新生大鼠海马神经元的原代培养方法

目的 介绍一种条件简单 ,生长良好的海马神经元培养方法。方法 急性分离及原代培养海马神经元 ,并用膜片钳全细胞记录方法观察培养好的神经元电生理学特性。结果 培养的神经元胞体清晰 ,晕光明显 ,表达了多种电压门控和化学门控离子通道。结论 本实验方法简单、可靠 。

裸鼹鼠成纤维细胞原代培养方法的建立

目的建立裸鼹鼠成纤维细胞的原代培养方法，研究裸鼹鼠成纤维细胞的生长特性。方法结合传统的消化培养法和组织培养法进行裸鼹鼠和小鼠成纤维细胞原代培养，CCK-8（cell countingkit）细胞计数比较研究两种物种成纤维细胞的生长速率和细胞周期。以不同浓度接种裸鼹鼠肝脏成纤维细胞，CCK-8计数细胞24h、72h、96h、144h细胞密度。结果结合消化培养法和组织培养法两种细胞原代培养方法，裸鼹鼠及小鼠成纤维细胞的生长状态良好。裸鼹鼠成纤维细胞的增殖速率显著高于小鼠成纤维细胞，处于对数生长期的细胞比例与小鼠比较，显著较高。以1．5×10^4／ml以上的浓度接种裸鼹鼠成纤维细胞能使细胞在两天内进入细胞生长对数期。结论结合消化培养法和组织培养法的原代培养方法能提高细胞原代培养的效率，裸鼹鼠成纤维细胞的增殖能力显著高于小鼠。

血管内皮细胞原代培养方法的改良及应用

目的 :建立一种简单易行的大鼠主动脉内皮细胞原代培养的改进方法。方法 :分离出大鼠主动脉 ,将主动脉内膜暴露于外 ,两端折入结扎 ,以胶原酶磁力搅拌消化和细胞刮擦法交替进行 ,每次消化 1 0 min,共消化 3次 ,离心后的沉淀再磁力搅拌消化 2 0 min,将收集的细胞接种在培养瓶中。结果 :细胞在第 3天延展 ,呈短梭形或类三角形。1 0～ 1 4d汇合成单层细胞 ,呈铺路石状 ,经第 8因子相关抗原 ABC法鉴定其为内皮细胞。结论 :用此改良的方法可以更好的培养出血管内皮细胞。

大鼠脑海马神经元原代培养方法的建立及其纯度的鉴定

目的:为建立一种稳定的大鼠胎鼠海马神经元培养方法并能够有效的鉴定其纯度。方法:分离Wista大鼠胚胎并取海马组织,比较两种常用酶,胰酶和木瓜酶消化效果对海马神经元产量的影响及两种不同培养方法对海马神经元纯度的影响。结果:培养的神经元胞体清晰晕光明显,应用两种不同的酶消化对神经元的产量影响无明显统计学意义,而应用无血清方法培养神经元在纯度上要优于应用阿糖胞苷去除神经胶质细胞的培养方法。结论:采用木瓜酶消化并用无血清培养的方法培养大鼠胎鼠海马神经元,稳定可靠,提高了原代神经元培养的产量和纯度。

非人灵长类动物高纯度雪旺细胞原代培养方法

我们采用雌性食蟹猴腓肠神经为模型，目的在于探索一种利用少量周围神经组织在较短时间内获取大量高纯度雪旺细胞（SCs）的方法，为其临床应用奠定基础。本研究旨在探讨非人灵长类动物高纯度SCs原代培养方法。

人气道肉芽组织成纤维细胞的原代培养方法及丝裂霉素对细胞增殖抑制作用初探

近年来，呼吸介入治疗已成为良性气道狭窄的一线疗法。然而单纯介入治疗虽能迅速开通梗阻气道，但同时也会对气道结构造成二次损伤，而损伤修复过程中形成的过量肉芽组织及瘢痕常会使狭窄复发。局部应用丝裂霉素可抑制肉芽组织增生，是治疗瘢痕性狭窄的一种新兴辅助疗法，但其有效性尚存在争议，适宜的给药浓度亦不明确。本试验通过原代培养获得人气道肉芽组织成纤维细胞后，在体外细胞学水平观察了丝裂霉素短时间作用后对细胞增殖的抑制作用，并初步探索其量效关系，以期为临床制订优化的局部用药方案提供实验参考。

附睾上皮细胞体外培养模式综述

附睾上皮细胞培养和永生化方法的确立,对研究生殖系统疾病以及附睾特异表达基因的功能具有重要意义。本文对附睾上皮细胞体外培养模式做简要综述。

胎鼠海马神经元原代培养及转染条件的优化

目的建立一种稳定的大鼠胎鼠海马神经元培养方法并能够有效的鉴定其纯度,探讨用化学转染试剂体外转染大鼠胎鼠海马神经元的最佳转染条件。方法分离Wista大鼠E18d胚胎并取海马组织,无血清培养基培养并做MAP2荧光染色鉴定其纯度。应用lipofectamineTM2000转染试剂盒,大鼠神经元电转试剂盒,lipofectamineTM LTX转染试剂盒,三种不同方法包被质粒转染体外培养海马神经元。转染后观察绿色荧光蛋白的表达情况,并用台盼兰检测细胞的存活率。结果用无血清培养方法培养的海马神经元成活率好,MAP2荧光染色鉴定其纯度高于80%。三种转染方法的转染率lipofectamineTM 2000转染试剂为(14.05±2.32)%,大鼠神经元电转试剂为(52.39±1.68)%,lipofectamineLTX转染试剂为(22.87±5.32)%,其中电转试剂转染这种方法转染率最高。结论电转试剂能有效地转染体外培养的大鼠胎鼠海马神经元,同时保持很好的神经元存活率,是一种比较合适的神经元转染方法。

微血管内皮细胞的原代培养

本期“改良肺微血管内皮细胞原代培养技术及细胞鉴定”参考文献12：时全星，孙新，李娟，等．微血管内皮细胞的原代培养[J]．现代生物医学进展，2010，10（19）：3609—3612．本文利用大鼠肺组织的原代培养方法（组织块贴壁法）获得肺微血管内皮细胞（PMVECs）。作者通过改进组织块培养时间、培养液中血清的浓度以及培养瓶的材质等措施，经光镜和电镜扫描观察细胞形态、Ⅷ因子抗原检测进行细胞鉴定，PMVECs细胞生长速度和纯度都比较高，改良后的组织块培养方法简单、快捷、有效。

SD大鼠体外神经元培养技术的简介

目的:寻求一种简单、廉价的原代SD大鼠神经元原代培养方法。方法:采用胰蛋白酶消化法制备游离神经细胞悬液,进行培养。结果:通过多次探索、观察、成功的进行了原代神经元原代培养。结论:本方法适合一般实验室开展SD新生大鼠神经元细胞的培养。