一种高效实用的人卵巢表面上皮细胞培养方法

背景:体外分离培养纯度高、活力强且生物学特性稳定的卵巢表面上皮难度很大,目前原代培养主要采用组织块贴壁法和酶消化法,但这两种方法在取材、细胞活力及细胞纯度上都存在一定的问题。目的:建立一种高效实用的人卵巢表面上皮分离、培养和鉴定方法。方法:创新性地运用细胞刷刷取人卵巢表面上皮,以红细胞裂解法、差速贴壁法对细胞进行分离纯化,并向无血清DMEM-F12培养基中添加人表皮生长因子进行细胞培养。在倒置显微镜下观察细胞形态,应用苏木精-伊红染色和免疫细胞化学染色法对细胞进行鉴定,并绘制生长曲线。结果与结论:卵巢表面上皮培养24h开始贴壁生长,7-12d后基本达到融合,细胞呈多角形或扁平型,透光性及折光性强。细胞形态符合正常上皮细胞特性,所分离的细胞几乎完全表达上皮细胞表面标志物CK19。细胞生长良好,可以传6-8代,细胞生长曲线呈"S"形,纯度达95%以上。结果提示细胞刷取培养法操作简单,能够快速分离获得大量卵巢表面上皮,所获得的细胞经红细胞裂解法和差速贴壁法处理后纯度达95%以上,且细胞生长稳定。

培养小鼠卵巢表面上皮细胞合成细胞外间质的研究

目的 研究培养状态下卵巢表面上皮 (ovariansurfaceepithelium ,OSE)的特性。 方法 细胞培养 ,天狼星红 偏振光法 ,生物素 抗生物素蛋白间接免疫荧光方法 ,原位杂交。 结果 体外培养的OSE可表达Ⅳ型胶原和间质金属蛋白酶 2 (matrixmetalloproteinase 2 ,MMP 2 )的mRNA ,合成、分泌Ⅰ型、Ⅳ型胶原和层粘连蛋白 (laminin ,LN)。 结论 OSE在体外培养时 ,可合成多种细胞外间质 (extracellularmatrix ,ECM)成分和间质金属蛋白酶 (MMP 2 ) 。

术中印片在72例卵巢表面上皮-间质肿瘤中的临床病理观察

目的：探讨术中印片细胞学检查在卵巢表面上皮-间质肿瘤诊断中的临床应用价值。方法：对72例卵巢新鲜标本进行术中印片检查，并与常规石蜡切片结果对照。结果：术中印片细胞学检查在卵巢表面上皮-间质肿瘤的诊断准确率达86．11％。结论：术中印片细胞学检查仍可作为一种快速、简便、可靠的术中病理辅助诊断方法。

应用SELDI-TOF-MS技术筛选不同分型卵巢上皮性癌血清标志物

目的:应用表面增强激光解析离子化—飞行时间—质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选不同分型的卵巢上皮性癌患者血清标志物。方法:选择卵巢上皮性癌68例,健康妇女87例,卵巢良性肿瘤组20例血清,以及体外培养的卵巢恶性肿瘤细胞系SKOV3、A2780、HO8910、HO8910PM为材料,采用WCX2蛋白质芯片分析血清和体外培养的恶性肿瘤细胞系蛋白质表达差异蛋白,选择卵巢上皮性癌血清与细胞均存在表达的差异蛋白建立卵巢上皮性癌诊断模型进行验证。结果:WCX2芯片捕获的M/Z为5343和5640蛋白质,在卵巢浆液性上皮癌和浆液性上皮癌细胞系HO8910、HO8910PM中均上调表达。以上述2个蛋白质建立诊断模型判别浆液性卵巢癌的敏感性为97.8%,特异性为82.7%,优于CA125的检测结果。结论:M/Z为5343和5640蛋白质在卵巢浆液性上皮癌发生和发展的过程中的变化可以反映到血清中,而且可以验证血清标志蛋白的组织特异性,为其作为卵巢癌的肿瘤标志物提供强有力的支持。

肿瘤干细胞与卵巢癌

卵巢肿瘤干细胞(OCSCs)是存在于卵巢癌组织中的一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞,表面共表达CD44和CD117分子标记。虽然其起源不是很确定,但目前倾向于认为卵巢表面上皮细胞来源于OCSCs。研究OCSCs自我更新机制和表观遗传学的改变,可为肿瘤发生的机制及新药的开发提供很好的基础。

上皮间充质转化在上皮性卵巢肿瘤侵袭和转移中的作用

卵巢恶性肿瘤是常见的女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,大多数起源于卵巢表面上皮。其中上皮性卵巢癌(epithelial ovarian carcinoma,EOC)是死亡率最高的妇科恶性肿瘤。上皮间充质转化(epithelial to mes-enchymal transition,EMT)是胚胎发育过程中的基本现象。近年研究发现,EMT不仅参与胚胎形成、组织的再生和修复,而且与上皮细胞性肿瘤的恶性进展也存在重要的联系。EMT的形成机制和进展的相关研究对于上皮性肿瘤的防治有重要意义,因此关于EMT在上皮性肿瘤形成和侵袭过程中的机制研究受到越来越多的关注。综述上皮性卵巢癌中EMT形成机制及其与卵巢上皮性肿瘤微环境和上皮性卵巢肿瘤相关信号通路的关系。

雌激素调节IL-6的表达与卵巢癌发生、发展关系的研究进展

卵巢癌（OvarianCancer）是妇科第二常见、死亡率最高的恶性肿瘤，多见于更年期和绝经期妇女。该病90％以上起源于卵巢表面上皮，但其病因学及发病机制目前尚不明确。有研究证实其发生、发展除与促性腺激素有关外，还与雌激素关系密切。雌激素有利于卵巢上皮肿瘤的形成，对卵巢上皮细胞具有基因转录活性调节和促进其有丝分裂的作用。

卵巢生殖干细胞与卵巢表面生发上皮关系的研究进展

雌性哺乳动物体内是否存在分裂活跃的生殖干细胞(GSCs),依然存在争议。近年来研究证实,在人类和小鼠卵巢中分离得到了具有分裂活性的GSCs样细胞。假定的雌性哺乳动物GSCs可能定位于卵巢表面生发上皮中。卵巢微环境对GSCs池的维持和分化至关重要,而年龄增加和免疫系统退变可以通过改变卵巢微环境使GSCs无法获得足够的支持来形成新的卵子和卵泡。雌性GSCs的存在,不仅可以为干细胞领域的研究提供新的来源,对辅助生殖技术的未来发展也有着重要意义。

卵巢巧克力囊肿腹腔镜术后联合应用醋酸曲普瑞林疗效观察

卵巢巧克力囊肿是一种子宫内膜异位症（endometriosis,EMS）,常见于育龄妇女中,临床表现为卵巢表面上皮组织中存在紫褐色小泡或斑点,内膜因反复出血形成单个或更多的囊肿,囊肿内含有似巧克力液体的黏糊状陈旧血液,呈暗褐色。目前该病的主要治疗方法是腹腔镜手术,但手术无法彻底清除异位的子宫内膜细胞,残留的病灶会重新生长,导致疾病复发,因此术后联合应用药物治疗有利于消除残留病灶，减少复发。

FSH和LH联合上调卵巢上皮性癌细胞侵袭能力的机制研究

卵巢上皮性癌（卵巢癌）的病死率居妇科恶性肿瘤之首,约90％的卵巢癌被认为起源于正常卵巢表面上皮（ovarian surface epithelium,OSE）或内衬OSE的包涵囊肿.但卵巢癌发生发展的确切机制尚不明确.卵巢癌病情隐匿,易出现侵袭和转移,70％的患者确诊时已处于晚期.目前认为,妇女绝经后或卵巢功能不全者存在高促性腺激素状态,FSH和LH持续刺激可导致细胞过度增殖,最终可引发卵巢癌.

血清间皮素在卵巢上皮性癌诊断和病情监测中的价值

间皮素（mesothelin）是一种肿瘤细胞表面的糖蛋白抗原，通常只在体腔表面的间皮细胞、恶性间皮瘤、卵巢上皮性癌（卵巢癌）、胰腺癌中表达。间皮素的cDNA编码相对分子质量为71000的多肽前体，此前体可以被酶解成两部分，一部分40000的片段通过糖基磷脂酰肌醇锚定于细胞表面称作间皮素，位于细胞膜上的间皮素经过进一步的酶修饰，形成两个异构体，其中一个异构体可以从细胞表面脱落，

卵巢上皮癌患者ABO血型抗原表达异常与血清糖链蛋白水平的关系

ABO血型抗原是在红细胞、内皮细胞、上皮细胞表面糖蛋白或糖脂类蛋白上发现的复杂的碳水化合物结构。A、B血型抗原的决定簇，糖蛋白和糖脂上的寡糖在ABO基因编码的糖基转移酶作用下，将特异性糖基转移到一种前体物质（H）产生A和B抗原。已知人类ABO血型的多态性是环境和病原体介导下进化选择的结果，ABO血型与疾病间存在着一些必然联系，血型变异被认为是白血病的症状，也可出现在许多的癌症患者的肿瘤细胞上。

卵巢生殖干细胞的研究进展

越来越多的研究表明,从雌性哺乳动物和人卵巢表面上皮细胞中能够分离出少量端粒酶活性高、表达干性标志且能被诱导发育成为卵母细胞样的卵巢干细胞,即生殖干细胞(GSCs)。体内移植后,可使不孕小鼠产生排卵,生育后代。GSCs可能在维持出生后卵泡的再生与修复中发挥重要作用。然而,GSCs的研究还存在一些缺陷和存在性的直接证据。本文主要对卵巢GSCs的研究进展和潜在的应用前景进行了综述。

卵巢内生殖干细胞的研究进展和应用

对于哺乳动物卵巢中生殖干细胞(germline stem cells,GSCs)是否存在一直有争议,以往的研究表明哺乳动物卵巢中卵泡是不可再更新的,但最近基于小鼠的研究对其提出了异议,并通过大量实验来证实。最新的研究更从人类的卵巢中分离出生殖干细胞,这一发现对生殖干细胞进一步的研究和未来的临床应用提供了动力。因此本文对生殖干细胞的研究进展及应用做一综述。

生殖(性)生理

9931224 碱性成纤维细胞生长因子和N-细胞选择蛋白通过刺激成纤维细胞生长因子受体的酪氨酸磷酸化保持大鼠颗粒细胞和卵巢表面上皮细胞的生存力/Trolice M P∥Endocrinology.-1997,138(7).-107～113 津医图 9931225 假孕期间小鼠子宫前列腺素E受体亚基的mRNA的精确细胞定位/Kat-suyama M∥Endocrinology.-1997,138(1).-344～350 津医图 9931226