原位免疫PCR技术及对胃癌神经内分泌分化的研究

原位免疫ＰＣＲ技术是将合成生物素标记的外源性ＤＮＡ片段通过卵白素与生物素标记抗体结合，进行原位ＰＣＲ反应，使外源性ＤＮＡ片段作为放大信号，再应用免疫组化ＡＢＣ法显示信号。本文应用原位免疫ＰＣＲ技术及免疫组化方法对２２例胃癌的嗜铬粒蛋白Ａ（ＣｇＡ）进行观察，结果发现免疫组化ＣｇＡ阳性率为３８．６％，原位免疫ＰＣＲ为８５．７％，证明胃癌中含有神经内分泌细胞是很常见的现象。本文对原位免疫ＰＣＲ技术进行了介绍和讨论。

检测人巨细胞病毒抗原的原位免疫PCR技术

目的 :建立用于诊断HCMV活动性感染的原位免疫PCR方法。方法 :HCMVAD16 9株感染的人胚肺成纤维细胞或先天畸形胎儿肾组织石蜡切片 ,依次加入抗HCMV单抗、生物素化二抗、链霉亲合素以及作为指示元件的生物素化DNA ,随后进行原位PCR扩增 ,经酶显色反应判断结果。结果 :应用本法检测HCMV感染的细胞可于感染后 8h清晰检出阳性信号 ;检测先天畸形胎儿肾组织HCMV感染 ,阳性率显著高于免疫组化法。结论 :本方法具有敏感性高、特异性好及精确组织定位等特点 。

应用原位免疫聚合酶链反应检测活动性巨细胞病毒感染

目的 建立一种新的诊断活动性巨细胞病毒感染的方法。方法 应用原位免疫聚合酶链反应 (PCR)技术检测早、中、晚期孕妇宫颈脱落细胞中巨细胞病毒抗原。结果 119例受检标本中有 16例出现人巨细胞病毒(HCMV)抗原阳性 ,孕早、中、晚期孕妇活动性 HCMV感染率分别为 :9.37%、11.90 %、17.77% ;检出的 HCMV抗原阳性细胞数为 2～ 38/ 5万宫颈脱落细胞 ,平均 8.5 / 5万细胞。常规 ABC法平行检测 ,原位免疫 PCR法检测敏感性高于 ABC法。结论 原位免疫 PCR方法敏感性高、特异性强 ,可检出微量 HCMV抗原 ,为临床诊断活动性

钙结合蛋白S100A13在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的:探索钙结合蛋白S100A13(S100 calcium binding protein A13,S100A13)在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:收集广西医科大学第一附属医院34例HCC及相应癌旁组织、18例正常肝组织标本,商业购置197例肝癌及相应癌旁高密度组织芯片。应用原位RT-PCR技术检测HCC组织、癌旁组织、正常肝组织中S100A13 mRNA的表达,使用免疫组织化学技术检测HCC组织、癌旁组织、正常肝组织中S100A13蛋白的表达,并用Image-ProPlus软件分析免疫组织化学光密度值。结果:S100A13 mRNA在HCC、相应癌旁和正常肝组织中表达的阳性率分别为70.21%、51.06%和33.33%;S100A13 mRNA定位主要在胞核,多表达于核膜。S100A13蛋白在HCC、相应癌旁和正常肝组织中表达的阳性率分别为55.84%、38.96%及26.32%,HCC组织中的平均D值最高(0.038±0.051),其次是癌旁组织(0.022±0.034),正常肝组织(0.01±0.009)最低(P<0.05);S100A13蛋白主要表达于HCC细胞的胞质中,部分细胞核偶见表达,此外在癌旁次生胆小管中及部分炎细胞中也存在高表达。S100A13蛋白在HCC中的表达与患者的性别、年龄及病理分级无关。结论:HCC组织高表达S100A13蛋白,S100A13可能具有作为肝癌治疗靶点的潜力。