表现。

卵巢常见性索间质肿瘤的影像学表现与病理对照分析

目的总结卵巢常见性索间质肿瘤(OSCST)实性和囊性成分的影像特征。方法收集本院经手术病理证实为OSCST 36例患者的影像学资料,并与病理对照分析。结果颗粒细胞瘤9例(25%),9例(100%)有实性成分,5例(55.6%)有囊性成分;卵泡膜细胞瘤-纤维瘤组肿瘤27例(75%),25例(92.6%)有实性成分,11例(40.7%)有囊性成分。前者的实性成分呈等/稍低密度,MRI呈等T_(1)稍长T_(2)信号,增强明显强化。后者的实性成分呈等/稍低密度,MRI呈等/长T_(1)信号短/长T_(2)信号,增强轻度延迟强化。二者囊性成分均呈低密度,MRI呈长T_(1)长T_(2)信号,增强未见强化;动脉期囊变间分隔内见多发细小血管影。OSCST易合并子宫肌瘤、子宫内膜增厚、盆腔积液(血)等。结论OSCST实性成分呈等/稍低密度,MRI呈等/长T_(1)信号及短/长T_(2)信号,囊变间分隔内见多发细小血管影,结合伴随影像征象,能够对其作出初步诊断。

CT鉴别卵巢卵泡膜-纤维瘤和成人型颗粒细胞瘤的价值

目的探讨CT对卵泡膜-纤维瘤和成人型颗粒细胞瘤的鉴别诊断价值。方法回顾性分析经手术病理证实的22例卵泡膜-纤维瘤和10例成人型颗粒细胞瘤的完整影像及临床资料,比较二者的CT表现特点。结果除1例卵泡膜-纤维瘤为双侧发病,余均为单侧发病。二者均多表现为境界清楚的实性或囊实性肿块,圆形或类圆形,肿瘤较大时可为分叶状。肿瘤囊性低密度区分布:卵泡膜-纤维瘤囊性低密度区多表现为包膜下边界清楚的大囊,而成人型颗粒细胞瘤多为病灶内多发片状不规则小囊,典型者呈"蜂窝状"。二者实性肿块或肿块实性成分平扫平均CT值分别为(37.35±8.58)HU、(37.30±7.60)HU,差异无统计学意义(t=0.016,P=0.988)。增强扫描后二者实性肿块或肿瘤实性成分净增CT值(ΔCT)分别为(7.8±2.65)HU及(46.6±12.65)HU,二者比较差异具有明显统计学意义(t=-8.001,P<0.01)。本组中50%(5/10)成人型颗粒细胞瘤增强扫描病灶周边见多发迂曲、扩张血管显影。23枚卵泡膜-纤维瘤均未见此征象。1枚卵泡膜-纤维瘤内见结节样钙化。1例卵泡膜-纤维瘤及5例成人型颗粒细胞瘤见斑片状出血。10例卵泡膜-纤维瘤及3例成人型颗粒细胞瘤伴不等量腹/盆腔积液。结论卵泡膜-纤维瘤和成人型颗粒细胞瘤在肿块囊性低密度区分布、实性部分强化方式及伴发出血、钙化及腹盆腔积液等方面存在一定差异,仔细分析其特征,有助于二者的鉴别诊断。

流式细胞计数测定抗孕激素对猪卵巢细胞孕酮受体的影响

为了研究抗孕激素调节卵巢功能的机理 ,制备了人胎盘羊膜的双池培养系统。分离猪卵巢颗粒细胞和内泡膜细胞 ,分别种在羊膜两侧。在加入或不加 RU486和ZK98.73 4时 ,两种细胞在促性腺激素刺激下共同培养。 48h后 ,应用流式细胞计数(FCM)测定两种细胞的孕酮受体 (PR)和雌激素受体 (ER) ;放射免疫法测定培养液中的孕酮 (P)和雌二醇 (E2 )浓度。结果显示 ,抗孕激素增加两种细胞的 PR含量 ,ER没有明显改变 ;颗粒细胞的 P和 E2 分泌受到抑制 ,内泡膜细胞的 P分泌也减少。提示 P调节 P本身的合成 ,这种旁分泌和自分泌作用是通过 P控制 PR上调的途径。

冰冻诊断少见卵巢肿瘤临床病理分析

目的 探讨冰冻组织切片诊断卵巢少见肿瘤的病理特征及鉴别诊断。方法 对5例卵巢肿瘤的冰冻标本进行大体认证、显微镜下形态分析、免疫组织化学检查,部分病例外院会诊,并复习相关文献。结果 1例诊断为卵巢微囊性间质瘤,镜下弥散增生的细胞呈网格状、血窦样、微囊样方式生长,主要组化结果:CK(部分+)CK7(-)ER(-)CK20(-)VIM(强+)EMA(-)Ki-67(5%+)AE1/AE3(部分+)SMA(+)α-inhibin(-)CD10(+)β-catenin(+)WT-1(+)CyclinD1(+)。1例为卵巢低级别子宫内膜样间质肉瘤伴广泛上皮及平滑肌分化,镜下异型细胞舌状浸润生长,细胞胞浆丰富,透亮,核大深染,部分呈上皮样细胞改变,部分组化结果:CK7(+)Ki67(+5%)CK20(-)ER(部分弱+部分强+)PR(-)EMA(局灶+)CA125(+)WT-1(+),AE1/AE3(+)CD10(-)Vimentin(+)SMA(灶+)CyclinD1(+)Desmin(局灶+)GATA3(散在+)HMB45(-)。3例患者为成人型粒层细胞瘤,镜下局灶肉瘤样弥散生长,有些区域小梁状条索状,可见特征性的Call-Exner小体,部分组化结果:WT-1(+)α-inhibin(+)CK7(-)EMA(-)CK20(-)。肉眼大体观1例囊性,有增厚区,无附壁结节;其余4例均为囊实性肿瘤,可见附壁结节。结论 冰冻切片诊断卵巢性索间质肿瘤及宫内膜样间质肉瘤时,首先是大体认证,正确选择取材部位;其次是镜下观察肿瘤细胞的排列形式,细胞核染色、胞浆、核仁,核分裂象等;最后结合免疫组织化学结果综合判断,给出准确的冰冻结论。

卵巢性索间质肿瘤的临床及超声表现分析

目的探索卵巢常见类型性索间质肿瘤的超声特点及其与临床表现的相关性,并分析误诊原因。方法收集2010年至2019年复旦大学附属中山医院经阴道及/或经腹部超声检查并经手术病理证实的71例卵巢性索间质肿瘤患者。卵泡膜纤维瘤、卵泡膜细胞瘤及纤维瘤属于卵巢纤维-卵泡膜瘤组(ovarian thecoma-fibroma groups,OTFG),共64例;成人颗粒细胞瘤(adult granular cell tumor,AGCT)共7例。收集患者卵巢肿块的最大径线、回声、形态、边界、后方回声是否衰减、彩色多普勒血流成像(color Doppler flow imaging,CDFI)信号等信息;比较不同大小肿瘤之间盆腔积液、CA125及肿瘤囊性成分是否具有差异;分析超声成像诊断符合率及误诊情况。结果OTFG多纵横比<1(89.1%),AGCT多为不规则形或分叶状(100%);OTFG以实质低回声为主(73.4%),AGCT常表现为囊实混合型(100%);68.8%OTFG病灶伴回声衰减,AGCT均不伴回声衰减;所有病灶边界清晰;OTFG病灶CDFI多表现为无或少量彩色血流信号,血流信号以周边多见(60.9%),AGCT则CDFI以3、4级彩色血流多见(100%)。不同大小肿瘤之间囊性成分、CA125及盆腔积液差异有统计学意义(χ^2=7.407、16.080和21.540;P=0.025、<0.001和<0.001)。实性及实性为主型病变诊断符合率高于囊实性及囊性为主型。结论 OTFG与AGCT在超声表现上有一定差异,可通过声像图特征对两组疾病进行鉴别诊断。

Meigs’综合征免疫特征及CD4^+T细胞糖酵解相关基因表达水平分析

目的探讨Meigs’综合征(MS)患者的外周免疫特征以及CD4^+T细胞糖酵解相关基因的表达水平。方法分析2010至2018年9例MS(MS组),81例卵巢卵泡膜瘤-纤维瘤(OTF组),30例卵巢癌(OC组)和30例健康对照(HC组)的临床特征和实验室指标参数,并检测1例MS和1例OTF患者手术前后,9例卵巢癌(OC组)以及10例健康对照(HC)的外周血CD4^+T细胞的糖酵解相关基因(HIF1α、GLUT1、ENO1、LDHα)的表达水平。结果 MS组患者血清CA125和HE4水平显著高于OTF组(P<0.000 1,P<0.05)和HC组(P<0.000 1,P<0.05),而血清HE4较OC组显著降低(P<0.00 1),血清CA125和HE4水平均与腹水的量呈正相关(P<0.000 1,P<0.01);MS组外周血淋巴细胞绝对数和百分比较OTF组(P<0.05,P<0.01)和HC组(P<0.05,P<0.01)显著降低,并且显著高于OC组(P<0.01,P<0.05),此外,NLR、PLR和SII较OTF组(P<0.05,P<0.001,P<0.001)和HC组(P<0.05,P<0.001,P<0.01)显著升高,且NLR显著低于OC组(P<0.01),PLR和SII均与腹水的量呈正相关(P<0.01, P<0.05);术前MS患者HIF1α表达水平显著高于OTF患者(P<0.000 1),OC组(P<0.01)和HC组(P<0.01),GLUT1和LDHα则显著低于OTF患者(P<0.000 1,P<0.05),OC组(P<0.01,P<0.01)和HC组(P<0.01,P<0.05),ENO1表达水平较OC组(P<0.01)和HC组(P<0.01)显著降低;MS患者这4个基因的表达水平在手术切除肿瘤后倾向于恢复正常水平(P<0.000 1)。结论 MS患者外周免疫功能紊乱,且CD4^+T细胞糖酵解过程存在障碍。

激素对肿瘤发生发展的影响

激素作为机体方面的因素之一,与肿瘤之间的关系非常复杂。激素对肿瘤的影响主要限于各自的靶器官发生的肿瘤,然而有时对某些非靶器官的肿瘤亦有一定程度的影响。另一方面,内分泌器官发生的肿瘤,可产生过量的激素,引起功能亢进的征候。近年来,非内分泌组织发生的肿瘤分泌“异位激素”引起各种“异位激素综合征”已受到广泛重视。