沉性大卵径鱼卵的观察方法与虹鳟的胚胎发育

虹鳟等冷水性鱼类产沉性卵,由于卵膜较厚,不作特殊处理,肉眼无法直接观察其胚胎发育的过程.该研究分别采用0.6%～1.0%胰蛋白酶酶解透明、透明液处理和5%甲醛固定剥膜的方法对虹鳟的受精卵进行处理,在显微镜下比较3种处理方法并对虹鳟胚胎发育进行观察.结果表明,用胰蛋白醇适度处理以后,卵膜呈透明状态,可以用显微镜清楚的观察到各个发育时期;用透明液处理以后,卵膜仍然较厚,在发眼前期,仅可观察到胚胎的大致发育时期,发眼期以后,虽然可以观察到每一个发育时相,但效果较差;采用甲醛固定后卵膜及卵内物质变性,胚胎固化形态稳定,发育时相得以固定,机械去除卵膜以后,各发育时相清晰可见,进而可以深入研究其胚胎发育.通过对甲醛固定以后的胚胎观察,可以将虹鳟的胚胎发育分为囊胚期、原肠期、神经胚期、眼球色素出现期和循环期等21个时期.

虹鳟(Oncorhynchus mykiss)受精率计算方法研究

采用鉴别液与Bouin's固定剥膜相结合方法,对虹鳟2细胞期、4细胞期、8细胞期、桑葚期、高囊胚期、原肠中期六个发育阶段,进行受精率计算方法研究。结果表明,计算鱼卵受精率取样时间从卵裂期开始,桑葚期最佳;取样数量随机抽取60粒,重复两次,求其平均值即可;鉴别液与Bouin's液固定剥膜后测定受精率差异不显著(P>0.05),生产中完全可以直接使用鉴别液来测定受精率,简单、快速、准确度高。此结果可以作为产沉性大卵虹鳟等冷水性鱼类受精率计算方法标准化依据。

虹鳟胚胎受精率适宜发育期的研究

用鉴别液J1、J2与Bouin’s液固定剥膜比较方法,测定了虹鳟(Oncorhynchus mykiss)不同发育期胚胎的受精率。结果表明:用鉴别液J1处理后测得的二细胞期、四细胞期、八细胞期、桑葚期、高囊胚期、原肠中期胚胎的受精率分别为53.21%、77.89%、82.00%、88.2%、87.71%和81.43%;用鉴别液J2处理测得的受精率分别为51.64%、77.86%、81.43%、89.07%、87.50%和81.86%。二者与Bouin’s液固定剥膜后测定的受精率差异不显著(P>0.05),说明这两种鉴别液均可用于生产中测定受精率。在不同的发育时期,鉴别的准确性有所不同,细胞分裂期的准确性远低于桑葚期至囊胚期,这可能是由于胚胎发育不同步和早期胚胎细胞较少所致,因此,鉴别虹鳟鱼卵的受精率最好在桑葚期和囊胚期之间(12～24℃.d)的时间点。