CT联合分泌型卷曲受体蛋白4及可溶性生长刺激表达基因2蛋白对恶性胆道梗阻患者术后并发胰腺炎的诊断价值

目的探讨计算机断层扫描(CT)联合血清分泌型卷曲受体蛋白4(SFRP4)及可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)对恶性胆道梗阻(MBO)患者胆管支架置入术后并发胰腺炎的诊断价值。方法选取行胆管支架置入术的243例MBO患者为研究对象,根据术后并发胰腺炎情况分为胰腺炎组105例和无胰腺炎组138例。采用酶联免疫法检测SFRP4、sST2水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线和四表格法分析SFRP4、sST2单独及联合CT诊断术后并发胰腺炎的临床价值。结果胰腺炎组血清SFRP4、sST2水平高于无胰腺炎组,差异有统计学意义(P<0.05);血清SFRP4、sST2水平诊断术后并发胰腺炎的曲线下面积(AUC)为0.694、0.667。CT诊断术后并发胰腺炎的敏感度为76.19%,特异度为60.87%;CT联合血清SFRP4、sST2水平诊断术后并发胰腺炎的敏感度为98.10%、准确度为76.54%;三者联合诊断的敏感度和准确度高于CT、SFRP4、sST2单独诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胆管支架置入术后并发胰腺炎的MBO患者血清SFRP4、sST2水平较高,CT联合血清SFRP4、sST2水平对术后并发胰腺炎具有较高的诊断价值。

CT联合血清SFRP4、sST2水平对恶性胆道梗阻患者胆管支架置入术后并发胰腺炎的诊断价值

目的探究CT联合血清分泌型卷曲受体蛋白4(SFRP4)、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)水平,对恶性胆道梗阻患者胆管支架置入术后并发胰腺炎的诊断价值。方法选取2021年1月至2023年3月期间在本院进行胆管支架置入术的243例恶性胆道梗阻患者,根据其术后是否并发胰腺炎分为胰腺炎组105例和无胰腺炎组138例。酶联免疫法检测血清SFRP4、sST2水平,ROC曲线分析血清SFRP4、sST2水平对胆管支架置入术后并发胰腺炎的诊断价值;四表格法分析CT联合血清SFRP4、sST2水平诊断胆管支架置入术后并发胰腺炎的临床价值。结果胰腺炎组血清SFRP4、sST2水平显著高于无胰腺炎组(P<0.05);血清SFRP4、sST2水平诊断胆管支架置入术后并发胰腺炎的AUC分别为0.694.0.667。CT扫描结果显示,无胰腺炎患者109例,胰腺炎患者134例;CT扫描诊断术后并发胰腺炎的敏感性为76.19%,特异性为60.87%;CT扫描诊断结果与诊断标准具有一致性(Kappa值=0.359,P<0.05)。CT联合血清SFRP4、ST2水平诊断胆管支架置入术后并发胰腺炎的敏感性为98.10%(103/105)、准确度为76.54%(186/243),三者联合诊断结果与诊断标准具有较好一致性(Kappa=0.549,P<0.05),三者联合诊断的敏感性和准确度显著高于CT.SFRP4.ST2单独诊断(P<0.05)。结论胆管支架置入术后并发胰腺炎的恶性胆道梗阻患者血清SFRP4、sST2水平较高,CT联合血清SFRP4、sST2水平对胆管支架置入术后并发胰腺炎具有较高诊断价值。

miR-144-3p通过靶向FZD4阻断Wnt/β-catenin通路抑制肝癌Huh-7细胞的恶性生物学行为

目的:探讨miR-144-3p通过阻断卷曲受体4(FZD4)/Wnt/β-catenin信号通路对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法:收集2012年3月至2017年7月在柳州市工人医院手术切除的18例肝癌患者的癌组织及相应的癌旁组织标本,以及肝癌细胞系Huh-7、SMMC7721和MHCC97和人正常肝上皮细胞株THLE-3,用qPCR检测肝癌组织及细胞系中miR-144-3p的表达水平。将miR-144-3p mimics/inhibitor和FZD4敲降载体转染至Huh-7细胞中,用CCK-8、Transwell、划痕愈合实验和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测Huh-7细胞的增殖、迁移和凋亡水平。用双荧光素酶报告基因验证miR-144-3p和FZD4的靶向关系。结果:在肝癌组织和细胞系中miR-144-3p均呈低表达(P<0.05或P<0.01)。过表达miR-144-3p可显著抑制Huh-7细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证明miR-144-3p靶向作用FZD4并下调其表达水平。体外实验进一步证实,过表达miR-144-3p靶向FZD4并阻断Wnt/β-catenin通路,进而抑制Huh-7细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡(均P<0.01)。结论:miR-144-3p通过阻断FZD4/Wnt/β-catenin通路抑制肝癌Huh-7细胞的恶性生物学行为,为肝癌诊断或治疗提供了潜在分子靶点。

MiR-132-3p调控FZD4/Wnt/β-catenin通路抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和侵袭

目的探究miR-132-3p对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)增值和侵袭的影响及调控机制。方法运用qRT-PCR分析miR-132-3p和卷曲类蛋白受体4(FZD4)RNA表达。将miR-132-3p模拟物、模拟物阴性对照、pcDNA3.1(+)载体以及FZD4过表达载体转染RA-FLSs后分析细胞活力、增殖、侵袭以及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达。再运用双荧光素酶报告实验鉴定miR-132-3p和FZD4关系。结果miR-132-3p在类风湿关节炎患者滑膜组织中的表达低于在正常滑膜组织中的表达,且在RA-FLSs中的表达低于在正常纤维样滑膜细胞中的表达,差异均有统计学意义(P<0.05);miR-132-3p模拟物转染后能抑制WT-FZD43’UTR组的荧光素酶活性,差异有统计学意义(P<0.05),但miR-132-3p模拟物对WT-FZD43'UTR组的荧光素酶活性无影响,差异无统计学意义(P>0.05);miR-132-3p转染组的RA-FLSs活力、EdU阳性细胞数、侵袭细胞数和β-catenin、c-Myc和CyclinD1蛋白表达明显低于miR-NC转染组,差异均有统计学意义(P<0.05),但是这些指标在miR-132-3p和FZD4共转染组中的表达又明显高于miR-132-3p和pcDNA共转染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论MiR-132-3p通过抑制FZD4/Wnt/β-catenin通路激活来调控RA-FLSs增殖和侵袭。

卷曲受体蛋白4在高脂血症大鼠种植体周围组织中的早期表达

目的探讨卷曲受体蛋白4(Frizzled4)在高脂血症大鼠种植体周围组织中早期的表达.方法48只成年雄性SD大鼠,随机分为实验组和对照组,每组24只.分别喂食高脂饲料和普通饲料8周.均于股骨干骺端植入直径1.5 mm、长2.5 mm的种植体.分别于术后第1天、第3天、第5天和第28天时处死大鼠,获取种植体周围骨组织.用Inveon MM CT扫描组织标本,扫描完成后将图像中种植体周围1 mm区域设置为兴趣区(ROI),进行ROI内三维重建,分析骨小梁参数:骨小梁体积/ROI体积(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁间隙(Tb.S).RT-PCR法检测成骨细胞、破骨细胞分化标志物Runt相关转录因子2(RUNX2)、组织蛋白酶K(CTSK)和Frizzled4的基因表达情况,Western blotting法检测Frizzled4蛋白表达情况.结果实验组种植体植入第1天、第3天时,实验组和对照组BV/TV、Tb.S、Tb.Th和Tb.N比较差异无统计学意义(P>0.05).植入第5天、第28天时,实验组BV/TV、Tb.Th和Tb.N均低于对照组,而Tb.S高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).实验组种植体植入第1天、第3天、第5天和第28天后,Runx2 mRNA表达水平均低于对照组,而CTSK mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).对照组种植体植入3 d内,Frizzled4 mRNA和蛋白表达水平明显增加,第5天、第28天时有所下降,但是仍高于实验组(P<0.05).实验组植入3 d内,Frizzled4 mRNA和蛋白表达水平明显下降,并且在第5天、第28天时升高(P<0.05).对照组种植体植入3 d内,Wnt/β-catenin蛋白表达水平明显增加,第5天,第28天时有所下降,但是仍高于实验组(P<0.05).实验组植入3 d内,Wnt/β-catenin蛋白表达水平显著上升,并且在第5天、第28天下降(P<0.05).结论高脂血症可抑制种植体的早期骨结合,这种作用可能与下调Frizzled4的表达有关,未来需要进一步地进行机制研究.

大鼠骨骼肌损伤修复中FZD4时序性变化及其应用

目的以卷曲受体4(FZD4)为例,探索细胞膜上受体蛋白的表达变化能否作为损伤时间推断的指标。方法 78只大鼠随机分为对照组和损伤后4h、8h、12h、16h、20h、24h、28h、32h、36h、40h、44h和48 h组(n=6)。麻醉后,采用重力锤自由落体方式砸伤大鼠右后肢,取股四头肌处挫伤的组织。应用免疫荧光、real-time PCR和western blotting方法检测肌肉中FZD4蛋白及m RNA的表达量。结果免疫荧光结果显示FZD4表达于骨骼肌细胞膜上,胞浆和细胞核内均未见表达;Real-time PCR结果表明FZD4 m RNA在损伤后8h、12h、36h和40h显著上调(P<0.05),均超过对照组的两倍;Western blotting结果示FZD4蛋白的表达在8h、36h、40h、44h和48h组明显增加(P<0.05),但均未超过对照组的两倍。结论 FZD4 m RNA和蛋白在肌肉挫伤后呈时序性变化规律可作为损伤时间推断的指标,在一定程度上FZD4 m RNA比FZD4更适用于损伤时间推断。