纺锤体观测仪在高龄患者卵胞浆内单精子显微注射术中的应用价值

目的:探讨纺锤体观测仪在高龄患者卵胞浆内单精子显微注射术(ICSI)中的临床价值。方法:选取2022年1月至2023年6月九江市妇幼保健院辅助生殖中心收治的高龄女性患者ICSI共121例,根据ICSI助孕方法的不同分为对照组(49例)和观察组(72例)。对照组采用传统方法(ICSI进针位置与第一极体呈90°夹角),观察组使用纺锤体观测仪引导ICSI进针位置。比较两组患者获卵平均数、MⅡ卵平均数、胚胎各项指标。结果:两组患者获卵平均数、MⅡ卵平均数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者2PN受精率、2PN受精卵裂胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率、临床妊娠率均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在高龄患者中,使用纺锤体观测仪下进行ICSI助孕,其胚胎各项指标要优于传统ICSI助孕。

体质指数对多囊卵巢综合征患者卵胞质内单精子注射助孕结局的影响

目的探讨体质指数(BMI)对多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者卵胞质内单精子注射(ICSI)结局的影响。方法选择本院生殖中心行ICSI助孕的200例患者,包括82名PCOS患者和118名非PCOS患者,根据BMI分为非超重组(BMI<24 kg/m^(2))、超重组(BMI≥24 kg/m 2),PCOS患者分为非超重组47例和超重组35例,非PCOS患者分为非超重组81例和超重组37例。比较4组的一般临床特征、促性腺激素(Gn)用量、Gn时间、卵母细胞数量、成熟卵母细胞、受精率、胚胎质量、妊娠率、着床率及流产率等。结果PCOS组超重者和非超重者LH均高于非PCOS组;PCOS组和非PCOS组超重者BMI均高于非超重者(P<0.05)。与同组非超重亚组比较,超重亚组均Gn总量升高,日扳机E2水平下降(P<0.05)。Gn总量、日扳机E2水平PCOS超重组低于非PCOS超重组;PCOS非超重组低于非PCOS非超重组(P<0.05)。卵泡数、获卵数、成熟卵母细胞数PCOS非超重组高于非PCOS非超重组,PCOS超重组高于非PCOS超重组(P<0.05)。结论BMI的增加会增加促排卵过程中的促性腺激素使用剂量,多囊卵巢综合征患者卵泡数、获卵数高于无多囊卵巢综合征患者。

延时成像监测第二极体释放预测卵胞质内单精子注射卵子受精及胚胎发育效率

目的探讨延时成像监测第二极体(Pb2)释放在预测卵胞质内单精子注射(ICSI)周期卵子受精及胚胎发育效率中的临床应用价值。方法回顾性分析278个接受ICSI助孕治疗患者的临床资料和延时成像监测胚胎培养数据,探讨卵子ICSI注射后Pb2释放与否以及具体释放时间与受精及胚胎发育结局的关系。结果延时成像监测ICSI注射后Pb2释放平均时间为(3.03±1.21)h;有Pb2释放组的受精率、2原核(2PN)受精率及5d(D5)囊胚转化率均显著高于无Pb2释放组(99.95%vs 1.75%,P<0.001;97.18%vs 0.66%,P<0.001;60.50%vs 16.67%,P<0.05);Pb2释放时间>3~4 h组2PN受精率显著高于0~2 h组和>5 h组(98.80%vs 93.81%,P<0.05;98.80%vs 95.40%,P<0.05);Pb2释放时间与D3胚胎平均卵裂球数显著相关(P<0.001);>3~4 h组D5囊胚转化率显著低于>2~3 h组(56.23%vs 67.23%,P<0.05),>4~5 h组显著低于0~2 h组、>2~3 h组(46.61%vs 62.30%,P<0.05;46.61%vs 67.23%,P<0.05),>5 h组D5囊胚转化率为7.14%,均显著低于其他4组(P<0.05);>3~4 h组D5优质囊胚转化率显著低于0~2 h组、>2~3 h组(9.92%vs 16.39%,P<0.05;9.92%vs 20.72%,P<0.05),>4~5 h组显著低于>2~3 h组(11.02%vs 20.72%,P<0.05)。结论延时成像监测Pb2释放可以准确预测受精结局,Pb2释放时间与胚胎发育潜力显著相关,是有价值的预测ICSI卵子受精及胚胎发育结局的形态学指标。

逆行射精不育男性采用睾丸穿刺取精术联合卵胞浆内单精子注射的治疗价值

目的探讨睾丸穿刺取精术(TESA)联合卵胞浆内单精子注射(ICSI)对逆行射精(RE)所致男性不育患者的临床结局的影响。方法选择2018年1月至2021年12月在我院男科不育门诊就诊的因无法通过尿液回收足够活动精子而选择TESA联合ICSI治疗的12例RE不育患者为研究对象,分析纳入患者的病因,口服碳酸氢钠碱化尿液后尿液及精液标本中精子质量,及行TESA联合ICSI治疗的临床妊娠结局。结果共纳入12例RE患者,其中9例为糖尿病,2例为直肠癌术后,1例为特发性RE(未知具体病因)患者;12例RE患者仅3例患者可获得精液,检测精液精子浓度发现,患者7为无精子症,患者5和患者6的精子浓度均<3.0×10^(6)个/ml,且精液标本中均未见活动精子;常规碱化尿液后,检测精子浓度发现,12例尿液标本中9例精子浓度<1×10^(6)个/ml;检测尿液精子活力发现,12例尿液标本中9例未见活动精子;经TESA取精后分析精子质量发现,12例RE患者睾丸组织悬液中均查到0~1个精子/高倍视野(HPF),且查到有C级活动精子,精子存活率为75%(50%,80%);TESA联合ICSI治疗共22个周期,其中14个周期进行了胚胎移植(7个新鲜胚胎移植周期及7个冻融胚胎移植周期),HCG阳性率为50%(7/14),临床妊娠率为35.7%(5/14)。结论对于尿液中不能回收到足够数量及活动精子用于辅助生殖的RE患者,TESA结合ICSI是解决RE患者生育问题的一种有效的治疗方法。

冻融复苏微量精子行卵细胞胞质内单精子注射术的疗效及临床妊娠结局分析

目的:回顾性分析123例无精子症患者经皮附睾精子抽吸术(PESA)或经皮睾丸精子抽吸术(TESA)后冻融复苏微量精子行卵细胞胞质内单精子注射术(ICSI)的疗效及临床妊娠结局情况。方法:将采用微量冻融PESA、TESA精子行ICSI的病例归为冻融精子组,采用新鲜PESA、TESA精子行ICSI的病例归为对照组。比较冻融精子组与新鲜精子组组间及组内的双原核(2PN)受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、流产率、宫外孕率、多胎妊娠率有无统计学差异。结果:PESA精子冻融组与新鲜组受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、流产率、宫外孕率及多胎妊娠率分别为75.67%vs76.49%,64.96%vs66.19%,55.21%vs57.22%,13.21%vs12.61%,3.77%vs5.41%,37.74%vs37.84%(P>0.05),TESA精子冻融组与新鲜组受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、流产率、宫外孕率及多胎妊娠率分别为74.41%vs76.43%,64.63%vs66.35%,46.81%vs53.39%,18.18%vs14.55%,4.55%vs1.82%,37.74%vs37.84%,组间及组内均无统计学差异(P>0.05)。PESA精子与TESA精子冻融复苏成功率为70.07%vs62.67%,无统计学差异(P>0.05)。结论:微量PESA及TESA精子冻融技术对无精子症患者来说是一种安全、经济、有效的治疗方法;精子冷冻复苏技术有待于进一步提高;该技术是否会增加子代远期遗传风险仍有待于进一步探讨和研究。

荧光原位杂交技术联合卵胞质内单精子注射成功治疗Klinefelter综合征一例

Klinefelter综合征即先天性睾丸曲细精管发育不全,是男性不育和原发性性腺发育不全最常见的一种类型,尤其是在无精子症患者中占相当的比例。

双侧输精管结扎术后不同来源精子对卵胞浆内单精子显微注射助孕结局的影响

目的探讨双侧输精管结扎术后不同来源精子对卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)助孕结局的影响。方法回顾性分析2012年1月至2020年6月中国人民解放军陆军第七十三集团军医院生殖医学中心诊治的双侧输精管结扎术后或复通失败后患者行ICSI治疗的76个新鲜取卵移植周期,依据精子来源分为经皮附睾精子抽吸术(PESA)组(36个周期)和经皮睾丸精子抽吸术(TESA)组(40个周期)。比较两组的相关指标和妊娠结局。结果两组男方年龄、结扎年限、女方年龄、女方卵泡刺激素(FSH)及女方抗苗勒管激素(AMH)比较,差异无统计学意义(P>0.05);PESA组的正常受精率高于TESA组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组2PN卵裂率、胚胎平均评分、优质胚胎率及囊胚养出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);TESA组的临床妊娠率和活产率均高于PESA组,差异无统计学意义(P>0.05);两组的胚胎种植率和流产率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论TESA来源精子的妊娠结局优于PESA来源精子,因此,当输精管结扎术后患者行ICSI助孕时,可优先选择睾丸内精子,以期获得更好的临床妊娠结局。

卵胞浆内单精子注射技术的精子优选方法

辅助生殖技术发展至今,已成为解决人类生育问题的重要手段,其包含和衍生出的各种技术也随着辅助生殖技术本身的进步而日新月异。现在卵胞浆内单精子注射技术(ICSI)日益成熟,对于男性而言配子的问题是最受关注的,也关乎辅助生殖的各个环节。ICSI中精子优选技术的应用对ICSI结局的各个指标存在影响,如何合理选择精子优选技术是各生殖中心如何提高胚胎质量的重要课题。

卵胞质内单精子注射与转座子介导的转基因技术

通过卵胞质内单精子注射（ICSI）已经成为治疗人类不育症和小鼠生殖生物学研究的一种有效手段。而且IcsI介导的转基因作为一种动物转基因技术，仍然不够完善。但是相比传统的原核注射技术，该技术最大的优势是可以导入较大片段的外源基因（比如人工酵母染色体YAC）。最近研究者们又发展了一种ICSI与转座子结合的转基因技术，能够高效地生产转基因后代，其效率几乎可以与慢病毒载体法相媲美。值得在转基因动物研究中加以推广和应用。

不同参数精子对卵胞质内单精子注射术结局的影响

目的 分析不同精子参数对卵胞质内单精子注射术（ICSI）临床结局的影响.方法 选取在我院接受ICSI治疗的不孕夫妇235对（共299个ICSI周期）,根据男方精液的来源和参数不同,我们将299个ICSI周期分为4组：精液正常组（A组,70例、96个周期）,严重少弱精子症组（B组,33例、44个周期）,附睾精子组（C组,23例、28个周期）和睾丸精子组（D组,109例、131周期）.比较4组的受精率、优质胚胎率、种植率和临床妊娠率等.结果 A组年龄明显大于其他3组（P〈0.01）.A、B、C、D组患者行ICSI卵数分别为937、476、344、1543,单周期移植胚胎数分别为2.74±0.49、2.22±0.47、2.07±0.26、2.12±0.43,A组单周期移植胚胎数显著多于其他各组（P〈0.01）.D组受精率（62.80%）显著低于其他3组（75.03%、72.06%、78.02%）（P〈0.01）.C组优质胚胎率（35.31%）显著低于其他3组{47.65%、48.40%、45.71%）（P〈0.01）,4组间临床妊娠率和种植率并无明显差异（P〉0.05）.结论 不同参数的精子虽然可以影响ICSI后胚胎早期的发育,但对临床妊娠率并无明显影响.

重组人促卵泡激素对比尿促卵泡素在体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植中促排卵治疗的快速卫生技术评估

目的:比较重组人促卵泡激素(r FSH)和尿促卵泡素(u FSH)在体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)中促排卵治疗的有效性、安全性和经济性,为r FSH和uFSH的临床合理使用提供循证证据。方法:计算机检索PubMed、Embase、Cochrane图书馆、中国知网、维普网、万方数据以及专业的卫生技术评估(HTA)数据库,收集rFSH对比uFSH在IVF/ICSI-ET中促排卵治疗的HTA、系统评价/Meta分析和经济学研究。筛选文献、提取资料、评价质量后,采用定性描述的方法汇总纳入研究的结论。结果:共纳入7篇文献,包括2篇系统评价/Meta分析和5篇经济学评价,未检索到HTA报告,所有研究均来自国外报道。系统评价/Meta分析发现,rFSH组在控制性促排卵中的获卵数较u FSH组多;而两组的持续妊娠率、临床妊娠率、活产率、流产率和卵巢过度刺激综合征发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。经济学研究显示,rFSH可能更具成本-效果优势。结论:目前可获得的证据支持将rFSH用于IVF/ICSI-ET的促排卵治疗,u FSH的疗效和安全性与其相当,且rFSH可能更具成本-效果优势。

不同不育类型患者精液质量比较及对补救卵胞浆内单精子注射术临床结局的影响分析

目的探讨不同不育类型患者精液质量情况及其对补救卵胞浆内单精子注射术(R-ICSI)临床结局的影响。方法回顾性研究2014-01~2018-12于广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心行常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败而进行R-ICSI治疗的98对不孕不育夫妇的临床资料。根据不育类型将98对夫妇分为原发性不育组(n=56)和继发性不育组(n=42)。比较两组的一般情况、精液质量、胚胎发育情况及临床结局。结果继发性不育组前向运动精子百分率大于原发性不育组,精子DNA断裂指数(DFI)小于原发性不育组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。但两组患者在精液体积、精子浓度、精子总数、精子正常形态率、精子顶体完整率及精子自发顶体反应率方面比较差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者受精率、卵裂率、优胚率、活产率、早产率、流产率、单胎率及双胎率差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者临床妊娠率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论原发性不育患者精液质量较差,临床妊娠率较低,在行生殖助孕诊疗时,需把不育类型列入考虑范畴。

体外受精完全失败行卵细胞胞质内单精子注射补救的应用价值探讨

目的 :对受精完全失败的体外受精 (IVF)周期及时行卵细胞胞质内单精子注射 (ICSI)进行补救的临床应用价值进行探讨。 方法 :取精卵共培养 16～ 18h后受精完全失败的 16个周期 ,及时将所有可见第一极体的卵母细胞进行补救ICSI。 结果 :行ICSI后 ,卵母细胞异常受精率为 17.9% ,正常受精率为 4 2 .7% ,正常卵裂率为79.6 % ,种植日优质胚胎率为 2 9.7%。 16个周期共移植胚胎 5 4个 ,平均每个周期种植 3.4个。共获得 3例妊娠 ,临床妊娠率 18.8%。 结论 :补救性ICSI是否有临床应用价值 ,主要与可供行补救ICSI的卵母细胞数量和取卵当日卵母细胞的成熟度有关。

单精子卵胞浆内注射术中不同来源精子的处理方法

目的 :介绍单精子卵胞浆内注射术 (ICSI)中不同来源精子的洗涤处理方法。方法 :轻度少、弱精精液或正常精液精子 ,采用Percoll梯度离心法或直接离心加上游法处理 ;严重少、弱精精液精子或无精子症的附睾液精子 ,采用直接离心法处理 ;无精子症的睾丸组织内精子 ,采用组织磨碎加直接离心法处理。结果 :三种方法处理后 ,均获得足够的活动精子用于ICSI治疗 ,ICSI操作均能顺利进行。采用直接离心法获得的精子行ICSI可以获得相似的治疗结果。结论 :不同来源精子都可以经直接离心法处理 ,并能有效用于ICSI治疗中。

经皮睾丸微穿刺活检后冷冻精子的卵胞质内单精子注射

目的:对经皮睾丸微穿刺活检后冷冻保存精子卵胞质内单精子注射(ICSI)治疗非梗阻性无精子症所致不育进行临床总结,并对其影响治疗结果的因素进行探讨。方法:对62例非梗阻性无精子症患者进行经皮睾丸微穿刺活检,发现活动精子者(35例)对睾丸活检组织进行冷冻保存;女方促排卵常规使用促性腺激素释放激动剂(GnRHa)/卵泡刺激素(FSH)/人绒毛膜促性腺激素(hCG)方案,B超监测卵泡发育情况并引导经阴道取卵,冷冻的睾丸组织解冻后行ICSI,良好胚胎进行移植。结果:取卵周期为35个,冷冻的睾丸精子解冻后行ICSI,35个周期进行常规胚胎移植。13例临床妊娠。启动周期、取卵周期与移植周期临床妊娠率均为37.14%(13/35)。结论:经皮睾丸微穿刺活检后ICSI是治疗非梗阻性无精子症所致不育的最主要和有效的方法;活检后对有活动精子的睾丸组织进行冷冻保存不影响治疗结果,可以减少患者睾丸活检的次数,减轻患者痛苦。

经皮附睾穿刺取精精子冷冻复苏后卵细胞胞质内单精子注射治疗无精子症的初步研究

目的:回顾性分析27例无精子症患者经皮附睾穿刺取精术(PESA)所获精子冷冻复苏后行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗后的效果及妊娠结局。方法:将诊断性附睾穿刺以及PESA治疗周期ICSI后所剩余活精子以常规方法加以冷冻,将复苏后找到了足量活精子并行ICSI的病例归为冻精组,而采用新鲜PESA活精子ICSI的病例则归为对照组。比较冻精组与对照组的受精率、种植率、临床妊娠率,同时分析两组间的妊娠并发症、新生儿出生及畸形等情况。结果:冻精组15个周期、对照组100个周期分别注射MⅡ期成熟卵子163、1 157个,受精率冻精组显著高于对照组(84.05%vs73.29%,P<0.05),种植率、临床妊娠率则两组间差异无显著性(23.07%vs15.73%;53.33%vs37.00%,P>0.05),新生儿出生体重差异亦无显著性(P>0.05)。冻精组共妊娠8例,已分娩5例,继续妊娠3例。对照组妊娠37例,已分娩30例,1例死胎;继续妊娠3例;流产4例。两组均未出现重大的妊娠并发症及新生儿畸形。结论:采用PESA冷冻精子ICSI是治疗男性无精子症的一种经济、有效、安全的方法;但PESA冻精复苏率有待于进一步提高。

精子来源与数量对单精子卵胞浆内注射术妊娠结局的影响

目的:分析不同精子来源和数量对单精子卵胞浆内注射术(ICSI)妊娠结局的影响。方法:2000年1月至2003年6月在本中心进行ICSI治疗而妊娠的271例,据精子来源与数量分为精液正常组(39例)、少弱精组(144例)与手术取精组(88例)。比较精液正常组、少弱精组、手术取精组的临床妊娠率、流产率、分娩率、妊娠并发症、分娩孕周、新生儿出生体重、畸形、围生儿死亡率等组间差异。结果:精液正常组、少弱精组与手术取精组患者的临床妊娠率、流产率、分娩率、双胎率、妊娠期高血压疾病发生率、前置胎盘发生率、早产率、分娩孕周、新生儿出生体重、先天性畸形发生率(4.5%、6.3%、4.0%)、围生儿死亡率差异均无显著性(P>0.05)。结论:精液正常组、少弱精组与手术取精组ICSI治疗后临床妊娠率、流产率、妊娠期并发症、新生儿出生体重、先天性畸形发生率、围生儿死亡率相似,不同精子来源与数量不影响ICSI治疗后的妊娠和围生儿结局。

Y染色体无精子症因子c区缺失男性不育患者同步显微取精术后行卵胞浆内单精子显微注射的临床结局

目的:评价同步显微镜下睾丸切开取精术结合卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对Y染色体长臂上无精子症因子c区(azoospermia factor c region,AZFc)缺失所致男性不育患者的临床治疗效果,指导AZFc缺失男性不育患者的临床治疗。方法:回顾性分析了自2015年1月到2019年12月因AZFc缺失所致男性不育患者在北京大学第三医院生殖医学中心行显微取精术的临床资料,追踪随访了同步显微取精手术中成功获取精子的患者使用睾丸精子行ICSI助孕的临床结局,比较了首次同步显微取精术与第二次同步显微取精术患者的临床结局,包括受精率、临床妊娠率、流产率和活产率等。结果:共有195例AZFc缺失的男性不育患者接受显微取精术,其中14例为隐匿性精子症,术中均成功发现精子,精子获得率为100%(14/14);181例为非梗阻性无精子症(non-obstructive aoospermia,NOA),122例成功发现精子,精子获得率为67.4%(122/181),余59例NOA患者在显微取精术中未发现精子,占32.6%(59/181)。我们随访了手术成功发现精子的患者中,选择夫妻双方同步取精、取卵且不行胚胎植入前遗传学检测患者的临床结局,纳入研究的99例患者共进行了118人次显微取精术和120个ICSI周期助孕,最终有38例患者成功活产,累积活产率38.4%(38/99),总共分娩出22个健康男婴和22个健康女婴,其中在首次和二次同步显微取精术的新鲜精子-ICSI周期中,优质胚胎率、新鲜周期临床妊娠率和取卵周期活产率分别为47.7%vs.50.4%、40.5%vs.50.0%、28.3%vs.41.2%,第二次同步手术组略高于首次同步手术组,但组间差异没有统计学意义。结论:对AZFc缺失导致的男性不育患者,有较大的概率通过显微取精在睾丸中成功获取精子,并结合ICSI生育自己的遗传学后代,对首次同步ICSI周期未成功的患者,有机会通过再次手术取精和ICSI成功孕育后代。