分泌性卷曲相关蛋白3影响小鼠胚胎肝干细胞体外成熟分化的实验研究

目的检测不同发育阶段的肝组织中Wnt信号拮抗因子分泌性卷曲相关蛋白(secreted frizzled-related pro-tein,SFRP)的表达,并探讨SFRP3对胚胎肝干细胞体外成熟分化的影响。方法分离胚胎12.5 d至出生后4周共9个阶段的小鼠肝组织,RT-PCR检测5种SFRPs在肝组织及胚胎肝干细胞14.5(embryonic liver stem cells,ELSC)中的表达水平。腺病毒SFRP3感染小鼠胚胎肝干细胞,地塞米松(dexamethasone,Dex)联合肝细胞生长因子(hepatic growthfactor,HGF)诱导肝细胞分化,诱导后第3、6、9、12天检测白蛋白启动子荧光素酶报告基因(ablumin promoter-GaussiaLuciferase,ALB-GLuc)活性,诱导后第12天,RT-PCR和Western blot检测肝脏相关基因表达,PAS染色检测糖原合成功能。结果 SFRP1、4、5在不同阶段肝组织中的表达无明显差异,SFRP2和SFRP3只在胚胎期肝组织中表达,随后很快消失。ELSC14.5细胞中,SFRP2高表达而SFRP3表达很低。Dex联合HGF可有效诱导ELSC14.5细胞的体外成熟分化,与对照组相比,SFRP3过表达可降低成熟肝细胞标志白蛋白(albumin,ALB)、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)、酪氨酸转氨酶(tyrosine aminotransferase,TAT)、载脂蛋白B(apolipoprotein B,ApoB)及尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A(UDP-glucuronosyl transferase,UGT1A)的水平,增强肝干细胞标志Delta蛋白(Delta-like protein,DLK)和甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)的表达,并抑制糖原合成功能。结论 SPRF3在肝脏发育过程中表达水平迅速降低,并显著抑制胚胎来源的肝干细胞体外成熟分化,其下调可能是肝脏发育和肝细胞成熟分化的一个重要因素。

多发性骨髓瘤患者的血清PINP、DKK1和SFRP3水平及其临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者的血清I型原胶原氨基端前肽(PINP)、dickkopf Wnt信号通路抑制因子1(DKK1)和分泌型卷曲相关蛋白3(SFRP3)水平及其临床意义。方法纳入150例MM患者(MM组)及150健康体检者(对照组)。比较两组研究对象之间、不同临床分期MM患者之间、不同临床疗效MM患者之间的血清DKK1、PINP、SFRP3水平。采用Logistic回归模型分析治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平与MM患者临床疗效的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平对MM患者临床疗效的预测效能。结果MM组患者治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平高于对照组(P<0.05);Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期MM患者治疗前血清DKK1、PINP、SFRP3水平依次升高(P<0.05);有效组患者治疗前血清DKK1、PINP、SFRP3水平低于无效组(P<0.05)。治疗前血清DKK1、SFRP3、PINP水平升高是影响MM患者临床疗效的独立危险因素(P<0.05)。治疗前血清DKK1和SFRP3水平对MM患者临床疗效无预测价值(曲线下面积<0.5,P>0.05),而治疗前血清PINP水平对MM患者的临床疗效有一定的预测价值(曲线下面积=0.663,P<0.05)。结论MM患者治疗前的血清DKK1、PINP和SFRP3水平高于健康人群,且与疾病严重程度有关,是MM患者临床疗效的影响因素。治疗前血清PINP水平对预测MM患者的临床疗效有一定的价值。

非小细胞肺癌患者癌组织FZD3、DVL2表达水平及其临床预后意义

目的 探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者癌组织卷曲蛋白3(frizzled 3,FZD3)、蓬乱蛋白2(dishevelled 2,DVL2)表达水平及其临床预后意义。方法 选取2018-09/2020-09月作者医院收治的105例NSCLC患者为研究对象,手术留取癌组织和癌旁组织并制作成标本。采用免疫组织化学法检测FZD3、DVL2在癌组织和癌旁组织标本中的表达情况;分析FZD3、DVL2表达水平与NSCLC患者临床特征的关系,并分析影响NSCLC患者预后的相关因素。结果 癌组织中FZD3阳性表达率、DVL2阳性表达率均高于癌旁组织(P均<0.05)。临床分期为Ⅲ期、分化程度为低分化、有淋巴结转移的NSCLC患者FZD3阳性表达率和DVL2阳性表达率高于临床分期为Ⅱ期、分化程度为中/高分化、无淋巴结转移的NSCLC患者(P均<0.05)。FZD3阳性表达、DVL2阳性表达的NSCLC患者的3年总生存率低于FZD3阴性表达、DVL2阴性表达的NSCLC患者(P均<0.05)。多因素Cox回归分析显示,分化程度低(HR=2.524,95%CI:1.669~3.817)、有淋巴结转移(HR=2.959,95%CI:1.897~4.618)、FZD3阳性表达(HR=3.111,95%CI:1.982~4.883)、DVL2阳性表达(HR=3.476,95%CI:2.155~5.608)是NSCLC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 FZD3、DVL在NSCLC组织中表达上调,且与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关,有望作为NSCLC预后评估的生物学标志物。

原发性肝癌组织TACC3、p53蛋白表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系

目的探讨原发性肝癌组织转录相关酸性卷曲蛋白3(TACC3)、p53蛋白表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择原发性肝癌组织和癌旁组织各112例份,采用Western blotting法检测TACC3、p53蛋白表达。分析原发性肝癌组织TACC3、p53蛋白表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果原发性肝癌组织TACC3、p53蛋白相对表达量均明显高于癌旁组织(P均<0.05)。原发性肝癌组织TACC3、p53蛋白表达与肿瘤最大直径、临床分期、组织分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤数目无关(P均>0.05)。原发性肝癌组织TACC3表达与p53蛋白表达呈正相关关系(r=0.613,P<0.05)。以TACC3、p53蛋白表达的平均值为临界值,将患者分为TACC3或p53蛋白高表达者与低表达者。TACC3、p53蛋白高表达者3年生存率均明显低于其低表达者(χ~2分别为4.843、4.020,P均<0.05)。结论原发性肝癌组织TACC3、p53蛋白表达明显升高,其表达变化与肿瘤进展和患者预后不良有关。

多发性骨髓瘤病人血清SFRP3检测及其临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤（MM）病人血清分泌型卷曲相关蛋白3（SFRP3）的表达及临床意义。方法收集2007年7月—2014年7月于聊城市人民医院血液科住院的初治MM病人70例,用酶联免疫吸附试验法检测血清SFRP3水平,并分析其与骨髓瘤骨病（MBD）、疗效和生存的关系。结果 MBD 0~1级病人血清SFRP3水平低于2~3级和4级病人,MBD 2~3级病人血清SFRP3水平低于4级病人,差异均有显著意义（F=20.89,P〈0.01）。MM病人治疗后,获得完全缓解（CR）病人的血清SFRP3水平较治疗前明显降低（t=3.76,P〈0.01）;获得部分缓解（PR）病人的血清SFRP3水平较治疗前下降,达不到PR病人的血清SFRP3水平较治疗前上升,但差异均无显著性（P〉0.05）。血清SFRP3水平≤0.65μg/L的病人中位生存期较〉0.65μg/L的病人长,但差异无显著性（P〉0.05）。结论 MM病人血清SFRP3水平与MBD和疗效相关,对疗效和预后有提示作用。

SFRP3与肿瘤关系的研究进展

Wnt信号通路在胚胎发育、组织内稳态及肿瘤发生和发展等生物学行为中发挥重要作用,许多因素影响Wnt信号的表达。分泌型卷曲相关蛋白(SFRPs)家族是重要的Wnt拮抗因子,它们在胞外与Wnt或其受体Fz结合抑制Wnt信号的传递。分泌型卷曲相关蛋白3(SFRP3)作为最早发现的SFRPs成员,其启动子甲基化导致的沉默与恶性肿瘤的发生和发展密切相关,故SFRP3通常被认为是一种抑癌基因,SFRP3的基因多态性也被发现是部分恶性肿瘤的高危因素。该文就SFRP3与肿瘤关系的研究进展进行综述。

表没食子儿茶素没食子酸酯对牙源性角化囊肿上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对牙源性角化囊肿(OKC)上皮细胞增殖、凋亡的影响,以及与Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3表达的关系。方法:采用原代培养的人牙源性角化囊肿上皮细胞,分别用不同浓度的EGCG处理24、48、72 h,CCK-8法检测细胞增殖,FITC-Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR、Western免疫印迹检测Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:EGCG以剂量-时间依赖方式抑制OKC上皮细胞增殖。低浓度EGCG(0～20μmol/L)对细胞增殖无显著影响(P>0.05),高浓度EGCG(40～320μmol/L)对细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05),且随着药物浓度增加及作用时间延长,抑制作用逐渐增强(P<0.05)。EGCG (20、160、320μmol/L)诱导OKC上皮细胞凋亡,呈剂量依赖性(P<0.05),并将细胞周期阻滞于G1期。EGCG可下调Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达(P<0.05)。结论:EGCG抑制OKC上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与阻断Wnt信号通路相关基因FZD3和JNK3的表达有关。

TACC3在胃腺癌中的表达及其与上皮-间质转化的关系

目的探讨转录相关酸性卷曲蛋白3(TACC3)在胃腺癌(GAC)中的表达及其与临床病理学参数间的关系,并研究TACC3在胃腺癌中与上皮-间质转化(EMT)间的关系。方法采用免疫组织化学方法对2013年10月—2014年10月蚌埠医学院第一附属医院病理科存档的113例胃腺癌标本及相应的癌旁组织标本进行TACC3、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达分析。结果TACC3、E-cadherin、Vimentin在胃腺癌标本和相应癌旁组织中的阳性表达率分别为67.3%、45.1%、50.4%和17.7%、69.9%、27.4%,差异有统计学意义。Kaplan-Meier生存分析表明,TACC3和Vimentin阳性表达的患者生存时间(OST)比阴性表达的患者短,差异有统计学意义(均P<0.001)。E-cadherin表达阳性的患者生存时间高于阴性表达组(P<0.001)。多因素分析显示TACC3和Vimentin的阳性表达及E-cadherin阴性表达是GAC的独立预后因素(均P<0.05);Spearman相关分析显示TACC3与Vimentin的表达呈正相关,E-cadherin与TACC3的表达呈负相关,E-cadherin和Vimentin的表达呈负相关(均P<0.001)。结论TACC3的高表达在胃腺癌中与EMT及不良预后相关。TACC3有望成为胃腺癌靶向治疗的新靶点,同时TACC3早期检测结果有望成为评估胃腺癌患者转移和预后的指标之一。