形态动力学联合减数分裂纺锤体观测在卵裂期胚胎筛选中的应用

目的利用胚胎形态动力学联合卵母细胞减数分裂纺锤体(MS)观测,探索预测胚胎发育潜能的卵裂期胚胎筛选方法。方法回顾性分析2020年8月至2022年6月在苏州市立医院生殖与遗传中心行卵胞浆内单精子注射(ICSI),同时行卵母细胞MS观测和胚胎实时观测培养的46个周期患者的临床资料。根据卵母细胞MS形态、胚胎是否存在异常分裂方式,以及胚胎形态学差异对卵母细胞及卵裂期胚胎进行分类研究,分析胚胎形态动力学参数及MS形态预测胚胎发育潜能的价值,建立预测囊胚形成的早期胚胎分层筛选模型,并利用受试者工作特征(ROC)曲线探讨该模型的预测价值。结果MS正常组的囊胚形成率显著高于MS异常组(63.6%vs.46.9%,P<0.05);直接分裂(DC)1组的囊胚形成率显著低于DC2组和无DC组(5.0%vs.46.7%、63.9%,P<0.05);D3形态学优质胚胎的囊胚形成率显著高于D3形态学非优质胚胎(79.4%vs.24.6%,P<0.05)。采用多元Logistic回归分析发现,在D3形态学优质胚胎中,3细胞到5细胞的发育时间(cc3)、5细胞到8细胞的发育时间(s3)和MS形态对囊胚形成有预测价值(P<0.05);在D3形态学非优质胚胎中,卵裂球数目对囊胚形成有预测价值(P<0.05)。以此建立了D3胚胎分层筛选模型,共11级(A~K级),A级最优,K级最劣。该筛选模型对囊胚形成的ROC曲线显示,曲线下面积为0.857[95%CI(0.816,0.899),P=0.000]。结论采用胚胎形态动力学参数联合MS形态分析建立的D3胚胎分层筛选模型,对胚胎发育潜能具有较好的预测能力。

第3天新鲜胚胎移植周期中卵裂球数目与助孕方式对妊娠结局的影响

目的探讨第3天新鲜胚胎移植周期中卵裂球数目及助孕方式对妊娠结局的影响。方法回顾性分析2012年1月至2020年8月海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院生殖医学中心收治的首次接受胚胎移植、采用常规体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕、胚胎质量为Ⅰ级或Ⅱ级的患者资料。共1788个第3天新鲜移植周期纳入研究,先分为单胚胎移植和双胚胎移植两大类,每类再根据卵裂球数目分为≤6个细胞组、7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组。在新鲜单胚胎移植周期中,≤6个细胞组36个(IVF 21个、ICSI 15个),7个细胞组53个(IVF 25个、ICSI 28个),8个细胞组204个(IVF 146个、ICSI 58个),9个细胞组36个(IVF 22个、ICSI 14个),≥10个细胞组50个(IVF 34个、ICSI 16个);在新鲜双胚胎移植周期中,≤6个细胞组59个(IVF 27个、ICSI 32个),7个细胞组72个(IVF 48个、ICSI 24个),8个细胞组1178个(IVF 820个、ICSI 358个),9个细胞组44个(IVF 24个、ICSI 20个),≥10个细胞组56个(IVF 24个、ICSI 32个)。比较各组的胚胎种植率、临床妊娠率、流产率和活产率。结果在新鲜单胚胎移植周期中,8个细胞组的胚胎种植率、临床妊娠率高于≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组(均P<0.05),活产率高于≤6个细胞组、7个细胞组(均P<0.05),流产率与≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组比较差异无统计学意义(均P>0.05);8个细胞组中ICSI助孕的胚胎移植后胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于IVF助孕(均P<0.05),而≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组中IVF和ICSI 2种助孕方式的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。在新鲜双胚胎移植周期中,8个细胞组的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组(均P<0.05),流产率与≤6个细胞组、7个细胞组、≥10个细胞组比较差异无统计学意义(均P>0.05),但低于9个细胞组且差异有统计学意义(P<0.05);≤6个细胞组ICSI助孕的胚胎移植后胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于IVF助孕(均P<0.05),而7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组中IVF和ICSI 2种助孕方式的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论在第3天新鲜胚胎移植周期中,可首选8个细胞胚胎,其次是9个细胞胚胎、≥10个细胞胚胎、7个细胞胚胎、≤6个细胞胚胎;8个细胞胚胎在ICSI助孕方式下的胚胎种植率、临床妊娠率和活产率比IVF高,可以优先选择;对于一部分ICSI助孕患者在无其他优质胚胎情况下,移植≤6个细胞的胚胎也可以获得较好的妊娠结局。

反复种植失败患者卵裂胚解冻培养囊胚移植的效果分析

目的将反复种植失败(repeated implantation failure,RIF)患者中剩余卵裂胚解冻并培养囊胚移植作为一种潜在的治疗策略,并分析其妊娠结局。方法本研究纳入295名RIF患者进行冻融胚胎移植,根据囊胚来源分为卵裂胚解冻培养囊胚移植组(n=141)和传统解冻囊胚移植组(n=154)。研究两组患者临床妊娠率、种植率和活产率的区别。结果卵裂胚解冻培养囊胚移植组的临床妊娠率、种植率均明显高于传统解冻囊胚移植组(P<0.05),两组之间的流产率、多胎率和活产率差异无统计学意义(P>0.05)。RIF≤4次和RIF=5次的患者,卵裂胚解冻培养囊胚移植组的种植率高于传统的解冻囊胚移植组(P<0.05),而RIF≤4次,RIF=5次和RIF≥6次的患者,两组临床妊娠率、流产率、多胎率和活产率差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论当RIF患者囊胚为零时,解冻剩余的卵裂胚并培养囊胚进行移植可以提高临床妊娠率和种植率,是一种有效治疗策略。

早期异常卵裂对胚胎发育潜能及妊娠结局的影响

目的通过时差成像(time-lapse imaging,TLI)培养系统动态观察胚胎早期发育过程,研究不同卵裂模式对胚胎发育潜能及妊娠结局的影响。方法回顾性分析作者医院2022-03~11月行TLI技术培养的体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)患者112例。通过TLI系统软件分析正常受精后卵裂的1080枚胚胎早期发育的形态学变化。记录各种卵裂模式、统计其发生率,并将其分为正常卵裂组、直接卵裂(direct cleavage,DC)组、胞质异常波动(abnormal fluctuation,AF)组、逆向卵裂(reverse cleavage,RC)组、无序卵裂(chaotic cleavage,CC)组及混合异常卵裂组。比较正常组与异常卵裂组的各项胚胎发育指标及妊娠结局。结果胚胎卵裂模式构成比为:正常卵裂58.61%(633/1080),DC 15.37%(166/1080),AF 4.72%(51/1080),RC 3.52%(38/1080),CC 3.61%(39/1080),混合异常卵裂14.17%(153/1080)。异常卵裂组D3优质胚胎率与正常卵裂组比较差异无统计学意义(P>0.05)(CC组无优质胚胎形成),但其囊胚形成率均低于正常卵裂组(P<0.05);异常卵裂模式中,AF组囊胚形成率最高(61.54%),DC组与AF组可利用囊胚率(80.33%,75.00%)及优质囊胚率(45.90%,45.83%)均较高,与正常卵裂组比较差异无统计学意义(P>0.05)。移植D3单优质胚胎,异常卵裂组(AF组除外)临床妊娠率均显著低于正常卵裂组(P均<0.05),移植单优质囊胚,DC组、AF组的临床妊娠率与正常卵裂组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用TLI技术观察胚胎早期发育的动态表型,结合其他动力学参数,有助于预测胚胎发育潜能,为挑选最优胚胎移植提供准确参考;早期异常卵裂胚胎可行囊胚培养后利用,提高其临床应用价值.

应用时差成像培养系统观察早期胚胎的卵裂模式对其发育潜能的影响

目的:通过时差成像系统(TLI)观察早期胚胎的卵裂模式,探讨卵裂模式对早期胚胎发育潜能的影响。方法:回顾性分析2019年1月—2021年7月在中山市博爱医院生殖中心行辅助生殖助孕时通过时差成像系统进行囊胚培养的1318个胚胎的发育情况。依据双原核(2PN)受精卵的卵裂模式分为正常卵裂和异常卵裂,其中异常卵裂包括首次卵裂异常和非首次卵裂异常。分析不同卵裂模式组早期胚胎第3天(D3)的优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率及妊娠率、流产率等妊娠结局。结果:正常卵裂组和异常卵裂组的D3优质胚胎率分别为57.36%和39.47%、囊胚形成率分别为66.33%和36.62%、优质囊胚率分别为60.14%和27.61%,正常卵裂组均显著高于异常卵裂组(P<0.01);正常卵裂组与异常卵裂组间临床妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05)。在异常卵裂组中,首次卵裂异常组的D3优质胚胎率和优质囊胚率分别为34.45%和24.64%,均显著低于非首次卵裂异常组的D3优质胚胎率58.02%和优质囊胚率(37.66%),差异均有统计学意义(P<0.05),在2个异常卵裂组间临床妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胚胎的异常卵裂影响早期胚胎的发育潜能,异常卵裂发生的时间越早对胚胎发育影响越大。

冻融卵裂期胚胎与囊胚移植的妊娠结局及第二性别比的比较

目的探讨冻融周期中卵裂期胚胎与囊胚移植对妊娠结局及第二性别比(SSR)的影响。方法选取2019年6月至2021年3月在金华市人民医院生殖医学中心行冻融胚胎移植的977个周期。根据移植胚胎的发育阶段分为第3天卵裂期胚胎组(D3组,699个周期)和第5天囊胚组(D5组,278个周期)。对两组的临床妊娠率、胚胎种植率、流产率和多胎妊娠率等妊娠结局及出生体重、早产率和SSR等新生儿指标进行比较。筛选临床认为与妊娠结局有关及单因素分析P<0.15的变量行多因素logistic回归分析,筛选与冻融周期胚胎移植妊娠结局相关的独立影响因素。结果D5组移植胚胎数少于D3组,生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎种植率、总活产率、单胎活产率和SSR均高于D3组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组多胎妊娠率、异位妊娠率、流产率、早产率、孕周和出生体重等比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。多因素logistic回归分析提示,年龄>30岁(OR=0.747,P<0.05)、移植胚胎数(OR=2.271,P<0.01)和囊胚移植(OR=1.843,P<0.01)是冻融周期临床妊娠的独立影响因素,囊胚移植是出生男婴的独立影响因素(OR=1.436,P<0.05)。结论冻融周期中囊胚移植在降低移植胚胎数的同时,可以提升胚胎种植率和临床妊娠率,因此,建议辅助生殖技术周期中早期胚胎培养至囊胚后再行移植或冷冻,但其可能会提高SSR,对造成SSR偏移的具体因素尚需进一步研究。

新鲜单卵裂胚与单囊胚移植周期妊娠结局及其影响因素分析

目的分析新鲜单卵裂胚与单囊胚移植周期妊娠结局及其影响因素。方法回顾性分析广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心2002年10月至2020年10月行卵裂期与囊胚期单胚胎移植(SET)共5543个周期的患者临床资料。根据胚胎移植时期分为第3天卵裂胚组(D3组,1229例)和第5天囊胚组(D5组,4314例)。比较两组临床资料及妊娠结局,采用二元logistic回归分析SET周期妊娠结局的影响因素。结果SET周期临床妊娠率为48.13%(2668/5543),活产率为39.49%(2189/5543),多胎率为2.89%(77/2668)。二元logistic回归分析结果显示,年龄和胚胎发育时期是SET临床妊娠结局和活产结局的共同影响因素(P<0.05)。分层分析结果显示,年龄≤30岁且优胚数>3枚的D3组和D5组的临床妊娠率(54.55%vs 54.76%)、活产率(49.09%vs 47.21%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论新鲜周期选择单卵裂胚和单囊胚移植均可获得较好的临床妊娠率和活产率。选择合适人群,单卵裂胚移植可获得与单囊胚移植周期相似的临床妊娠率和活产率。

逆卵裂胚胎的染色体整倍性及移植后的妊娠结局

目的使用时差成像培养系统记录胚胎早期逆卵裂现象,联合胚胎植入前遗传学检测技术评估逆卵裂胚胎的染色体整倍性,探讨胚胎发育早期存在逆卵裂现象的囊胚的临床应用价值。方法选择2021年5月至2022年6月在徐州市妇幼保健院就诊的142个因高龄、反复种植失败和反复自然流产行胚胎植入前遗传学检测的周期,正常受精胚胎1087个,其中达到活检标准的囊胚483枚,利用时差成像培养系统记录达到活检标准的来自正常卵裂(n=407)和逆卵裂(n=76)的囊胚,比较逆卵裂囊胚与正常卵裂囊胚的染色体整倍性及移植后的妊娠结局。结果胚胎早期正常卵裂和逆卵裂形成的囊胚染色体整倍体率和临床妊娠率均无统计学差异(P<0.05)。结论胚胎发育早期出现逆卵裂不影响其染色体整倍性,早期胚胎出现逆卵裂时可行囊胚培养后依据胚胎级别列入可利用胚胎,移植到宫腔后可以获得健康的新生儿。

卵裂期胚胎冻存及移植策略对解冻周期临床妊娠率和多胎率的影响

目的探讨在目前冻融胚胎移植(FET)以单囊胚移植为主流的情况下,卵裂期胚胎(简称卵裂胚)的冻存与移植策略对FET周期临床妊娠率及多胎率的影响。方法回顾性分析2015年10月至2022年1月在我院生殖医学中心接受卵裂胚FET治疗的2544个周期的临床资料。按照胚胎培养情况分为两组:D3冷冻备份组(冷冻部分D3卵裂胚,作为囊胚培养的备份胚胎;n=941)和D3全胚冷冻组(D3卵裂胚全部冷冻,无囊胚培养;n=1603)。又根据移植复苏卵裂胚的数量和质量不同分为5组:移植两枚优胚(A组)、移植1枚优胚+1枚非优胚(B组)、移植两枚非优胚(C组)、移植1枚优胚(D组)、移植1枚非优胚(E组);每组再根据患者年龄不同分为≤35岁和>35岁组。比较各组患者的一般资料及临床结局(种植率、临床妊娠率及多胎妊娠率等)。结果(1)D3冷冻备份组和D3全胚冷冻组不同移植策略亚组间获卵数、D3胚冷冻数存在显著性差异(P<0.001)。D3冷冻备份组中A组临床妊娠率最高(54.2%),显著高于C组(P<0.05);D3全胚冷冻组中A组的临床妊娠率最高(41.8%),显著高于C、D、E组(P<0.05);D3冷冻备份组和D3全胚冷冻组中A、B、C组间多胎妊娠率比较无显著性差异(P>0.05),单胚胎移植组(D、E组)的多胎妊娠率均为0%。(2)D3冷冻备份组≤35岁患者中,A组的临床妊娠率(61.5%)显著高于C组和E组(P<0.05);A组的多胎率为35.3%,但与B、C组比较尚无显著性差异(P>0.05)。D3冷冻备份组>35岁患者中,A组的临床妊娠率最高(41.4%),但与其他各组尚无显著性差异(P>0.05);A、B、C组的多胎妊娠率亦无显著性差异(P>0.05)。(3)D3全胚冷冻组≤35岁患者中,A组的临床妊娠率(62.3%)显著高于其他各组(P<0.05);A组的多胎率为36.4%,但与B、C组尚无显著性差异(P>0.05)。D3全胚冷冻组>35岁患者中,A、B组的临床妊娠率(26.2%、27.3%)显著高于C、D、E组(P<0.05),A、B、C组间多胎妊娠率亦无显著性差异(P>0.05)。结论在单囊胚移植为主的FET周期中,影响卵裂胚移植临床妊娠率的主要因素是年龄、移植胚胎数和移植胚胎质量,而影响多胎妊娠率的主要因素是移植胚胎数。对于≤35岁患者,首选单个优胚冷冻和移植,可获得较满意的临床妊娠率,同时避免多胎妊娠;对于>35岁患者,因胚胎种植率降低,临床妊娠率低,尚无明确的临床证据支持首选单胚胎移植。

D3胚胎卵裂球数目与胚胎发育潜能和整倍性的相关性研究

目的通过高通量测序技术(NGS)探讨D3胚胎卵裂球数目与胚胎发育潜能和整倍性之间的关系。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月于本院生殖中心行胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)助孕的261个治疗周期共920枚活检囊胚的数据资料,根据D3胚胎卵裂球数目不同进行分组(4细胞组、5细胞组、6细胞组、7细胞组、8细胞组、9细胞组、10细胞组及≥11细胞组),评估各组后续获得优质囊胚和整倍体囊胚的机会,并统计分析各组间临床结局的差异。结果(1)与8细胞组相比,5细胞、6细胞、7细胞及10细胞组优质囊胚率显著降低(P=0.00),调整女方年龄因素以后,差异仍有显著性(P=0.00);卵裂球数目合并分组后,≤7细胞组、9~10细胞组的优质囊胚率显著低于8细胞组,调整年龄因素以后,差异仍有显著性(P<0.05);≥11细胞组优质囊胚率与8细胞组间无显著性差异(P=0.51),调整女方年龄后,仍无显著性差异(P=0.45)。(2)与8细胞组相比,其他各组囊胚的整倍体率均无显著性差异(P>0.05);调整年龄后,各组间囊胚整倍体率仍无显著性差异(P>0.05);卵裂球数目合并分组后,各组间随着卵裂球发育速度增快,囊胚整倍体率增加,但差异尚无统计学意义(P>0.05);调整年龄混杂因素后,各组间的囊胚整倍体率仍无显著性差异(P>0.05)。(3)随着卵裂球数目增加,各组临床妊娠率、活产率呈上升趋势;卵裂球数目合并分组后,≥11细胞组的临床妊娠率和活产率最高,≤7细胞组的临床妊娠率和活产率最低,但差异均尚无统计学意义(P>0.05)。结论D3卵裂期胚胎的发育潜能随着卵裂球数目的增加而增加,≥11细胞的D3快速分裂胚胎具有同8细胞胚胎相似的整倍体率和活产率,为临床单胚胎移植胚胎选择策略提供一定的参考。

卵裂期优质胚胎与非优质胚胎来源的囊胚冻融移植后着床率比较

目的比较卵裂期优质胚胎与非优质胚胎来源的囊胚进行冻融囊胚移植(FET)的囊胚着床率,探讨卵裂期非优质胚胎来源的囊胚移植价值。方法选择2018年1月至2022年1月于山东中医药大学第一附属医院生殖与遗传中心行FET的613枚受精后5 d(D_(5))囊胚为研究对象,根据其在受精后3 d(D_(3))是否为优质胚胎将其分为优质组(n=158)和非优质组(n=455)。分别比较2组不同内膜准备方案、囊胚腔不同扩张程度、不同级别内细胞团(ICM)、不同级别滋养外胚层(TE)的囊胚着床率以及不同等级囊胚的着床率。结果优质组囊胚着床率为37.97%(60/158);其中自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率分别为38.30%(18/47)、41.82%(23/55)、36.67%(11/30)、30.77%(8/26);优质组4种内膜准备方案的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.942,P>0.05)。非优质组囊胚着床率为33.41%(152/455);其中自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率分别为31.01%(40/129)、32.43%(36/111)、23.30%(7/30)、37.30%(69/185);非优质组4种内膜准备方案的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=3.008,P>0.05)。优质组与非优质组的囊胚着床率以及自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=1.082、0.829、1.414、1.270、0.419,P>0.05)。优质组中囊胚腔扩张程度2级、3级、4级、5级的囊胚着床率分别为6.25%(1/16)、35.40%(25/71)、46.38%(32/69)、0.00%(0/2);囊胚腔扩张程度3、4级的囊胚着床率高于2级(χ^(2)=5.227、8.805,P<0.05);囊胚腔扩张程度3级与4级囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.807,P>0.05)。非优质组中囊胚腔扩张程度2级、3级、4级、5级的囊胚着床率分别为40.43%(19/47)、31.07%(64/206)、34.03%(65/191)、36.36%(4/11);非优质组中不同囊胚腔扩张程度的胚囊着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.624,P>0.05)。非优质组中囊胚腔扩张2级的囊胚着床率显著高于优质组(χ^(2)=6.434,P<0.05);优质组与非优质组中囊胚腔扩张3、4、5级的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.416、3.303、1.051,P>0.05)。优质组中ICM A级、B级、C级的囊胚着床率分别为16.67%(1/6)、40.58%(56/138)、21.43%(3/14);优质组中不同ICM等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=3.181,P>0.05)。非优质组中ICM A级、B级、C级的囊胚着床率分别为28.57%(2/7)、34.07%(138/405)、27.90%(12/43);非优质组中不同ICM等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.739,P>0.05)。优质组与非优质组中ICM A、B、C级的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.258、1.897、0.229,P>0.05)。优质组中TE A级、B级、C级的囊胚着床率分别为37.50%(6/16)、36.28%(41/113)、44.83%(13/29);优质组中不同TE等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.713,P>0.05)。非优质组中TE A级、B级、C级的囊胚着床率分别为73.33%(11/15)、36.16%(111/307)、22.56%(30/133);非优质组中TE A级的囊胚着床率显著高于B级和C级(χ^(2)=8.399、17.353,P<0.05),TE B级的囊胚着床率显著高于C级(χ^(2)=7.882,P<0.05)。非优质组中TE A级的囊胚着床率显著高于优质组(χ^(2)=4.014,P<0.05),非优质组中TE C级的囊胚着床率显著低于优质组(χ^(2)=6.057,P<0.05),2组间TE B级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.001,P>0.05)。优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率分别为18.42%(14/76)、48.28%(14/29)、60.38%(32/53),优质组中囊胚等级3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率高于囊胚等级≤3BB(χ^(2)=9.567、23.957,P<0.05),≥4BB与3BB~4BB的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.115,P>0.05)。非优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率分别为23.04%(53/230)、29.90%(29/97)、54.69%(70/128);非优质组中囊胚等级≥4BB的囊胚着床率显著高于囊胚等级3BB~4BB、≤3BB(χ^(2)=13.764、33.149,P<0.05),囊胚等级3BB~4BB与≤3BB的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.706,P>0.05)。优质组与非优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.714、3.355、0.493,P>0.05)。结论卵裂期非优质胚胎若形成囊胚,应优先选择≥4BB等级的囊胚行FET,以提高囊胚着床率。

人类卵裂早期胚胎多核现象研究进展

移植日胚胎的选择在辅助生殖技术(ART)治疗过程中至关重要,如何挑选高质量胚胎进行移植与ART治疗结局息息相关。目前辅助生殖实验室常用胚胎形态学特征来评估胚胎的发育潜能,但其中暂未纳入早期胚胎的卵裂球多核现象。近年来,随着ART及医学遗传学诊断方法的飞速发展,生殖医学研究者逐渐认识到胚胎早期发育过程中的卵裂球多核现象可能与胚胎后续发育潜能之间有一定的相关性,并对其进行了深入研究。本文就胚胎早期发育过程中多核卵裂球的形成原因及其与胚胎后续发育潜能和临床结局之间的相关性展开综述。

单卵裂期胚胎移植在体外受精-胚胎移植中的临床结局

目的探讨体外受精第3天(D3)单卵裂期胚胎移植在体外受精-胚胎移植中的临床应用前景。方法回顾性分析我院体外受精D3单卵裂期胚胎移植临床结局,收集172个新鲜胚胎移植周期,观察原发不育组和继发不育组、D3移植胚胎细胞数及评级、主动性单卵裂期胚胎移植及被动性单卵裂期胚胎移植与临床妊娠的关系。结果继发不育组女方年龄高于原发不育组,临床妊娠率(胚胎种植率)分别为33.63%、23.73%。D3移植胚胎的细胞数在8细胞以上者妊娠率与细胞数不足7细胞者相比有统计学差异(P<0.01)。主动性单卵裂期胚胎移植组虽然年龄和不育年限高于被动性单卵裂期胚胎移植组,但移植胚胎质量及妊娠率明显高于后者(P<0.01)。被动性单卵裂期胚胎移植组中各年龄段患者的移植胚胎质量没有显著性差异,但年龄低于35岁者有较好的妊娠结局。结论体外受精D3单卵裂期胚胎移植能获得良好的妊娠结果,临床妊娠结局主要与移植胚胎所含细胞数及评分密切相关。其次,年龄不足35岁,不育年限短的不育患者有更好的妊娠结局。

冷冻复苏胚胎卵裂球损伤因素分析

目的探讨冷冻复苏胚胎移植(FET)周期中影响胚胎卵裂球完整性的相关因素。方法回顾性分析98例移植两个胚胎的FET周期临床资料,移植的两个胚胎其中一个复苏后所有卵裂球完整,另一个胚胎部分卵裂球完整或全部卵裂球死亡。采用多因素1∶1配对资料条件Logistic回归分析胚胎胞质颗粒化、胞质空泡、胚胎碎片、卵裂球数目、卵裂球均一度对冷冻复苏胚胎卵裂球完整性的影响。结果胞质空泡(OR=13.413)、胚胎碎片(OR=1.101)增加了冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的危险性,而卵裂球数目增加(OR=0.569)降低了冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的可能(P<0.05)。结论胞质空泡、胚胎碎片及卵裂球数目是影响冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的重要因素。

可口革囊星虫受精过程及早期卵裂的细胞学变化

为探究可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)受精过程中精子入卵、极体排放、雌雄原核的形成与结合以及早期卵裂的特点,为胚胎发育机制研究奠定基础及指导人工育苗,显微观察了可口革囊星虫卵母细胞的形态;用荧光染色剂HOECHST33258对已固定的成熟卵及受精卵进行染色的方法,在荧光显微镜下观察了可口革囊星虫受精过程及第一与第二次卵裂的细胞学变化。成熟卵呈椭圆形,卵膜较厚,核区偏位,染色体排列整齐。在水温30℃-31℃、盐度23条件下,授精后5min-10min,精子完成入卵;授精后10min-20min,完成第一次减数分裂、释放第一极体;授精后20min-30min,完成第二次减数分裂、放出第二极体,部分受精卵的第一极体分裂为二;授精后30min-40min,雌、雄原核形成,并相互靠近向卵中央迁移;授精后40min-50min,雌、雄原核在卵中央结合成合子核;授精后50min-70min及70min-90min分别完成第一及第二次卵裂。可口革囊星虫的受精过程及早期卵裂的细胞学特点为:1)成熟卵是处在第一次减数分裂中期的初级卵母细胞,具有受精能力;2)精子入卵位点是随机的,存在多精入卵现象;3)雌、雄原核以融合方式结合成合子核;4)第一及第二次卵裂均为经裂、不等裂。

IGF-I、TGF-α、bFGF对猪卵母细胞体外成熟和卵裂的影响

研究了IGF-I、bFGF、TGF-α3种细胞因子单独或者联合作用对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后卵裂的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,3种细胞因子对卵母细胞的成熟和激活后卵裂呈现双重效应(1)20ng·ml-1的IGF-I的成熟率和卵裂率显著的高于对照组和10、30、40、50、100ng·ml-1组[(85.3±2.11)%,(85.4±2.81)%;(71.1±1.91)%,(62.5±0.98)%;(77.5±2.5)%,(59.1±3.93)%;(61.9±1.72)%,(54.3±3.48)%;(58.6±4.26)%,(53.1±1.23)%;(44.4±5.10)%,(49.8±3.55)%;(33.9±3.48)%,(46.1±3.59)%,P<0.05),当IGF-I的浓度达到100ng·ml-1时,成熟率(33.9±3.48)%和卵裂率(46.1±3.59)%降低,与其它各组相比差异显著(P<0.05)。(2)20ng·ml-1的bFGF的成熟率(85.0±1.70)%和卵裂率(85.0±2.82)%最高,和其它各组相比,差异显著(P<0.05)。(3)15ng·ml-1的TGF-α的成熟率(86.9±0.46)%和卵裂率(86.3±2.01)%最高,和其它各组相比,差异显著(P<0.05)。(4)15ng·ml-1TGF-α和20ng·ml-1bFGF联用组,卵母细胞成熟率和分裂率显著高于20ng·ml-1bFGF和20ng·ml-1IGF-I联合组;15ng·ml-1TGF-α和20ng·ml-1IGF-I联合组;与20ng·ml-1bFGF、20ng·ml-1IGF-I和15ng·ml-1TGF-α三者联用组。[(89.2±1.44)%和(88.8±0.17)%.(75.6±0.98)%和(78.3±1.65)%;(77.2±2.54)%和(80.2±2.26)%;(76.4±1.28)%和(77.4±3.73)%,P<0.05]。

卵裂球的完整性和生长与否对冻融胚胎移植妊娠结局的影响

目的:探讨冻融胚胎移植(FET)周期卵裂球的完整性和生长与否对妊娠结局的影响。方法:375例FET周期,其中解冻当天移植周期242例,提前解冻周期133例,根据复苏后移植卵裂球的完整性分为3组:均完整(A组,n=235)、均有破损(B组,n=21)、完整与破损混合(C组,n=119);提前解冻者根据卵裂球的生长与否分为均有生长74例(Ⅰ组)、部分有生长45例(Ⅱ组)和均无生长14例(Ⅲ组)3组。结果:375例FET周期共解冻胚胎1284个,复苏率为61.2%,每移植周期临床妊娠率30.1%,种植率18.3%;A组的继续妊娠率和种植率分别为27.7%和20.5%,明显高于B组的9.5%和8.3%(P<0.05),C组为22.7%和15.1%,低于A组,但差异无统计学意义(P>0.05)。随着移植胚胎中含完整存活胚胎数的增加(0个、1个、2个、3个),继续妊娠率呈增加趋势(9.5%、17.6%、22.3%和38.2%),移植胚胎中含3个完整胚胎的继续妊娠率明显高于含0、1个完整胚胎者(P<0.05);提前解冻的Ⅰ组继续妊娠率(37.8%)和种植率(26.1%)最高,Ⅲ组最低(7.1%和8.3%),Ⅱ组为24.4%和14.1%,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:卵裂球的完整性是影响冻融胚胎种植率的重要因素,移植前提早解冻观察复苏后胚胎有无进一步生长,有助于评价冻融胚胎的发育潜能。

EGF和IGF-I对绵羊卵母细胞体外成熟和卵裂的影响

本文研究了EGFI、GF-I以及EGF和IGF-I联合对绵羊卵母细胞体外成熟和卵裂的影响,以确立绵羊卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明:50 ng/mL的EGF的成熟率和卵裂率分别为71.2%和45.5%,显著高于对照组和10、20、304、0 ng/mL组(P<0.05),当EGF浓度达到100 ng/mL时,成熟率和卵裂率最高,分别为72.9%和45.7%;40 ng/mL IGF-1的成熟率和卵裂率分别为70.7%和58.5%,显著高于对照组和10、20、60、80、100ng/mL组(P<0.05),当IGF-I的浓度为100 ng/mL时,成熟率和卵裂率最低,分别为38.8%和20.0%,与对照组和其它各试验组差异显著(P<0.05);50 ng/mL EGF和40 ng/mL IGF-I联合使用,成熟率和卵裂率分别为85.6%和61.0%,同对照组和50 ng/mL EGF组4、0 ng/mL IGF-I组之间差异显著(P<0.05)。

卵裂期胚胎中的凋亡征象及其与胚胎形态的关系

目的评估体外授精的人卵裂期胚胎中是否存在凋亡,探讨卵裂期胚胎的凋亡征象与胚胎形态之间的关系。方法结合末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL)原位检测DNA凋亡和测定Caspase 3的表达水平,检测人卵裂期胚胎中的凋亡。并分析卵裂期胚胎中胞质碎片占胚胎总体积的比例和发育速度与TUNEL阳性率和Caspase 3的表达强度之间的关系。结果碎片比>20%组胚胎的凋亡率明显高于碎片比≤20%的胚胎(P<0.01),Caspase 3平均荧光强度在碎片比>50%组明显升高(P<0.05)。发育正常、迟缓和停滞胚胎之间胚胎凋亡率差异无显著性意义,发育停滞组的Caspase 3平均荧光强度高于发育正常和迟缓组(P<0.05)。结论人体外授精的卵裂期胚胎中存在凋亡征象,凋亡主要与胞质碎片有关,胚胎发育停滞可能是胚胎凋亡的早期表现。

人卵裂期胚胎玻璃化冻融体外培养时间对妊娠结局的影响

目的研究人卵裂期胚胎玻璃化冻融体外培养时间对妊娠结局的影响。方法对我中心进行的解冻胚胎数不超过3枚,解冻胚胎全部存活并全部移植的274例患者分为当日移植组(A组)和次日移植组(B组),比较组间临床妊娠率、种植率和流产率。结果胚胎龄为第2天(D2)的共163个周期,其中A组130个周期,临床妊娠率、种植率和流产率分别为:23.08%、11.71%和6.67%,B组33个周期,临床妊娠率、种植率和流产率分别为:27.27%、11.84%和11.11%;胚胎龄为第3天(D3)的共111个周期,其中A组94个周期,临床妊娠率、种植率和流产率分别为:36.17%、19.35%和8.82%,B组17个周期,临床妊娠率、种植率和流产率分别为:35.29%、20.45%和16.67%。D2和D3胚胎当日移植组和次日移植组之间的临床妊娠率、种植率和流产率均无统计学差异。结论延长体外培养时间不显著影响玻璃化冻融卵裂期胚胎的发育潜能,可根据需要灵活安排玻璃化冷冻胚胎的解冻时间。