应用原位引物标记技术快速检测人类13、18、21号染色体

为发展新的快速产前诊断染色体非整倍体的方法，我们利用已发表的染色体α-卫星序列，设计特异性引物，应用原位引物标记技术检测了13、18、21号染色体。研究结果显示这是一种快速，简捷的染色体数目检测方法，蛋白酶消化处理可提高标记信号强度，准确掌握退火温度是保证标记信号特异性的关键，如何在原位标记过程中保持良好的染色体形态则有待于进一步改进实验方法。

应用引物原位标记技术检测21号染色体

应用原位引物标记技术 (PRINS)检测了 2 1号染色体着丝粒 ,在外周血和绒毛细胞的标记效率分别为91%和 93%,实验过程可以在 2 h之内完成 ,证明这一检测方法是一种快速、灵敏、特异性良好的染色体数目检测方法 ,有可能用于 2

引物原位标记技术快速诊断精子染色体非整倍性

目的:探索应用引物原位标记技术分析精子染色体非整倍性的可靠性。方法:采用3mol/LNaOH溶液对精子标本进行快速而有效的预处理,此步骤能够对精子细胞核同时进行去浓缩和变性,分析正常男性的8份精液标本的17条染色体和性染色体的非整倍性。结果:二体频率为0.28%至0.36%,染色体间在二体频率上无显著差异,但是21号染色体的不分离频率比其它染色体要高。结论:引物原位标记技术是一种简便、快速、经济的精子染色体非整倍性分析方法,具有较强的敏感性和特异性。

应用快速引物原位标记技术检测鼻咽癌染色体异常

背景与目的:鼻咽癌细胞染色体畸变常见,但目前的检测方法较复杂,临床实际应用价值不大,本研究的目的是探讨快速引物原位标记技术检测鼻咽癌染色体异常的可行性。方法:采用快速引物原位标记技术,分别以人3号和7号染色体特异性寡核苷酸作引物,检测15例鼻咽癌组织和5例鼻咽正常组织冰冻切片细胞染色体,染色体异常标准以标记信号≤1的细胞所占比率≥65%时视为染色体丢失,标记信号≥3的细胞所占比率≥6.5%作为染色体拷贝数增加。结果:鼻咽癌组织细胞3号染色体标记率为88.6%,10例(66.7%)染色体拷贝数增加;7号染色体标记率87.4%,5例(33.3%)染色体丢失;其中4例同时存在3号染色体拷贝数增加和7号染色体丢失。正常组织3号和7号染色体标记率分别为92.0%和91.8%,二倍体细胞分别为43.2%和43.6%,与鼻咽癌比较差异均有统计学意义(P<0.05),未发现三倍体细胞。结论:快速引物原位标记技术可用于鼻咽癌冰冻组织切片中染色体的检测,染色体数目的改变可作为鼻咽癌诊断的重要参考指标。

引物原位标记技术在鼻咽组织印片中的应用

目的:探讨引物原位标记技术应用于鼻咽组织印片中的可行性。方法:以鼻咽非癌组织和鼻咽癌组织印片为研究材料,外周血正常淋巴细胞分裂中期染色体作对照,采用7号染色体特异性引物和引物介导原位DNA合成技术检测鼻咽印片组织细胞染色体数目。结果:6例鼻咽印片组织细胞7号染色体都获得特异性标记,3例正常组织的标记率为99.0%,二倍体细胞达94.0%;3例鼻咽癌细胞标记率为97.7%,二倍体细胞只有70.7%,二者差异显著(P<0.05)。结论:引物原位标记技术可用于组织印片中染色体的检测,初步研究结果提示7号染色体数目的改变可作为判断鼻咽恶性肿瘤的重要参考指标。

引物原位标记合并荧光原位杂交技术在人类中期染色体分析中的应用

[目的]建立检测人类外周血淋巴细胞中期染色体的引物原位标记合并荧光原位杂交技术,并进行其在产前诊断中的可行性分析。[方法]采用单色引物原位标记合并单色荧光原位杂交技术同时对正常人外周血淋巴细胞18号染色体的着丝粒α-卫星序列和21号染色体长臂的单拷贝序列进行双色标记。[结果]成功地在淋巴细胞培养的中期分裂相上同时获得了18号和21号染色体的标记,其中18号标记为绿色信号,21号标记为橙红色信号,标记率分别达96.2%和93.6%,双标记率达到91.3%。[结论]应用该技术对人类外周血淋巴细胞染色体进行标记结合了引物原位标记和荧光原位杂交技术各自的优点,增加了检测靶点的多样性,为其在产前诊断中的应用奠定了基础。

应用引物原位标记技术快速诊断唐氏综合征

目的 探索快速诊断唐氏综合征的方法。方法 应用 2 1号染色体特异的寡核苷酸引物对 12份外周血淋巴细胞培养标本进行了引物原位标记反应。结果 4例唐氏综合征患儿标本中 ,中期分裂相 2 1号染色体标记率平均为 99% ,平均 93%的间期细胞核显示 3个标记信号。 8例习惯性流产夫妇的标本中 ,中期分裂相 2 1号染色体标记率平均为 98% ,平均 91%的间期细胞核显示 2个信号。荧光信号清晰明亮 ,整个反应在 4～ 5小时内完成。结论 应用引物原位标记技术可快速准确检测 2 1号染色体数目异常 ,诊断唐氏综合征。

引物原位标记法产前诊断18号染色体数目异常

目的 探讨引物原位标记法 (PRINS)结合经腹脐血穿刺 ,应用于脐血中期细胞快速产前诊断 18号染色体数目异常的可行性。方法 B超监护下经腹采集胎儿脐血共 16例 ,外周血 3 4例 ,应用 18号染色体特异性引物 ,标记分裂中期细胞 18号染色体 ,PRINS结果与中期细胞染色体G带分析结果进行比较。结果 16例脐血中 ,PRINS检测 2例为 18三体 ,3 4例外周血中 ,1例为 18三体 ,与染色体核型分析一致。结论 PRINS是一种简便、快速、可靠的产前诊断染色体数目异常的临床检测方法 。

引物原位标记技术的建立

为了快速检测特异性染色体,采用引物原位标记和细胞化学技术,以7号,17号,X和Y染色体特异性寡核苷酸作引物,对外周血淋巴细胞分裂中期染色体和间期核进行定位研究。结果显示,上述4种染色体均得到特异性标记,且信号强,清晰,无背景着色。结论表明,在与染色体有关的许多研究中该法可替代原位杂交,结合其最近在组织病理学中的应用研究,提示该技术有可能成为分子病理学研究和细胞基因快速诊断的有价值的工具。

引物原位标记技术及其应用

本文综述了近几年来引物原位标记技术的发展和应用，并以检测猪染色体端位序列为例，介绍了这项技术的基本原理和实验程序。现已表明，引物原位标记技术不仅可以应用于检测染色体（包括多线染色体）特定的ＤＮＡ序列，而且可以应用于在细胞和组织切片上检测特定的ＲＮＡ序列。

应用引物原位标记技术快速诊断先天愚型

目的 :为发展快速诊断先天愚型的方法 ,方法 :利用 2 1号染色体α -卫星序列 ,设计特异性引物直接在分裂间期和中期细胞上作引物原位标记。结果 :先天愚型三体型间期细胞核中和中期染色体上观察到 3个标记信号。正常对照组为2个标记信号 ,平均标记效率分别分 90 .8%、91.3%。先天愚型嵌合型显示 2个和 3个标记信号 ,并且各占一定的比例。结论 :引物原位标记技术可直接在淋巴细胞间期核中进行 ,4～ 5h内能对先天愚型患者作出快速、准确的诊断。

引物原位标记技术快速检测21号染色体

目的 探索快速检测21号染色体的方法。方法 对8例外周血淋巴细胞培养标本分别进行引物原位标记反应和常规细胞遗传学分析。结果 中期分裂相21号染色体标记率平均为98％(97％～100％);平均91％(89％～95％)的间期细胞核显示2个信号。荧光信号清晰明亮,引物原位标记反应在4～5h内完成。其结果与常规G显带结果一致。结论 引物原位标记技术检测外周血标本中21号染色体特异性强,标记效率高,可作为产前快速诊断异倍体的新方法。

染色体上引物原位标记（PRINS）技术及其应用的新发展

本文详细介绍了染色体上引物原位标记（ＰＲＩＮＳ）技术的新发展．其中包括随机引物原位标记技术、重复ＰＲＩＮＳ技术、多色ＰＲＩＮＳ技术和快速ＰＲＩＮＳ技术．并对ＰＲＩＮＳ技术在研究杂色体结构、畸变、检测核酸顺序和基因定位等方面的应用作了介绍．

人类中期染色体引物原位延伸标记的研究

染色体上引物原位延伸标记在研究染色体结构和基因定位等方面具有重要意义。分别应用随机引物和SOX基因兼并引物在人类染色体上进行了原位延伸标记。结果表明，随机引物延伸在染色体上呈现明暗相间的带纹样特征。SOX基因兼并引物延伸发现了更多的SOX基因位座，并进一步证实该家族基因在基因组中是散在存在的。

引物原位地高辛标记在绒毛细胞中快速检测Y染色体专性序列

本文报道了以人绒毛细胞为材料，利用人类Y染色体特异片段的一对扩增引物Y_3和Y_4，以地高辛（Digoxigenin）为标记物，在玻片上进行细胞内引物原位延伸标记，进而快速检测Y染色体专性序列的实验结果。

引物原位标记技术快速检测人类染色体非整倍性

染色体数目异常是人类染色体疾病的重要类型,经常导致胚胎丢失、胎儿流产、婴儿死亡、先天畸形和神经发育异常等出生缺陷。文章应用引物原位标记(Primed in situ labeling,PRINS)技术快速检测人类染色体非整倍性,率先采用更新的非ddNTP阻断的多色PRINS技术,对人类外周血淋巴细胞和精子等多种样本进行标记;然后对不同靶标序列的标记效率及不同荧光色素的发光特点通过实验进行评估,获得关于PRINS技术的多项反应原理参数,并筛选标记顺序以获得均一稳定的标记效果,最后进行临床FISH探针与PRINS的标记比较实验。通过实验比较PRINS技术与传统FISH技术之间的标记特点与差别,评估PRINS的实际应用效果。在2.5h内标记了同一精子核内的多条染色体,单色以上标记达到99%。同时在人类外周血淋巴细胞中也得到较好的标记效果。与FISH技术相比,PRINS的这些优点使得它成为诊断染色体非整倍性变异的首选技术。

应用快速引物原位标记技术检测鼻咽癌染色体异常(英文)

目的探讨快速引物原位标记技术检测鼻咽癌染色体异常的可行性。方法采用快速引物原位标记技术,分别以人3号和7号染色体特异性寡核苷酸作引物,检测15例鼻咽癌和5例鼻咽正常冰冻组织切片细胞染色体,染色体异常标准以标记信号≤1的细胞比例≥65%时视为染色体丢失,标记信号≥3的细胞比例≥6.5% 作为染色体拷贝数增加。结果鼻咽癌组织细胞3号染色体标记率为88.6%,10例(66.7%)染色体拷贝数增加;7号染色体标记率87.4%,5例(33.3%)染色体丢失;其中4例同时存在3号染色体拷贝数增加和7号染色体丢失。正常组织3号和7号染色体标记率分别为92%和91.8%,二倍体细胞分别为43.2%和43.6%,与鼻咽癌比较差异均有统计学意义(P<0.05),未发现三体细胞。结论快速引物原位标记技术可用于鼻咽癌冰冻组织切片中染色体的检测,染色体数目的改变可能有助于鼻咽癌的诊断。

引物原位标记技术及其在产前诊断中的应用

引物原位标记(PR IN S)是一种新的细胞遗传学方法,因该法能提供快速、准确及高效的结果,正作为荧光原位杂交的替代或补充方法在产前诊断中加以应用。现对引物原位标记技术及在人类染色体疾病研究、产前诊断中的应用作一综述。