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三步沉淀法纯化鸡卵类黏蛋白 被引量:9
1
作者 王帅 吴子健 +4 位作者 王素英 刘建福 张伟 帖航 荣强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第24期74-80,共7页
鸡卵类黏蛋白(hen’s egg ovomucoid,HOVM)是鸡蛋清中最重要的过敏原蛋白,探讨三步沉淀(一步三氯乙酸沉淀以及两步硫酸铵盐析沉淀)从鸡蛋清中提取并纯化HOVM的工艺条件,并利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳以及高效液相色谱(high p... 鸡卵类黏蛋白(hen’s egg ovomucoid,HOVM)是鸡蛋清中最重要的过敏原蛋白,探讨三步沉淀(一步三氯乙酸沉淀以及两步硫酸铵盐析沉淀)从鸡蛋清中提取并纯化HOVM的工艺条件,并利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳以及高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)技术检测纯化效果。结果表明:用等体积去离子水稀释的鸡卵清液加入质量分数10%三氯乙酸去除大部分杂蛋白后,所得上清液加入硫酸铵至终饱和度50%,盐析沉淀进一步去除非HOVM的杂蛋白,上清液中最后再追加硫酸铵至终饱和度80%,离心所得沉淀再经过透析冻干即为高纯度的HOVM;HPLC(检测波长220 nm)检测所获HOVM的纯度为99.202%,此工艺条件下得到HOVM的提取率约为27.05%。 展开更多
关键词 蛋白 三步沉淀 盐析
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卵类糖蛋白手性柱拆分钙离子拮抗剂尼卡地平对映体 被引量:11
2
作者 傅强 贺浪冲 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1779-1782,共4页
研究了在卵类糖蛋白(OGCH I)手性柱上影响钙离子拮抗剂尼卡地平对映体拆分的主要因素,建立了尼卡地平对映体的拆分方法。氨丙基硅胶在0.2 mol/L磷酸钠缓冲液(pH 6.6)中与OGCH I反应,制备的固定相装填于10 cm不锈钢柱中,用高效液相色谱... 研究了在卵类糖蛋白(OGCH I)手性柱上影响钙离子拮抗剂尼卡地平对映体拆分的主要因素,建立了尼卡地平对映体的拆分方法。氨丙基硅胶在0.2 mol/L磷酸钠缓冲液(pH 6.6)中与OGCH I反应,制备的固定相装填于10 cm不锈钢柱中,用高效液相色谱法拆分尼卡地平对映体。优化的色谱条件为:0.05 mol/L磷酸钠缓冲液(pH 5.5)-甲醇(65∶35),流速0.2 mL/m in,紫外检测波长236 nm,柱温:25℃。在此条件下,尼卡地平对映体可得到良好分离。通过改变有机改性剂的种类和比例、流动相的pH值、缓冲溶液的浓度以及流速等色谱条件,确定了影响尼卡地平对映体拆分的主要因素。 展开更多
关键词 尼卡地平 手性分离 蛋白 高效液相色谱
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鸡卵类黏蛋白结构与性质研究进展 被引量:4
3
作者 王帅 吴子健 +2 位作者 刘建福 胡志和 王连芬 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第17期326-331,共6页
鸡卵类黏蛋白是鸡蛋中最主要也是过敏原性最强的过敏原蛋白。本文总结该蛋白的结构,包括氨基酸序列、糖基组成、二硫键位置、二级结构以及组成该蛋白的3个结构域,并描述其理化性质,最后着重分析讨论其过敏原性,特别是其分子结构中二硫... 鸡卵类黏蛋白是鸡蛋中最主要也是过敏原性最强的过敏原蛋白。本文总结该蛋白的结构,包括氨基酸序列、糖基组成、二硫键位置、二级结构以及组成该蛋白的3个结构域,并描述其理化性质,最后着重分析讨论其过敏原性,特别是其分子结构中二硫键、糖基和结构域等因素与过敏原性之间的内在联系。 展开更多
关键词 蛋白 过敏原性 二硫键 糖基 结构域
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抗鸡蛋卵类黏蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:6
4
作者 邹菊 张强 刘志刚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期185-188,共4页
目的制备和鉴定鼠抗鸡蛋主要过敏原卵类黏蛋白的单克隆抗体。方法利用鸡蛋卵类黏蛋白(ovm)为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。采用半固体培养基法和有限稀释法相结合的方法快速筛选获得稳定分泌的特... 目的制备和鉴定鼠抗鸡蛋主要过敏原卵类黏蛋白的单克隆抗体。方法利用鸡蛋卵类黏蛋白(ovm)为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。采用半固体培养基法和有限稀释法相结合的方法快速筛选获得稳定分泌的特异性杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。利用双抗体夹心ELISA法检测食品中的鸡蛋过敏原。结果获得4株可稳定分泌鼠抗卵类黏蛋白的单克隆抗体,分别命名为1G8,2H5,3A7,4G4,其Ig亚型均为IgG1。且4株单抗效价均在10-8以上。ELISA和Western blotting分析表明该4株单抗均能特异性识别卵类黏蛋白,并且建立双抗体夹心ELISA的方法可以准确的检测出食品中鸡蛋过敏原的存在。结论成功制备了4株高效价的鼠抗卵类黏蛋白的单克隆抗体,为建立卵类黏蛋白检测及纯化方法奠定了基础,也可为食品中鸡蛋过敏原的检出提供依据。 展开更多
关键词 蛋白 单克隆抗体 特性鉴定 过敏原检测
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鸡卵类黏蛋白过敏原性的在体与离体实验 被引量:1
5
作者 王丽娟 吴子健 +3 位作者 刘露 陈一华 裴高鑫 王勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期247-251,共5页
通过观察卵类黏蛋白引起的豚鼠过敏性休克以及对致敏豚鼠离体肠平滑肌过敏性收缩反应(SchultzDale反应)的影响,研究鸡卵类黏蛋白的过敏原性,并初步建立其过敏实验的动物模型。结果显示:1)在实验观察剂量下,1 mg/mL卵清白蛋白组豚鼠100%... 通过观察卵类黏蛋白引起的豚鼠过敏性休克以及对致敏豚鼠离体肠平滑肌过敏性收缩反应(SchultzDale反应)的影响,研究鸡卵类黏蛋白的过敏原性,并初步建立其过敏实验的动物模型。结果显示:1)在实验观察剂量下,1 mg/mL卵清白蛋白组豚鼠100%出现过敏性休克并死亡,全身性过敏反应呈极强阳性(4分);卵类黏蛋白组豚鼠的反应与卵白蛋白组相似(P>0.05),大部分动物出现死亡,全身性过敏反应100%呈阳性(2.04~3.68分);不同剂量的卵类黏蛋白引起的豚鼠全身过敏反应呈现出剂量依赖性,当致敏剂量为4 mg/mL时,全身性过敏反应评分为3.68。2)卵类黏蛋白对Schultz-Dale反应的影响也与卵清白蛋白相似,使致敏的肠平滑肌收缩活动明显加强;以2 mg/mL致敏时,豚鼠离体肠收缩力改变率最高,为538.5%。3)不同致敏剂量卵类黏蛋白组豚鼠血清免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)G水平较对照组明显升高,且呈剂量依赖性。由此建立的卵类黏蛋白在体与离体过敏实验的动物模型可用以检测卵类黏蛋白过敏原及评价其过敏原的消减效果。 展开更多
关键词 蛋白 蛋白 动物模型 过敏性休克 Schultz-Dale反应
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双抗夹心酶联免疫(ELISA)方法测定卵类黏蛋白
6
作者 李晶 王薇 +2 位作者 张燕 陆旸 王硕 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2015年第22期127-130,共4页
卵类黏蛋白是鸡蛋中的主要过敏原,因此建立相应的检测方法对保障消费者健康非常重要。为此本试验分别制备了卵类黏蛋白特异性兔多克隆抗体和鼠多克隆抗体,对不同检测条件进行优化,最终建立了一种用于定量分析卵类黏蛋白的双抗夹心ELISA... 卵类黏蛋白是鸡蛋中的主要过敏原,因此建立相应的检测方法对保障消费者健康非常重要。为此本试验分别制备了卵类黏蛋白特异性兔多克隆抗体和鼠多克隆抗体,对不同检测条件进行优化,最终建立了一种用于定量分析卵类黏蛋白的双抗夹心ELISA方法,并对检测方法的精密度进行考察。结果表明,通过对封闭液、捕获抗体包被量和检测p H的优化,该方法的最低检出限达到(0.274±1.27)ng/m L,且具有良好的特异性以及检测精密度。因此,所建立的方法可用于食品中卵类黏蛋白的定量检测。 展开更多
关键词 过敏原 蛋白 双抗夹心ELISA方法
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卵类糖蛋白固定相高效液相色谱法测定血浆中尼伐地平对映体(英文)
7
作者 傅强 贺浪冲 《中国临床药学杂志》 CAS 2006年第2期76-79,共4页
目的 建立血浆中尼伐地平对映体的HPLC法。方法在弱碱性条件下,血浆样品用环己烷-异丙醇(96.5:3.5,V/V)混合溶剂提取,以卵类糖蛋白为固定相,以含乙醇22.5%的50mmol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH5.1)为流动相,采用HPLC法分离... 目的 建立血浆中尼伐地平对映体的HPLC法。方法在弱碱性条件下,血浆样品用环己烷-异丙醇(96.5:3.5,V/V)混合溶剂提取,以卵类糖蛋白为固定相,以含乙醇22.5%的50mmol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH5.1)为流动相,采用HPLC法分离测定,检测波长236nm。结果在本实验条件下,血浆内源性物质无干扰,尼伐地平对映体可在30min内得到基线分离。检测信号峰面积与(S)-(+)或(R)-(-)尼伐地平在10—300μg·L^-1内呈良好的线性关系,检测限约为3μg·L^-1,方法回收率为91.7%~100.5%,RSD〈9.8%。结论本方法具有简便快速、精密度和准确度好的优点,可用于血浆中尼伐地平对映体的分离和测定。 展开更多
关键词 尼伐地平 对映体 蛋白 HPLC 血浆
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加热对鸡卵类黏蛋白结构及其与IgG结合能力的影响 被引量:1
8
作者 吴子健 张允萍 +1 位作者 侯惠静 李晓萌 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第13期183-191,共9页
鸡卵类黏蛋白(hen's egg ovomucoid,HOVM)是存在于鸡蛋卵清中的一种致敏蛋白,而热处理是常用的一种蛋制品的加工方式。通过间接酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法、圆二色谱法、8-苯胺-1-萘磺酸(8-anili... 鸡卵类黏蛋白(hen's egg ovomucoid,HOVM)是存在于鸡蛋卵清中的一种致敏蛋白,而热处理是常用的一种蛋制品的加工方式。通过间接酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法、圆二色谱法、8-苯胺-1-萘磺酸(8-anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS)荧光探针法以及相关性分析法解释热处理对HOVM与免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)结合能力和结构的影响。结果表明:随着热处理强度(包括温度和时间)的增加,HOVM与IgG的结合能力不断下降,二级结构中的α-螺旋和β-折叠含量呈下降趋势,β-转角和无规则卷曲的含量呈上升趋势,表面疏水性指数在处理强度较低的情况下会提高,处理强度较高的情况下会下降,HOVM结合ANS后的最大荧光波长数(λmax)出现蓝移以及数值变化显示HOVM结构在热处理的作用下先变得松散,随后处理温度的攀升可能会进一步导致HOVM蛋白发生凝聚。 展开更多
关键词 蛋白 间接酶联免疫吸附测定法 圆二色谱法 8-苯胺-1-萘磺酸(8-anilino-1-naphthalenesulfonic acid ANS)荧光探针 表面疏水性 二级结构
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卵蛋白性关节炎模型的诱导及研究 被引量:5
9
作者 魏东明 赵学 刘敬珍 《河北中医》 2011年第1期114-116,共3页
在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的动物实验研究中,以大、小鼠作为实验对象,采用佐剂或Ⅱ型胶原诱导RA模型报道颇多,再加上诸多的方法改进,使大、小鼠动物模型的诱导比较成熟可靠,
关键词 关节炎 蛋白 疾病模型 动物
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不同浓度的卵蛋白泵雾化激发方式对大鼠哮喘模型的影响 被引量:1
10
作者 龚萍 李云 +2 位作者 钟礼立 李文开 刘持 《医学临床研究》 CAS 2013年第8期1515-1517,1521,共4页
【目的】探讨不同浓度的卵蛋白(0VA)泵雾化激发方式对大鼠哮喘模型的影响。【方法】将32只SD大鼠按照0VA激发浓度的不同分为4组:用PARIBOY高频雾化器激发浓度分别为0%、1%、2%、4%(O%浓度为对照组,激发以生理盐水代替)。各0V... 【目的】探讨不同浓度的卵蛋白(0VA)泵雾化激发方式对大鼠哮喘模型的影响。【方法】将32只SD大鼠按照0VA激发浓度的不同分为4组:用PARIBOY高频雾化器激发浓度分别为0%、1%、2%、4%(O%浓度为对照组,激发以生理盐水代替)。各0VA先按常规建立哮喘模型。各组实验大鼠于末次激发24h后(即d。,)麻醉,采用BUXCO测定气道阻力。取右肺组织做HE、Masson和AB-PAS染色检测,分析气道炎症和气道重塑情况;做左肺支气管肺泡灌洗(BAL)后,行其灌洗液(BALF)细胞学分析。【结果】①一般观察:OVA各组大鼠均出现呼吸急促、点头状呼吸、腹肌痉挛等表现,而对照组大鼠激发前后一般观察无明显变化,呼吸平稳,运动敏捷。②与对照组相比较,0VA各组支气管周围炎性细胞浸润评分、支气管管壁周围E0s、气道平滑肌面积、杯状细胞占上皮细胞百分比、胶原沉积面积显著增高(P〈0.01);OVA各组之间无显著差异(P〉0.05)。③相对于对照组,0VA各组BALF细胞总数、各细胞分类中嗜酸性粒细胞(EOS),淋巴细胞显著增高(P〈0.01);但0VA各组之间无显著差异(P〉0.05)。④OVA各组大鼠RflW值均大于对照组(P〈0.01);而0VA各组之间无显著差异(P〉0.05)。【结论】①不同浓度泵雾化激发均能够成功复制哮喘大鼠模型。②在一定范围下,卵蛋白泵雾化激发浓度对模型制作无明显影响。 展开更多
关键词 哮喘 疾病模型 动物 大鼠 蛋白
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吸入汽油废气颗粒大鼠再行卵蛋白攻击后哮喘速发相反应变化
11
作者 元熙哲 李今子 +2 位作者 金正勇 池永学 尹永日 《延边大学医学学报》 CAS 2008年第3期169-172,共4页
[目的]观察吸入不同时间长度汽油废气颗粒(DEP)的大鼠行卵蛋白攻击后哮喘速发相反应的变化.[方法]选择雄性Wistar大鼠,随机分为6个组,其中A组给予生理盐水攻击,B组给予卵蛋白攻击,C,D,E,F组分别给吸入DEP各1,2,3,4周后再行卵蛋白攻击.... [目的]观察吸入不同时间长度汽油废气颗粒(DEP)的大鼠行卵蛋白攻击后哮喘速发相反应的变化.[方法]选择雄性Wistar大鼠,随机分为6个组,其中A组给予生理盐水攻击,B组给予卵蛋白攻击,C,D,E,F组分别给吸入DEP各1,2,3,4周后再行卵蛋白攻击.抗原攻击结束1周后除A组外的其他各组大鼠给予卵蛋白激发30 min,测量气道阻力5 min.观察肺泡灌洗液中炎症细胞及血清总IgE值的变化,检测肺组织中IL-5和IFN-γ水平.[结果]抗原激发后B,C,D,E,F组大鼠气道阻力均高于A组,E,F组明显高于B组;气道阻力的增高程度和DEP的吸入时间呈正相关.除A组外的各组大鼠肺泡灌洗液中均可观察到大量炎症细胞浸润,包括嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞,以前两者为主.嗜酸性粒细胞体积分数在B组与A组之间及E,F组与B组之间差异均有统计学意义;中性粒细胞体积分数在A,B,C,D组之间无显著性差异,但E,F组较A,B组显著增高.B,C,D,E,F组大鼠血清总IgE值较A组显著增高,F组与B组间差异亦有统计学意义;D,E,F组大鼠肺组织中IL-5水平较A,B组显著增高.[结论]吸入DEP大鼠再行卵蛋白攻击后哮喘速发相反应明显增强,反应增强程度与DEP吸入时间呈正相关. 展开更多
关键词 哮喘 车辆排放物 蛋白 大鼠
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卵黄LT抗毒素的制备与鉴定 被引量:1
12
作者 袁军 凌天翼 唐俊杰 《贵阳医学院学报》 CAS 2002年第2期120-122,共3页
目的 :为了进一步进行不耐热肠毒素 (LT)研究 ,制备较纯的抗LT抗体是必要的。方法 :采用初步纯化的LT免疫母鸡 ,从所产蛋的卵黄中提取并纯化卵黄LT抗毒素 (EyIgG) ,用ELISA竞争抑制试验和对流电泳鉴定其抗原性。结果 :证实其有LT抗体特... 目的 :为了进一步进行不耐热肠毒素 (LT)研究 ,制备较纯的抗LT抗体是必要的。方法 :采用初步纯化的LT免疫母鸡 ,从所产蛋的卵黄中提取并纯化卵黄LT抗毒素 (EyIgG) ,用ELISA竞争抑制试验和对流电泳鉴定其抗原性。结果 :证实其有LT抗体特异性 ,效价分别为 1∶10和 1∶8。此抗体能保护小鼠逃脱LT的攻击 ,保护效价为 1∶16。结论 展开更多
关键词 黄LT抗毒素 制备 鉴定 蛋白 肠毒素 抗体 酶联免疫吸附测定
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斑点免疫结合法测定卵黄抗体的活性(英文)
13
作者 阮光萍 安梅 +2 位作者 王桂华 叶蕾 邓淑芬 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2397-2400,共4页
背景:哺乳动物产生的抗体和鸡产生的卵黄抗体在物理、生物活性方面存在差异。卵黄抗体能耐酸耐热,可口服用来防治动物和人类的肠内感染疾病,且对发展常规的诊断免疫实验有益。传统的ELISA法检测卵黄抗体比斑点免疫结合法费时。目的:应... 背景:哺乳动物产生的抗体和鸡产生的卵黄抗体在物理、生物活性方面存在差异。卵黄抗体能耐酸耐热,可口服用来防治动物和人类的肠内感染疾病,且对发展常规的诊断免疫实验有益。传统的ELISA法检测卵黄抗体比斑点免疫结合法费时。目的:应用斑点免疫结合法检测卵黄抗体的稳定性。设计:开放性实验。单位:解放军成都军区昆明总医院输血科。材料:实验于2006-01/06在解放军成都军区昆明总医院完成。选取30周龄的白色莱杭母鸡2只,以HLA-A*0201α链作为抗原,纯化抗原的总蛋白浓度0.04g/L,相对分子质量为32000(自行制备);硝酸纤维素膜(进口分装);脱脂奶粉(安怡产品,批号20051220);DAB(博士德公司);辛酸(上海星火化工厂生产);硫酸铵(汕头市光华化学厂生产)。方法:①抗原HLA-A*0201α链以总蛋白浓度0.04g/L纯化后,进行鸡卵黄抗体的纯化,采用SDS-PAGE电泳检测卵黄抗体的纯化结果。②1μL抗原被点样在硝酸纤维素膜的中心,于37℃孵箱中烤干,浸于1mL的PBST中,37℃孵箱90r/min封闭振荡15min,重新更换1mL的PBST,加入一抗卵黄抗体,终浓度为10mg/L。在37℃孵箱振荡30min后,硝酸纤维素膜用PBST洗3次。加入二抗标记HRP的鼠抗鸡卵黄抗体,孵育30min后,硝酸纤维素膜用PBST洗3次,通过用DAB试剂孵育来显色。阳性反应产生一个深棕色的斑点,表明卵黄抗体具有较好的活性;斑点变浅表明失去部分活性;斑点消失表明失去全部活性。根据斑点的灰度值变化对照标准样品,可计算卵黄抗体剩余的百分活性。③卵黄抗体用磷酸盐缓冲液调整为1,0.1,0.01g/L3种蛋白浓度,室温下放置4个月,每个月分别从各种浓度的样品中取10μg,采用斑点免疫结合法检测卵黄抗体室温稳定性。④卵黄抗体分别置于7个EP管,100μL/管,编号1~7。1~3号管用1mol/L的HCL分别调整pH值为5,3,2;4~6号管用1mol/L的NaOH分别调整pH值为9,11,12;7号管的pH值为7(中性),不加酸或碱。1~7号管均放在37℃孵箱中3h,每隔1h各管分别取10μg样品,采用斑点免疫结合法检测卵黄抗体不同pH值条件下的稳定性。⑤卵黄抗体分别置于6个EP管,10μL/管,编号1~6。按顺序编号各管分别于30,40,50,60,70,80℃水浴15min,然后4℃冰箱冷却,每管取样10μg,以未经过加热处理的样品作为标准对照,采用斑点免疫结合法检测卵黄抗体热稳定性。主要观察指标:①卵黄抗体SDS-PAGE电泳检测。②卵黄抗体室温稳定性检测。③卵黄抗体不同pH值稳定性检测结果。④卵黄抗体热稳定性检测。结果:①纯化的卵黄抗体经SDS-PAGE电泳后有两条主带,重链相对分子质量约66000,轻链相对分子质量约25000。②1,0.1,0.01g/L的卵黄抗体,室温下放置4个月后仍然保留部分活性。③pH5~9时37℃孵育3h后,卵黄抗体仍有部分活性;在pH低于5或高于9的条件下37℃孵育3h后,卵黄抗体失去全部活性。④纯化的卵黄抗体分别置于6个EP管中,1~4号管的卵黄抗体仍有活性,第5管和第6管出现白色沉淀,可能是较高温度下蛋白变性引起的。结论:卵黄抗体稳定性较好,斑点免疫结合法能够快速简单的证明和描述卵黄抗体的功能活性,且只需要微量抗原和抗体,斑点特异,能同时处理大量样品。 展开更多
关键词 蛋白 免疫球蛋白 染色与标记/方法
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Best卵黄样黄斑营养不良一例
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作者 田青 马海燕 +1 位作者 何佳 李桦 《空军总医院学报》 2011年第2期121-122,共2页
1临床资料 患者,邓某,男,19岁,空军某部通信连战士,2008年4月因头痛前往我院神经内科就诊,常规检查眼底时发现双眼黄斑异常。
关键词 黄斑变性/诊断 营养不良/诊断 蛋白/分析
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鸡蛋中重要功能蛋白的研究与应用展望 被引量:2
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作者 吕玲 《中国家禽》 北大核心 2011年第16期34-37,共4页
鸡蛋是一种最为普遍的食物过敏原。蛋清是引起过敏的主要因素,目前已经证实蛋清中含有4种蛋白质具有过敏原性,分别是卵类黏蛋白、卵白蛋白、卵转铁蛋白和溶菌酶。其中,卵类黏蛋白是引起免疫反应的成分,当体内摄入卵类黏蛋白后,血液中会... 鸡蛋是一种最为普遍的食物过敏原。蛋清是引起过敏的主要因素,目前已经证实蛋清中含有4种蛋白质具有过敏原性,分别是卵类黏蛋白、卵白蛋白、卵转铁蛋白和溶菌酶。其中,卵类黏蛋白是引起免疫反应的成分,当体内摄入卵类黏蛋白后,血液中会产生更多的IgG与IgE来对抗它。卵白蛋白是蛋清中的主要蛋白质,含有8种人体所需的氨基酸,以及人体必需的金属微量元素。 展开更多
关键词 蛋白 蛋白 黄高磷蛋白 功能 应用
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β-甘露糖苷酶酶解对HOVM结构与胰蛋白酶抑制活性的影响
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作者 侯惠静 吴子健 +1 位作者 石振鹏 姜宇峰 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第4期32-37,共6页
通过苯酚-硫酸法、8-苯氨基-1-萘磺酸(8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS)荧光探针法以及圆二色谱法检测分析β-甘露糖苷酶酶解处理鸡卵类黏蛋白(hen-egg ovomucoid,HOVM)上的糖基部分后,HOVM中糖基含量变化与蛋白的表面疏水性... 通过苯酚-硫酸法、8-苯氨基-1-萘磺酸(8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS)荧光探针法以及圆二色谱法检测分析β-甘露糖苷酶酶解处理鸡卵类黏蛋白(hen-egg ovomucoid,HOVM)上的糖基部分后,HOVM中糖基含量变化与蛋白的表面疏水性、二级结构组成以及HOVM对胰蛋白酶抑制活力之间的关系。研究结果表明:β-甘露糖苷酶酶处理降低了HOVM中糖基部分的含量,会逐步提高HOVM对胰蛋白酶的抑制活力,同时对于二级结构组成的影响不是很显著,但是随着糖基含量的降低,HOVM中无规则卷曲的含量降低与胰蛋白酶的抑制率逐渐增高具有显著的相关性。 展开更多
关键词 蛋白 蛋白酶抑制活性 β-甘露糖苷酶 无规则卷曲
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不同时间变应原暴露对大鼠哮喘模型的影响 被引量:3
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作者 胡艳 安芸 +5 位作者 黄鹤 郝洪军 宿利 王月丹 刘新民 李海潮 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期306-309,共4页
目的:研究幼年大鼠不同时间接触卵蛋白(ovalbumin,OVA)对成年后气道哮喘炎症的影响及机制。方法:新生SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为哮喘组,出生后第3天、第7天、第14天变应原接触组,以及正常对照组。各变应原接触组分别于出生后第3天... 目的:研究幼年大鼠不同时间接触卵蛋白(ovalbumin,OVA)对成年后气道哮喘炎症的影响及机制。方法:新生SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为哮喘组,出生后第3天、第7天、第14天变应原接触组,以及正常对照组。各变应原接触组分别于出生后第3天、第7天和第14天给予皮下注射OVA1 mg(含氢氧化铝凝胶5 mg)。大鼠饲养至6周龄后,除正常对照组外其他各组均经OVA致敏并激发为哮喘模型。观察大鼠肺组织病理改变,计数每个细支气管上皮中黏液细胞数量。检测脾及胸腺中CD4+CD25+T细胞比例和叉头框P3(forkhead box P3,Foxp3)转录因子mRNA表达水平。结果:出生后第3天组(2.29±0.49)、出生后第7天组(1.25±0.46)与哮喘组相比(3.50±0.76)黏液细胞数量减少(P<0.01),气道炎症明显减轻;而出生后第14天组黏液细胞数未见减少[(3.00±1.16)vs(3.50±0.76),P>0.05]。出生后第3天组、第7天组脾中CD4+CD25+T细胞比例[(13.68±3.54)%vs(7.33±3.39)%,P<0.01;(16.65±4.91)%vs(7.33±3.39)%,P<0.01]和Foxp3 mRNA水平[(18.46±5.01)vs(5.49±1.99),P<0.01;(26.37±4.68)vs(5.49±1.99),P<0.01]与正常组比较均明显升高,且出生后第7天组胸腺中Foxp3 mRNA表达亦增高[(18.73±3.66)vs(11.13±1.75),P<0.01];但出生后第14天组脾CD4+CD25+T细胞比例及Foxp3 mRNA表达与正常组比较差异均无统计学意义[(11.04±2.88)%vs(7.33±3.39)%,P>0.05;(8.71±2.19)vs(5.49±1.99),P>0.05]。结论:早期接触变应原对大鼠哮喘气道炎症的抑制作用存在"时间窗"现象,其发生机制可能与诱导产生调节性T细胞有关。 展开更多
关键词 哮喘 免疫耐受 T淋巴细胞 卵蛋白类 大鼠
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地龙注射液对哮喘大鼠肺功能的影响 被引量:10
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作者 吴世满 张彩苹 《山西医药杂志(上半月)》 CAS 2009年第6期511-513,共3页
目的观察腹腔注射地龙注射液对哮喘大鼠肺通气功能和气道阻力的影响。方法应用随机分组的方法将大鼠分为实验4周、8周和12周组,每组又分别分为哮喘组、地塞米松干预组、地龙干预组和对照组,每个小组8只动物。用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏... 目的观察腹腔注射地龙注射液对哮喘大鼠肺通气功能和气道阻力的影响。方法应用随机分组的方法将大鼠分为实验4周、8周和12周组,每组又分别分为哮喘组、地塞米松干预组、地龙干预组和对照组,每个小组8只动物。用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入诱喘的方法制成哮喘模型,地龙和地塞米松干预组诱喘前分别给予地龙注射液腹腔注射和地塞米松雾化吸入,应用Maclab数据系统记录分析大鼠肺通气功能和气道阻力。结果实验4周组,各组间肺顺应性差异无统计学意义,哮喘组与其余3组比较,气道阻力明显增高(P<0.01)、每分通气量降低(P<0.01)、呼吸频率增快(P<0.01);实验8周和12周,哮喘组气道阻力明显增加,每分通气量降低,肺顺应性下降,呼吸频率增快(P<0.01或0.05),而地龙组和地塞米松组与对照组比较,气道阻力增高(P<0.05)、呼吸频率增快(P<0.05)、每分通气量降低(P<0.01)、肺顺应性下降(P<0.05);地龙组与地塞米松组间各项肺功能指标差异均无统计学意义。结论地龙注射液可缓解哮喘大鼠支气管痉挛,降低气道阻力,改善肺功能。 展开更多
关键词 地龙 哮喘 卵蛋白类 气道阻力
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蛙鸣粉平喘作用的实验研究
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作者 别晓东 马毅强 +1 位作者 楼兰花 王健民 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 2002年第2期87-88,共2页
目的 探讨中药蛙鸣粉的平喘作用。方法 采用卵蛋白致敏激发豚鼠哮喘及组胺与乙酰胆碱引喘 ,以及止咳 ,化痰 ,抗炎实验。结果 蛙鸣粉能显著延长卵蛋白 ,组胺与乙酰胆碱引起的哮喘潜伏期 ,延长氢氧化氨诱发小鼠咳嗽潜伏期 ,增加小鼠气... 目的 探讨中药蛙鸣粉的平喘作用。方法 采用卵蛋白致敏激发豚鼠哮喘及组胺与乙酰胆碱引喘 ,以及止咳 ,化痰 ,抗炎实验。结果 蛙鸣粉能显著延长卵蛋白 ,组胺与乙酰胆碱引起的哮喘潜伏期 ,延长氢氧化氨诱发小鼠咳嗽潜伏期 ,增加小鼠气管内酚红排出量 ,抑制琼脂引起的小鼠慢性炎症。结论 蛙鸣粉的作用机理可能在于其抗I型变态反应以及对炎症介质组胺的拮抗作用 ,可预防理化刺激对气道上皮的损伤 。 展开更多
关键词 蛙鸣粉 药理学 哮喘 化学诱导 蛋白 副作用 组胺 乙酰胆碱 中药
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Protection of Carassius auratus Gibelio against infection by Aeromonas hydrophila using specific immunoglobulins from hen egg yolk 被引量:9
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作者 LI Xiao-liang SHUAI Jiang-bing FANG Wei-huan 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2006年第11期922-928,共7页
Specific immunoglobulin (IgY) from egg yolk against Aeromonas hydrophila was produced by immunization of White Leghorn hens with formalin-killed whole cells of A. hydrophila. ELISA test using A. hydrophila as the coat... Specific immunoglobulin (IgY) from egg yolk against Aeromonas hydrophila was produced by immunization of White Leghorn hens with formalin-killed whole cells of A. hydrophila. ELISA test using A. hydrophila as the coating antigen revealed that the specific antibody titer started to increase in the egg yolk at the 13th day post-immunization (P/N=2.18), reached the peak at the 56th day (P/N=13.82), and remained at high level until day 133 (P/N=7.03). The antibody was purified by saturated ammonium sulphate with a recovery rate of 63.5%. The specific IgY inhibited the growth of A. hydrophila at a concentration of 1.0 mg/ml during the 18 h incubation. Pre-treatment of polyploid gibel carps Carassius auratus Gibelio with specific IgY had a protection rate of 60% (6/10) against challenge with A. hydrophila, while none of the fishes in the control groups receiving sterile phosphate buffered saline (PBS) or non-specific IgY survived the challenge. Treatment of fishes with the specific IgY 4 h after the challenge also had lower mortality (70%, 7/10), a 30% reduction against the control PBS or non-specific IgY groups (10/10). These results indicate that specific IgY antibodies could be obtained easily from hens immunized with an inactivated A. hydrophila and could provide a novel alternative approach to control of diseases in fishes caused by this organism. 展开更多
关键词 Aeromonas hydrophila IMMUNOGLOBULINS Hen egg yolk Polyploid gibel carps Carassius auratus Gibelio
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