形态动力学联合减数分裂纺锤体观测在卵裂期胚胎筛选中的应用

目的利用胚胎形态动力学联合卵母细胞减数分裂纺锤体(MS)观测,探索预测胚胎发育潜能的卵裂期胚胎筛选方法。方法回顾性分析2020年8月至2022年6月在苏州市立医院生殖与遗传中心行卵胞浆内单精子注射(ICSI),同时行卵母细胞MS观测和胚胎实时观测培养的46个周期患者的临床资料。根据卵母细胞MS形态、胚胎是否存在异常分裂方式,以及胚胎形态学差异对卵母细胞及卵裂期胚胎进行分类研究,分析胚胎形态动力学参数及MS形态预测胚胎发育潜能的价值,建立预测囊胚形成的早期胚胎分层筛选模型,并利用受试者工作特征(ROC)曲线探讨该模型的预测价值。结果MS正常组的囊胚形成率显著高于MS异常组(63.6%vs.46.9%,P<0.05);直接分裂(DC)1组的囊胚形成率显著低于DC2组和无DC组(5.0%vs.46.7%、63.9%,P<0.05);D3形态学优质胚胎的囊胚形成率显著高于D3形态学非优质胚胎(79.4%vs.24.6%,P<0.05)。采用多元Logistic回归分析发现,在D3形态学优质胚胎中,3细胞到5细胞的发育时间(cc3)、5细胞到8细胞的发育时间(s3)和MS形态对囊胚形成有预测价值(P<0.05);在D3形态学非优质胚胎中,卵裂球数目对囊胚形成有预测价值(P<0.05)。以此建立了D3胚胎分层筛选模型,共11级(A~K级),A级最优,K级最劣。该筛选模型对囊胚形成的ROC曲线显示,曲线下面积为0.857[95%CI(0.816,0.899),P=0.000]。结论采用胚胎形态动力学参数联合MS形态分析建立的D3胚胎分层筛选模型,对胚胎发育潜能具有较好的预测能力。

卵裂期胚胎发育速度对体外受精-胚胎移植临床结局的影响

目的 探讨不同发育速度的卵裂期胚胎对后续囊胚培养及移植后结局的影响。方法 回顾性分析2020年1月至2023年7月于该院生殖中心行体外受精-胚胎移植/卵胞浆内单精子注射助孕的患者资料,根据第3天胚胎卵裂球数目分为6~10个细胞组及11~16个细胞组。其中6~10个细胞组又分为6个细胞组、7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组和10个细胞组;11~16个细胞组又分为11~12个细胞组、13~14个细胞组和15~16个细胞组。比较各组的囊胚培养情况和移植后的临床结局。结果 11~16个细胞组的非二倍卵裂率和卵裂球碎裂率明显高于6~10个细胞组,差异有统计学意义(P<0.05)。6~10个细胞组的囊胚形成率和优质囊胚率均明显低于11~16个细胞组,差异均有统计学意义(P<0.05);2组临床妊娠率、胚胎种植率、流产率、活产率和抱婴回家率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。在6~10个细胞各亚组中,6个细胞组的囊胚形成率明显低于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05);7个细胞组的囊胚形成率明显低于8个细胞组、9个细胞组、10个细胞组,差异有统计学意义(P<0.05);6个细胞组和7个细胞组的优质囊胚率明显低于8个细胞组、9个细胞组、10个细胞组,差异有统计学意义(P<0.05);各组间的临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率、活产率和抱婴回家率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在11~16个细胞各亚组中,3组的囊胚形成率、优质囊胚率、临床妊娠率、胚胎种植率、流产率、活产率和抱婴回家率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 发育速度较快的11~16个细胞胚胎可形成高质量囊胚,移植后可获得较好的临床结局。

第3天新鲜胚胎移植周期中卵裂球数目与助孕方式对妊娠结局的影响

目的探讨第3天新鲜胚胎移植周期中卵裂球数目及助孕方式对妊娠结局的影响。方法回顾性分析2012年1月至2020年8月海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院生殖医学中心收治的首次接受胚胎移植、采用常规体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕、胚胎质量为Ⅰ级或Ⅱ级的患者资料。共1788个第3天新鲜移植周期纳入研究,先分为单胚胎移植和双胚胎移植两大类,每类再根据卵裂球数目分为≤6个细胞组、7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组。在新鲜单胚胎移植周期中,≤6个细胞组36个(IVF 21个、ICSI 15个),7个细胞组53个(IVF 25个、ICSI 28个),8个细胞组204个(IVF 146个、ICSI 58个),9个细胞组36个(IVF 22个、ICSI 14个),≥10个细胞组50个(IVF 34个、ICSI 16个);在新鲜双胚胎移植周期中,≤6个细胞组59个(IVF 27个、ICSI 32个),7个细胞组72个(IVF 48个、ICSI 24个),8个细胞组1178个(IVF 820个、ICSI 358个),9个细胞组44个(IVF 24个、ICSI 20个),≥10个细胞组56个(IVF 24个、ICSI 32个)。比较各组的胚胎种植率、临床妊娠率、流产率和活产率。结果在新鲜单胚胎移植周期中,8个细胞组的胚胎种植率、临床妊娠率高于≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组(均P<0.05),活产率高于≤6个细胞组、7个细胞组(均P<0.05),流产率与≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组比较差异无统计学意义(均P>0.05);8个细胞组中ICSI助孕的胚胎移植后胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于IVF助孕(均P<0.05),而≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组中IVF和ICSI 2种助孕方式的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。在新鲜双胚胎移植周期中,8个细胞组的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组(均P<0.05),流产率与≤6个细胞组、7个细胞组、≥10个细胞组比较差异无统计学意义(均P>0.05),但低于9个细胞组且差异有统计学意义(P<0.05);≤6个细胞组ICSI助孕的胚胎移植后胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于IVF助孕(均P<0.05),而7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组中IVF和ICSI 2种助孕方式的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论在第3天新鲜胚胎移植周期中,可首选8个细胞胚胎,其次是9个细胞胚胎、≥10个细胞胚胎、7个细胞胚胎、≤6个细胞胚胎;8个细胞胚胎在ICSI助孕方式下的胚胎种植率、临床妊娠率和活产率比IVF高,可以优先选择;对于一部分ICSI助孕患者在无其他优质胚胎情况下,移植≤6个细胞的胚胎也可以获得较好的妊娠结局。

不同受精方式对非优质卵裂期胚胎囊胚形成的影响

目的探讨不同受精方式对D3非优质胚胎继续体外培养的囊胚形成情况的影响。方法回顾性分析2015年1月至2023年1月于我院生殖医学中心行常规体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治疗,且在胚胎培养的D3未形成优质胚胎的1686个周期的临床资料。根据最终是否形成囊胚将患者分为囊胚形成组(n=251)和囊胚未形成组(n=1435),又根据是否形成优质囊胚将囊胚形成组分为两个亚组:优质囊胚组(n=41)和非优质囊胚组(n=210),比较各组间患者的一般资料,并采用单因素分析影响囊胚形成率及优质囊胚形成率的相关因素,采用多因素Logistic回归方程分析影响囊胚形成率及优质囊胚形成率的因素。结果囊胚未形成组的女方平均年龄、不孕年限、继发不孕比例、ICSI受精占比和基础卵泡刺激素(bFSH)水平均显著高于囊胚形成组(P<0.05)。在囊胚形成组中,优质囊胚组基础黄体生成素(bLH)显著低于非优质囊胚组(P<0.05)。单因素结果显示,女方年龄<35岁、D3胚胎细胞数为6个、D3细胞数为奇数、D3碎片率≤15%、受精方式采用IVF的胚胎的囊胚形成率更高(P<0.05);D3细胞数≥6个、D3碎片率≤15%、受精方式采用IVF的胚胎的优质囊胚形成率更高(P<0.05)。多因素Logistic回归在校正女方年龄、D3胚胎细胞数、D3胚胎碎片率等混杂因素后,结果显示,受精方式是D3非优质胚胎囊胚形成率和优质囊胚形成率的独立影响因素(P<0.05)。结论与ICSI方式获得的D3非优质胚胎相比,采取IVF方式获得的D3非优质胚胎具有较高的囊胚形成率和优质囊胚形成率。

反复种植失败患者卵裂胚解冻培养囊胚移植的效果分析

目的将反复种植失败(repeated implantation failure,RIF)患者中剩余卵裂胚解冻并培养囊胚移植作为一种潜在的治疗策略,并分析其妊娠结局。方法本研究纳入295名RIF患者进行冻融胚胎移植,根据囊胚来源分为卵裂胚解冻培养囊胚移植组(n=141)和传统解冻囊胚移植组(n=154)。研究两组患者临床妊娠率、种植率和活产率的区别。结果卵裂胚解冻培养囊胚移植组的临床妊娠率、种植率均明显高于传统解冻囊胚移植组(P<0.05),两组之间的流产率、多胎率和活产率差异无统计学意义(P>0.05)。RIF≤4次和RIF=5次的患者,卵裂胚解冻培养囊胚移植组的种植率高于传统的解冻囊胚移植组(P<0.05),而RIF≤4次,RIF=5次和RIF≥6次的患者,两组临床妊娠率、流产率、多胎率和活产率差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论当RIF患者囊胚为零时,解冻剩余的卵裂胚并培养囊胚进行移植可以提高临床妊娠率和种植率,是一种有效治疗策略。

SGK1对Cyclin B/Cdc2通路介导小鼠G_(1)期受精卵卵裂的调控作用及其机制

目的:探讨血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)在小鼠细胞周期G_(1)期受精卵早期发育过程中的调控作用,并阐明相关机制。方法:取若干只4~6周龄且体质量约为20 g的雌鼠和若干只8周龄以上且体质量约为30 g的雄鼠,雌鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG),每只10 IU,48 h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(HCG),每只10 IU,并将注射HCG的雌鼠与雄鼠1∶1合笼过夜。取交配成功的雌鼠受精卵,注射HCG后分别于12~21 h、21~26 h、26~28 h和28~30 h收集细胞周期G_(1)期、S期、G2期及M期的受精卵,并于光学显微镜下观察不同细胞周期的细胞形态表现。收集小鼠超排卵后G_(1)期受精卵,体外转录生成mRNA后,分为未注射组、Tris-EDTA缓冲液注射组(TE注射组)和SGK1-mRNA注射组。采用SGK1抗体与KSOM培养液配置1∶25、1∶50、1∶100、1∶200和0共5种不同浓度SGK1抗体组的培养液,培养小鼠G_(1)期受精卵。Western blotting法检测各组小鼠受精卵中SGK1蛋白表达水平和各组小鼠及不同浓度SGK1抗体组HCG注射不同时间受精卵中磷酸化细胞分裂周期因子2(Cdc2)酪氨酸15位点(Cdc2-pTyr15)去磷酸化情况,相差显微镜观察各组小鼠和不同浓度SGK1抗体组受精卵发育情况,Western blotting法检测HCG注射不同时间小鼠受精卵中磷酸化SGK1-苏氨酸256位点(SGK1-pThr256)和Cdc2-pTyr15蛋白表达水平。结果:与未注射组和TE注射组比较,SGK1-mRNA注射组SGK1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。HCG注射后27~28 h,SGK1-mRNA注射组小鼠受精卵中Cdc2-pTyr15磷酸化信号逐渐消失,至HCG注射29 h,Cdc2-pTyr15磷酸化信号完全消失;HCG注射后28~29 h,未注射组和TE注射组小鼠受精卵中Cdc2-pTyr15磷酸化信号逐渐消失,至HCG注射后30 h,Cdc2-pTyr15磷酸化信号完全消失;随着SGK1抗体浓度升高,不同浓度SGK1抗体组受精卵中Cdc2-pTyr15磷酸化信号减弱和磷酸化信号消失的时间逐渐延长。HCG注射后27 h,SGK1-mRNA注射组小鼠受精卵开始卵裂;HCG注射后31 h,SGK1-mRNA注射组受精卵几乎全部分裂为G2期细胞受精卵;HCG注射后33 h,0和1∶200 SGK1抗体组受精卵全部发生卵裂;随着SGK1抗体浓度升高,1∶25、1∶50和1∶100 SGK1抗体组受精卵卵裂逐渐减少,在1∶25 SGK1抗体组受精卵卵裂减少最明显。HCG注射后31 h,与未注射组和TE注射组比较,SGK1-mRNA注射组小鼠受精卵死亡率明显降低(P<0.05),卵裂率明显升高(P<0.05)。注射HCG后31和33 h,随着SGK1抗体浓度升高,与1∶200 SGK1抗体组比较,1∶100、1∶50和1∶25SGK1抗体组受精卵死亡率逐渐升高(P<0.05),卵裂时间延长,受精卵卵裂率降低(P<0.05),并呈剂量依赖性,其中1∶25 SGK1抗体组受精卵卵裂率最低。HCG注射后27 h,小鼠受精卵中SGK1-pThr256蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05或P<0.01),并呈时间依赖性;HCG注射后28~29 h,小鼠受精卵中Cdc2-pTyr15蛋白表达水平逐渐降低(P<0.01),并呈时间依赖性,并于HCG注射后30 h完全消失。结论:过表达或抑制SGK1均会影响小鼠G_(1)期受精卵进入M期的时间,SGK1蛋白可能是小鼠G_(1)期受精卵早期发育的调控因子之一,其可能通过Cdc2调节G_(1)期受精卵发育。

拮抗剂方案新鲜移植两枚卵裂期胚胎与新鲜移植单囊胚的妊娠结局比较

目的探讨拮抗剂方案新鲜移植两枚卵裂期胚胎与新鲜移植单囊胚的临床结局。方法回顾性选取2022年1月至12月在赣州市妇幼保健院生殖与遗传科行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治疗的97例助孕患者作为研究对象,根据移植胚胎类别分为A组(移植两枚卵裂期胚胎,55例)和B组(移植单囊胚,42例):比较两组患者的体重指数(BMI),年龄,人绒毛膜促性腺激素(HCG)日雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)水平及促性腺激素(GN)用量,获卵数、2原核(PN)受精率、优胚率、种植率、妊娠率、流产率,囊胚形成率,卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率,多胎率及活产率。结果A组基础LH低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组Gn用量、Gn天数,HCG日LH、P、内膜厚度及可用胚胎数比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组Gn启动剂量高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);A组HCG日E2、HCG日≥14 mm卵泡数、获卵数、正常受精数、可用胚胎数及囊胚形成率均低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组HCG阳性率、临床妊娠率、流产率及活产率比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组多胎率高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组种植率低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论拮抗剂新鲜移植两枚卵裂期胚胎可达到与单囊胚移植类似的临床妊娠率,但明显增加了多胎率。对于2PN达5个以上患者可建议行囊胚培养,单囊胚移植,降低多胎率的发生率。

解冻卵裂期胚胎养成囊胚行植入前遗传学检测二次冷冻复苏移植后临床结局

目的 回顾性评估解冻卵裂期胚胎养成囊胚后进行活检,再次冷冻移植后临床及新生儿结局,以期为临床医生和患者提供参考数据。方法 收集2017年1月至2022年10月于西北妇女儿童医院生殖中心接受解冻卵裂期胚胎养成囊胚后进行活检,再次解冻移植治疗的患者的冻融胚胎移植周期为实验组(n=13),并将女方新鲜周期取卵时年龄、移植囊胚级别、胚胎植入前遗传学诊断的指证以及分类作为匹配因素,按照1∶3配对,选取同周期新鲜囊胚活检、解冻后移植的患者作为对照组(n=39)。比较两组患者的临床基线资料、妊娠结局以及新生儿结局。结果 两组患者临床基本资料、妊娠率以及活产率均无统计学差异(P>0.05),两组产科及新生儿结局亦无显著性差异(P>0.05)。两组患者均未报道重大产科并发症和新生儿畸形。结论 将冻存的卵裂期胚胎解冻后培养至囊胚期进行活检,行胚胎植入前遗传学检测,冷冻后再次复苏行冻融移植周期的妊娠率、活产率及新生儿结局与新鲜囊胚活检后进行冻融移植无明显差异,可以为患者提供更多的选择。

卵裂期无优质胚胎周期影响因素的分析和进一步治疗策略的探讨

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕过程中,卵裂期无优质胚胎周期的影响因素和行囊胚培养未形成可用囊胚的影响因素,探讨该部分患者适宜的进一步治疗策略。方法回顾性分析广西壮族自治区生殖医院2017年7月—2020年10月行IVF-ET且卵裂期无优质胚胎病例1623例,依据病例在卵裂期是否有可用胚胎分为无可用胚胎组(119例)和有可用胚胎组(1504例),将有可用胚胎组中行囊胚培养的1309例分为无可用囊胚形成组(558例)和有可用囊胚形成组(751例),进行基线资料分析,比较无可用胚胎组和有可用胚胎组、无可用囊胚形成组和有可用囊胚形成组患者的年龄、体重指数(BMI)、基础卵泡刺激素(bFSH)、基础黄体生成素(bLH)、基础雌二醇(bE_(2)),不孕年限,促性腺激素(Gn)用量,Gn使用天数,hCG日LH,hCG日E_(2),hCG日孕酮(P)、获卵数是否有差异,进一步分析影响患者卵裂期有无可用胚胎和行囊胚培养未形成可用囊胚的关键因素,分析进一步治疗方式对患者临床结局的影响。结果对于卵裂期无优质胚胎的患者,无可用胚胎组的bFSH、bFSH/bLH显著高于有可用胚胎组(P<0.05);有可用胚胎组的bLH、hCG日E_(2)、获卵数显著高于无可用胚胎组(P<0.05);bFSH/bLH以及获卵数是有可用胚胎形成的关键因素。无可用囊胚形成组的年龄、bFSH、bFSH/bLH、不孕年限、Gn用量,hCG日LH显著高于有可用囊胚形成组(P<0.05),有可用囊胚形成组hCG日E_(2)、hCG日P和获卵数显著高于无可用囊胚形成组(P<0.05);年龄、不孕年限以及获卵数是行囊胚培养有可用囊胚形成的关键因素。冻融囊胚移植临床妊娠率(47.5%)显著高于卵裂期(14.8%,P<0.05)以及新鲜囊胚移植的临床妊娠率(31.4%,P<0.05)。结论卵巢功能储备低下是助孕患者卵裂期无优质胚胎的主要原因,若该部分患者年龄较轻、获卵数较多,且不孕年限较短,延长培养时间若形成可用囊胚进行冻融囊胚移植,能够改善这部分患者的妊娠结局。

冻融卵裂期胚胎与囊胚移植的妊娠结局及第二性别比的比较

目的探讨冻融周期中卵裂期胚胎与囊胚移植对妊娠结局及第二性别比(SSR)的影响。方法选取2019年6月至2021年3月在金华市人民医院生殖医学中心行冻融胚胎移植的977个周期。根据移植胚胎的发育阶段分为第3天卵裂期胚胎组(D3组,699个周期)和第5天囊胚组(D5组,278个周期)。对两组的临床妊娠率、胚胎种植率、流产率和多胎妊娠率等妊娠结局及出生体重、早产率和SSR等新生儿指标进行比较。筛选临床认为与妊娠结局有关及单因素分析P<0.15的变量行多因素logistic回归分析,筛选与冻融周期胚胎移植妊娠结局相关的独立影响因素。结果D5组移植胚胎数少于D3组,生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎种植率、总活产率、单胎活产率和SSR均高于D3组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组多胎妊娠率、异位妊娠率、流产率、早产率、孕周和出生体重等比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。多因素logistic回归分析提示,年龄>30岁(OR=0.747,P<0.05)、移植胚胎数(OR=2.271,P<0.01)和囊胚移植(OR=1.843,P<0.01)是冻融周期临床妊娠的独立影响因素,囊胚移植是出生男婴的独立影响因素(OR=1.436,P<0.05)。结论冻融周期中囊胚移植在降低移植胚胎数的同时,可以提升胚胎种植率和临床妊娠率,因此,建议辅助生殖技术周期中早期胚胎培养至囊胚后再行移植或冷冻,但其可能会提高SSR,对造成SSR偏移的具体因素尚需进一步研究。

应用时差成像培养系统观察早期胚胎的卵裂模式对其发育潜能的影响

目的:通过时差成像系统(TLI)观察早期胚胎的卵裂模式,探讨卵裂模式对早期胚胎发育潜能的影响。方法:回顾性分析2019年1月—2021年7月在中山市博爱医院生殖中心行辅助生殖助孕时通过时差成像系统进行囊胚培养的1318个胚胎的发育情况。依据双原核(2PN)受精卵的卵裂模式分为正常卵裂和异常卵裂,其中异常卵裂包括首次卵裂异常和非首次卵裂异常。分析不同卵裂模式组早期胚胎第3天(D3)的优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率及妊娠率、流产率等妊娠结局。结果:正常卵裂组和异常卵裂组的D3优质胚胎率分别为57.36%和39.47%、囊胚形成率分别为66.33%和36.62%、优质囊胚率分别为60.14%和27.61%,正常卵裂组均显著高于异常卵裂组(P<0.01);正常卵裂组与异常卵裂组间临床妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05)。在异常卵裂组中,首次卵裂异常组的D3优质胚胎率和优质囊胚率分别为34.45%和24.64%,均显著低于非首次卵裂异常组的D3优质胚胎率58.02%和优质囊胚率(37.66%),差异均有统计学意义(P<0.05),在2个异常卵裂组间临床妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胚胎的异常卵裂影响早期胚胎的发育潜能,异常卵裂发生的时间越早对胚胎发育影响越大。

早期异常卵裂对胚胎发育潜能及妊娠结局的影响

目的通过时差成像(time-lapse imaging,TLI)培养系统动态观察胚胎早期发育过程,研究不同卵裂模式对胚胎发育潜能及妊娠结局的影响。方法回顾性分析作者医院2022-03~11月行TLI技术培养的体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)患者112例。通过TLI系统软件分析正常受精后卵裂的1080枚胚胎早期发育的形态学变化。记录各种卵裂模式、统计其发生率,并将其分为正常卵裂组、直接卵裂(direct cleavage,DC)组、胞质异常波动(abnormal fluctuation,AF)组、逆向卵裂(reverse cleavage,RC)组、无序卵裂(chaotic cleavage,CC)组及混合异常卵裂组。比较正常组与异常卵裂组的各项胚胎发育指标及妊娠结局。结果胚胎卵裂模式构成比为:正常卵裂58.61%(633/1080),DC 15.37%(166/1080),AF 4.72%(51/1080),RC 3.52%(38/1080),CC 3.61%(39/1080),混合异常卵裂14.17%(153/1080)。异常卵裂组D3优质胚胎率与正常卵裂组比较差异无统计学意义(P>0.05)(CC组无优质胚胎形成),但其囊胚形成率均低于正常卵裂组(P<0.05);异常卵裂模式中,AF组囊胚形成率最高(61.54%),DC组与AF组可利用囊胚率(80.33%,75.00%)及优质囊胚率(45.90%,45.83%)均较高,与正常卵裂组比较差异无统计学意义(P>0.05)。移植D3单优质胚胎,异常卵裂组(AF组除外)临床妊娠率均显著低于正常卵裂组(P均<0.05),移植单优质囊胚,DC组、AF组的临床妊娠率与正常卵裂组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用TLI技术观察胚胎早期发育的动态表型,结合其他动力学参数,有助于预测胚胎发育潜能,为挑选最优胚胎移植提供准确参考;早期异常卵裂胚胎可行囊胚培养后利用,提高其临床应用价值.

新鲜单卵裂胚与单囊胚移植周期妊娠结局及其影响因素分析

目的分析新鲜单卵裂胚与单囊胚移植周期妊娠结局及其影响因素。方法回顾性分析广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心2002年10月至2020年10月行卵裂期与囊胚期单胚胎移植(SET)共5543个周期的患者临床资料。根据胚胎移植时期分为第3天卵裂胚组(D3组,1229例)和第5天囊胚组(D5组,4314例)。比较两组临床资料及妊娠结局,采用二元logistic回归分析SET周期妊娠结局的影响因素。结果SET周期临床妊娠率为48.13%(2668/5543),活产率为39.49%(2189/5543),多胎率为2.89%(77/2668)。二元logistic回归分析结果显示,年龄和胚胎发育时期是SET临床妊娠结局和活产结局的共同影响因素(P<0.05)。分层分析结果显示,年龄≤30岁且优胚数>3枚的D3组和D5组的临床妊娠率(54.55%vs 54.76%)、活产率(49.09%vs 47.21%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论新鲜周期选择单卵裂胚和单囊胚移植均可获得较好的临床妊娠率和活产率。选择合适人群,单卵裂胚移植可获得与单囊胚移植周期相似的临床妊娠率和活产率。

逆卵裂胚胎的染色体整倍性及移植后的妊娠结局

目的使用时差成像培养系统记录胚胎早期逆卵裂现象,联合胚胎植入前遗传学检测技术评估逆卵裂胚胎的染色体整倍性,探讨胚胎发育早期存在逆卵裂现象的囊胚的临床应用价值。方法选择2021年5月至2022年6月在徐州市妇幼保健院就诊的142个因高龄、反复种植失败和反复自然流产行胚胎植入前遗传学检测的周期,正常受精胚胎1087个,其中达到活检标准的囊胚483枚,利用时差成像培养系统记录达到活检标准的来自正常卵裂(n=407)和逆卵裂(n=76)的囊胚,比较逆卵裂囊胚与正常卵裂囊胚的染色体整倍性及移植后的妊娠结局。结果胚胎早期正常卵裂和逆卵裂形成的囊胚染色体整倍体率和临床妊娠率均无统计学差异(P<0.05)。结论胚胎发育早期出现逆卵裂不影响其染色体整倍性,早期胚胎出现逆卵裂时可行囊胚培养后依据胚胎级别列入可利用胚胎,移植到宫腔后可以获得健康的新生儿。

卵裂期胚胎冻存及移植策略对解冻周期临床妊娠率和多胎率的影响

目的探讨在目前冻融胚胎移植(FET)以单囊胚移植为主流的情况下,卵裂期胚胎(简称卵裂胚)的冻存与移植策略对FET周期临床妊娠率及多胎率的影响。方法回顾性分析2015年10月至2022年1月在我院生殖医学中心接受卵裂胚FET治疗的2544个周期的临床资料。按照胚胎培养情况分为两组:D3冷冻备份组(冷冻部分D3卵裂胚,作为囊胚培养的备份胚胎;n=941)和D3全胚冷冻组(D3卵裂胚全部冷冻,无囊胚培养;n=1603)。又根据移植复苏卵裂胚的数量和质量不同分为5组:移植两枚优胚(A组)、移植1枚优胚+1枚非优胚(B组)、移植两枚非优胚(C组)、移植1枚优胚(D组)、移植1枚非优胚(E组);每组再根据患者年龄不同分为≤35岁和>35岁组。比较各组患者的一般资料及临床结局(种植率、临床妊娠率及多胎妊娠率等)。结果(1)D3冷冻备份组和D3全胚冷冻组不同移植策略亚组间获卵数、D3胚冷冻数存在显著性差异(P<0.001)。D3冷冻备份组中A组临床妊娠率最高(54.2%),显著高于C组(P<0.05);D3全胚冷冻组中A组的临床妊娠率最高(41.8%),显著高于C、D、E组(P<0.05);D3冷冻备份组和D3全胚冷冻组中A、B、C组间多胎妊娠率比较无显著性差异(P>0.05),单胚胎移植组(D、E组)的多胎妊娠率均为0%。(2)D3冷冻备份组≤35岁患者中,A组的临床妊娠率(61.5%)显著高于C组和E组(P<0.05);A组的多胎率为35.3%,但与B、C组比较尚无显著性差异(P>0.05)。D3冷冻备份组>35岁患者中,A组的临床妊娠率最高(41.4%),但与其他各组尚无显著性差异(P>0.05);A、B、C组的多胎妊娠率亦无显著性差异(P>0.05)。(3)D3全胚冷冻组≤35岁患者中,A组的临床妊娠率(62.3%)显著高于其他各组(P<0.05);A组的多胎率为36.4%,但与B、C组尚无显著性差异(P>0.05)。D3全胚冷冻组>35岁患者中,A、B组的临床妊娠率(26.2%、27.3%)显著高于C、D、E组(P<0.05),A、B、C组间多胎妊娠率亦无显著性差异(P>0.05)。结论在单囊胚移植为主的FET周期中,影响卵裂胚移植临床妊娠率的主要因素是年龄、移植胚胎数和移植胚胎质量,而影响多胎妊娠率的主要因素是移植胚胎数。对于≤35岁患者,首选单个优胚冷冻和移植,可获得较满意的临床妊娠率,同时避免多胎妊娠;对于>35岁患者,因胚胎种植率降低,临床妊娠率低,尚无明确的临床证据支持首选单胚胎移植。

D3胚胎卵裂球数目与胚胎发育潜能和整倍性的相关性研究

目的通过高通量测序技术(NGS)探讨D3胚胎卵裂球数目与胚胎发育潜能和整倍性之间的关系。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月于本院生殖中心行胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)助孕的261个治疗周期共920枚活检囊胚的数据资料,根据D3胚胎卵裂球数目不同进行分组(4细胞组、5细胞组、6细胞组、7细胞组、8细胞组、9细胞组、10细胞组及≥11细胞组),评估各组后续获得优质囊胚和整倍体囊胚的机会,并统计分析各组间临床结局的差异。结果(1)与8细胞组相比,5细胞、6细胞、7细胞及10细胞组优质囊胚率显著降低(P=0.00),调整女方年龄因素以后,差异仍有显著性(P=0.00);卵裂球数目合并分组后,≤7细胞组、9~10细胞组的优质囊胚率显著低于8细胞组,调整年龄因素以后,差异仍有显著性(P<0.05);≥11细胞组优质囊胚率与8细胞组间无显著性差异(P=0.51),调整女方年龄后,仍无显著性差异(P=0.45)。(2)与8细胞组相比,其他各组囊胚的整倍体率均无显著性差异(P>0.05);调整年龄后,各组间囊胚整倍体率仍无显著性差异(P>0.05);卵裂球数目合并分组后,各组间随着卵裂球发育速度增快,囊胚整倍体率增加,但差异尚无统计学意义(P>0.05);调整年龄混杂因素后,各组间的囊胚整倍体率仍无显著性差异(P>0.05)。(3)随着卵裂球数目增加,各组临床妊娠率、活产率呈上升趋势;卵裂球数目合并分组后,≥11细胞组的临床妊娠率和活产率最高,≤7细胞组的临床妊娠率和活产率最低,但差异均尚无统计学意义(P>0.05)。结论D3卵裂期胚胎的发育潜能随着卵裂球数目的增加而增加,≥11细胞的D3快速分裂胚胎具有同8细胞胚胎相似的整倍体率和活产率,为临床单胚胎移植胚胎选择策略提供一定的参考。

卵裂期优质胚胎与非优质胚胎来源的囊胚冻融移植后着床率比较

目的比较卵裂期优质胚胎与非优质胚胎来源的囊胚进行冻融囊胚移植(FET)的囊胚着床率,探讨卵裂期非优质胚胎来源的囊胚移植价值。方法选择2018年1月至2022年1月于山东中医药大学第一附属医院生殖与遗传中心行FET的613枚受精后5 d(D_(5))囊胚为研究对象,根据其在受精后3 d(D_(3))是否为优质胚胎将其分为优质组(n=158)和非优质组(n=455)。分别比较2组不同内膜准备方案、囊胚腔不同扩张程度、不同级别内细胞团(ICM)、不同级别滋养外胚层(TE)的囊胚着床率以及不同等级囊胚的着床率。结果优质组囊胚着床率为37.97%(60/158);其中自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率分别为38.30%(18/47)、41.82%(23/55)、36.67%(11/30)、30.77%(8/26);优质组4种内膜准备方案的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.942,P>0.05)。非优质组囊胚着床率为33.41%(152/455);其中自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率分别为31.01%(40/129)、32.43%(36/111)、23.30%(7/30)、37.30%(69/185);非优质组4种内膜准备方案的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=3.008,P>0.05)。优质组与非优质组的囊胚着床率以及自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=1.082、0.829、1.414、1.270、0.419,P>0.05)。优质组中囊胚腔扩张程度2级、3级、4级、5级的囊胚着床率分别为6.25%(1/16)、35.40%(25/71)、46.38%(32/69)、0.00%(0/2);囊胚腔扩张程度3、4级的囊胚着床率高于2级(χ^(2)=5.227、8.805,P<0.05);囊胚腔扩张程度3级与4级囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.807,P>0.05)。非优质组中囊胚腔扩张程度2级、3级、4级、5级的囊胚着床率分别为40.43%(19/47)、31.07%(64/206)、34.03%(65/191)、36.36%(4/11);非优质组中不同囊胚腔扩张程度的胚囊着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.624,P>0.05)。非优质组中囊胚腔扩张2级的囊胚着床率显著高于优质组(χ^(2)=6.434,P<0.05);优质组与非优质组中囊胚腔扩张3、4、5级的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.416、3.303、1.051,P>0.05)。优质组中ICM A级、B级、C级的囊胚着床率分别为16.67%(1/6)、40.58%(56/138)、21.43%(3/14);优质组中不同ICM等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=3.181,P>0.05)。非优质组中ICM A级、B级、C级的囊胚着床率分别为28.57%(2/7)、34.07%(138/405)、27.90%(12/43);非优质组中不同ICM等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.739,P>0.05)。优质组与非优质组中ICM A、B、C级的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.258、1.897、0.229,P>0.05)。优质组中TE A级、B级、C级的囊胚着床率分别为37.50%(6/16)、36.28%(41/113)、44.83%(13/29);优质组中不同TE等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.713,P>0.05)。非优质组中TE A级、B级、C级的囊胚着床率分别为73.33%(11/15)、36.16%(111/307)、22.56%(30/133);非优质组中TE A级的囊胚着床率显著高于B级和C级(χ^(2)=8.399、17.353,P<0.05),TE B级的囊胚着床率显著高于C级(χ^(2)=7.882,P<0.05)。非优质组中TE A级的囊胚着床率显著高于优质组(χ^(2)=4.014,P<0.05),非优质组中TE C级的囊胚着床率显著低于优质组(χ^(2)=6.057,P<0.05),2组间TE B级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.001,P>0.05)。优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率分别为18.42%(14/76)、48.28%(14/29)、60.38%(32/53),优质组中囊胚等级3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率高于囊胚等级≤3BB(χ^(2)=9.567、23.957,P<0.05),≥4BB与3BB~4BB的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.115,P>0.05)。非优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率分别为23.04%(53/230)、29.90%(29/97)、54.69%(70/128);非优质组中囊胚等级≥4BB的囊胚着床率显著高于囊胚等级3BB~4BB、≤3BB(χ^(2)=13.764、33.149,P<0.05),囊胚等级3BB~4BB与≤3BB的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.706,P>0.05)。优质组与非优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.714、3.355、0.493,P>0.05)。结论卵裂期非优质胚胎若形成囊胚,应优先选择≥4BB等级的囊胚行FET,以提高囊胚着床率。

人类卵裂早期胚胎多核现象研究进展

移植日胚胎的选择在辅助生殖技术(ART)治疗过程中至关重要,如何挑选高质量胚胎进行移植与ART治疗结局息息相关。目前辅助生殖实验室常用胚胎形态学特征来评估胚胎的发育潜能,但其中暂未纳入早期胚胎的卵裂球多核现象。近年来,随着ART及医学遗传学诊断方法的飞速发展,生殖医学研究者逐渐认识到胚胎早期发育过程中的卵裂球多核现象可能与胚胎后续发育潜能之间有一定的相关性,并对其进行了深入研究。本文就胚胎早期发育过程中多核卵裂球的形成原因及其与胚胎后续发育潜能和临床结局之间的相关性展开综述。

单卵裂期胚胎移植在体外受精-胚胎移植中的临床结局

目的探讨体外受精第3天(D3)单卵裂期胚胎移植在体外受精-胚胎移植中的临床应用前景。方法回顾性分析我院体外受精D3单卵裂期胚胎移植临床结局,收集172个新鲜胚胎移植周期,观察原发不育组和继发不育组、D3移植胚胎细胞数及评级、主动性单卵裂期胚胎移植及被动性单卵裂期胚胎移植与临床妊娠的关系。结果继发不育组女方年龄高于原发不育组,临床妊娠率(胚胎种植率)分别为33.63%、23.73%。D3移植胚胎的细胞数在8细胞以上者妊娠率与细胞数不足7细胞者相比有统计学差异(P<0.01)。主动性单卵裂期胚胎移植组虽然年龄和不育年限高于被动性单卵裂期胚胎移植组,但移植胚胎质量及妊娠率明显高于后者(P<0.01)。被动性单卵裂期胚胎移植组中各年龄段患者的移植胚胎质量没有显著性差异,但年龄低于35岁者有较好的妊娠结局。结论体外受精D3单卵裂期胚胎移植能获得良好的妊娠结果,临床妊娠结局主要与移植胚胎所含细胞数及评分密切相关。其次,年龄不足35岁,不育年限短的不育患者有更好的妊娠结局。

冷冻复苏胚胎卵裂球损伤因素分析

目的探讨冷冻复苏胚胎移植(FET)周期中影响胚胎卵裂球完整性的相关因素。方法回顾性分析98例移植两个胚胎的FET周期临床资料,移植的两个胚胎其中一个复苏后所有卵裂球完整,另一个胚胎部分卵裂球完整或全部卵裂球死亡。采用多因素1∶1配对资料条件Logistic回归分析胚胎胞质颗粒化、胞质空泡、胚胎碎片、卵裂球数目、卵裂球均一度对冷冻复苏胚胎卵裂球完整性的影响。结果胞质空泡(OR=13.413)、胚胎碎片(OR=1.101)增加了冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的危险性,而卵裂球数目增加(OR=0.569)降低了冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的可能(P<0.05)。结论胞质空泡、胚胎碎片及卵裂球数目是影响冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的重要因素。