用环境扫描电镜原位定量追踪K-PSDS型地聚合物混凝土界面区的水化过程

应用环境扫描电镜(ESEM)原位定量追踪K-PSDS型(KOH激发合成的PSDS型)地聚合物水泥混凝土在相对湿度80％条件下界面区水化产物生成、发展和演化的过程。实验结果表明:界面区和基体区的ESEM形貌在水化早期差别较大,界面区存在许多大的空洞(50μm),而基体区颗粒分布均匀、密实;随龄期的增长,凝胶状产物在界面区空洞周缘淀积,并向外伸展,空洞逐渐被填满、湮没;到后期二者形貌基本没有太大区别,但通过能量散射分析(EDXA)发现界面区n(K)/n(Al)和n(Si)/n(Al)高于基体区,表明K和Si在界面区富集,从而造成胶凝产物化学组成的差异。另外,界面区在任何龄期均未出现尺寸规则的结晶产物,而仅生成了海绵状胶凝体。

用环境扫描电镜原位定量研究K-PS型地聚合物水泥的水化过程

应用环境扫描电镜原位定量追踪K PS型地聚合物水泥在相对湿度 80 %条件下水化产物生成—发展—演化的全过程 .实验结果表明 :在水化早期偏高岭土颗粒松散地堆积在一起 ,存在许多大空隙 ;随龄期的增长 ,生成了大量的海绵状胶体 ,积淀在颗粒表层 ,并向外扩充 ;到后期颗粒被胶体厚厚包裹 ,大空隙被逐渐填满 ,基体变得比较致密 .通过能量散射X射线能谱分析(EDXA)发现随着水化的进行 ,n(K) /n(Al)不断增大 ,而n(Si) /n(Al)逐渐减小 ,水化 4h的n(K) /n(Al) =0 99,n(Si) /n(Al) =1 49.另外 ,在任何龄期均未出现形貌规则的结晶产物 。

原位定量评价组织工程研究中细胞生长状态的新方法

目的探讨一种能原位定量评定细胞在高分子聚合物载体上生长情况的方法。方法采用CFDA-AM和PI双染结合激光扫描共聚焦显微镜技术,用平均荧光强度代表细胞数量,对组织工程骺软骨中骨骺软骨细胞在聚乳酸载体上1、2及3周时的死活细胞数量进行评价。结果骨骺软骨细胞在聚乳酸载体上的530nm的平均荧光强度随时间逐渐增加,而603nm的荧光强度在第2周时有所增加,而到第3周时则无明显增加。与细胞在载体上重量增加的结果一致。结论首次采用的原位定量检测载体上死活细胞的方法是可行的,解决了在不透明载体上即不影响细胞和载体结构,而可以原位快速定量评定细胞生长的难题。

原位定量检测体外培养的尿道黏膜上皮细胞活性

目的解决在不透明载体上观察细胞生长状况的难题。方法取雄性新西兰幼兔1只,进行尿道黏膜上皮细胞的原代培养并传至第3代。将其接种于胶原-壳聚糖复合材料上,体外培养3、7、14和21d后,行6-羧基二乙酸甲酯荧光素与碘化丙啶荧光双染,并应用激光共聚焦细胞仪检测。结果尿道黏膜上皮细胞在胶原-壳聚糖复合材料载体上生长,增殖良好。培养3、7d,活细胞荧光强度值为(1.09±0.13)×108、(2.04±0.13)×108,培养14、21d活细胞荧光强度值分别为(0.55±0.09)×108、(0.47±0.03)×108,与培养3、7d比较差异均有统计学意义(P<0.05)。各时间点死细胞荧光强度值差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用激光共聚焦细胞仪对不同波长荧光强度分别进行定量分析,可以在原位定量快速检测尿道黏膜上皮细胞活性,动态观察组织工程组织生长情况,解决无法在不透明载体上观察细胞生长状况的难题。

利用拉曼光谱原位定量检测技术筛选红酵母类胡萝卜素高产突变株

建立了一种利用显微拉曼光谱原位定量技术筛选平板培养基上类胡萝卜素高产突变株的方法。为了消除培养基背景信号对定量结果的影响,采用矢量校正算法对光谱数据进行预处理,得到了不含培养基干扰的菌落净信号。比较了不同光谱收集方式对光谱重现性的影响,发现扫描方式较定点检测能获得重现性更好的菌落净信号。利用共焦显微拉曼光谱分析了平板培养基上红酵母菌落中的类胡萝卜素,并用光镊拉曼光谱法进行验证,两种方法所得类胡萝卜素1512cm-1拉曼峰值呈现良好的线性关系,说明了共焦显微拉曼光谱定量检测平板培养基上菌落内类胡萝卜素的可行性。用该方法对红酵母诱变菌进行筛选,筛选出两株类胡萝卜素高产菌株。研究结果表明该菌种筛选方法比传统方法更客观、高效。

原位定量检测磷酸化蛋白质的Duolink PQ技术

很多蛋白质功能的变化往往要借助于特定位置和一定数目的磷酸化变化,因此原位和定量检测将是磷酸化蛋白质分析发展的新方向。一种可原位定量检测磷酸化蛋白质的新技术——Duolink PQ在国内还被了解得很少。本文从原理、方法及应用三个方面对其进行了介绍,并进而对现有磷酸化蛋白质检测的主要技术进行了简要评价。

定量荧光原位杂交测定端粒长度

目的:应用定量荧光原位杂交(Q-FISH)方法测定端粒长度。方法:选取4种端粒长度均一的标准细胞株采用Q-FISH的方法做出荧光亮度与端粒长度的标准曲线,从而得出实验细胞株的端粒长度,与DNA印迹法测定末端限制性片段(TRF)长度进行二者之间的相关性分析。结果:检测荧光强度的最佳线性曝光时间为400ms,相对于DNA印迹法,定量荧光原位杂交(Q-FISH)法所需标本量少,实验周期短,端粒长度结果与Southern杂交法具有很好的相关性。结论:采用定量荧光原位杂交方法测端粒长度具有重复性好、精确可靠的特点,适用于对珍贵标本的端粒改变进行分析。

运用原位末端标记和ICM—DNA定量检测重型肝炎中Ⅲ型细胞死亡

目的 探索Ⅲ型细胞死亡在重型肝炎中生物学特性和形态学特征及其发病中的意义。 方法用ICM-末端标记(ISEL)、ICM-DNA定量并结合形态学方法,观察17例重型肝炎中细胞死亡。 结果 ①Ⅲ型细胞的ISEL标记阳性,在急性和亚急性重型肝炎中的阳性率为(15±7)个/hpf,高于I型细胞的(5±3)个/hpr(P<0.05),而且无核周空晕,无凋亡小体形成,多分布于大片或亚大片坏死区和坏死边缘区,形态上与Ⅱ型细胞有过渡。②原位DNA定量I型、Ⅲ型细胞中亚2C细胞的百分率分别65％和46％,高于残存肝细胞的11％,(P<0.01～0.05),I型和Ⅱ型细胞中的亚2C分别为65％和29％,也存在差异(P<0.05);I型和Ⅲ型细胞核面积分别为22.09和25.11μm^2,均低于残存肝细胞的59.91μm^2(P<0.05)。③光镜下形态学观察表明:Ⅲ型细胞核染色质边聚,细胞体积缩小等有I型细胞特征,胞浆丰富,胞膜边界不清,又有Ⅱ型细胞特征。结论 Ⅲ型细胞死亡与凋亡和坏死相关,是在重型肝炎坏死区中出现的一种特殊类型的细胞死亡。

深海高温热液喷口流体原位拉曼定量探测获新突破

[本刊讯]中国科学院海洋大科学研究中心阎军团队、李超伦团队在深海热液系统原位拉曼光谱定量探测研究中获得进展,基于自主研发的深海原位激光拉曼光谱探测系统（Raman insertion probe,RiP）对冲绳海槽中部热液区的高温热液流体进行了原位拉曼光谱定量探测,在国际上首次获得高温热液流体中溶解二氧化碳及硫酸根离子的原位浓度。

ESEM追踪K-PSDS型地聚合物水泥的水化

应用环境扫描电镜原位定量追踪K PSDS型地聚合物水泥在相对湿度80%条件下水化产物生成—发展—演化的全过程.结果表明:在水化早期,偏高岭土颗粒松散地堆积在一起,存在许多大空隙;随着龄期的增长,生成的大量海绵状胶体积淀在颗粒表层,并向外扩充;到了后期,颗粒被胶体厚厚包裹,空隙被填满,基体变得非常致密.通过能量散射分析(EDXA)发现,随着水化的进行,K2O与Al2O3,SiO2与Al2O3的摩尔比逐渐减小,最终产物的这两个比值分别为1.28,6.54,接近理论值.另外,在任何龄期均未出现外形规则的结晶产物,而仅生成了一种均匀的海绵状胶体.

矿物——成矿与找矿

单颗粒矿物微量元素激光原位定量分析测试数据的大量积累和研究,使矿物成为矿床地球化学研究和矿床勘查的重要示踪剂。本文重点选择磁铁矿、磷灰石、石榴子石、榍石、锆石、绿泥石和绿帘石等的原位分析研究所获得的认识,介绍单颗粒矿物成分组合及变化在矿床类型划分、成矿年龄测定、氧逸度、成矿过程与物质来源、找矿与勘探等方面的应用。不同矿床类型中普遍存在的矿物,如磁铁矿、磷灰石等的微量元素含量及组合差异,提供了矿床类型识别的标志。单颗粒矿物,特别是矿石矿物和密切共生矿物如锡石、铌钽铁矿、赤铁矿、石榴子石、方解石等的原位定年,使成矿年龄的直接准确测定成为现实。矿物中变价元素,如Fe、V、Mn、Ce、Eu含量和/或比值的变化,指示了成矿过程氧逸度及其变化特点。从矿物核部向震荡环带与边部的微量元素含量或同位素组成的变化,示踪了成矿过程中流体来源或性质的变化。斑岩和矽卡岩矿床中与成矿作用关系密切的蚀变矿物,如绿泥石、绿帘石的形成温度、特征微量元素比值,如Ti/Sr、Ti/Co、V/Ni、Mg/Sr等,与距矿床中心距离呈线性函数关系,可定量预测距矿床中心的距离,使以绿泥石、绿帘石为代表的找矿指示矿物研究迅速发展。

同位素稀释-激光剥蚀-电感耦合等离子体质谱法测定生物组织样品中铁元素的含量

针对目前采用同位素稀释-激光剥蚀-电感耦合等离子体质谱(ID-LA-ICP-MS)对固体生物组织切片样品难以实现原位准确定量的难题,本研究将同位素稀释法与LA-ICP-MS技术相结合,通过开展生物组织样品与浓缩稀释剂的同位素充分交换平衡、稀释剂添加方式、原位的同位素比测量等关键技术研究,确定了组织切片与同位素稀释剂的最佳平衡时间、稀释剂的质量以及选用甲醇作为稀释剂溶剂等实验条件,建立了基于同位素稀释技术的LA-ICP-MS技术在生物样品组织切片中Fe元素的微区定量分析方法,并采用实验室自行制备的均匀的山羊脑和牛肝组织切片标准样品对方法进行了验证,通过ID-LA-ICP-MS方法的测量结果与微波消解-同位素稀释方法的测量结果相一致,验证了该方法的有效性和可靠性。本方法可进一步应用于临床中生物组织切片样品中金属元素的原位、微区定量测量及成像分析。

我国科学家实现细胞内蛋白质静电相互作用的直接测量

大多数蛋白质在细胞中执行它们的功能,而复杂的细胞环境可以影响蛋白质的静电相互作用,从而对蛋白质执行其功能造成影响,但影响可达到何种程度尚不清楚。以往研究都是针对水溶液中的蛋白质静电相互作用进行测量的,近期,我国科学家实现了在细胞内原位定量测量蛋白质静电相互作用,研究结果发表在《Journal of the American Chemical Society》期刊,标题为:“Quantifying Protein Electrostatic Interactions in Cells by Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy”。

复杂过程光谱数据分析的化学计量学方法研究进展

使用光谱仪器对复杂化学体系进行原位实时光谱定量分析时,测试条件(如温度)通常无法控制,而且对被测样本不能进行任何预处理。从复杂的原位实时光谱数据中提取出有用的化学信息对分析化学家来说是一项极具挑战性的任务。本文综述了近些年针对原位实时光谱数据的定量分析而发展的一些化学计量学模型与方法,并给出了一些方法的具体算法。

基于受体捕获的人源诺如病毒检测方法的优化及应用

在原位捕获反转录实时定量PCR法(In situ capture real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,ISC-RT-qPCR)建立的基础上,本研究旨在优化该新型感染性HuNoVs的检测方法,并将其应用于市售贝类样品中HuNoVs的检测。本研究以2份HuNoVs临床腹泻样本3010(GI组)和3009(GII组)对ISC-RT-qPCR中猪胃粘膜提取物(porcine gastric mucin,PGM)包被浓度、待测样本孵育时间和孵育pH进行了优化;最后,对随机采集的40份市售贝类样品(文蛤、花蛤、海蛏、扇贝和鲍鱼)进行感染性HuNoVs的检测。结果表明,ISC-RT-qPCR最佳试验参数分别为:PGM包被浓度为1.0 mg/mL、待测样本孵育时间为30min、孵育pH(GI组,pH=3.0;GII组,pH=7.0);40份市售贝类样品中,贝类中HuNoVs总检出率为22.5%,多重检出率为5.0%,GI组和GII组HuNoVs的检出率分别为17.5%和10.0%;其中,市售文蛤的GI组和GII组HuNoVs检出率均为最高。因此,ISC-RT-qPCR是一种可用于市售贝类样品中感染性HuNoVs的检测方法,为食品中HuNoVs的检测与监测提供了新选择。

外周血白细胞特定染色体相对端粒长度的测定

目的:建立一套以相对长度为单位的测量人类单个染色体端粒长度的标准,测定正常人特定染色体长臂和短臂末端上的端粒长度。方法:采用荧光原位杂交定量法(Q-FISH)测定所有单个染色体端粒的信号强度,并转化为相对端粒长度(relative telomere length,RTL)进行比较。结果:对20例正常人外周血白细胞每条染色体上RTL值的测定显示,不同染色体臂上的端粒长度呈非随机分布并差异有统计学意义(F=8.923,P<0.01),其中2q、16p、17p、17q、19p、20q、22q、Yq的端粒最短(P<0.05),而3p、5p、Xp和Yp的端粒最长(P<0.05)。结论:用Q-FISH测定单个染色体RTL的方法易标准化,便于推广;正常人外周血白细胞中46条不同染色体上的端粒长度呈现特定的分布模式。

莫来石晶须前驱体含量对原位生长莫来石/刚玉轻质耐火材料性能的影响

将铝矾土和高岭土天然矿物原料作为主体原料引入到莫来石晶须前驱体和烧结坯料配方中,采用莫来石晶须前驱体原位制备莫来石-刚玉轻质耐火材料。利用XRD,SEM以及相应的EDS等手段对莫来石-刚玉质耐火材料进行表征分析,研究莫来石晶须前驱体与莫来石烧结体的质量比对莫来石/刚玉质耐火材料性能和微观结构的影响。结果表明:当莫来石晶须前驱体与烧结体质量比为50:50时,样品的抗折强度达到最大值55.9MPa,并且其第一热应力断裂抵抗因子达到最大值54.4。

妊高征患者胎盘绒毛5-羟色胺及其受体的定位定量研究

据《中华妇产科杂志》1997年8月32卷第8期报道 为探讨胎盘5-羟色胺(5-HT)及其受体的含量与妊高征发病的关系。解放军空军总医院妇产科任东平等,应用免疫组织化学法和原位定量分析法,对15例妊高征患者(PIH组)和5例正常分娩的妇女(对照组)胎盘绒毛的5-HT及其受体进行检测。结果:对照组胎盘绒毛合体滋养层细胞及毛细血管内皮细胞的5-HT及5-HT受体反应呈强阳性,妊高征组的胎盘绒毛合体滋养层细胞及毛细血管内皮细胞的5-HT及5-HT受体呈免疫反应弱阳性或阴性。原位定量分析结果显示,对照组胎盘绒毛合体滋养层细胞单位面积的5-HT及5-HT受体相对含量均高于妊高征组,两组比较,差异有极显著性(P【0.001)。结论:胎盘绒毛的5-HT及其受体的含量与妊高征的发病机理可能有密切关系。

基于受体捕获诺如病毒检测方法的特异性及应用

目的评价新型感染性诺如病毒检测方法原位捕获反转录实时定量PCR（In situ capture realtime quantitative reversetranscription polymerase chain reaction，ISC-RT-qPCR）的特异性，并将其应用于新鲜草莓中诺如病毒的检测。方法以诺如病毒GⅡ组不同基因型和不同浓度的临床粪便标本评价ISC-RT-qPCR方法的特异性。此外，利用ISC-RT-qPCR方法对以GⅡ组诺如病毒人工污染新鲜草莓样本进行检测。结果ISC-RT-qPCR可特异性检测所有GⅡ诺如病毒8种基因型临床腹泻样本；与传统RT-qPCR相比，检测的Ct值并未随着诺如病毒滴度的降低而升高。人工污染新鲜草莓的ISC-RT-qPCR检测限为1.36基因组拷贝数。结论ISC-RT-qPCR是一种可用于临床腹泻样本和草莓中GⅡ组感染性诺如病毒的检测方法，为食品中诺如病毒的检测与监测提供了技术储备。