卵白蛋白肽的磷酸化改性工艺优化

在试验确定酶解制备卵白蛋白肽的最优工艺条件基础上,对酶解后鸡蛋清卵白蛋白肽磷酸化改性工艺进行了研究。以磷酸化程度为指标,确定最佳磷酸盐为三聚磷酸钠。通过单因素和四元二次正交旋转组合试验,研究了磷酸化工艺,确定最优工艺条件组合为:反应温度30℃、p H值8.0、反应时间4 h、三聚磷酸钠添加量(质量分数)9%,在此条件下磷酸化程度可达到(57.27±1.68)mg/g。通过紫外光谱扫描,对磷酸化改性的卵白蛋白肽进行结构变化分析。研究结果表明:磷酸化改性的卵白蛋白肽的紫外吸收峰发生了红移,卵白蛋白分子的有序二级结构减少。由于磷酸基团的嵌入,卵白蛋白肽的结构发生了变化,使得磷酸化改性后的卵白蛋白肽的紫外最大吸收峰增强。

卵白蛋白肽复合酶法制备工艺优化及解酒效果

目的:验证卵白蛋白肽的解酒活性,提高鸡蛋产品的附加值。方法:用碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶解卵白蛋白,以乙醇脱氢酶(ADH)激活率为指标,采用响应曲面法优化酶解工艺。通过检测卵白蛋白肽的总抗氧化性、水解度、氨基酸组成及相对分子质量,评估卵白蛋白肽的解酒效果。结果:最佳酶解工艺条件:酶解时间5 h,复合酶用量3100 U/g,酶解温度50℃,料液比(m_(卵白蛋白)∶V_(蒸馏水))3.5∶25(g/mL),在此条件下得到的卵白蛋白肽ADH激活率为(22.71±0.15)%,总抗氧化能力值为(9.51±0.03)U/mL,水解度为(29.28±0.16)%。卵白蛋白肽富含谷氨酸(9.5543%)、丙氨酸(3.8633%)、亮氨酸(5.7647%)等有益于提高解酒活性的氨基酸,小分子肽(<1000 Da)含量超过88.77%。结论:使用复合酶解法制备的卵白蛋白肽具有良好的抗氧化活性和解酒效果。

卵白蛋白低聚肽的体外抗氧化及ACE抑制作用

以卵白蛋白低聚肽为研究对象,测定了理化成分,分子质量分布和氨基酸组成基础之上;通过DPPH·法、邻苯三酚自氧化法和水杨酸钠法测定对DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2^-·)和羟自由基(·OH)的清除能力,分析了其体外抗氧化作用;另外通过反向高效液相色谱法测定了对血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)的抑制作用。结果显示,分子质量低于1 000 u的卵白蛋白低聚肽占总蛋白的92.58%,并主要集中在140~500 u(占71.24%);体外抗氧化实验中,抗氧化能力与质量浓度呈现出良好的剂量关系,DPPH·、O2^-·和·OH的半抑制浓度(IC 50)分别为0.25、25、0.64 mg/mL;另外卵白蛋白低聚肽显示出较好的ACE抑制作用,IC50值为1.5 mg/mL。结果表明,卵白蛋白低聚肽具有良好的抗氧化和ACE抑制作用,为相关抗氧化和降血压等保健类食品的开发利用提供一定的理论依据。

卵白蛋白源抗菌肽的分离纯化与结构鉴定

以卵白蛋白为原料,采用胃蛋白酶水解制备具有抑菌活性的蛋白肽。通过超滤和Superdex peptide 10/300凝胶色谱分离技术获得高抑菌性组分,以抗菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌性为试验指标,筛选最佳抑菌性组分,再进行反相高效液相色谱分离,测定分离得到的 9个组分抑菌活性,发现C3组分的抑菌活性和得率最高,其中大肠杆菌及沙门氏菌抑菌圈直径分别为(19.32± 1.45 ),(18.74±1.27) mm。最后采用高效液相色谱—电喷雾—质谱鉴定抗菌肽的结构,显示氨基酸序列为Gly-Leu-Glu-Pro-Ile-Asn-Phe-Gln(GLESINFQ)。该肽经固相合成纯度为95.84%,其抑菌活性与C3组分无显著性差异(P>0.05),从而证明卵白蛋白源抗菌肽发挥抑菌活性的成分主要是肽段GLESINFQ。