IL-6、FGF21和ANGPTL8与能量负平衡奶牛卵巢静止的关系

为了确定组织细胞因子在奶牛产后能量负平衡(NEB)诱导的卵巢静止(IO)发生中的作用。本试验根据产后21 d血浆β-羟丁酸(BHBA)和葡萄糖(Glu)的水平,从100头奶牛中选取能量正平衡(PEB)组和NEB组各30头。随后,根据产后50~60 d是否发情及卵泡发育状况,选取NEB组中IO奶牛(NEB-IO)和PEB组中发情奶牛(PEB-E)各6头进行采样。利用生化和ELISA方法分别检测血浆中代谢指标和细胞因子的水平;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA方法检测组织中细胞因子的水平。结果显示:与PEB组奶牛相比,NEB组奶牛产后21 d血浆中白细胞介素6(IL-6)极显著升高(P<0.01),成纤维细胞生长因子21(FGF21)和血管生成素样蛋白8(ANGPTL8)水平显著降低(P<0.05),并持续到产后50 d;3个细胞因子与BHBA、Glu和游离脂肪酸(NEFA)之间显著相关(P<0.05);与PEB-E组奶牛相比,NEB-IO组奶牛IL-6 mRNA表达量和蛋白含量在肌肉和卵巢中显著降低(P<0.05);FGF21和ANGPTL8 mRNA表达量和蛋白含量在肝脏中显著降低(P<0.05),但在卵巢中均无明显变化(P>0.05)。结果表明,奶牛产后NEB可通过调节细胞因子的变化在奶牛IO发生中发挥作用。

促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛血清生殖激素的影响

【目的】研究促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和孕酮(P4)4种生殖激素的影响,探讨促孕散治疗奶牛持久黄体和卵巢静止的作用机理。【方法】用促孕散治疗奶牛持久黄体和卵巢静止,统计发情率,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测奶牛血清中的E2、FSH、LH和P44种生殖激素,并与正常奶牛对比。【结果】促孕散治疗持久黄体牛发情有效率为91.67%,治疗卵巢静止牛发情有效率为88.89%。促孕散处理前,持久黄体P4水平极显著高于正常组(P<0.01),卵巢静止P4极显著低于正常组(P<0.01),而两种病型在处理前E2、FSH、LH水平与正常组差异不显著(P>0.05)。持久黄体患牛在促孕散处理后血清中E2和FSH水平不断升高,与正常组比较差异不显著(P>0.05),LH水平在促孕散处理后也逐渐上升,与正常组同时达到峰值,其变化规律与正常组相似,P4水平逐渐降低,与正常组水平差异不显著(P>0.05)。卵巢静止组在促孕散处理后血清中E2、FSH和LH水平均升高,其变化规律与正常组相似,P4水平出现先升高后降低的变化,变化规律与正常组相似,差异不显著(P>0.05)。【结论】促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛血清生殖激素具有显著调节和诱导发情的作用。

基于核磁共振技术的卵巢静止奶牛血浆代谢谱分析

为研究卵巢静止奶牛与发情奶牛体内差异代谢物变化,选取产后60-90d的年龄、胎次、体况相近的健康经产高产奶牛作为实验动物。根据奶牛发情表现、直肠检查和B超检查及激素检测的结果,选取10头奶牛为发情组（A）,10头奶牛为卵巢静止组（B）,然后对两组奶牛血浆样品进行无偏性的1 H谱核磁共振检测,对比其血浆代谢组学图谱,进行多元统计分析,筛选及鉴定卵巢静止奶牛血浆差异代谢产物,并进行生物信息学分析。结果显示：相对于正常发情奶牛,卵巢静止奶牛血浆中共12种代谢产物表现异常,包括水平增加的乙酸、柠檬酸和酪氨酸,以及水平下降的低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、脂质、丙氨酸、丙酮酸、肌酸、胆碱、磷酸胆碱和甘油磷酸胆碱等;这些代谢产物与糖代谢、氨基酸代谢、脂蛋白代谢和胆碱代谢的异常密切相关;通过参与生物合成通路调节,干扰了奶牛正常卵泡生长。并且发现卵巢静止的奶牛血浆肌酸浓度降低和酪氨酸浓度升高的新变化。多种代谢异常提示奶牛卵巢静止与泌乳早期能量负平衡有关,并有伴发酮病和脂肪肝病的风险;另外,卵巢静止奶牛血浆肌酸、胆碱浓度降低和酪氨酸浓度升高的变化,为今后更为深入研究奶牛卵巢静止发生机制提供了新的方向。

基于iTRAQ技术的卵巢静止奶牛血清差异蛋白分析

旨在利用iTRAQ技术探究卵巢静止奶牛血清差异蛋白。本试验在奶牛产后60～90 d,根据发情表现、直肠检查和B超检查,按判定标准将试验奶牛分为卵巢静止组(IO)和正常发情对照组(CON),每组50头,采集血清。应用同位素标记绝对定量(iTRAQ)/质谱(MS)联用技术筛选差异蛋白,并应用免疫印迹以及ELISA方法鉴定奶牛卵巢静止血清差异蛋白。结果表明,试验共获得61种血清差异表达蛋白。GO分析表明,生物学过程包括34个注释,分子功能包括15个注释,细胞组成包括13个注释。蛋白质网络互作分析共得到57个节点,68条蛋白互作注释,蛋白质互作富集P<10^(-16),得到11个信号代谢通路。经过筛选发现,糖酵解/糖异生、氨基酸的生物合成、胰高血糖素信号通路,维生素的消化与吸收可能与卵巢静止的发生存在相关性。与卵巢静止相关差异表达蛋白共有14种:其中GPX3、SCGB1D和PKM2表达下调,ADIPOQ、AHSG、APOA4、FETUB、ALDOB、SPAM1、LDHB、RBP4、IGFBP2、ITIH3及GLYCAM1表达上调。ADIPOQ、IGFBP2和RBP4通过生殖激素生物过程影响卵泡发育,GPX3通过氧化应激而影响卵泡发育。

口服促孕散治疗奶牛卵巢静止的B超影像学研究

为探讨促孕散治疗卵巢静止的作用机理,本研究主要通过直肠检查结合B超对卵巢静止奶牛做出诊断后,对其口服促孕散进行治疗,应用B超对卵巢卵泡直径、卵巢长度、卵巢宽度、子宫角纵径和子宫颈纵径进行测量,并与用药前进行对比。30头卵巢静止奶牛口服促孕散后,治疗有效率达86.7%。停药后第1天卵巢出现中等卵泡和大卵泡,停药后第16天大卵泡数量最多,部分奶牛出现发情并排卵。与用药前卵巢比较发现,左右两侧卵巢长度在停药后第1、4、10、19天显著增大(P<0.05);左卵巢宽度在停药后第19天显著增大(P<0.05);右卵巢宽度在停药后第1、10、19天显著增大(P<0.05)。子宫颈纵径在停药后第13、16天极显著增大(P<0.01),第19天显著增大(P<0.05),子宫角纵径与用药前比较差异不显著(P>0.05)。结果表明,B超是诊断奶牛卵巢静止的有效手段,中药促孕散对卵巢静止奶牛卵巢和子宫形态学变化具有一定的作用,对治疗奶牛卵巢静止有明显的效果。

催情促孕中药对黄牛卵巢静止和持久黄体的治疗效果

本试验旨在探讨催情促孕中药方剂对黄牛卵巢静止和持久黄体的治疗效果。选持久黄体黄牛16头,分成对照组（5头）和试验组（11头）;卵巢静止黄牛17头,分成对照组（5头）和试验组（12头）。试验组每天灌服组方药物400 g/次,7 d为一疗程,停药10 d仍未发情者灌服第二疗程,对照组灌服生理盐水。采用统计临床发情率和ELISA方法检测血清孕酮（P4）、促卵泡素（FSH）和促黄体素（LH）浓度来评价治疗效果。结果表明：灌服本方剂对持久黄体牛总有效率为90.00%,对卵巢静止牛总有效率为83.34%,对照组均未见发情;持久黄体牛P4浓度呈由服药前高浓度的先降后升趋势,,10 d时最低（P〈0.05）;FSH由服药前低浓度呈先升后降趋势,7 d时最高（P〈0.05）;LH浓度呈先升后降趋势,10 d最高（P〈0.05）;卵巢静止牛P4浓度从7 d时开始降低,10 d时降至最低（P〈0.05）后持续升至高于服药前水平（P〈0.05）;FSH浓度变化与持久黄体相近,LH浓度在1～5 d呈逐渐升高,7 d时降至服药前浓度,10 d时由急剧升至峰值（P〈0.05）后迅速降至1 d时水平。结果表明,灌服本中药方剂可以显著促进垂体FSH、LH的释放,激活卵巢机能,促使乏情黄牛返情。

电针和水针对奶牛卵巢静止所致不孕效果的比较研究

将已被诊断为由于卵巢静止而致不孕的５７头奶牛分为４组：电针组、水针组、激素组和对照组。输精后，电针组受胎率为８０％，水针组为４６７％，激素组为７３３％，而对照组为１６７％。４头对激素治疗无反应的奶牛经电针治疗后受孕。对各组奶牛乳中孕酮水平进行了监测。

促孕散对卵巢静止不孕奶牛血清中激素和微量元素含量的影响

经促孕散治疗奶牛卵巢静止,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测奶牛血清中的雌二醇(E_2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和孕酮(P),火焰-原子吸收光谱法检测微量元素(Cu、Fe、Mn、Zn)含量,并与正常奶牛对比,初步探讨促孕散治疗奶牛卵巢静止中微量元素与激素的关系。结果表明:卵巢静止不孕奶牛中,促孕散处理前P显著低于正常组(P<0.05),E_2、FSH、LH水平与正常组差异不显著(P>0.05)。在促孕散处理后血清中E_2、FSH和LH水平均升高,其变化规律与正常组相似,治疗后P水平呈现升高-降低-升高现象,变化规律与正常组相似,差异不显著(P>0.05)。微量元素中治疗前血清中Mn含量低于正常组(P<0.01),治疗后逐步与正常组含量差异不显著(P>0.05),Cu、Fe、Zn含量治疗前含量低于正常组,差异不显著(P>0.05),经治疗后更接近正常组水平。这说明促孕散在调节体内的微量元素和激素变化中起到重要作用。

奶牛卵巢静止及其中西疗法的疗效比较

卵巢静止是卵巢机能不全的一种表现。卵巢机能不全是由于卵巢机能暂时性扰乱,机能减退,处于静止状态,不出现周期性活动。如果机能长久衰退,则引起卵巢组织萎缩和硬化。卵巢机能减退在奶牛卵巢疾病中约占26.3%,在黄牛疾病中达49.7%,在母牛不孕症中发病率最高,是导致牛不育最常见的原因之一。

促孕散治疗卵巢静止不孕奶牛血清白介素与激素的相关性分析

为探讨促孕散治疗卵巢静止不孕奶牛血清中生殖激素和白介素含量的关系,分析其相关性与回归方程,利用ELISA法测定了促孕散治疗卵巢静止不孕奶牛前后血清中促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、孕激素(P)、雌二醇(E2)、IL-1和IL-6的浓度,统计分析了四种激素和两种白介素间的相关关系与回归方程。结果显示,IL-1与P呈负相关,与E2、FSH和LH呈正相关;IL-6与P、FSH呈负相关,与E2和LH呈正相关。可得出卵巢静止不孕奶牛血清中白介素含量与生殖激素的分泌有一定相关性。

PMSG处理卵巢静止奶牛以缩短产犊间隔的研究

将４１头产后４０－１００天卵巢静止奶牛分为四个处理组：ＯＩＵＰＭＳＧ（ｎ＝１２）、１０００ＩＵＰＭＳＧ（ｎ＝１２）、１２５０ＩＵＰＭＳＧ（ｎ＝１２）及１５００ＩＵＰＭＳＧ（ｎ＝５），处理后一周内的排卵率分别为０．０％、８３．３３％、９１．６７％及４０．０％（Ｐ＜０．０１），从处理到妊娠间隔时间分别为８９．１±３６．７天、２９．８±２且．７天、５１．９±２５．２天及６０．２±２９．６天（Ｐ＜０．０１）；２９头试验母牛又按产后４０－６０天及产后６１－１００天分为两组，处理后一周内的排卵率分别为９２．９％及６６．７％（Ｐ＞０．０５），从处理到妊娠间隔时间分别为５０．３±２７．０天及３８．５±２７．０天（Ｐ＞０．０５）。结果表明，ＰＭＳＧ处理卵巢静止母牛具有明显效果，其中以１０００ＩＵ为最优，处理时间的早晚对处理效果无明显影响。

奶牛高烧性疾病后继发卵巢静止的治疗试验

用传统中兽医理论组方,配制一种中药散剂——奶牛催情促孕散,对奶牛高烧性疾病后继发卵巢静止病例进行治疗试验。2个疗程后试验组发情率达80%,发情牛配种受胎率达87.5%,明显高于对照组。

奶牛产后卵巢静止的诊断与治疗

在奶牛生产中,产后不发情较为常见.造成奶牛产后不发情的因素很多,其中卵巢静止是很的一个方面.现就奶牛卵巢静止的症状及诊断、治疗及预防做一概述,仅供兽医临床工作者参考.

藿芪灌注液治疗奶牛卵巢静止和持久黄体临床试验

为了评价藿芪灌注液治疗奶牛卵巢静止和持久黄体的临床效果,将确诊为患持久黄体和卵巢静止的病牛各40头随机分为4组,分别为藿芪灌注液高、中(推荐剂量)、低剂量治疗组和对照药物治疗组,每组10头。试验组每头牛每次分别按150 m L、100 m L和50 m L的剂量子宫灌注,隔日1次,4次为1个疗程;对照药物治疗组为促孕灌注液,每次100 m L,隔日1次,4次为1个疗程。试验结果表明,用藿芪灌注液治疗奶牛持久黄体的高、中、低剂量组的治愈率分别为80%、70%和50%,总有效率分别为90%、90%和60%;对照组治愈率80%,总有效率90%,藿芪灌注液高剂量组、中剂量组与对照组的治愈率和总有效率均显著高于低剂量组(P<0.05),高剂量组与中剂量组之间无显著性差异(P>0.05);高、中剂量组与对照组之间无显著性差异(P>0.05)。用藿芪灌注液治疗奶牛卵巢静止高、中、低剂量组的治愈率分别为90%、80%和60%,总有效率分别为100%、100%和70%;对照组治愈率80%,总有效率90%,高剂量组、中剂量组和对照组的治愈率和总有效率均显著高于低剂量组(P<0.05),高剂量组与中剂量组之间无显著性差异(P>0.05),高、中剂量组与对照组之间无显著性差异(P>0.05)。

基于GC/MS技术的产后卵巢静止奶牛血浆代谢谱分析

【目的】运用代谢组学中气相色谱/质谱联用技术(GC/MS)筛选卵巢静止奶牛和正常发情奶牛的血浆差异代谢物,探究奶牛发生卵巢静止时其体内代谢的变化。【方法】在黑龙江省某集约化牛场选取产后60—90 d,年龄、胎次、体况相近的经产高产奶牛为实验动物。根据奶牛的发情表现、直肠检查、B超检查及激素检测的结果,将奶牛分为发情组(A)22头和卵巢静止组(B)20头。应用GC/MS对两组奶牛的血浆样品进行检测得到其代谢组图谱,利用Chroma TOF软件对得到的峰图进行分析,得到原始数据。将标准化的GC/MS数据矩阵导入SIMCA-P+14.0软件包中,进行多元统计分析,先进行无监督的主成分分析PCA来观察各样本之间的总体分布和整个分析过程的稳定性,然后用有监督的(正交)偏最小二乘法分析(O)PLS-DA来区分各组间代谢轮廓的总体差异,找到组间的差异代谢物。为防止模型过拟合,采用七次循环交互验证和200次响应排序检验的方法来考察模型的质量。采用多维分析(O)PLS-DA和单维分析(t-test)相结合的办法,来筛选组间差异代谢物。在(O)PLS-DA分析中,变量权重值VIP>1的变量为差异变量;在t-test中,P<0.05的变量为差异变量。筛选VIP>1且P<0.05的代谢物作为差异代谢物,最后采用KEGG途径数据库对两组奶牛血浆样本进行代谢组学差异代谢物通路富集及互作网络构建分析。【结果】与正常发情奶牛相比,卵巢静止奶牛血浆中共有20种代谢产物表现异常,其中17种差异表达代谢物与奶牛卵巢静止的发生密切相关,包括水平增加的胆酸,水平下降的香草扁桃酸、烟酸甘氨酸、6-羟基烟酸、β-丙氨酸、L-酪氨酸、苯丙酮酸等,这些代谢产物参与了苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的生物合成,并参与了丙酸乙酯、烟酸烟碱、苯丙氨酸和酪氨酸的代谢,它们通过单一途径或综合途径对奶牛卵泡的正常生长产生干扰,从而引起卵巢静止。另外3种化合物亚氨基二乙酸、N-甲基-L-谷氨酸、3-氨基异丁酸可能与氨基酸代谢和细胞能量转运有关,其在奶牛卵巢静止中的生物学作用有待进一步证实。【结论】应用GC/MS技术有效的筛选出正常发情奶牛和卵巢静止奶牛之间的血浆差异代谢物,这些差异代谢物提示奶牛产后发生卵巢静止与体内多种物质代谢紊乱有关。这为今后深入探索奶牛产后卵巢静止的发病机理以及防治策略奠定了基础。

藿芪灌注液治疗奶牛卵巢静止和持久黄体的临床试验

将确诊为患持久黄体和卵巢静止的病牛各40头,随机分为4组,分别为藿芪灌注液高、中(推荐剂量)、低剂量治疗组和促孕灌注液对照治疗组,每组10头。试验组每头牛分别按每次150mL、100mL和50mL的剂量子宫灌服,隔日1次,4次为1个疗程。对照药物治疗组为促孕灌注液,每次100 mL,隔日1次,4次为1个疗程。结果显示,用藿芪灌注液治疗奶牛持久黄体的高、中、低剂量组的治愈率分别是80%、70%和50%,总有效率分别是90%、90%和60%。对照组治愈率80%,总有效率90%。高剂量组、中剂量组和对照组的治愈率和总有效率均显著高于低剂量组(P<0.05),高剂量组与中剂量组之间无显著性差异(P>0.05),藿芪灌注液高、中剂量组与对照药物组之间无显著差异(P>0.05)。用藿芪灌注液治疗奶牛卵巢静止高、中、低剂量组的治愈率分别是90%、80%和60%,总有效率分别是100%、100%和70%;对照组治愈率80%,总有效率90%,高剂量组、中剂量组和对照组的治愈率和总有效率均显著高于低剂量组(P<0.05),高剂量组与中剂量组之间无显著性差异(P>0.05),高、中剂量组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。

基于~1H-NMR技术的产后卵巢静止奶牛乳清和血清代谢谱分析

旨在应用代谢组学技术筛选产后卵巢静止奶牛乳清和血清的差异代谢物,明确其与奶牛卵巢静止的关系。本研究选取产后45～60 d的正常发情奶牛和卵巢静止奶牛各14头进行试验。应用一维氢谱核磁共振(~1H-NMR)技术对两组奶牛的乳清和血清进行检测,结合多元统计分析和单变量分析,筛选出组间差异代谢物,并进行生物信息学分析,阐明差异代谢物参与的代谢通路与奶牛卵巢静止的关系。结果表明,在乳清和血清中分别筛选出13种差异代谢物。与发情奶牛相比,卵巢静止奶牛乳清中6种差异代谢物含量升高:琥珀酸、磷酸肌酸、甘氨酸、肌醇、乙醇酸、乳清酸,7种下降:丙氨酸、肌酐、磷酸胆碱、乳糖、牛磺酸、半乳糖、葡萄糖-1-磷酸;血清中4种差异代谢物升高:β-羟丁酸、乙酸、谷氨酰胺、甘氨酸,9种降低:丙氨酸、琥珀酸、柠檬酸、肌酐、磷酸胆碱、葡萄糖、肌醇、酪氨酸、组氨酸。两组奶牛乳清差异代谢物主要参与牛磺酸和亚牛磺酸代谢、半乳糖代谢、原代胆汁酸生物合成等。血清差异代谢物主要参与丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、柠檬酸循环、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成等。本研究获得了卵巢静止奶牛乳清和血清的代谢谱及其差异代谢物,结果表明了主要的糖代谢、脂代谢和氨基酸代谢的异常途径在奶牛产后卵巢静止发生中所起的作用,为今后深入研究奶牛产后卵巢静止发生机制和防治策略提供了新的方向。

特定电磁波谱治疗黄牛卵巢静止和持久黄体及对血桨孕酮17β-雌二醇的影响

特定电磁波谱治疗黄牛卵巢静止和持久黄体及对血桨孕酮１７β－雌二醇的影响豆晓峰高得吼付鹏志李闫川付福利（甘肃省张家川县畜牧兽医站７４１５００）本试验以患有卵巢静止和持久黄体的黄牛为对象，就特定电磁波谱（ＴＤＰ）穴位照射对患畜进行了临床试验与研究，应用放...

藿芪灌注液对奶牛卵巢静止和持久黄体临床疗效观察

评估藿芪灌注液对奶牛卵巢静止和持久黄体的临床疗效。采用藿芪灌注液治疗奶牛持久黄体患牛14例与卵巢静止患牛16例。结果发现藿芪灌注液对卵巢静止的治愈率93.75%,总有效率为100%;对持久黄体的治愈率78.57%,总有效率为85.71%。表明藿芪灌注液对奶牛卵巢性疾病不孕症疗效好。