卵蛋白性关节炎模型的诱导及研究

在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的动物实验研究中,以大、小鼠作为实验对象,采用佐剂或Ⅱ型胶原诱导RA模型报道颇多,再加上诸多的方法改进,使大、小鼠动物模型的诱导比较成熟可靠,

不同浓度的卵蛋白泵雾化激发方式对大鼠哮喘模型的影响

【目的】探讨不同浓度的卵蛋白（0VA）泵雾化激发方式对大鼠哮喘模型的影响。【方法】将32只SD大鼠按照0VA激发浓度的不同分为4组：用PARIBOY高频雾化器激发浓度分别为0％、1％、2％、4％（O％浓度为对照组，激发以生理盐水代替）。各0VA先按常规建立哮喘模型。各组实验大鼠于末次激发24h后（即d。，）麻醉，采用BUXCO测定气道阻力。取右肺组织做HE、Masson和AB-PAS染色检测，分析气道炎症和气道重塑情况；做左肺支气管肺泡灌洗（BAL）后，行其灌洗液（BALF）细胞学分析。【结果】①一般观察：OVA各组大鼠均出现呼吸急促、点头状呼吸、腹肌痉挛等表现，而对照组大鼠激发前后一般观察无明显变化，呼吸平稳，运动敏捷。②与对照组相比较，0VA各组支气管周围炎性细胞浸润评分、支气管管壁周围E0s、气道平滑肌面积、杯状细胞占上皮细胞百分比、胶原沉积面积显著增高（P〈0．01）；OVA各组之间无显著差异（P〉0．05）。③相对于对照组，0VA各组BALF细胞总数、各细胞分类中嗜酸性粒细胞（EOS），淋巴细胞显著增高（P〈0．01）；但0VA各组之间无显著差异（P〉0．05）。④OVA各组大鼠RflW值均大于对照组（P〈0．01）；而0VA各组之间无显著差异（P〉0．05）。【结论】①不同浓度泵雾化激发均能够成功复制哮喘大鼠模型。②在一定范围下，卵蛋白泵雾化激发浓度对模型制作无明显影响。

吸入汽油废气颗粒大鼠再行卵蛋白攻击后哮喘速发相反应变化

[目的]观察吸入不同时间长度汽油废气颗粒(DEP)的大鼠行卵蛋白攻击后哮喘速发相反应的变化.[方法]选择雄性Wistar大鼠,随机分为6个组,其中A组给予生理盐水攻击,B组给予卵蛋白攻击,C,D,E,F组分别给吸入DEP各1,2,3,4周后再行卵蛋白攻击.抗原攻击结束1周后除A组外的其他各组大鼠给予卵蛋白激发30 min,测量气道阻力5 min.观察肺泡灌洗液中炎症细胞及血清总IgE值的变化,检测肺组织中IL-5和IFN-γ水平.[结果]抗原激发后B,C,D,E,F组大鼠气道阻力均高于A组,E,F组明显高于B组;气道阻力的增高程度和DEP的吸入时间呈正相关.除A组外的各组大鼠肺泡灌洗液中均可观察到大量炎症细胞浸润,包括嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞,以前两者为主.嗜酸性粒细胞体积分数在B组与A组之间及E,F组与B组之间差异均有统计学意义;中性粒细胞体积分数在A,B,C,D组之间无显著性差异,但E,F组较A,B组显著增高.B,C,D,E,F组大鼠血清总IgE值较A组显著增高,F组与B组间差异亦有统计学意义;D,E,F组大鼠肺组织中IL-5水平较A,B组显著增高.[结论]吸入DEP大鼠再行卵蛋白攻击后哮喘速发相反应明显增强,反应增强程度与DEP吸入时间呈正相关.

卵黄LT抗毒素的制备与鉴定

目的 :为了进一步进行不耐热肠毒素 (LT)研究 ,制备较纯的抗LT抗体是必要的。方法 :采用初步纯化的LT免疫母鸡 ,从所产蛋的卵黄中提取并纯化卵黄LT抗毒素 (EyIgG) ,用ELISA竞争抑制试验和对流电泳鉴定其抗原性。结果 :证实其有LT抗体特异性 ,效价分别为 1∶10和 1∶8。此抗体能保护小鼠逃脱LT的攻击 ,保护效价为 1∶16。结论

斑点免疫结合法测定卵黄抗体的活性(英文)

背景:哺乳动物产生的抗体和鸡产生的卵黄抗体在物理、生物活性方面存在差异。卵黄抗体能耐酸耐热,可口服用来防治动物和人类的肠内感染疾病,且对发展常规的诊断免疫实验有益。传统的ELISA法检测卵黄抗体比斑点免疫结合法费时。目的:应用斑点免疫结合法检测卵黄抗体的稳定性。设计:开放性实验。单位:解放军成都军区昆明总医院输血科。材料:实验于2006-01/06在解放军成都军区昆明总医院完成。选取30周龄的白色莱杭母鸡2只,以HLA-A*0201α链作为抗原,纯化抗原的总蛋白浓度0.04g/L,相对分子质量为32000(自行制备);硝酸纤维素膜(进口分装);脱脂奶粉(安怡产品,批号20051220);DAB(博士德公司);辛酸(上海星火化工厂生产);硫酸铵(汕头市光华化学厂生产)。方法:①抗原HLA-A*0201α链以总蛋白浓度0.04g/L纯化后,进行鸡卵黄抗体的纯化,采用SDS-PAGE电泳检测卵黄抗体的纯化结果。②1μL抗原被点样在硝酸纤维素膜的中心,于37℃孵箱中烤干,浸于1mL的PBST中,37℃孵箱90r/min封闭振荡15min,重新更换1mL的PBST,加入一抗卵黄抗体,终浓度为10mg/L。在37℃孵箱振荡30min后,硝酸纤维素膜用PBST洗3次。加入二抗标记HRP的鼠抗鸡卵黄抗体,孵育30min后,硝酸纤维素膜用PBST洗3次,通过用DAB试剂孵育来显色。阳性反应产生一个深棕色的斑点,表明卵黄抗体具有较好的活性;斑点变浅表明失去部分活性;斑点消失表明失去全部活性。根据斑点的灰度值变化对照标准样品,可计算卵黄抗体剩余的百分活性。③卵黄抗体用磷酸盐缓冲液调整为1,0.1,0.01g/L3种蛋白浓度,室温下放置4个月,每个月分别从各种浓度的样品中取10μg,采用斑点免疫结合法检测卵黄抗体室温稳定性。④卵黄抗体分别置于7个EP管,100μL/管,编号1～7。1～3号管用1mol/L的HCL分别调整pH值为5,3,2;4～6号管用1mol/L的NaOH分别调整pH值为9,11,12;7号管的pH值为7(中性),不加酸或碱。1～7号管均放在37℃孵箱中3h,每隔1h各管分别取10μg样品,采用斑点免疫结合法检测卵黄抗体不同pH值条件下的稳定性。⑤卵黄抗体分别置于6个EP管,10μL/管,编号1～6。按顺序编号各管分别于30,40,50,60,70,80℃水浴15min,然后4℃冰箱冷却,每管取样10μg,以未经过加热处理的样品作为标准对照,采用斑点免疫结合法检测卵黄抗体热稳定性。主要观察指标:①卵黄抗体SDS-PAGE电泳检测。②卵黄抗体室温稳定性检测。③卵黄抗体不同pH值稳定性检测结果。④卵黄抗体热稳定性检测。结果:①纯化的卵黄抗体经SDS-PAGE电泳后有两条主带,重链相对分子质量约66000,轻链相对分子质量约25000。②1,0.1,0.01g/L的卵黄抗体,室温下放置4个月后仍然保留部分活性。③pH5～9时37℃孵育3h后,卵黄抗体仍有部分活性;在pH低于5或高于9的条件下37℃孵育3h后,卵黄抗体失去全部活性。④纯化的卵黄抗体分别置于6个EP管中,1～4号管的卵黄抗体仍有活性,第5管和第6管出现白色沉淀,可能是较高温度下蛋白变性引起的。结论:卵黄抗体稳定性较好,斑点免疫结合法能够快速简单的证明和描述卵黄抗体的功能活性,且只需要微量抗原和抗体,斑点特异,能同时处理大量样品。

Best卵黄样黄斑营养不良一例

1临床资料 患者，邓某，男，19岁，空军某部通信连战士，2008年4月因头痛前往我院神经内科就诊，常规检查眼底时发现双眼黄斑异常。

蛙鸣粉平喘作用的实验研究

目的 探讨中药蛙鸣粉的平喘作用。方法 采用卵蛋白致敏激发豚鼠哮喘及组胺与乙酰胆碱引喘 ,以及止咳 ,化痰 ,抗炎实验。结果 蛙鸣粉能显著延长卵蛋白 ,组胺与乙酰胆碱引起的哮喘潜伏期 ,延长氢氧化氨诱发小鼠咳嗽潜伏期 ,增加小鼠气管内酚红排出量 ,抑制琼脂引起的小鼠慢性炎症。结论 蛙鸣粉的作用机理可能在于其抗I型变态反应以及对炎症介质组胺的拮抗作用 ,可预防理化刺激对气道上皮的损伤 。

利用BN大鼠动物模型评价S86转基因大米的致敏性

为研究S86转基因大米的致敏性 ,用BN大鼠致敏动物模型进行研究。 4 0只BN大鼠随机分为 4组 ,每组 10只 ,分别为 :阳性对照组 ,转基因大米组 ,非转基因大米组及阴性对照组。分别在第 0和第 7天 ,通过腹腔注射给予阳性对照组的大鼠 0 1mg ml卵清蛋白 (OVA) 1ml ,其它各组在相同时间腹腔注射相同剂量的生理盐水。以AIN - 93G为依据配制各组饲料 ,阳性对照组和阴性对照组大鼠饲以AIN - 93G饲料 ,转基因大米组饲以含转基因大米粉的饲料 ,非转基因大米组饲以含非转基因大米粉的饲料 ,时间为 6周。在第 2次腹腔注射OVA后 ,取血分离血浆进行组胺测定。分别在第 14、2 1、2 8、35、4 2天取血分离血清 ,测定IgG及IgE水平 ;此外 ,分别在实验前和实验后测定各组大鼠的血压。血清学实验结果显示转基因大米全食品喂饲没有激发IgG及IgE反应 ,而OVA(阳性对照组 )激发了明显的IgG及IgE反应 ;转基因大米组的组胺水平与阴性对照组及亲本对照组相比差异没有显著性 ,而阳性对照组组胺水平升高。另外转基因大米没有引起大鼠血压升高。该研究结果表明通过全食品喂饲的方式给予BN大鼠S86转基因大米没有发现该转基因大米对BN大鼠具有致敏性。

开同合并低蛋白饮食对慢性肾脏疾病患者营养状况及肾功能的影响

目的评价开同合并低蛋白饮食干预对慢性肾脏疾病(CKD)患者营养状况及肾功能的改善效果。方法以60例CKD住院患者为研究对象,随机分为两组,对照组30例,给予低蛋白饮食即每人每天供给0.6g蛋白质;实验组30例,在给予低蛋白饮食的同时补充开同,按0.2g/(kg·d)分3次餐中整服,两组均持续干预3个月,观察患者体重、上臂围(MAC)、上臂肌围(MAMC)及血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、血清转铁蛋白(Tf)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)浓度的变化。结果与对照组比较,实验组患者体重、MAC、MAMC增加(P<0.01);血清ALB、PA、Tf含量升高(P<0.01);血清BUN、Cr浓度下降(P<0.01)。结论开同合并低蛋白饮食较单纯低蛋白饮食能明显改善CKD患者的营养状况,延缓CKD的进展。