厚朴和凹叶厚朴的质量评价

利用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)建立简单、快速、精确、同时测定厚朴和凹叶厚朴中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、和厚朴酚、厚朴酚的测定方法。色谱分离是反相C_(18)柱,以乙腈-0.1%甲酸为流动相梯度洗脱,在检测波长294 nm处进行分析。在研究的浓度范围内线性良好,r大于0.9995,回收率为98.28%～104.19%。该方法有效地应用于测定24个源于不同产地、不同采集时间的厚朴和凹叶厚朴样品中7个化学成分的测定。根据这7个特征化合物的浓度,利用聚类分析(HCA)及组成分分析(PCA)对这些厚朴和凹叶厚朴样品进行分类和区分,为合理利用和指导中药资源提供了依据。

配方施肥对高肥力区凹叶厚朴生长及药用成分的影响

[目的]为明晰高肥力区凹叶厚朴树体生长及树皮药用成分含量对氮、磷、钾配方施肥的响应,获得氮、磷、钾肥优化的施肥量。[方法]以凹叶厚朴5年生树为研究对象,采用氮、磷、钾“3414”施肥设计进行田间施肥试验,测定不同处理的树高和地径增长量及药用成分厚朴酚、和厚朴酚、总酚的含量,拟合建立树高增长量的肥料效应模型,采用频次分析方法获得优化施肥量。[结果]凹叶厚朴氮、磷、钾配方施肥处理的树高增长量、地径增长量、和厚朴酚、厚朴酚、总酚的含量的平均值比不施肥处理分别提高了84.56%、48.74%、3.40%、3.10%、3.21%。氮、磷、钾对树高和地径生长量的影响均是N>P>K,对树皮厚朴酚、和厚朴酚、总酚含量的影响均是K>N>P。氮、磷、钾对树高增长量的单因素效应为正,氮与磷、氮与钾、磷与钾的交互效应也都是正。[结论]高肥力区凹叶厚朴树高最大增长量的施肥量为氮肥128.63克/株、磷肥79.84克/株、钾肥54.63克/株,树高最大增长量为129.91 cm;最优施肥量为氮肥98.12~123.31克/株、磷肥60.23~74.78克/株、钾肥41.62~51.24克/株,预期树高平均增长量121.22 cm。

基于多指标成分定量、化学计量学、EW-TOPSIS分析的白术厚朴合剂质量评价研究

目的以10种成分为指标,建立白术厚朴合剂HPLC定量分析方法,联合化学计量学及熵权优劣解距离法(EW-TOPSIS)对其质量进行综合评价。方法以75%甲醇提取液为样品,采用Agilent TC-C18色谱柱,乙腈-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,HPLC法同时测定12批白术厚朴合剂中10个化合物(白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、和厚朴酚、厚朴酚、6-姜辣素、8-姜酚和10-姜酚)含量,运用化学计量学和EW-TOPSIS法对含量数据进行分析。结果经方法学验证,各指标均符合《中华人民共和国药典》要求:10种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好,相关系数>0.999;精密度、稳定性、重复性、加样回收率RSD均<2.0%。化学计量学分析显示,前2个主成分代表10个成分92.24%的信息,12批样品聚为3类,桂皮醛、厚朴酚、和厚朴酚、白术内酯Ⅲ、6-姜辣素和白术内酯Ⅰ对白术厚朴合剂的质量影响较大。EW-TOPSIS法结果显示,12批白术厚朴合剂的最优解欧氏贴近度均值为0.2385~0.6662,各批次间质量差异较大。结论建立的多指标成分定量方法操作便捷、结果准确,可用于白术厚朴合剂的质量控制,化学计量学及EW-TOPSIS分析可实现对白术厚朴合剂质量的综合评价,为白术厚朴合剂质量标准提升提供参考。

湖北蕲春产凹叶厚朴质量研究(Ⅰ)

目的:研究湖北蕲春产凹叶厚朴的质量。方法:采用高效液相色谱法测定湖北蕲春产凹叶厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量,并与其它不同产地、品种厚朴样品进行比较。结果:蕲春凹叶厚朴的厚朴酚与和厚朴酚含量较低,但符合药典规定。结论:本研究为湖北蕲春产凹叶厚朴药材的品质鉴定提供了依据。

湖北蕲春产凹叶厚朴的质量研究Ⅱ

目的研究湖北蕲春产凹叶厚朴的质量。方法对蕲春产凹叶厚朴10批样品(干皮)的HPLC图谱进行图谱相似度比较和特征性分析。结果蕲春凹叶厚朴的个体间指纹图谱相似度较差,但与对照用指纹图谱的相似度较高(>0.9)。共有峰(特征峰)6个,其中厚朴酚与和厚朴酚峰面积的比值、厚朴酚与和厚朴酚峰面积之和总峰面积的比例,可分别作为蕲春凹叶厚朴(干皮)的HPLC图谱特征(特征Ⅰ、Ⅱ)。结论本研究为湖北蕲春凹叶厚朴药材的品质鉴定提供了依据。

凹叶厚朴树体厚朴酚、和厚朴酚含量变化模型的研究

为了研究凹叶厚朴树厚朴酚、和厚朴酚的积累分布规律,以10年生凹叶厚朴为试验材料,建立了凹叶厚朴树体解析木高度与厚朴酚、和厚朴酚及树皮厚度含量的数学模型。结果表明:解析木高度与总酚含量、厚朴酚含量、和厚朴酚含量关系最优模型依次为y=─0.053 636x3+0.665 503x2─2.543 869x+3.964 848,y=─0.008939x3+0.110 233x2─0.419 464x+0.693 864,y=─0.044 697x3+0.555 271x2─2.124 405x+3.270 985;树体解析木高度与树皮厚度关系最优模型为y=─0.008 965x3+0.031 331x2─0.143 492x+4.941 212,可用于凹叶厚朴树体厚朴酚、和厚朴酚含量的预测,为科学采收厚朴皮提供了理论依据。

凹叶厚朴中生物碱成分的研究

目的研究凹叶厚朴Magnolia officinalis Rehderet Wils中的生物碱化学成分。方法离子交换树脂法提取总碱,硅胶柱层析法分离纯化,波谱法鉴定结构。结果从中分得9个异喹啉生物碱。分别为N-降荷叶碱(1)、lirinidine(2)、罗默碱(3)、番荔枝碱(4)、lysicamine(5)、鹅掌楸碱(6)、瑞枯灵(7)、isosalsoline(8)、N-methylisosalsoline(9)。结论生物碱2、3、5、8、9为首次从该植物中分离得到,应用光谱法鉴定了所有化合物的结构。

濒危植物凹叶厚朴幼苗更新及环境解释

凹叶厚朴为我国二级保护野生植物,由于其较高的药用价值,野生资源遭到无节制的盗砍,造成种群数的衰退和群落残败。调查浙江省遂昌县桂洋林场不同群落野生凹叶厚朴的更新状况,结果表明:凹叶厚朴种群大小级为不典型的"J"型,种群在较长的时间内保持稳定状态;凹叶厚朴以萌生更新为主,随着群落郁闭度的增加,萌生苗的比例增高,但不同群落平均萌枝数量、平均胸径及株高无显著差异。实生苗随着郁闭度的增加植株呈现变矮、变细的趋势;凹叶厚朴实生和萌生苗在不同群落中年龄结构差异均极大,针阔叶混交林中更新良好,针叶林大量高龄幼苗生长缓慢,且植株不易进入上层空间,常绿阔叶林中存在严重的更新不良现象;各群落中,更新幼苗株高和胸径增长量均随郁闭度的增加呈现极显著下降的趋势,其中实生苗的下降趋势更为明显;影响实生更新的主要环境因子为草本层盖度和厚度、枯落物盖度、腐殖质厚度及土壤含水率;影响种群萌生更新的主要环境因子为群落的光照及温湿度。因此,降低上层林冠密度,减少草本层、枯落物等的覆盖对于维持种群的发展、缓解其濒危状况具有重要的意义。

凹叶厚朴中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的成分

凹叶厚朴是四川省人工栽种的一种用途广泛的常用中药.在发现凹叶厚朴乙醇提取物具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性基础上,通过活性跟踪,对该提取物进行了分离,发现其中的生物碱显示了较强的抑制活性.通过溶剂萃取、树脂吸附和反复硅胶柱层析等分离方法从凹叶厚朴乙醇提取物中分离得到6个生物碱,用质谱和核磁共振等波谱方法分别鉴定为木兰箭毒碱,木兰花碱,鹅掌楸碱,蕃荔枝碱,罗默碱和Lysicamine,并应用小肠α-葡萄糖苷酶模型测定了它们对α-葡萄糖苷酶的抑制作用.其中,番荔枝碱和木兰箭毒碱的抑制活性较好,分别为60%和62%;其它4个生物碱成分活性几乎相当,鹅掌楸碱为46%,罗默碱为51%,Lysicamine为49%,木兰花碱为51%.

凹叶厚朴超临界二氧化碳萃取物成分分析

本文对凹叶厚朴超临界二氧化碳萃取物进行了GC-MS分析,检出和厚朴酚、厚朴酚、异厚朴酚、按叶醇等15种成分,其中十六酸、9,8-十八碳二烯酸为首次从该药物中检出。

凹叶厚朴优良无性系的嫁接技术研究

以凹叶厚朴为研究材料,研究了嫁接方法、嫁接时间、砧木及接穗粗度、砧木不同处理对凹叶厚朴嫁接成活率及生长的影响。结果表明：凹叶厚朴嫁接适宜的方法是三刀切接法;3月中、下旬嫁接,其成活率及生长量比其它时间嫁接的要高,最高成活率和生长量分别为92%、35.5cm;适宜砧木和接穗粗度均为0.8~1.0cm时,嫁接成活率可达92.6%~94.0%;在地栽砧木上直接嫁接,与将砧木挖出后嫁接,再移栽到营养钵中,两者的嫁接成活率没有明显差异,但生长量差异显著,前者高于后者62.7%。

不同树龄凹叶厚朴7种次生代谢产物积累研究

目的:建立研究同一地域来源、不同树龄的凹叶厚朴7种次生代谢产物质量分数变化,为确定凹叶厚朴最佳采收条件提供参考依据.方法:利用高效液相色谱法(HPLC)对绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、和厚朴酚与厚朴酚进行分离,并建立标准曲线及回归方程.分析随着树龄的增加,其叶、枝皮、茎皮和根皮中7种次生代谢产物质量分数积累情况.结论:不同树龄的凹叶厚朴叶片、枝皮、茎皮和根皮中7种代谢产物质量分数随着树龄积累差异较大,绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素等主要存在于在树龄相对较小的叶片和枝皮中,随着树龄从7年增加至26年其积累变化不明显;厚朴酚与和厚朴酚主要分布于凹叶厚朴的树皮中,其中根皮质量分数最高,茎皮、枝皮次之;7至13年树龄的植株,其厚朴酚与和厚朴酚积累量随树龄增加而明显增加,13至26年树龄的植株随树龄增加二者积累量增幅不大.因此,凹叶厚朴的最适采收对象是树龄超过13年之后的植株.

凹叶厚朴扦插繁殖的生根机理研究

为了探索凹叶厚朴扦插生根的方法及其生根机理,促进凹叶厚朴优良无性系的快速推广栽培。以半木质化枝条为插条,依据单因素试验结果,设计L9(34)正交试验,优化扦插生根配方;定期采集插条下段,测定其韧皮部内的营养物质的含量及氧化酶的活性变化;定期采集插穗下部制作石蜡切片,观察生根部位及发生过程。凹叶厚朴的最佳扦插生根配方为:以泥炭土:珍珠岩:黄沙(1:1:1)为基质,用KIB A1000mg/L浸泡30min,生根率可达94.4%;生根过程中,用KIBA浸泡的插条与对照相比,其内的营养物质含量及PPO及POD活性的变化规律相同,但试验组各项峰值到达的时间比要对照早10天,对应的生根时间也早10天;PPO及POD活性最高值达到时间与生根时间相符;凹叶厚朴的不定根产生有潜伏型根原基和诱导型根原基两种类型,潜伏型根原基存在于幼茎的皮层外方,诱导型根原基存在于皮层叶隙维管束的外方,不定根的形成主要以诱导型根原基为主。

湖南道县产凹叶厚朴发汗前后挥发油成分及含量变化的研究

目的研究发汗对湖南道县产厚朴中挥发油的影响,为湖南道县厚朴质量评价体系提供参考。方法采用GC-MS对挥发油进行成分分析。结果发汗不仅能提高厚朴中的挥发油的含量,而且在成分组成和成分含量上与未经过发汗处理的厚朴存在差异。结论若以挥发油含量为考核指标,建议厚朴的产地加工坚持发汗处理。

凹叶厚朴大、小孢子发生和雌、雄配子体发育的研究

凹叶厚朴花药四囊型,腺质绒毡层有1-2层细胞,小孢子形成时胞质分裂方式为修饰性同时型．小孢子四分体排列方式为左右对称型,成熟花粉粒为二细胞型。四分体和小孢子在发生时有不规则变形。子房单心皮。心皮腹面壁上着生2个胚珠,胚珠倒生型,厚珠心,双珠被;抱原细胞一个,并且自表皮下第2层细胞处分化。胚囊发育为单孢蓼型。凹叶厚朴的胚胎学特征与木兰科其它植物的胚胎学特征基本相同,属于较原始的被子植物胚胎类型。在凹叶厚朴大、小孢子发生和雌、雄配子体发育过程中存在部分败育现象。本文初步探讨了凹叶厚朴濒危的生殖生物学原因。

施肥、修剪等措施对凹叶厚朴中厚朴酚、和厚朴酚含量累积的影响

目的:提高凹叶厚朴的品质,缩短生产周期,为凹叶厚朴种植提供科学参考依据。方法:本次实验通过采用施肥、修枝、环割、铁丝环扎对凹叶厚朴进行处理,采用HPLC测定两年后厚朴中厚朴酚、和厚朴酚的含量,计算总酚含量增长率。结果:凹叶厚朴中总酚含量累积增长(Y)与肥料中的氮肥、磷肥正相关,与钾肥负相关,回归方程为:Y=1.804+2.470N+2.746P-15.616K(r=0.982)。修枝处理的凹叶厚朴中总酚的含量较前期增长了310%,环割处理的凹叶厚朴中总酚的含量较前期增加了125.65%,铁丝环扎处理的凹叶厚朴中总酚的含量较前期增加了343.2%,而同期的空白组中凹叶厚朴中总酚的含量较前期增加了84.62%。实验结果显示不同栽培措施的效果由大到小的顺序是:铁丝环扎>修枝>环割。结论:凹叶厚朴中厚朴酚、和厚朴酚含量的积累可以通过改变土壤的肥力、环割、修枝等栽培措施得以提高。

凹叶厚朴离体胚培养的研究

为了满足市场的资源需求,建立优质凹叶厚朴离体再生体系,为凹叶厚朴工厂化生产提供理论依据,以优质凹叶厚朴离体胚为外植体,以B5为基本培养基,6-BA、NAA、消毒时间为因素,采用L9(33)正交设计,进行无菌苗培养优化试验。结果表明:最佳消毒方法为0.1%升汞浸泡8 min,污染率为12.6%,外植体生长良好;最佳组合为B5+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+消毒时间8 min,发芽率高达87%。

凹叶厚朴种子休眠与萌发特性的研究

用组织切片法对凹叶厚朴种子胚形态结构的观察、种皮透水性的测定、种子不同部位浸提液的生物测定,初步探讨了凹叶厚朴种子的休眠原因.结果表明:凹叶厚朴种子的胚已分化完全;内种皮有阻碍种子吸水的作用;外种皮和中种皮以及胚乳存在较多的发芽抑制物质.对凹叶厚朴种子的萌发试验表明,用1 500 mg/L赤霉素(GA3)浸种后低温层积处理是解除休眠、促进萌发的最佳方法,种子发芽率可达72%,比单独低温层积处理提高了17%.

凹叶厚朴不同溶剂提取物对几种植物病原菌的抑制活性

以不同的溶剂和提取方法分别对凹叶厚朴皮和茎进行提取,并对所得提取物进行了5种病原真菌的生长抑制活性测试。结果表明:在供试质量浓度为1 mg/ml的情况下,当采用相同的提取方法和提取溶剂时,凹叶厚朴皮的提取物对所有供试病菌抑菌效果比茎的提取物好;当采用相同的植物部位提取物和提取溶剂时,超声波提取物对所有供试病菌抑菌效果比浸提提取物效果好;而当提取方法和提取部位都一定而改变提取溶剂时,以95%乙醇提取物对所有供试病菌抑菌效果最好,石油醚提取物抑菌活性次之,而10%氢氧化钙提取物、水提取物对所有供试病菌抑制率均比较低。凹叶厚朴皮的提取物作为植物源杀菌剂值得进一步研究。