大鼠精子冷冻保存和卵胞浆内精子注射研究进展

许多哺乳类动物精子冷冻保存技术均已成功建立。然而,成功建立一套啮齿类动物精子冷冻保存程序还具有一定的挑战性。尤其是大鼠,因为其较长的精子尾巴,使得它的精子冷冻保存相当困难,并且大鼠的卵胞浆内精子注射(ICSI)技术也没有小鼠那样成熟。国内尚未见关于大鼠精子冷冻保存和ICSI的报道,国际上关于这方面的报道也较少。本文就这两方面的研究进展做一简要综述。

卵胞浆内精子注射治疗阻塞性无精症一例

患者×××,女,30岁,婚后3年未孕就诊.既往月经规律,量中等,无痛经.B超检查显示子宫大小正常,内膜线居中,双侧卵巢无异常,左侧卵巢可见发育中卵泡.

卵胞浆内精子注射后和原核形成期间非损伤性测定人胚胎所吸收的葡萄糖和丙酮酸量

为实施体外受精(IVF)-胚胎移植(ET), 选择人类胚胎常根据胚胎的形态和卵裂率。尽管做了最大努力来改进预测胚胎活力的记分技术,但着床率仍很低。不是所有形态好的胚胎都着床,有碎片的胚胎在体外也可以发育到囊胚期。为了达到可接受的妊娠率,常规地移植1个以上的胚胎,这样伴随着不可避免的多胎的危险。

季节对超数排卵兔卵母细胞数量及质量的影响

用孕马血清促性腺激素PMSG配合人绒毛膜促性腺激素hCG处理中国白兔,对4个季节超排兔卵母细胞的数量和孤雌胚胎以及卵胞浆内精子注射(ICSI)胚胎的体外发育能力进行了评定。结果表明,春季成熟卵母细胞的获得数量显著高于冬季(P<0.05),而其他季节之间差异不显著(P>0.05);两种卵子(孤雌激活和ICSI)的卵裂率不受季节影响(P>0.05),但夏季两种胚胎的囊胚形成能力显著低于其他3个季节(P<0.05)。所以,季节既影响超数排卵兔的卵母细胞数,也影响卵母细胞的质量。

兔初级卵母细胞生发泡移植方法的研究

目的 :以家兔为实验动物模型 ,探索卵母细胞生发泡 (GV)互换的可行性。方法 :在注射第一针卵泡刺激素 (FSH) 72 h后 ,取大耳白兔卵巢内 GV期卵母细胞 ,用显微操作和电融合的方法 ,对兔初级卵母细胞进行异卵间 GV互换 ,将重构卵培养于 TCM-1 99加 1 0 % FCS中 ,对重构卵进行成熟培养 ,最后对成熟重构卵进行卵胞浆内精子注射(ICSI)和胚胎培养。结果 :对 987枚 GV期卵母细胞进行了异卵间 GV互换 ,成功互换 2 72枚 (2 7.6 % ) ,电融合后存活 2 30枚 (84.6 % ) ,在进行成熟培养后 ,2 30枚卵有 1 78枚(77.4% )发育到 MII期 (排出第一极体 ) ,将成熟卵进行 ICSI后 ,有 1 2 6枚 (70 .8% )受精。结论 :对兔初级卵母细胞进行 GV互换是可行的 ,若将此法应用于提高高龄妇女卵母细胞的质量 ,将有助于解决她们的不育问题。

玻璃化冷冻人卵母细胞体外受精-胚胎移植9例临床分析

目的探讨人卵母细胞玻璃化冷冻在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用效果。方法行IVF-ET治疗、因取卵日男方因素无法进行受精的患者9例,对其成熟卵子进行玻璃化冷冻保存,解冻后进行卵胞浆内显微授精(ICSI),记录卵子复苏、受精、卵裂及移植后妊娠情况。结果 9例患者共解冻复苏58枚卵子,复苏率68.2%(58/85);复苏后进行ICSI的成熟卵子中,受精40枚,形成胚胎34枚,受精率69.0%,卵裂率85.0%。7个移植周期共移植胚胎15枚,临床妊娠3例,临床妊娠率42.9%。结论人卵母细胞玻璃化冷冻可以获得一定的临床妊娠率,在IVF-ET中可作为临床治疗的选择之一。

微量精子麦管冷冻法在ICSI中应用的安全性研究

目的 评价微量精子麦管冷冻法在ICSI中应用的胚胎实验室指标、临床妊娠结局以及出生子代健康等的安全性。方法 回顾性分析2021年1月至2022年12月于我院生殖医学科因男方为微量精子行ICSI患者的临床资料,行麦管冷冻精子共84例1 080枚成熟卵子为麦管冷冻组,同时期的新鲜微量精子为新鲜精子组,共48例554枚成熟卵子,并对所有受试者进行随访。对比两组患者的精子活率、精子活力、受精、胚胎培养、接受胚胎移植的妇女的妊娠结局、新生儿相关信息以及子代健康随访结果。结果 两组女性患者一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组男性患者的疾病类型和精子获取模式比较,差异有统计学意义(P<0.01)。麦管冷冻组精子复苏后的活率为25.35%,精子活力为15.22%。新鲜精子组精子的活率为35.56%,精子活力为25.32%,两组比较,差异显著(P<0.05)。两组的获卵数、成熟卵子率、受精率、D3优质胚胎率、D5囊胚形成率、D5优质胚胎率、平均移植胚胎数、临床妊娠率、累计临床妊娠率、流产率、早产率、活产率、出生缺陷率、平均出生体重和子代健康随访结果比较,差异无统计学意义(P>0.05);麦管冷冻组的流产率为3.57%、新鲜精子组的流产率为20.83%,两组比较,差异有统计学意义(P=0.013);麦管冷冻组的活产率为48.04%,新鲜精子组的活产率为32.73%,两组比较,差异有统计学意义(P=0.030)。结论 与新鲜精子相比,微量精子通过麦管冷冻法复苏之后精子活率和活力会有所下降,但选择合适浓度的精子行麦管冷冻可获得足够的精子用于ICSI,在ICSI中应用麦管冷冻保存明显降低了流产率,同时提高了活产率,具有较高的安全性。

精子DNA碎片对IVF-ET/ICSI患者妊娠结局的影响及其机制

目的探讨精子DNA碎片对IVF-ET/ICSI患者妊娠结局的影响及其产生机制。方法选取在生殖医学中心行IVF-ET/ICSI助孕的61周期不孕不育症夫妇,根据精子DFI值分别纳入对照组(DFI<25%,n=35)和观察组(DFI≥25%,n=26)。收集取卵(OPU)日精液标本,行精液常规分析、Western Blot检测精子Bcl-2及Caspase-3表达水平。分析精子DFI与精液常规参数、Bcl-2及Caspase-3表达的相关性,观察两组IVF-ET/ICSI妊娠结局。结果两组优化处理前精子浓度、优化处理后精液参数(浓度、活力及PR)、2PN受精率、2PN卵裂率及囊胚形成率差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,观察组优化处理前精子活力、PR、Bcl-2均下降、Caspase-3上升,差异有统计学意义(P<0.05);观察组可移植胚胎率、优质胚胎率、着床率、临床妊娠率、分娩率及活产率均下降,早期流产率上升,差异有统计学意义(P<0.05)。精子DFI和优化处理前精子活力、Bcl-2表达均呈负相关(分别r=-0.285、-0.672,P<0.05),与Caspase-3表达呈正相关(r=0.627,P<0.05)。结论精子DNA碎片产生可能与Bcl-2表达下调及Caspase-3表达上调有关,高精子DFI可能降低精子活力和IVF-ET/ICSI患者临床妊娠率。

Y染色体DAZ基因缺失与男性不育

最近的研究证明,Y染色体长臂的5,6区带含有与生成精子有关的基因AZF(azoospermia factor,AZF)。DAZ(deleted in azoospermia,DAZ)基因是AZF的候选成分,在精子产生过程中起重要作用。AZF和DAZ基因缺失可致无精子或严重少精子症。虽然卵胞浆内精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术解决了一部分男方因素所致的不育,但人们仍然担心这种遗传缺陷是否会传给下一代。有研究表明,经过ICSI传给下一代的染色体缺失率为9.4％～33％。