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粗穗披碱草1H^(t)S染色体特异荧光原位杂交标记开发
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作者 宫文萍 汪晓璐 +6 位作者 王开 韩冉 祁广 徐文竞 曾小雪 郭军 刘成 《山东农业科学》 北大核心 2024年第7期16-22,共7页
小麦-粗穗披碱草1H^(t)S.1BL罗伯逊易位系高抗小麦条锈病和叶锈病,是小麦遗传改良的优异基因源。我们前期利用中国春ph1b基因突变体对该易位系进行诱导,获得了一批诱导后代材料,为了从中准确鉴定小麦-粗穗披碱草1H^(t)S小片段易位系,需... 小麦-粗穗披碱草1H^(t)S.1BL罗伯逊易位系高抗小麦条锈病和叶锈病,是小麦遗传改良的优异基因源。我们前期利用中国春ph1b基因突变体对该易位系进行诱导,获得了一批诱导后代材料,为了从中准确鉴定小麦-粗穗披碱草1H^(t)S小片段易位系,需要建立能够覆盖粗穗披碱草1H^(t)S染色体的荧光原位杂交(FISH)标记。本研究利用21个小麦及其近缘种探针、61个基于中国春基因组序列新开发的小麦1BS染色体探针以及40个根据简单三碱基重复序列新开发的探针对小麦-粗穗披碱草1H^(t)S.1BL易位系进行非变性FISH分析。结果显示,B74、B76和B77等36个探针(33个为新开发的)在1H^(t)S染色体上具有杂交信号,并且杂交信号可分为仅在染色体末端、仅在着丝粒处、同时在着丝粒处和近着丝粒处、覆盖1H^(t)S约3/4染色体臂、覆盖绝大部分1H^(t)S共五种类型。因此,部分探针单独使用或多个探针联合使用,其信号能覆盖1H^(t)S染色体,能够满足小麦-粗穗披碱草1H^(t)S小片段易位系鉴定,这可为小麦背景中粗穗披碱草染色质追踪提供新的检测手段。 展开更多
关键词 粗穗披碱草 1H^(t)S染色体 探针 荧光原位杂交标记
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引物原位标记合并荧光原位杂交技术在人类中期染色体分析中的应用 被引量:3
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作者 魏萍 丁显平 聂涌 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第10期1891-1893,共3页
[目的]建立检测人类外周血淋巴细胞中期染色体的引物原位标记合并荧光原位杂交技术,并进行其在产前诊断中的可行性分析。[方法]采用单色引物原位标记合并单色荧光原位杂交技术同时对正常人外周血淋巴细胞18号染色体的着丝粒α-卫星序列... [目的]建立检测人类外周血淋巴细胞中期染色体的引物原位标记合并荧光原位杂交技术,并进行其在产前诊断中的可行性分析。[方法]采用单色引物原位标记合并单色荧光原位杂交技术同时对正常人外周血淋巴细胞18号染色体的着丝粒α-卫星序列和21号染色体长臂的单拷贝序列进行双色标记。[结果]成功地在淋巴细胞培养的中期分裂相上同时获得了18号和21号染色体的标记,其中18号标记为绿色信号,21号标记为橙红色信号,标记率分别达96.2%和93.6%,双标记率达到91.3%。[结论]应用该技术对人类外周血淋巴细胞染色体进行标记结合了引物原位标记和荧光原位杂交技术各自的优点,增加了检测靶点的多样性,为其在产前诊断中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 引物原位标记合并荧光原位杂交 外周血 中期相 染色体
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原位荧光标定硝基化合物
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作者 刘云 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期11-14,共4页
介绍了用原位荧光标记法测定硝基化合物2,4-二氯苯基-4'-硝基苯基醚,O,O-二甲基-O-(3-甲基-4-硝基苯基)硫逐硫酸酯,O-乙基-O-异丙胺基-O-(对甲邻硝基苯基)硫逐磷酸酯,O,O-二甲基-O-(对硝基... 介绍了用原位荧光标记法测定硝基化合物2,4-二氯苯基-4'-硝基苯基醚,O,O-二甲基-O-(3-甲基-4-硝基苯基)硫逐硫酸酯,O-乙基-O-异丙胺基-O-(对甲邻硝基苯基)硫逐磷酸酯,O,O-二甲基-O-(对硝基苯基)硫逐磷酸酯的方法,并报告了上述硝基化合物丹酰荧光衍生物的荧光性能。 展开更多
关键词 原位荧光标记 硝基化合物 丹酰荧光衍生物
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荧光定量PCR和FISH技术诊断肺结核的价值比较 被引量:4
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作者 温韵洁 刘丽军 +2 位作者 罗伟权 林斌 邓永键 《现代医院》 2014年第11期85-87,共3页
目的比较荧光定量PCR和FISH技术对肺结核诊断的敏感性和特异性。方法共收集300例明确诊断为肺结核的患者作为阳性对照组,以及收集300例健康志愿者(明确排除肺结核患者)做为阴性对照组。收集800例新收临床疑似肺结核患者做为研究组。收集... 目的比较荧光定量PCR和FISH技术对肺结核诊断的敏感性和特异性。方法共收集300例明确诊断为肺结核的患者作为阳性对照组,以及收集300例健康志愿者(明确排除肺结核患者)做为阴性对照组。收集800例新收临床疑似肺结核患者做为研究组。收集该800例患者的肺活检标本以及同期的痰液标本,其中痰液进行涂片、结核杆菌分离培养以及结核杆菌DNA荧光定量PCR检测和FISH检测。比较荧光定量PCR和FISH技术对肺结核诊断阳性符合率和阴性符合率。结果 1FISH技术检测结核杆菌阳性符合率为99.3%;荧光定量PCR检测结核杆菌阳性符合率为97.3%。两者阳性符合率存在统计学差别(p=0.015)。2FISH技术检测结核杆菌阴性符合率为98.2%,荧光定量PCR技术检测结核杆菌阴性符合率为96.9%。两者阴性符合率存在统计学差别(p=0.007)。结论与荧光定量PCR比较,FISH对肺结核诊断具有较高的阳性符合率和阴性符合率。 展开更多
关键词 肺结核 荧光定量PCR 荧光标记原位杂交技术
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端粒DNA长度检测方法 被引量:3
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作者 葛璐璐 陈晓晖 +1 位作者 刘超 王穗保 《中国法医学杂志》 CSCD 2002年第5期314-316,共3页
端粒(Telomeres)位于染色体末端,由高度重复的DM序列(人类为TTAGGG)和结合蛋白所构成,保护染色体免遭熔合、重组和降解.
关键词 端粒 DNA长度 检测方法 荧光标记原位杂交 年龄鉴定 法医学
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活性氧在脊髓损伤中的作用及损伤机制 被引量:2
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作者 陈光学 李兴国 +5 位作者 边立功 邹智荣 李守民 王廷华 孙俊 陆地 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期13-17,共5页
目的研究脊髓损伤(SCI)后脊髓组织中丙二醛(MDA)的动态水平变化和神经细胞凋亡及其凋亡相关因子表达的变化,探讨活性氧(ROS)在SCI后的作用及其分子机制。方法成年雄性大鼠132只,用改良的Allen法复制大鼠急性SCI模型,致大鼠脊髓(T10)中... 目的研究脊髓损伤(SCI)后脊髓组织中丙二醛(MDA)的动态水平变化和神经细胞凋亡及其凋亡相关因子表达的变化,探讨活性氧(ROS)在SCI后的作用及其分子机制。方法成年雄性大鼠132只,用改良的Allen法复制大鼠急性SCI模型,致大鼠脊髓(T10)中度挫伤,采用化学比色法测定不同时间段受损脊髓组织的MDA含量;免疫组织化学法分析受损脊髓组织区域凋亡相关因子Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达变化;荧光原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果SCI后6h,脊髓组织中MDA含量明显增高并维持到损伤后5d,期间在6h和3d出现两次高峰,7d基本恢复正常;SCI后6h脊髓组织中凋亡细胞开始增多,3d达高峰,以后逐渐减少,各时间点与假手术组比较有显著性的差异;Bcl-2和Bax蛋白损伤后6h开始有较多的表达,以后快速增多,5d达高峰,然后逐渐回落。Caspase-3蛋白在损伤后6h开始增多,3d达高峰,以后逐渐减少。3种凋亡相关因子在各时间点与假手术组比较有显著性差异;甲基强的松龙(MPSS)治疗组与SCI组比较:MDA含量、凋亡细胞数、凋亡因子Caspase-3和Bax表达减少,Bcl-2表达增加,并且在部分时间点有显著性差异。结论在SCI后ROS可能通过促进Caspase-3表达和降低Bcl-2/Bax之间的比值诱导神经细胞凋亡,从而加重了SCI继发性损伤。 展开更多
关键词 脊髓损伤 活性氧 凋亡蛋白 化学比色法 荧光原位缺口末端标记 免疫组织化学 大鼠
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Comparative Physical Localization of Rice Pib Gene and Its Linked RFLP Markers in Oryza sativa, O. officinalis and Zea mays 被引量:3
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作者 李霞 宁顺斌 +1 位作者 金危危 宋运淳 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第1期49-54,共6页
Comparative genetic studies have shown that there are widespread synteny and colinearity of the genes among different species within grass family. Rice ( Oryza sativa L.) is a model plant, and analysis of its genome a... Comparative genetic studies have shown that there are widespread synteny and colinearity of the genes among different species within grass family. Rice ( Oryza sativa L.) is a model plant, and analysis of its genome allows us to reveal the common features and the evolutionary rules of the gramineous genomes and accumulate the data for establishment of a common genetic system in the Poaceae. In this study, a rice gene Pib ( 10.3 kb), a map-based cloned gene, and RFLP markers linked with it are used as the tested probes to investigate their homology and physical location among the tested species. Southern blotting analysis showed that there were sequences homologous to Pib in maize genome. Further, Pib was localized onto the chromosomes of O. sativa ssp. indica cv. Guangluai 4, O. officinalis Wall ex Watt and the inbred line of Zea mays cv. Huangzao 4. The results of fluorescence in situ hybridization (FISH) and double-color FISH indicated that a synteny of Pib and RFLP markers linked with Pib existed among the genomes of the three tested species. 展开更多
关键词 RICE RFLP markers double-color FISH PIB comparative physical mapping
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分子生物学技术在临床常见病原微生物快速检测中应用研究进展 被引量:2
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作者 吉永 胡大春 《医学综述》 2009年第11期1608-1612,共5页
近年来,随着现代生物技术的快速发展,建立在分子生物学基础上的快速检测病原微生物技术得到了迅速的发展。基于核酸杂交的方法、聚合酶链反应(PCR)、生物传感技术这三大类快速检测病原微生物的新技术被广泛应用于微生物检测,使得疾病... 近年来,随着现代生物技术的快速发展,建立在分子生物学基础上的快速检测病原微生物技术得到了迅速的发展。基于核酸杂交的方法、聚合酶链反应(PCR)、生物传感技术这三大类快速检测病原微生物的新技术被广泛应用于微生物检测,使得疾病诊断的水平有了很大的提高。本文根据目前国内外研究的动向,对这三类检测技术的原理、特点及应用进行综述。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 微阵列 荧光标记原位杂交 链置换扩增技术 16SRRNA基因
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FISH检测中标本切片预处理的优化方案的探索
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作者 温韵洁 王晓丹 +3 位作者 黎相照 杨芝洁 孙宇超 梁莉 《国际医药卫生导报》 2014年第23期3517-3520,共4页
目的探索荧光标记原位杂交技术(FISH)检测中标本切片预处理的优化方案。方法收集300例明确诊断为肺结核的患者作为阳性对照组,300例健康志愿者(明确排除肺结核患者)作为阴性对照组。收集800例新收临床疑似肺结核患者作为研究组。... 目的探索荧光标记原位杂交技术(FISH)检测中标本切片预处理的优化方案。方法收集300例明确诊断为肺结核的患者作为阳性对照组,300例健康志愿者(明确排除肺结核患者)作为阴性对照组。收集800例新收临床疑似肺结核患者作为研究组。收集该800例患者的肺活检标本以及同期的痰液标本,其中痰液进行涂片、结核杆菌分离培养、结核杆菌DNA荧光定量PCR检测以及FISH检测。采用两种石蜡包埋组织切片的预处理方案,方案1为自主设计的病理组织切片预处理方法,方案2为参考常用石蜡包埋组织切片预处理方法而设计的方案,比较两种方案对肺结核诊断阳性符合率和阴性符合率。结果(1)方案1检测结核杆菌阳性符合率为98.7%,方案2检测结核杆菌阳性符合率为97.9%,两种方法阳性符合率差异无统计学意义(P=0.148)。(2)方案1检测结核杆菌阴性符合率为97.8%,方案2检测结核杆菌阴性符合率为96.1%,两种方法阴性符合率差异有统计学意义(P=0.036)。结论采用FISH技术诊断肺结核具有较高的价值;与此同时,探索实验条件的优化能够进一步提高FISH诊断的阳性符合率和阴性符合率。 展开更多
关键词 荧光标记原位杂交技术 肺结核 阳性符合率 阴性符合率
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