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哺乳动物腔前卵泡体外培养及研究进展 被引量:2
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作者 梁洋 刘娣 +2 位作者 孙兴参 岳顺利 周佳勃 《动物医学进展》 CSCD 2005年第6期32-35,共4页
哺乳动物卵巢内的原始卵泡库是雌性生殖资源的储存库,但大部分卵泡在腔前阶段已退化闭锁了,这无疑是对这一资源的巨大浪费。因此,越来越多的学者致力于腔前卵泡的开发和利用,建立了一系列的培养体系,尤其在小鼠上做的比较成功,已经得到... 哺乳动物卵巢内的原始卵泡库是雌性生殖资源的储存库,但大部分卵泡在腔前阶段已退化闭锁了,这无疑是对这一资源的巨大浪费。因此,越来越多的学者致力于腔前卵泡的开发和利用,建立了一系列的培养体系,尤其在小鼠上做的比较成功,已经得到了少量后代。文章主要就卵泡的发生发育过程,腔前卵泡的分离方法,培养基的选择,不同直径腔前卵泡培养体系的建立,影响腔前卵泡发育的因素及研究进展进行了阐述,为进一步完善腔前卵泡培养体系,揭示其发育机理提供参考。 展开更多
关键词 哺乳动物 腔前卵泡 卵泡培养
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哺乳动物原始卵泡体外培养与激活调控研究进展 被引量:2
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作者 梁菁媛 邓彦飞 +7 位作者 赵易敏 朱剑宗 程隽如 张瑞门 吕巧 潘雨 杨素芳 石德顺 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期5-9,共5页
随着体外受精、克隆与转基因动物等基础研究快速发展,对卵母细胞的需求越来越多,科学家们不得不寻求能够获得大量优质卵母细胞的新途径。原始卵泡作为生长卵泡的来源,其初始容量影响哺乳动物的繁殖性能,是整个雌性生殖期中各阶段卵泡及... 随着体外受精、克隆与转基因动物等基础研究快速发展,对卵母细胞的需求越来越多,科学家们不得不寻求能够获得大量优质卵母细胞的新途径。原始卵泡作为生长卵泡的来源,其初始容量影响哺乳动物的繁殖性能,是整个雌性生殖期中各阶段卵泡及卵子发育的源头。哺乳动物的卵巢在出生时由一定数量的卵泡组成,大多数原始卵泡处于休眠状态,只有极少数的原始卵泡被激活并进入生长卵泡池中。因此合理开发卵巢里尚未激活的原始卵泡对提高动物繁殖率、加速优良牛种的遗传改良、阐明动物卵泡发生的分子机理具有重要意义。本文将目前哺乳动物原始卵泡体外激活的国内外进展做一综述,为研究动物和人类卵泡激活的生物学过程提供理论基础。 展开更多
关键词 原始卵泡激活 卵泡体外培养 信号传导通路
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卵母细胞体外培养系统的研究进展 被引量:1
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作者 高敏芝 《国外医学(计划生育分册)》 2002年第3期159-162,共4页
近几年人类未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)成为辅助生殖技术(ART)的研究热点,但迄今各种培养系统的成熟率、受精率和妊娠率仍较低,IVM技术仍处于实验阶段,尚不能常规应用于临床。如何获得一个稳定的具有较高成功率的培养系统成为需要迫切... 近几年人类未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)成为辅助生殖技术(ART)的研究热点,但迄今各种培养系统的成熟率、受精率和妊娠率仍较低,IVM技术仍处于实验阶段,尚不能常规应用于临床。如何获得一个稳定的具有较高成功率的培养系统成为需要迫切解决的问题。现就IVM培养系统和有关影响因素的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 卵母细胞体外成熟 卵泡培养 影响因素 研究进展 辅助生殖技术
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卵母细胞体外培养成熟技术在人类生殖中的应用
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作者 汪玉宝 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期184-188,共5页
辅助生殖技术中未成熟卵母细胞体外成熟培养 ( IVM)研究已有二十余年 ,从 GV期卵母细胞到窦前卵泡的体外培养已获得一定成功 ,目前 IVM应用范围已从纯粹的基础研究扩展到治疗PCOS、供卵、生殖保险等领域。IVM仍处于实验阶段 。
关键词 未成熟卵母细胞体外成熟 卵泡培养 辅助生殖技术
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Rho相关激酶抑制剂Y27632对小鼠腔前卵泡体外发育的作用
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作者 张樱馨 俞晓丽 +2 位作者 罗晓强 邱意开 裴秀英 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期979-985,共7页
目的探讨Rho相关激酶(ROCK)抑制剂Y27632在小鼠腔前卵泡体外发育中的作用。方法取出生12.5 d的小鼠卵巢,机械法收集单枚腔前卵泡,采用超低吸附96孔板模拟3D环境对其进行培养。设置对照组和含有Y27632的实验组,通过形态学观察、卵泡直径... 目的探讨Rho相关激酶(ROCK)抑制剂Y27632在小鼠腔前卵泡体外发育中的作用。方法取出生12.5 d的小鼠卵巢,机械法收集单枚腔前卵泡,采用超低吸附96孔板模拟3D环境对其进行培养。设置对照组和含有Y27632的实验组,通过形态学观察、卵泡直径的变化、成熟卵泡的数量、成熟卵母细胞纺锤体的变化等来评估卵泡的整体发育情况。采用Real-time PCR技术检测颗粒细胞中卵泡刺激素受体(FSHR)、卵母细胞中骨形态发生蛋白15(BMP15)、生长分化因子9(GDF9)等以及凋亡相关基因(Bad、Bax和Caspase-3)的表达情况,同时,用细胞存活染料检测卵泡发育过程中颗粒细胞的凋亡情况。结果 ROCK抑制剂Y27632对卵泡直径增长和基本发育指标(存活数、成腔率和成熟率)无明显影响(P>0.05),但对照组卵母细胞成熟后纺锤体组装出现异常。培养8 d后,与对照组相比,实验组颗粒细胞特异性基因FSHR上调;卵母细胞特异性基因BMP15和GDF9上调,而叉头框O3(Fox O3)下调;凋亡基因Bax、Bad和Caspase-3表达下调,实验组卵泡内的颗粒细胞凋亡明显少于对照组。结论小鼠卵泡体外发育过程中,ROCK抑制剂Y27632能够抑制颗粒细胞的凋亡,防止卵母细胞纺锤体组装异常,进而提高卵泡体外发育质量。 展开更多
关键词 Rho相关激酶 Y27632 纺锤体 卵泡培养 实时定量聚合酶链反应 小鼠
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GnRHa对体外培养的卵巢黄素化颗粒细胞分泌功能的影响 被引量:2
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作者 白晓红 糜若然 《天津医药》 CAS 北大核心 2005年第10期621-623,共3页
目的:研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对体外培养的卵巢黄素化颗粒细胞分泌功能的影响。方法:对16例接受体外受精患者卵泡液中分离的卵巢黄素化颗粒细胞进行体外培养,利用免疫组化法检测颗粒细胞的卵泡刺激素受体(FSHR)蛋白表达鉴... 目的:研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对体外培养的卵巢黄素化颗粒细胞分泌功能的影响。方法:对16例接受体外受精患者卵泡液中分离的卵巢黄素化颗粒细胞进行体外培养,利用免疫组化法检测颗粒细胞的卵泡刺激素受体(FSHR)蛋白表达鉴定颗粒细胞的纯度,检测加入GnRHa(实验组)体外培养颗粒细胞分泌雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)的水平并与未加GnRHa(对照组)比较。结果:从卵泡液中分离培养的卵巢黄素化颗粒细胞,75%以上呈FSHR蛋白阳性表达;100ng/L的GnRHa对体外培养颗粒细胞作用24h后上清液中每1000个细胞中E2含量为(0.83±0.46)ng/L,明显低于对照组的(2.60±1.53)ng/L(P<0.05);P,T,IGF-1和EGF的含量与对照组差别无统计学意义。结论:GnRHa减弱了颗粒细胞分泌E2的功能,推测GnRHa对卵泡发育和卵母细胞可能有负面影响。 展开更多
关键词 促性腺素释放激素 胰岛素样生长因子Ⅰ 表皮生长因子细胞 培养卵泡刺激素受体 促性腺激素 卵巢黄素化颗粒细胞 细胞分泌功能 GNRHA 体外培养 表皮生长因子(EGF)
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同型半胱氨酸对小鼠卵母细胞成熟过程中组蛋白表观遗传修饰的影响 被引量:2
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作者 梁蓉 陈曦 +1 位作者 张育军 石程 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期585-589,共5页
目的探讨卵母细胞发育过程中同型半胱氨酸(HCY)对组蛋白表观遗传修饰的影响。方法首先使用10只2周ICR雌性小鼠建立完整卵泡的体外培养体系,在卵母细胞发育早期,利用免疫组织化学方法,观察HCY对甲基化组蛋白H3K4、H3K9以及乙酰化组蛋白H... 目的探讨卵母细胞发育过程中同型半胱氨酸(HCY)对组蛋白表观遗传修饰的影响。方法首先使用10只2周ICR雌性小鼠建立完整卵泡的体外培养体系,在卵母细胞发育早期,利用免疫组织化学方法,观察HCY对甲基化组蛋白H3K4、H3K9以及乙酰化组蛋白H3K9分布的影响;其次使用10只4周ICR雌性小鼠,利用卵母细胞的体外成熟培养体系,观察HCY对卵母细胞成熟过程的影响,同时利用实时定量PCR方法,观察在此成熟过程中HCY对卵母细胞内组蛋白乙酰化水平的调控酶GCN5和HDAC表达的影响。结果 HCY明显抑制卵母细胞的体外成熟,在HCY作用下,甲基化组蛋白H3K4、H3K9以及乙酰化组蛋白H3K9的分布没有变化,但是表达强度降低,核呈现去浓缩的趋势。成熟过程中HCY并不改变基因GCN5的表达水平,却明显抑制卵母细胞内HDAC基因的表达。结论卵母细胞发育过程中高水平的同型半胱氨酸影响组蛋白的表观遗传修饰,HCY对卵母细胞核内组蛋白甲基化和乙酰化修饰的影响有可能是造成核染色体稳定性下降的重要原因。 展开更多
关键词 卵母细胞发育 同型半胱氨酸 组蛋白甲基化 组蛋白乙酰化 体外成熟 卵泡培养 小鼠
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抗坏血酸、表皮生长因子和促卵泡素对绵羊卵巢皮质体外培养的影响 被引量:1
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作者 彭夏雨 汪立芹 +2 位作者 杨梅 陈童 郭志勤 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期744-752,共9页
本研究旨在评估抗坏血酸(VC)、表皮生长因子(EGF)、促卵泡素(FSH)对绵羊原始卵泡体外培养的影响以及它们之间的相互关系。实验按照2×2×2因子试验设计分为8组,分别为:MEM(对照组),MEM+VC(50μg/mL),MEM+EGF(100ng/mL),MEM+FSH(... 本研究旨在评估抗坏血酸(VC)、表皮生长因子(EGF)、促卵泡素(FSH)对绵羊原始卵泡体外培养的影响以及它们之间的相互关系。实验按照2×2×2因子试验设计分为8组,分别为:MEM(对照组),MEM+VC(50μg/mL),MEM+EGF(100ng/mL),MEM+FSH(50ng/mL),MEM+VC+EGF,MEM+VC+FSH,MEM+EGF+FSH,MEM+VC+EGF+FSH。在培养0(未培养对照组)、2、6、12d后,对培养的卵巢皮质薄片进行组织学和增殖细胞核抗原(PCNA)检测以及透射电镜(TEM)观察。结果表明,与未培养组(发育卵泡比例15.4%±1.9%,正常卵泡比例88.2%±4.6%)比较,所有培养组中发育卵泡比例显著增加(P<0.05),正常卵泡比例下降(P<0.05)。培养12d后,与对照组(卵泡直径(34.5±3.3)μm,卵泡存活比例(38.9%±3.9%))比较,MEM+VC+FSH和MEM+EGF+FSH组中卵泡直径(分别为(39.7±3.4)μm和(42.5±5.1)μm)和卵泡存活比例(分别为58.5%±4.3%和59.3%±3.7%)都显著提高(P<0.05);各处理组中,培养12d后,MEM+VC+EGF组中发育卵泡比例(49.3%±3.2%)和卵泡直径((32.3±2.3)μm)最低,颗粒细胞PCNA阳性卵泡比例(26.4%±1.2%)也最少,而MEM+VC+EGF+FSH组中卵泡存活率(59.7%±6.1%)和卵泡直径((42.5±5.1)μm)都显著增加(P<0.05),颗粒细胞PCNA(43.5%±4.1%,P<0.05)表达增加。电镜结果表明,VC+EGF+FSH组能够维持与正常卵泡类似的超微结构,而在MEM和MEM+VC+EGF组却显示不同程度的退化特征。本研究结果提示在培养中联合添加VC与EGF抑制卵泡的发育和生长,而联合添加VC、EGF和FSH可能是促进绵羊原始卵泡体外激活和生长,维持卵泡存活以及结构完整的最有效的处理手段之一。 展开更多
关键词 绵羊 原始卵泡培养 抗坏血酸 卵泡 表皮生长因子
原文传递
Justicia insularis Improves the in vitro Survival and Development of Ovine Preantral Follicles Enclosed in Ovarian Tissue
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作者 Gildas Tetaping Mbemya Denise Damasceno Guerreiro +11 位作者 Nathalie Jiatsa Donfacl~ Luciana Mascena Silv~ Luis Alberto Vieira Geovania Francisca Canafistula de Sousa Benner Geraldo Alves Aryele Pinto Izaguirry Francielli Weber Santos Phelix Bruno Telefo Otilia Deusdenia Loiola Pessoa Johan Smitz Jose Ricardo de Figueiredo Ana Paula Ribeiro Rodrigues 《Journal of Pharmacy and Pharmacology》 2017年第9期668-680,共13页
Objectives: Evaluating the addition effect of./. insularis extract and FSH on the survival, activation and ROS production after in vitro culture of ovine preantral follicles enclosed in ovarian tissue. Methods: In t... Objectives: Evaluating the addition effect of./. insularis extract and FSH on the survival, activation and ROS production after in vitro culture of ovine preantral follicles enclosed in ovarian tissue. Methods: In the first experiment, ovarian fragments were fixed (non-cultured control) or in vitro cultured in α-MEM+ (cultured control), α-MEM+ supplemented with FSH 50 ng/mL, or in α-MEM+supplemented with J. insularis (JUS0.3; 1.25 or 5 mg/mL) for 1 or 7 days, at 39℃, 5% CO2. In the second experiment, fragments were fixed or cultured in α-MEM+ supplemented with anethole 300 μg/mL + FSH 50 ng/mL or in α-MEM+ supplemented with anethole 300μg/mL + 0.3 mg/mL JUS. Key findings: JUS0.3 was the only treatment that maintained the percentage of morphologically normal follicles similar to non-cultured control even after 7 days of culture. After 7 days of culture, a higher (p 〈 0.05) percentage of developing follicles was observed in JUS5 treatment compared with the other treatments except JUS 1.25. In the second experiment, FSH maintained the percentage of normal follicles and promoted activation of primordial follicles. A reduction (p 〈 0.05) of stromal cell density was observed in MEM++ANE supplemented with JUS or FSH. Conclusions: J. insularis in a concentration-dependent manner maintained the levels of ROS and improved in vitro follicular survival and activation of ovine primordial follicles. 展开更多
关键词 Medicinal plant antioxidant in vitro folliculogenesis preantral follicles.
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