原卟啉二钠体外对丙型肝炎病毒复制子的抑制作用

目的:探讨原卟啉二钠(PPN)体外对丙型肝炎病毒(HCV)的抑制作用。方法:用不同浓度PPN和利巴韦林处理HCV复制子细胞模型,MTT法检测药物的细胞毒性作用;荧光定量PCR检测HCV RNA。结果:PPN和利巴韦林浓度在1 mg·mL-1以下时,MTT法比色A值比较,实验组与对照组间差异均无显著性,无明显细胞毒性;PPN在1 mg·mL-1时对HCV RNA的抑制率为73.44%,差异有显著性(P<0.05),利巴韦林在1 mg·mL-1时对HCV RNA的抑制率为40.78%,差异无显著性,二者抑制HCV RNA的EC50分别为0.23 mg·mL-1和1.19 mg·mL-1。结论:PPN和利巴韦林浓度在1 mg·mL-1以下时对HCV Replicon细胞生长无毒性作用;PPN具有明显的体外抑制在HCV复制的作用,抑制作用强于利巴韦林。

非抗凝动物血提取原卟啉二钠的实验研究

探讨非抗凝动物血提取原卟啉二钠的方法。将凝固动物血中的蛋白质水解,分离出血红素,制备原卟啉甲酯、原卟啉等中间产物,最终精制获得原卟啉二钠;并根据原卟啉二钠的光吸收特性,利用分光光度法对其进行定量检测。原卟啉二钠为红褐色结晶,可溶于水,不溶于氯仿、乙醚及丙酮,易溶于酸性溶液。溶于酸性溶液后,在波长600nm、556nm、及408nm显示吸收峰,最大吸收波长为408nm。利用本方法可将非抗凝动物血精制成原卟啉二钠,且该方法是目前以非抗凝动物血为原料提取原卟啉二钠较为理想的方法。

原卟啉二钠的抗鸭乙型肝炎病毒作用

目的:研究原卟啉二钠(PPN)抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用先天感染DHBV的龙岩麻鸭为动物模型,分设模型对照组、拉米呋啶组和PPN组,各组按20 mg.kg-1.d-1灌胃给药10 d,斑点杂交法观察用药前、用药5 d、10 d及停药后3 d血清中DHBV DNA表达,HE染色观察肝脏组织病理学变化。结果:PPN组于用药后5 d1、0 d,血清DHBV DNA水平分别为1.36±0.261、.05±0.28,与模型对照组2.04±0.05、1.90±0.31比较明显降低(T5P<0.05、T10P<0.01),病理检查发现PPN组肝细胞点状坏死明显减轻,与模型对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:PPN有抑制DHBV DNA的作用,并具有明显的抗炎、保肝作用。

非抗凝动物血制备原卟啉二钠的方法改进

目的利用非抗凝猪血简易制备原卟啉二钠。方法提取非抗凝猪血中的血红素、经氯化血红素、原卟啉二甲酯、原卟啉等中间制备过程,最后制取原卟啉二钠。结果所制得的原卟啉二钠为紫黑色晶体,可溶于水和甲醇,不溶于氯仿、乙醚、丙酮,难溶于稀酸,纯度为91.4%。结论此方法可利用非抗凝动物血中的血红素制备原卟啉二钠。该方法制备条件要求不高,操作简便、原料易得、成本低廉,是一种较为理想的制备原卟啉二钠的方法。

原卟啉二钠对HCC细胞株体外放射增敏作用的研究

目的探讨NAPP对HCC细胞细胞毒性和放射增敏作用。方法 MTT法检测细胞毒性,在培养细胞中加入含NAPP完全培养基(最高浓度3mg/mL,5倍稀释,共6个浓度梯度),作用72h后用MTT在OD490nm测定细胞活力。然后分取终浓度为0、4.8、24、120、600μg/mL的NAPP与HCC细胞株共育,以2、4、6Gy剂量辐照,同时设空白对照组。3d后用MTT法检测细胞抑制率。结果体外实验细胞毒药物浓度为24μg/mL以上,在120～600μg/mL区间内随着辐照剂量的增加对HCC抑制率也明显增强(P<0.05～0.01)。结论体外实验证明NAPP对HCC细胞株SMMC-7721有明显的细胞毒性和辐照增敏作用。

原卟啉二钠对氯丙嗪致肝功能异常的预防作用

目的:原卟啉二钠片预防抗精神病药致肝功能异常的疗效。方法:将精神分裂症患者随机分为预防组(第1组、第2组和第3组)和空白组(第4组),预防组分别在不同时间给予原卟啉二钠片,而空白对照组未服用任何保肝药,观察临床症状及ALT、AST的变化。结果:预防组的肝功能指标与空白对照组比较有统计学意义(P<0.001)。结论:原卟啉二钠片具有明显的预防抗精神病药致肝功能异常的疗效。

NAPP体外抗乙型肝炎病毒作用的实验研究

[目的]应用HepG2.2.15细胞株作为体外抗乙型肝炎病毒的实验模型,研究NAPP对乙肝病毒的抑制作用。[方法]以NAPP梯度浓度与HepG2.2.15细胞混合培养,通过MTT法检测药物的细胞毒性,9 d后取细胞培养上清液,用ELISA法测定HBsAg、HBeAg含量,荧光定量PCR检测上清液中病毒载量。[结果]NAPP浓度在1 mg/ml时,对细胞无明显毒性;NAPP在所稀释的各浓度下,对HBsAg、HBeAg均有抑制作用,对HBsAg、HBeAg的治疗指数分别大于188.7和64.5;NAPP可抑制HBV-DNA的复制。[结论]NAPP体外对HBV有显著的抑制作用。

PPN抑制HBV-DNA表达及复制的体外实验

目的 体外观察PPN对HBV DNA表达、复制的抑制效果及其细胞毒性作用。方法 取 10 μg/ml、2 0 μg/ml、 4 0 μg/ml、 80 μg/ml、 16 0 μg/mlPPN水溶液分别加入 2 2 15细胞株培养悬液中 ,8天后用放射免疫法检测上清液中HBeAg的含量 ,并计算HBeAg抑制率、细胞存活率、HBeAg抑制率为 5 0 %时的药物浓度 (ID50 )、实验组存活细胞为对照组的 5 0 %时的药物浓度 (CD50 )和治疗指数 (TI)。PCR技术检测HBV DNA阳性血清中加入 16 0 μg/mlPPN水溶液后对HBV DNA复制的抑制作用。 结果 当加入的PPN浓度为 16 0 μg/ml和 80 μg/ml时 ,HBeAg抑制率分别为 89 8%和 82 4 % ,细胞存活率分别为 98 7%和 99 2 % ;HBV DNA阳性血清中加入PPN后可有效抑制其复制。结论 PPN可有效抑制HBV DNA的表达和复制 ,且对靶细胞 (肝细胞 )无细胞毒作用 。

动物血液的深度加工及综合利用

0 引言动物血液约占体重的4～10％.我国每年产猪血约40万吨、牛血约1.5万吨、羊血2.5万吨.邵阳市每年有各种畜禽血600多吨,但尚未被人们充分利用而造成浪费.目前国内外在对动物血液的深度加工及综合利用上,主要朝着生化制品的生产、食品工业、饲料工业及化工原料等方面发展,为了进一步开发利用动物血液资源,为我校教学、科研提供某些理论根据,本文就当前研究概况作一介绍.