卵源性因子在多囊卵巢综合征卵泡异常发育机制中的作用

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期女性最常见的生殖内分泌紊乱疾病,可表现为高雄激素血症,高胰岛素血症,胰岛素抵抗,并可引起生殖功能的障碍,该病与卵泡发育异常密切相关。卵泡发育是一个极为复杂的过程,而PCOS患者在此过程中出现募集亢进和无优势卵泡形成。现主要介绍卵源性因子如何调控生理情况下的卵泡发育及其在PCOS患者卵泡异常发育的病理机制中所起的作用。卵源性因子主要包括内分泌因子、生长因子、细胞因子等,它们可单因素或多因素地参与卵泡发育的调控。

卵丘细胞生长分化因子9 mRNA和骨形态蛋白15 mRNA水平非侵入性评估卵子发育潜能

目的:探讨卵丘细胞中生长分化因子9(GDF9)mRNA和骨形态蛋白15(BMP15)mRNA的表达水平进行非侵入性评估卵子发育潜能的临床应用价值。方法:收集252例行卵细胞浆内单精子注射(ICSI)助孕治疗的女性患者的卵丘细胞,采用实时定量PCR检测卵丘细胞中GDF9mRNA、BMP15 mRNA表达水平,并分析其与卵子成熟率、受精率和卵裂率的相关性;同时,将患者按照受精情况、有无优质胚胎和有无临床妊娠进行分组,比较不同组间GDF9 mRNA、BMP15mRNA的表达差异。结果:GDF9 mRNA、BMP15 mRNA表达水平与卵子成熟率、正常受精率、卵裂率均呈显著正相关(P<0.001)。GDF9 mRNA、BMP15 mRNA的表达水平在正常受精组显著高于异常受精组(P<0.05),在优质胚胎组显著高于非优质胚胎组(P<0.01),在临床妊娠组也显著高于未妊娠组(P<0.01)。结论:卵丘细胞中GDF9 mRNA和BMP15 mRNA水平与卵子发育潜能有关,可能成为胚胎选择新的分子指标。

人生长分化因子-9(GDF-9)基因真核表达载体的构建及表达

目的:构建人生长分化因子-9(GDF-9)基因真核表达载体并分离纯化获得重组GDF-9蛋白。方法:以cDNA克隆为模板,PCR法扩增出人GDF-9基因,将目的基因连接到pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/GDF-9,脂质体法将重组质粒转染到HEK293T细胞,通过Western blotting检测GDF-9蛋白表达。结果:以双酶切及基因测序鉴定构建的重组真核质粒,Western blotting方法证实人GDF-9基因正确表达。结论:成功构建人GDF-9基因pcDNA3.1(+)/GDF-9重组质粒,并在真核细胞系表达,获得重组GDF-9蛋白,为进一步研究GDF-9基因提供便利工具。