抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)卵黄免疫球蛋白(IgY)的制备与性质研究

目的观察鸡卵黄中抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)抗体的含量、纯度、来源及稳定性。方法用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)作为抗原免疫Leghorn鸡;通过改良水稀释法提取卵黄中的IgY;双紫外光波长测定抗体含量,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度;Western blot免疫印迹法测定该抗体来源;ELISA检测IgY对温度、酸碱度的稳定性。结果抗体含量13.3 mg/mL蛋黄液,抗体纯度达96%;免疫印迹证明IgY与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性;IgY具有良好的热稳定性,对酸碱具有一定的耐受力。结论改良水稀释法能得到高产量、高纯度的特异性IgY,而且有良好的生物学活性。

鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)分离纯化的研究

对鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的分离纯化进行了研究。工艺流程为:卵黄→8倍水稀释并搅拌10min→用HCl调pH至5.2后在4℃静置2h去沉淀→在上清夜中加入95%冰乙醇(-20℃)使终浓度为60%(v/v)→4℃搅拌20min后离心(22000r/min,4℃,25min)→收集沉淀并加入0.028mol/LNaCl溶液在4℃下过滤除去脂蛋白沉淀→收集的滤液用SDS-PAGE法进行纯化得纯度为98%的lgY。用大肠杆菌(E.coli)对其活性进行测定,效果良好,此方法能保持免疫球蛋白的活性。

抗加特纳杆菌卵黄免疫球蛋白(IgY)的研究

目的观察鸡卵黄中抗加特纳杆菌抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法用阴道加特纳杆菌作为抗原免疫Leghorn鸡。通过改良水稀释法提取卵黄中的IgY。双紫外光波长测定抗体含量 ,SDS -PAGE电泳检测抗体纯度。Westernblot免疫印迹法测定该抗体来源。ELISA检测IgY对温度、酸碱度的稳定性。结果抗体含量 12 .8mg/mL蛋黄液 ,抗体纯度达 95 %。免疫印迹证明IgY与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。IgY具有良好的热稳定性 ,对酸碱具有一定的耐受力。结论WD水稀释法能得到高产量、高纯度的特异性IgY 。

抗生殖器疱疹病毒卵黄免疫球蛋白(IgY)的研究

检测了鸡卵黄中抗生殖器疱疹病毒(HSV-2)抗体的产量、纯度、来源及稳定性。采用生殖器疱疹病毒(HSV-2)作为抗原免疫广州黄村鸡。通过改良水稀释法提取卵黄中的IgY。双紫外光波长测定抗体含量,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度。Western blot免疫印迹法测定该抗体来源。ELISA检测IgY对温度、酸碱度的稳定性。结果,蛋黄液中抗体质量浓度13.6g.L-1,抗体纯度达96.2%。免疫印迹证明IgY与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。IgY具有良好的热稳定性,对酸碱具有一定的耐受力。WD水稀释法能得到高产量、高纯度的特异性IgY,而且有良好的生物学活性。

卵黄免疫球蛋白IgY治疗过敏性鼻炎80例

目的:观察卵黄免疫球蛋白IgY治疗过敏性鼻炎的疗效。方法:将160例过敏性鼻炎患者随机分为试验组和对照组,试验组每日用喉友喷鼻,对照组用抗组胺药和雷诺考特鼻喷剂治疗。结果:试验组的症状积分下降指数为0.726±0.195,显著高于对照组0.628±0.294,差异有统计学意义(P<0.05)。用喉友对过敏性鼻炎进行治疗后,总有效率达到86.25%。结论:卵黄免疫球蛋白IgY能有效控制过敏性鼻炎症状。

鸡卵黄免疫球蛋白的提取及体外抑菌活性研究

本研究采用水稀释法脱脂、分步盐析法分离纯化对鸡卵黄免疫球蛋白进行了提取,结果表明,当卵黄作7倍无菌水稀释、pH值为5、4℃条件下温浴5 h时,可得到较纯的卵黄水溶性组分(W SF),再经过多步盐析,可获得纯度为68.4%的IgY,其回收率为82%。体外抑菌活性实验表明,提取的IgY对大肠杆菌具有明显的抑制作用,而对金黄色葡萄球菌抑制作用较弱。研究结果为IgY的分离提取及临床应用提供了参考数据。

鸡卵黄抗眼镜王蛇毒抗体IgY的理化特性

目的 研制抗眼镜王蛇毒鸡卵黄抗体并研究该抗体的理化特性。 方法 拟用减毒后的眼镜王蛇毒免疫母鸡后 ,从卵黄中制备抗眼镜王蛇毒抗体 Ig Y。采用间接 ELISA法对此抗体的理化特性进行研究。 结果 ELISA显示免疫后 12天开始出现特异性抗体 ,且抗体滴度逐渐升高 ,约在免疫后 6 0天左右 ,最高可达 1:10 0 0 0 0 ,此最高滴度可维持 30天 ,以后滴度逐渐降低 ,至免疫后 10 0～ 110天 ,滴度仍可维持在最高滴度的一半 ( 1:50 0 0 0 )。此抗体在 10～ 6 5℃温度范围内活性保持稳定 ;在 p H为 4～ 12范围内 ,抗体活性稳定 ;此抗体经胰蛋白酶处理 1h内 ,活性下降不明显 ,但 1h以后活性迅速下降。 结论 从卵黄中制备抗眼镜王蛇毒抗体 Ig Y,是可行的 ,稳定的。

冰乙醇分级离心法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的研究

采用冰乙醇分级离心法提取鸡卵黄免疫球蛋白(Immunoglobulin of egg yolk,IgY)。通过低温乙醇沉淀、DEAE葡萄糖凝胶A-50离子交换层析、Tris-HCl缓冲液洗脱及Sephadex G200凝胶过滤等逐步纯化免疫球蛋白。研究卵黄稀释倍数、pH值、乙醇添加量以及盐浓度对纯化效果的影响。分离纯化后所得的提取物经检测IgY纯度可达98%,且很好地保持了免疫球蛋白的活性。

抗大肠杆菌O157鸡卵黄抗体的初步研究

目的以煮沸15min灭活后的大肠杆菌O157为抗原,分4次免疫产蛋鸡,获取高免卵黄。经水稀释法去脂、超滤、盐析等粗分离,DEAESephadexA-50离子交换层析纯化,得到产物IgY为电泳单点纯,且仍保持效价在1∶104以上。从分离纯化过程中的跟踪检测表明,其卵黄制备的IgY抗体产量多、效价高、特异性强,可进一步用于大肠杆菌感染的检测研究。

黄芩、黄柏提取液与抗-MRSA IgY体外抑菌活性的比较研究

目的:观察中药黄芩、黄柏提取液及其不同配伍液和抗-MRSA IgY对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抑菌活性。方法:采用二次煮沸法提取中药黄芩、黄柏;改良水稀释法提取卵黄中的IgY;采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的琼脂稀释法测定中药黄芩、黄柏提取液及其不同配伍液和抗-MRSA IgY对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体的最小抑菌浓度(MIC)。结果:中药黄芩提取液的MIC50为0.75mg/ml,MIC90为6.2mg/ml;黄柏MIC50 1.35mg/ml,MIC90为10.6mg/ml;黄芩:黄柏(1∶1)MIC50为0.174mg/ml,MIC90为1.4mg/ml;黄芩∶黄柏(1∶2)MIC50为0.34mg/ml,MIC90为2.74mg/ml;黄芩∶黄柏(2∶1)MIC50为0.093mg/ml,MIC90为0.74mg/ml;抗-MRSA IgY的MIC50分别为1∶8192,MIC90为1∶2048。结论:黄芩、黄柏提取液对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均有较好的抑菌作用,其中黄芩比黄柏为好,两者有显著性差异;黄芩、黄柏配伍液中,以2∶1的配伍抑菌效果最好;抗-MRSA IgY对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有较好的抑菌效果。

重组酵母乙肝疫苗免疫蛋鸡后血清抗体与IgY变化规律研究

研究采用重组酵母乙肝疫苗免疫蛋鸡,探索特异性卵黄免疫球蛋白(IgY)的产生和变化规律。产蛋母鸡经免疫后每周收集所产蛋,分别提取IgY,测定血清抗体效价与抗体的产生量,ELISA定期检测卵黄中的抗体效价变化,Western blotting检测总IgY含量。以未免疫鸡IgY作阴性对照,作血清抗体与IgY变化的动态曲线。取三次免疫后的蛋鸡,解剖分离出各级卵泡,观察各级卵泡发育程度。ELISA结果显示:随着卵泡的生长,卵泡细胞分泌的IgY聚集到卵泡卵黄,卵泡卵黄中IgY的含量在逐渐增加。Western blotting显示:随免疫次数的增加,IgY含量增加。首免后第3天血清抗体被检出,以后逐渐上升,2周后达到高峰,维持到第8周后逐渐下降,到第15周仍可检出抗体。本研究表明:用重组酵母乙肝疫苗免疫蛋鸡,卵黄和鸡血清中可持久保持高效价的特异性抗体,血液中的抗体传递到卵黄需要一定时间,卵黄IgY动态变化规律与血清抗体基本一致。

抗轮状病毒（anti—HRV）免疫蛋白的研究

本文报道了抗轮状病毒卵黄免疫球蛋白ＩｇＹ的制备、提取以及纯化的基本方法，并对其理化性质做了初步研究，急性毒性实验表明其安全无毒，是一种理想的免疫型功能食品添加剂。

IgY的冻融法脱脂条件研究

目的 寻求IgY的最佳脱脂条件.方法 用人IgG免疫产蛋母鸡,待蛋黄中抗体效价达1：64以上时,选用不同的稀释度、酸碱度、冻融次数、离心力等条件分离IgY.测定除脂率、效价、蛋白含量,以确定最佳脱脂条件.结果 稀释度为1：7,pH为5.2,冻融1～2次,离心力大于或等于3 000 g,离心20min以上,其除脂率可超过98%,IgY的特异性抗体效价未降低,蛋白含量平均为8.033 mg/ml.结论 用冻融法分离IgY能有效去除蛋黄液中的脂肪,此工艺便于批量生产低脂IgY产品.

抗肠出血性大肠杆菌O157∶H7鸡卵黄抗体的初步研究

[目的 ]制备高效价特异性鸡卵黄免疫球蛋白 (Yolk Immunoglobulin,Ig Y)抗体 ,探索肠出血性大肠杆菌(EHEC O15 7∶ H7)防治的新方法。 [方法 ]用 EHEC O15 7∶ H7菌株制备抗原 ,免疫育龄 L eghorn鸡 ,获取大量含高效价Ig Y的卵黄 ,经水稀释法脱脂、盐析、初步纯化浓缩 ,用 EL ISA检定其免疫学活性 ,并测定提取物蛋白含量。 [结果 ]获得EL ISA效价达 1× 10 - 6 的抗 O15 7∶ H7Ig Y抗体 ,其蛋白含量为 141.8mg/ ml。 [结论 ]用水稀释法制备 Ig Y抗体简便、经济、高效。 EHEC O15 7∶ H7菌株抗原可有效地导致种鸡免疫反应 ,用其卵黄制备的 Ig Y抗体产量多、效价高、特异性强 ,可进一步用于抗 EHEC O15 7∶ H7感染的保护性研究。

牛珀至宝微丸对脓毒血症大鼠自由基和肝组织形态学的影响

为探讨牛珀至宝微丸 (主药 :水牛角、羚羊角、琥珀等 )对脓毒血症的防治作用。采用盲肠结扎术造成SD大鼠重度脓毒血症模型 ,在造模前连续 5d予牛珀至宝微丸治疗 ,并与鸡卵黄免疫球蛋白 (IgY)治疗组比较。检测血清SOD、MDA ;电镜下观察肝脏组织形态学变化。结果 :牛珀至宝微丸、IgY均能提高SOD活性、降低MDA含量 ;并能保护肝细胞线粒体及内织网。提示 ,牛珀至宝微丸和IgY对实验性动物脓毒血症有一定的防治作用 ,其机理可能与其有较强的清除超氧阴离子 ,抑制脂质过氧化有关。

贝可丽健齿喷剂在预防儿童龋齿中的跟踪研究

目的跟踪研究贝可丽健齿喷剂在预防儿童龋齿中的临床效果。方法选择110名3～6岁无龋齿儿童随机分为两组,即试验组和对照组,评价1年后两组除菌防蛀效果。结果使用贝可丽健齿喷剂1年后,试验组与对照组相比较,全口平均菌斑指数持续下降。结论长期使用贝可丽健齿喷剂能显著抑制牙菌斑的形成,有效预防龋齿。

药效营养品IgY在动物饲料与疾病防治中的应用

鸡卵黄免疫球蛋白(Ig Y)作为一种能够预防或控制细菌性和病毒性传染疾病的药效营养品而受到人们的极大关注。与哺乳动物的免疫球蛋白(Ig G)相比,Ig Y具有安全、高效、特异性强和制备简易等优势,可添加到动物饲料中,起到防治动物疾病的作用。文章概述了Ig Y作为药效营养品在陆生及水生动物饲料及疾病防治中的应用,并阐述了Ig Y存在的问题及未来前景。