非小细胞肺癌中卵巢癌结构域蛋白酶1的表达及其临床意义

目的:检测卵巢癌构域蛋白酶1(ovarian tumor domain-containing protease 1,OTUD1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达水平,探讨OTUD1表达与NSCLC临床病理特征及预后的关系。方法:选取2008年3月至2009年2月在山东大学齐鲁医院胸外科行手术治疗的82例非小细胞肺癌患者组织标本及40例正常肺组织标本,免疫组化法检测OTUD1的表达水平;另取2015年3月至2015年4月在山东大学齐鲁医院胸外科手术治疗的原发性NSCLC 25例,应用Real-time PCR检测OTUD1在NSCLC组织及邻近正常肺组织内的表达。结果:与正常肺组织相比,NSCLC组织中OTUD1 mRNA的表达显著增高(0.620±0.055 vs 0.387±0.037,P<0.01);OTUD1的表达与患者的年龄、性别、吸烟史、病理类型均无显著相关性(均P>0.05);与淋巴结转移(P<0.01)、分化程度(P<0.01)及TNM分期(P<0.05)显著相关。单因素及多因素分析结果显示,OTUD1高表达与患者不良预后有关。结论:OTUD1在NSCLC组织中高表达,与NSCL的恶性进展及不良预后密切相关,可作为判断NSCLC生物学特征及预后的参考指标。

基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1mRNA在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义(英文)

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP-9)及其组织抑制物(TIMP-1)mRNA与卵巢上皮性癌的发生、发展的关系。方法采用RT-PCR技术检测69例卵巢上皮性肿瘤(38例恶性、15例交界性、16例良性)及11例正常卵巢组织中MMP-9及TIMP-1mRNA的表达,并分析其与各临床病理特征的关系。结果MMP-9mRNA在卵巢上皮性癌及交界性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为76%、44%)及表达水平[分别为(154.14±4.42)、(96.87±3.04)]均显著高于良性肿瘤及正常卵巢组织[分别为13%、9%和(8.26±2.67)、(2.34±1.02);P<0.05];且MMP-9mRNA在晚期卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平明显高于早期癌组织(P<0.05)。TIMP-1mRNA在卵巢上皮性癌及交界性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为68%、38%)及表达水平[分别为(126.35±3.81)、(90.62±5.54)]均显著高于良性肿瘤及正常卵巢组织[分别为13%、9%和(8.32±2.02)、(2.63±1.35);P<0.05];TIMP-1mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平与各临床病理特征均无相关性(P>0.05)。结论MMP-9mRNA的高表达及MMP-9/TIMP-1平衡的调节失衡导致卵巢上皮性肿瘤的发生、侵袭和转移;MMP-9mRNA的高表达对卵巢上皮性癌有预后意义。

多囊卵巢综合征患者血清网膜素、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9、内脏脂肪组织来源的丝氨酸蛋白酶抑制剂水平与病情的相关性和诊断价值的研究

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清网膜素(Omentin)、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)、内脏脂肪组织来源的丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平与患者病情的相关性及其对PCOS的诊断价值。方法选取2015年10月至2021年3月邯郸市中心医院收治的106例PCOS患者作为观察组,根据PCOS分型标准将其分为1型组(n=36)、2型组(n=28)、3型组(n=24)、4型组(n=18)4个亚组;选取同期64例健康女性体检者作为对照组。检测两组血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平,观察组患者行经阴道超声检查,统计卵巢体积和卵巢直径<9mm的卵泡数目。采用Pearson相关性分析评价血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平与病情的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平对PCOS的诊断价值。结果观察组血清Omentin、CTRP9水平低于对照组,Vaspin水平高于对照组(P<0.05)。与1型组比较,4型组、3型组、2型组血清Omentin、CTRP9水平降低,且4型组<3型组<2型组(P<0.05)。与1型组比较,4型组、3型组、2型组血清Vaspin水平升高,且4型组>3型组>2型组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清Omentin水平与卵巢体积、卵泡数目均呈负相关(r=-0.458、-0.469,P<0.05),血清CTRP9水平与卵巢体积、卵泡数目均呈负相关(r=-0.391、-0.402,P<0.05),血清Vaspin水平与卵巢体积、卵泡数目均呈正相关(r=0.429、0.452,P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清Omentin诊断PCOS的曲线下面积(AUC)为0.841,临界值为71.74ng/L;血清CTRP9诊断PCOS的AUC为0.782,临界值为229.04ng/mL;血清Vaspin诊断PCOS的AUC为0.808,临界值为0.62mg/L;三者联合诊断PCOS的AUC为0.908。结论PCOS患者血清Omentin、CTRP9水平降低,Vaspin水平升高;血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平与患者病情密切相关;血清Omentin、CTRP9、Vaspin三者联合检测对PCOS诊断具有重要价值。

卵巢上皮性肿瘤中基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1 mRNA的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP-9)及其组织抑制物(TIMP-1)mRNA与卵巢上皮性癌的发生、发展及侵袭、转移的关系。方法:采用RT-PCR技术检测38例卵巢上皮性癌、15例卵巢交界性上皮性肿瘤、16例卵巢良性上皮性肿瘤及11例正常卵巢组织中MMP-9及TIMP-1 mRNA的表达,并分析其与各临床病理参数的关系。结果:MMP-9mRNA在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率分别为76%、44%及表达水平(分别为154.14±4.42,96.87±3.04)均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为13%,9%和8.26±2.67,2.341.02;P均<0.05);且MMP-9 mRNA在晚期卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平明显高于早期(P<0.05)。TIMP-1 mRNA在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为68%,38%)及表达水平(分别为126.35±3.81,90.62±5.54)均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为13%,9%和8.32±2.02,2.63±1.35;P均<0.05);TIMP-1 mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平与各临床病理参数均无相关性(P>0.05)。结论:MMP-9 mRNA的高表达及MMP-9/TIMP-1平衡的调节失衡导致卵巢上皮性肿瘤的发生、发展;MMP-9 mRNA的高表达对卵巢上皮性癌的预后有意义。

基于NOD样受体热蛋白结构域3/胱天蛋白酶-1通路探讨鱼腥草注射液缓解脂多糖诱导的小鼠急性肺炎肺损伤的作用机制

目的探究鱼腥草注射液(HHI)对急性肺炎小鼠的保护作用及对NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(caspase-1)通路的调控作用。方法2019年7月至2020年6月,将购自广东省医学实验动物中心的90只BALB/c雄性小鼠分为正常对照组、模型组、HHI低(10 mL/kg)及高(30 mL/kg)剂量组、NLRP3激动剂(DDC)组(300 mg/kg)、HHI+DDC组(30 mL/kg+300 mg/kg),每组15只。除正常对照组外,其余各组均通过雾化吸入脂多糖(LPS)2.5 g/L建立急性肺炎模型。末次给药后检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平、中性粒细胞数目;取右肺,检测右肺湿重/干重(W/D);左肺组织病理损伤情况,肺组织凋亡相关斑点样蛋白(ASC)mRNA及蛋白、NLRP3 mRNA及蛋白、TNF-α、IL-6、caspase-1蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组小鼠出现肺泡破坏及炎性细胞浸润等病理损伤现象,W/D、IL-6[(1692.06±95.26)µg/L比(569.91±50.89)µg/L]、TNF-α[(1846.24±99.26)µg/L比(506.99±55.48)µg/L]水平及中性粒细胞数目[(66.24±2.56)×10^(6)个/毫升比(5.09±1.98)×10^(6)个/毫升]、肺组织NLRP3 mRNA及蛋白(1.01±0.13比0.22±0.12)、ASC mRNA及蛋白(1.03±0.13比0.29±0.11)、caspase-1(1.06±0.14比0.25±0.12)、TNF-α、IL-6蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,HHI低、高剂量组肺泡破坏及炎性细胞浸润等现象缓解,W/D、小鼠BALF中炎性因子IL-6[(1069.13±75.12)µg/L、(889.02±65.13)µg/L比(1692.06±95.26)µg/L]、TNF-α[(1225.33±84.02)µg/L、(806.63±69.12)µg/L比(1846.24±99.26)µg/L]含量及中性粒细胞数目[(45.33±2.22)×10^(6)个/毫升、(22.63±2.02)×10^(6)个/毫升比(66.24±2.56)×10^(6)个/毫升]、肺组织中NLRP3 mRNA及蛋白(0.83±0.11、0.52±0.12比1.01±0.13)、ASC mRNA及蛋白(0.82±0.12、0.54±0.11比1.03±0.13)、caspase-1(0.80±0.15、0.59±0.12比1.06±0.14)、TNF-α、IL-6蛋白表达降低(P<0.05);DDC组小鼠上述指标与HHI低、高剂量组相反(P<0.05)。结论HHI可通过抑制NLRP3/caspase-1通路激活,改善肺炎小鼠炎症反应,缓解肺损伤。

基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1在卵巢肿瘤中的表达及意义

目的 研究基质金属蛋白酶MMP - 9及组织抑制剂TIMP - 1在卵巢肿瘤中的mRNA表达及与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法 应用RT -PCR方法检测 4 8例卵巢癌、 2 1例良性卵巢肿瘤及 2 2例正常卵巢组织中MMP - 9及TIMP - 1mRNA的表达情况 ,进行阳性率及半定量的比较 ,并将其结果与临床及病理学资料进行统计学分析。结果 MMP - 9在卵巢癌中表达的阳性率及半定量明显高于正常卵巢组织 ,其表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关 ,在Ⅲ -Ⅳ期患者中的表达显著高于Ⅰ -Ⅱ期患者 (P <0 0 5 )。MMP - 9阳性患者累积生存率明显低于阴性者。TIMP - 1的表达在卵巢癌中无明显增高 ,且与临床病理无相关性。MMP - 9/TIMP- 1在卵巢癌中的比值明显高于正常卵巢组织。结论 MMP - 9及MMP - 9与TIMP - 1的平衡失调与卵巢癌的浸润转移密切相关 ,MMP - 9可作为监测晚期卵巢癌患者预后的一个指标。

基质金属蛋白酶组织抑制剂-1基因在卵巢肿瘤中的表达及突变的检测

目的:研究基质金属蛋白酶组织抑制剂1(tissueinhibitorsofmatreixmetalloproteinases,TIMP1)在卵巢肿瘤中的表达及突变情况。方法:RTPCR方法检测48例卵巢癌、21例良性卵巢肿瘤及22例正常卵巢组织中TIMP1mRNA的表达情况;利用人卵巢癌组织构建人TIMP1真核表达质粒并测序;聚合酶链反应单链构象多态性(PCRSSCP)分析技术检测卵巢恶性肿瘤、良性肿瘤和正常卵巢组织中TIMP1基因的突变。结果:TIMP1在各种卵巢组织中mRNA的表达并无差异;构建的真核表达质粒经测序含人TIMP1全长cDNA,于第6外显子处发生错义突变;卵巢恶性肿瘤中TIMP1基因的突变率为16.7%。结论:卵巢恶性肿瘤组织中有TIMP1基因突变存在;构建的TIMP1真核表达质粒,为下一步研究TIMP1在卵巢癌侵袭转移中的作用打下了物质基础。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3、胱天蛋白酶-1、白细胞介素-1β在子宫内膜腺癌中的表达及临床意义

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)在子宫内膜腺癌组织中的表达及临床意义。方法选择徐州市中心医院2014年1月至2016年12月行手术治疗的病人组织蜡块标本,其中121例子宫内膜腺癌、32例子宫内膜不典型增生及50例正常增殖期子宫内膜,免疫组化法检测上述组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β的阳性表达,分析NLRP3、caspase-1、IL-1β表达水平与子宫内膜腺癌病人5年生存率的关系。结果子宫内膜腺癌组病人中NLRP3、caspase-1的阳性率为62.0%、71.1%,在子宫内膜不典型增生组织中的阳性率为46.9%、62.5%,其表达水平明显高于正常增殖期子宫内膜组织中NLRP3、caspase-1的阳性率14%,22%(P<0.05)。子宫内膜腺癌病人组织中NLRP3表达与caspase-1、IL-1β表达呈正相关(r=0.40,P<0.001;r=0.22,P=0.015),caspase-1与IL-1β表达呈正相关(r=0.27,P=0.003)。Kaplan-Meier生存分析显示:NLRP3、caspase-1、IL-1β阳性表达病人5年生存率分别为77.3%(58/75)、80.2%(69/86)、79.1%(53/67),均显著短于阴性表达病人97.8%(45/46)、97.1%(34/35)、92.6%(50/54)(均P<0.05)。Cox回归分析显示NLRP3是子宫内膜腺癌病人预后的独立危险因素[HR=15.375,95%CI:(1.595,148.187),P=0.018]。结论NLRP3、caspase-1、IL-1β可能通过细胞焦亡参与子宫内膜癌的发生发展;NLRP3高表达是影响子宫内膜腺癌病人预后的独立危险因素,可作为潜在的预后分子标志物,为肿瘤提供有效的治疗靶点。

宫颈癌患者血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体和相关细胞因子表达及临床意义

目的探究宫颈癌患者血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体和相关细胞因子的表达水平及临床意义。方法选取2021年3月至2024年3月收治的宫颈癌患者78例作为癌变组,选取同期宫颈上皮内瘤变患者78例作为癌前病变组。比较2组血清NLRP3炎症小体[NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)]、白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;采用Pearson相关性分析血清NLRP3、ASC、Caspase-1与IL-18、IL-1β的关系;分析宫颈癌患者相关细胞因子水平和临床病理特征之间的关系。结果癌变组血清IL-18、IL-1β、NLRP3、ASC、Caspase-1水平均高于癌前病变组(P<0.01);Pearson相关性分析结果显示,患者血清NLRP3、ASC、Caspase-1水平与IL-18和IL-1β水平均呈正相关(P<0.05,P<0.01)。宫颈癌患者肿瘤临床分期越高、分化程度越低,IL-18和IL-1β水平越高(P<0.01);有淋巴结转移和无淋巴结转移的宫颈癌患者IL-18和IL-1β水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论宫颈癌患者血清IL-18、IL-1β水平和血清NLRP3炎症小体均异常升高,且其水平变化与肿瘤恶性进展有关。

应用组织微阵列技术研究MMP-9与TIMP-1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义

目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织基质金属蛋白抑制剂-1(TIMP-1)在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义。方法应用组织微阵列技术结合免疫组化(S-P法)检测94例卵巢上皮性肿瘤组织中MMP-9和TIMP-1的表达。结果卵巢癌组织和卵巢交界性肿瘤组织中MMP-9阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤(P<0.01);卵巢癌组织中TIMP-1阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤(P<0.01);MMP-9和TIMP-1表达与患者年龄、肿瘤大小和卵巢组织学类型均无明显相关性;在卵巢癌的病理分级中,MMP-9/TIMP-1比值随卵巢上皮性肿瘤恶性程度的增加明显增大。结论MMP-9和TIMP-1在卵巢上皮性肿瘤的演进发展中起重要作用,二者可作为卵巢上皮性肿瘤恶性化的分子指标之一。组织微阵列是检测多样本组织的一种高效、低耗、可比性强的分子病理学研究工具。

蛋白酶体抑制剂诱导OVCAR3卵巢癌细胞自噬的机制研究

目的:研究蛋白酶体抑制剂诱导OVCAR3卵巢癌细胞的自噬中PI3K通路的作用。方法:MG1 3 2处理OVCAR3细胞后,光镜观察自噬泡的形成。多种蛋白酶体抑制剂处理OVCAR3细胞后,Western blot检测自噬特异性蛋白LC3的变化。PI3K抑制剂(渥曼青霉素与3-MA)联合多种蛋白酶体抑制剂处理OVCAR3细胞,Western blot检测LC3的变化。采用shRNA技术下调OVCAR3细胞的Beclin 1表达,MG132处理细胞,Western blot检测LC3的变化,吖啶橙(AO)染色观察酸性自噬泡的形成。结果:MG132诱导OVCAR3卵巢癌细胞自噬泡形成,多种蛋白酶体抑制剂均可诱导OVCAR3细胞LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化增强。PI3 K抑制剂与蛋白酶体抑制剂联合应用,与单独应用蛋白酶体抑制剂相比,LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化无改变。下调Beclin 1表达后,MG132诱导的LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化及酸性自噬泡的形成均无改变。结论:蛋白酶体抑制剂诱导OVCAR3卵巢癌细胞发生自噬是不依赖PI3K途径进行的。

卵巢浆液性肿瘤MMP-9和TIMP-1的表达意义

目的 :探讨基质金属蛋白酶 9(matrixmetallopro teinase 9,MMP 9)及其金属蛋白酶组织抑制剂 (tissueinhibitorofmetalloproteinases 1 ,TIMP 1 )在卵巢浆液性肿瘤中的表达特点及意义 .方法 :采用免疫组化法 ,观察 6例正常卵巢组织 ,1 2例卵巢浆液性囊腺瘤 ,1 2例交界性囊腺瘤 ,2 2例卵巢浆液性囊腺癌组织中MMP 9及TIMP 1表达特点及规律 .结果 :正常卵巢上皮细胞只有 1例表达MMP 9,但有 5例表达TIMP 1 .大部分卵巢浆液性肿瘤细胞都有MMP 9及TIMP 1的表达 ,但其表达强度在恶性程度不同的肿瘤中有明显差异 .结论 :TIMP 1可能参与卵巢的正常生理功能 .MMP 9及TIMP 1在卵巢浆液性囊腺癌的浸润、转移中起了重要作用 .

卵巢癌结构域蛋白酶-1基因拮抗IFN-α抗病毒效应研究

目的研究卵巢癌结构域蛋白酶-1(ovarian tumor domain-containing protease-1,OTUD1)基因对Ⅰ型干扰素信号通路的影响以及对IFN-α抗病毒效应的影响。方法双荧光素酶报告试验检测OTUD1基因对IFN-α诱导的干扰素刺激应答元件(interferon-stimulated response elements,ISRE)启动子转录活性的影响;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测OTUD1对IFN-α诱导的干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)表达水平的影响;Western blot检测OTUD1对干扰素信号通路关键分子表达的调控作用,qPCR和ELISA检测其对IFN-α抑制乙型肝炎病毒复制的影响。结果在HEK293T和Huh7.0细胞中,OTUD1下调了干扰素信号通路下游的ISRE启动子转录活性以及ISG15和ISG56等抗病毒基因的表达。在HEK293T细胞中,OTUD1降低了磷酸化蛋白质酪氨酸激酶(phospho-Jak1,p-JAK1)的蛋白质表达水平,但是OTUD1酶活突变体C320S不能调控ISGs和p-JAK1的表达。在Huh7.0细胞中,OTUD1降低了IFN-α抑制乙型肝炎病毒复制的效应。结论OTUD1通过其泛素化酶活性下调p-JAK1的蛋白质表达水平,抑制干扰素JAK-STAT信号通路及ISGs表达。OTUD1拮抗IFN-α抑制病毒复制的效应可能与干扰素诱导的JAK-STAT信号通路有关。

HIF-1α、MMP-2在卵巢癌中的表达及其与血管生成拟态的关系

目的：探讨卵巢癌缺氧诱导因子HIF-1α、基质金属蛋白酶MMP-2的表达及其与血管生成拟态（VM）的关系。方法：收集本院2000年1月~2009年5月经手术切除的卵巢肿瘤组织石蜡标本81例,免疫组化检测HIF-1α、MMP-2蛋白表达,采用CD34和PAS双重染色的方法检测卵巢癌组织中存在的VM,讨论HIF-1α、MMP-2表达与VM的关系。结果：卵巢癌HIF-1α表达与临床分期（r=0.392,P=0.020）、分级（r=0.358,P=0.035）呈正相关,MMP-2表达与分级（r=0.409,P=0.015）呈正相关。卵巢癌不同分级组的VM形成率有显著差异（P=0.018）,低分化的卵巢癌VM阳性率高于高分化组。VM阳性组和阴性组的HIF-1α表达有统计学差异（P=0.003）,VM阳性组和阴性组的MMP-2表达有统计学差异（P=0.004）。结论：低分化卵巢癌组织更易形成VM,HIF-1α、MMP-2表达与卵巢癌分级及VM密切相关。

卵巢癌组织CXCL12、MMP-9、integrinβ_1表达及意义

目的探讨趋化因子CXCL12、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及整合素β_1(integrinβ_1)在卵巢癌发生、发展中的作用。方法选取60例份卵巢癌组织、20例份卵巢交界性肿瘤组织及10例份卵巢良性肿瘤组织,采用免疫组化Envision法检测CXCL12、MMP-9及integrinβ_1阳性表达率,分析CXCL12、MMP-9及integrinβ_1阳性表达与卵巢癌患者临床病理参数的关系及卵巢癌组织中CXCL12、MMP-9、integrinβ_1表达的关系。结果卵巢癌组织中CXCL12、MMP-9及integrinβ_1阳性表达率均高于卵巢交界性肿瘤组织及卵巢良性肿瘤组织(P均<0.01)。CXCL12阳性表达与卵巢癌临床分期、淋巴结转移及腹水有关(P<0.05或<0.01),MMP-9及integrinβ_1表达均与卵巢癌组织学分级、TNM分期、淋巴结转移及腹水有关(P<0.05或<0.01)。卵巢癌组织中CXCL12表达与MMP-9及integrinβ_1表达均呈正相关(r分别为0.328、0.332,P均为0.001),MMP-9表达与integrinβ_1表达呈正相关(r=0.447,P=0.000)。结论卵巢癌组织CXCL12、MMP-9及integeinβ_1均高表达,三者协同作用,共同促进卵巢癌的发生、发展。

共培养体系中小鼠囊胚对人卵巢癌细胞系HO-8910PM的影响

目的:观察两种具有侵袭特性的小鼠囊胚细胞与人卵巢癌细胞在相同的体外微环境下,动态的相互作用和整体生物学行为变化。方法:建立小鼠囊胚与人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM体外共培养模型,应用MTT法检测HO-8910PM细胞黏附率的改变;应用Transwell体外细胞侵袭实验观察HO-8910PM细胞体外侵袭及趋化性运动能力的变化;应用RT-PCR检测HO-8910PM细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1、TIMP-2mRNA的表达。结果:癌细胞与小鼠囊胚共培养24h后,大部分囊胚开始边脱带边黏附,推开底层的癌细胞,在囊胚与肿瘤细胞间形成了明显的界限。共培养组的HO-8910PM细胞的黏附率低于对照组。Transwell小室体外侵袭实验及体外趋化性运动实验显示,共培养组穿过滤膜的细胞数明显少于对照组。共培养组MMP-2、MMP-9mRNA的表达及MMP/TIMP较对照组明显下降,TIMP-1、TIMP-2mRNA的表达略有增加。结论:当人HO-8910PM细胞与小鼠囊胚共培养时,肿瘤细胞失去了特有的侵袭性;小鼠囊胚能显著降低HO-8910PM细胞的黏附、体外侵袭能力、运动迁移性及MMP-2、MMP-9mRNA的表达。

甲状腺素转运蛋白对卵巢癌细胞株的影响及机制研究

目的:探讨甲状腺素转运蛋白(transthyretin,TTR)对卵巢癌细胞株SKOV-3及OVCAR-3迁移和侵袭的影响及其机制。方法:用Lipofectamine 2000搭载转染TTR小干扰RNA(siRNA)或non-target siRNA(对照组)入细胞,采用划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blotting)检测TTR下游蛋白表达。结果:划痕实验显示,TTR siRNA组和对照组SKOV-3细胞伤口愈合率分为(57.00±5.03)%和(87.33±1.20)%(P=0.004)。TTR siRNA组和对照组OVCAR-3细胞伤口愈合率分为(64.67±5.55)%和(84.33±1.45)%(P=0.027)。Transwell实验显示,TTR siRNA组SKOV-3及OVCAR-3细胞小室穿透的细胞数分别是对照组的(61.00±4.16)%(P=0.013)及(46.33±8.37)%(P=0.003)。Western blotting实验结果显示,在卵巢癌SKOV-3及OVCAR-3细胞,TTR siRNA组Wnt1、β连环素(β-catenin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达都低于对照组(均P<0.05)。结论:TTR可能通过抑制Wnt1/β-catenin通路及其下游关键分子MMP-2和MMP-9的表达,抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移。

MT1-MMP的表达与上皮性卵巢癌生物学特性及预后关系的研究

目的 研究膜型基质金属蛋白酶-1(membranetype-1matrixmetalloproteinase,MT1-MMP)蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义。方法 应用免疫组化SP法检测56例上皮性卵巢癌、15例上皮性卵巢良性肿瘤及10例正常卵巢组织中MT1-MMP的表达和微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果 MT1-MMP在卵巢癌组织中的阳性表达率(67. 9% )显著高于卵巢良性肿瘤(4 /15)和正常卵巢组织(1 /10) (P<0. 01)。MT1-MMP的表达水平与临床分期、组织学分级、有无淋巴结转移和MVD密切相关。在单因素生存分析中,MT1-MMP的表达与患者预后不良有关。结论 MT1 -MMP在上皮性卵巢癌中的异常高表达可能在肿瘤的侵袭转移和血管生成中起重要作用,对判断预后有一定的指导意义。

NOB1基因与肿瘤

人类NOB1基因是近年来新发现的一个基因，它是于2005年被鉴定的一个新分子。研究表明NOB1通过调节基因的转录参与肿瘤的发生和发展。本文就NOB1基因的结构特点和研究进展综述如下。

上皮性卵巢肿瘤组织中膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)的表达及临床意义

目的:研究膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化EnVision法检测40例上皮性卵巢癌(A组)、20例交界性上皮性卵巢肿瘤(B组)、20例良性上皮性卵巢肿瘤(C组)和20例正常卵巢组织(D组)中MT1-MMP的表达和预后。结果:MT1-MMP在上皮性卵巢癌中的阳性率(95%)显著高于良性卵巢肿瘤(45%)和正常卵巢(35%),A组中的强阳性率(77.5%)显著高于B组(30%)、C组(10%)和D组(10%)(P<0.05);D组中未绝经者的阳性率(66.7%)显著高于绝经者(9.1%)(P<0.05);晚期上皮性卵巢癌中的强阳性率(100%)显著高于早期的强阳性率(52.6%)(P<0.05);中低分化(G2～G3级)上皮性卵巢癌中的强阳性率(86.7%)显著高于高分化(G1级)的强阳性率(50%)(P<0.05);有淋巴转移的上皮性卵巢癌中的强阳性率(94.4%)显著高于无淋巴转移组的强阳性率(63.6%)(P<0.05)。在单因素生存分析中,A组中MT1-MMP的表达与患者预后不良有关;B组中MT1-MMP表达强阳性组(++～+++)的复发率(66.7%)显著高于MT1-MMP表达阴性～弱阳性组(-～+)的复发率(7.1%)(P<0.05)。结论:MT1-MMP可能参与卵巢的正常生理功能,它的异常高表达在上皮性卵巢癌的浸润、转移和交界性上皮性卵巢肿瘤的复发中起了重要作用,MT1-MMP的表达与患者预后不良有关。