原发性肝细胞癌细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bak的表达及意义

目的 探讨细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bak与肝癌的关系及其意义。方法 采用免疫组化S-P方法,检测22例肝癌、22例肝癌伴肝硬变、20例肝硬变和10例正常肝组织中bcl-2及其相关蛋白bak的表达。结果bcl-2蛋白在肝癌中表达阳性率为50.O％(22/44),而正常肝组织为60.0％(6/10),差异有显著性(P<0.05)。在肝癌组织中bak蛋白表达阳性率为88.6％(39/44),而肝硬变组织为95.0％(19/20),差异无显著性(P>0.05)。结论bcl-2在肝癌和肝硬变组织呈中等表达,而bak在肝癌和肝硬变均呈高表达。

晚癌康2号对原发性肝癌细胞凋亡基因Bcl-2Bax和Fas表达的影响

目的:探讨中药晚癌康2号治疗原发性肝癌的作用机制。方法:选择生长良好的肝癌细胞株,分别培养实验组和对照组的肿瘤细胞,滴加稀释度为1:50抗人Bcl-2、Bax和Fas及PCNA的单克隆抗体,采用荧光免疫组化显示技术和激光共聚焦显微细胞仪的定量技术(LaserScanConfobalmicroscope,LSCM)观测扫描细胞的荧光值。结果:晚癌康2号能影响人体肝癌细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas表达,使Bcl-2表达减少,Fas表达增加,对Bax表达无影响。结论:晚癌康2号对人体原发性肝癌细胞有治疗作用,其作用机制可能是通过对凋亡相关基因调控的表达来实现的。

树鼩实验性肝癌形成过程Bax、bcl-2的动态表达与细胞凋亡

目的 动态研究Bax和bcl-2在树鼩肝癌形成过程的不同阶段的表达与肝细胞凋亡的关系。方法 用免疫组化及TUNEL方法,检测35例树鼩的第30、60周肝活检组织和肝癌组织及对照树鼩对应期肝活检组织中Bax、bcl-2表达和细胞凋亡指数(AI)。结果①Bax和bcl-2在肝癌组织中的表达率均显著高于癌前和空白对照同期肝组织;在60周的肝组织中也显著高于30周及空白对照组对应期肝活检组织。②癌组织及其第30和60周的肝组织中的AI均值均显著高于对照组对应期肝组织。肝癌组织与其癌前30及60周的肝活检组织之间的AI差别无显著性。③Bax和bcl-2阳性肝组织的凋亡指数也均显著高于阴性的。结论 1.正常树鼩肝细胞凋亡率极低,在肝癌形成过程中凋亡率增加;2.Bax和bcl-2都与树鼩肝癌的发生有关,在肝癌形成过程中,它们的表达率及强度均呈增加趋势。动态观察树鼩肝癌形成过程中一些基因的表达变化,有利于探讨肝癌的发病机理,为人类肝癌的早期诊断、治疗以及预防的研究提供线索。肝组织中的Bax、bcl-2基因表达状况对于预测肝癌的发生可能有一定帮助。

Bcl-2、Bax、Cyt-C和Bid在原发性肝细胞癌中的表达及意义

目的观察Bc l-2、Bax、细胞色素C(Cyt-C)和B id在原发性肝细胞癌(PHC)组织中的表达并分析其与病理分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移间的关系。方法应用免疫组织化学法检测Bax以及应用原位分子杂交方法检测Bc l-2、Cyt-C和B id在50例PHC组织及30例正常肝脏组织(对照组)中的表达。结果 PHC组Bc l-2、Bax和B id的阳性表达率较对照组均明显下降(P<0.05或0.01),但Cyt-C阳性表达率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高及中分化PHC组Cyt-C阳性表达率均明显高于低分化组(P<0.05和P<0.01),但不同病理分级和有无淋巴结转移组间差异未见统计学意义(P>0.05)。PHC不同病理分级、分化程度和有无淋巴结转移组间Bc l-2、Bax和B id表达比较均未见统计学意义(P>0.05)。结论 PHC促凋亡基因B id表达下调,同时Cyt-C随着PHC分化程度的降低而表达下调。

MiR-122促进原发性肝细胞癌Huh-7细胞凋亡

目的探讨miR-122对原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）细胞性状的影响。方法HepG2细胞、Huh-7细胞分别转染miR-122、anti—miR-122，转染Mock组作为阴性对照，分别于转染后24h、48h用流式细胞法、TUNEL法检测细胞凋亡及细胞周期。结果转染后24h、48h，转染miR-122、Mock的HepG2细胞两组间细胞凋亡率均无统计学意义（P〉0．05），而在转染后48h，与Mock组Huh-7细胞相比，转染anti—miR-122的Huh-7细胞凋亡率明显降低（P〈0．05）；转染后24h、48h，转染miR-122、Mock的HepG：细胞，各细胞周期组份均无统计学意义（P〉0．05），但于转染后48h，转染anti—miR-122的Huh-7细胞可见G0-G1期细胞明显多于Mock组，S期、G2-M期细胞则显著少于Mock组（P〈0．05）。结论miR-122表达水平的下降能够抑制某些HCC细胞如Huh7细胞凋亡，miR-122可能作为一种内源性凋亡调控因子，在肝脏组织中发挥抗肿瘤作用。

肝细胞癌细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达及意义

目的：探讨原发性肝细胞癌（简称肝癌）细胞凋亡相关蛋白bcl－2和bax的表达情况及其意义。方法：采用免疫组化ABC法检测bcl－2和bax蛋白在66例人肝癌组织和24例人正常肝组织，以及3种人肝癌细胞系HCC－9204、SMMC－7721、HHCC和1种人正常肝细胞系QZG的表达情况，并分析肝癌组织的bcl－2和bax蛋白表达阳性率与其病理分级之间的关系。结果：bcl－2蛋白在正常肝组织中表达的阳性率只有4．2 ％（1／24），在肝癌组织中的阳性率为25．8 ％（17／66），二者具有显著性差异（P＜0．05）。bax蛋白在正常肝组织中表达的阳性率为70．8 ％（17／24），在肝癌组织中的阳性率为43．9 ％（29／66），二者也具有显著性差异（P＜0．05）。肝癌组织的bcl－2和bax蛋白表达阳性率与其病理分级之间均未见明显的相关性。在正常肝和肝癌组织中，bcl－2蛋白的阳性率均明显低于bax蛋白（P＜0．01，P＜0．05）。在正常肝细胞系QZG中未见明显的bcl－2阳性信号，bax蛋白的阳性细胞计数率为61．0％。肝癌细胞系SMMC－7721和HHCC的bcl－2蛋白阳性细胞计数率分别为14．3％和11．8％，bax蛋白阳性细胞计数率分别为58．3％和47．1％。肝癌细胞系HCC－9204中未见明显的bcl－2阳性信号，bax蛋白阳性细胞计数率为43．2％。结论：与正常肝组?

乙醇诱导的肝癌细胞HCC-9204凋亡及其与Bax和Bcl-2蛋白的关系

目的探讨乙醇对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其与凋亡相关基因bax和bcl-2表达的关系。方法用噻唑蓝(MTT)法检测浓度分别为20～100 mL/ L的乙醇对肝癌细胞系HCC-9204的杀伤作用。然后，用60 mL/ L乙醇作用6 h诱导HCC-9204细胞凋亡。以May-Grunwald-Giemsa (MGG)染色法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法和流式细胞术分别分析凋亡细胞的形态学变化、DNA断裂情况和不同细胞周期的DNA含量变化。用免疫细胞化学染色图象分析法，检测诱导凋亡前、后Bax和Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果随着乙醇浓度的增加，其对HCC-9204细胞的杀伤作用逐渐增强。60 mL/ L乙醇可使HCC-9204细胞发生明显的细胞凋亡的形态学变化，并且大部分细胞为TUNEL阳性着色。流式细胞术分析可见明显的亚二倍体凋亡峰。诱导凋亡后的HCC-9204细胞Bax蛋白的表达水平明显增高，而Bcl-2在诱导凋亡前、后的HCC-9204细胞中均未见表达。结论低浓度乙醇对肝癌细胞HCC-9204具有明显的凋亡诱导作用，其凋亡的发生与Bax蛋白表达水平的增高有关。

细胞色素C及相关细胞凋亡蛋白、基因在原发性肝癌组织表达的临床意义

目的观察外源性凋亡通路中Caspase8和Bid及内源性凋亡通路中Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt-C)和Cas-pase9在50例原发性肝细胞癌(肝癌组)及30例正常肝组织(对照组)中的表达,并分析其与病理分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移的关系。方法应用免疫组织化学方法检测Bax表达,应用核酸原位分子杂交方法检测Caspase8、Bid、Bcl-2、Cyt-C和Caspase9表达。结果 Caspase8表达强度与对照组比较呈升高趋势(P<0.05),阳性表达率组间差异未见统计学意义(P>0.05)。Bid阳性表达率与对照组比较呈下降趋势(P<0.01),表达强度两组间差异未见统计学意义(P>0.05)。Bcl-2阳性表达率和表达强度较对照组均明显下降(P<0.01),Bax阳性表达率和表达强度较对照组均下降(P<0.05和P<0.01)。Cyt-C和Caspase9的阳性表达率和表达强度两组间比较差异均未见统计学意义(P>0.05)。高、中分化肝癌组Cyt-C阳性表达率均明显高于低分化肝癌组(P<0.05和P<0.01),但其与病理分级和淋巴结转移未见相关性(P>0.05)。Caspase8、Bid、Bcl-2、Bax和Caspase9在不同病理分级、肿瘤分化程度和淋巴结转移组中表达差异均未见统计学意义(P>0.05)。结论在肝癌发生发展过程中,早期外源性凋亡通路发挥促凋亡活性,而随着肿瘤分化程度的降低,内源性凋亡通路发挥抗凋亡活性,且Cyt-C的表达调节应该是一晚期事件。

肝细胞癌凋亡抑制蛋白bcl-2和bcl-xl与VEGF、bFGF及血管生成的关系

目的 :探讨原发性肝细胞癌 (HCC)组织中凋亡抑制蛋白bcl 2和bcl xl的表达与血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)以及血管生成之间的关系。方法 :对经病理证实的肝细胞癌 38例共 4 0个癌灶进行分析 ,用免疫组化SP法检测癌组织中VEGF、bFGF、bcl 2和bcl xl的表达以及微血管密度 (MVD) ,分析它们之间的相互关系。结果 :VEGF、bFGF、bcl 2和bcl xl的阳性表达率分别为 77 5 % (31/4 0 )、75 % (30 /4 0 )、2 7 5 % (11/4 0 )和 5 0 % (2 0 /4 0 ) ,所有病灶的平均MVD为 39 3± 8 4 0。VEGF与bFGF、bcl 2与bcl xl之间明显相关 (P <0 0 1)。VEGF与bcl 2之间也存在一定的相关性 (P <0 0 5 )。在VEGF、bcl xl的阴性和阳性表达组MVD均具有显著的差异 (P <0 0 5 )。结论 :VEGF、bFGF与bcl 2、bcl xl之间具有一定的关系 ,VEGF和bcl

肝细胞癌和肝硬变中bcl-2蛋白表达与细胞凋亡的关系

目的：研究肝细胞癌和肝硬变中ｂｃｌ－２蛋白表达与细胞凋亡的关系。方法：应用原位脱氧核糖核酸末端转移酶标记法和Ｓ－Ｐ免疫组化技术检测２８例肝硬变和３５例肝细胞癌组织中凋亡细胞的分布、密度及ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：肝细胞癌组织中凋亡细胞密度显著低于肝硬变，且随其恶性程度的增高呈逐渐降低趋势；凋亡细胞在肝硬变中多分布于假小叶周边区域。ｂｃｌ－２蛋白在肝细胞癌组织中的表达强度明显高于肝硬变，但表达的阳性率差异不明显。结论：ｂｃｌ－２通过其表达产物调控肝硬变和肝细胞癌中的细胞凋亡，在肝细胞癌发生中起重要作用。

Survivin在人原发性肝细胞癌中的表达及其与凋亡的相关性

利用免疫组化 (IHC) EnVision法和Tunel法检测了 6 8例原发性肝细胞癌 (HCC)和癌旁肝组织及 1 2例正常肝组织中Survivin、PcNA、Bcl xl,探讨Survivin基因在肝组织细胞中的表达与凋亡指数 (AI)、增殖指数 (PI)和凋亡抑制因子的相关性。结果发现Survivin和Bcl xl在HCC中阳性检测率分别为 5 8.8% (4 0 / 6 8)和 4 8.5 % (33/ 6 8) ,高于癌旁肝组织 [分别为 5 .88%(4 / 6 8)和 36 .8% (2 5 / 6 8) ]及正常肝组织 [0 (0 / 1 2 )和 2 5 % (3/ 1 2 ) ]。Survivin和Bcl xl主要表达在细胞质或细胞膜上。Survivin的阳性表达与HCC的侵袭转移倾向、AI以及Bcl xl有关 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ,而与PI无关。

bcl-2和bax蛋白在肝癌组织的表达与细胞凋亡指数的关系

目的 :研究bcl 2及相关蛋白bax在肝癌组织中的表达与细胞凋亡指数之间的关系。方法 :对2 9例人肝细胞癌及癌旁组织分别进行bcl 2、bax的免疫组织化学研究 ,原位细胞凋亡检测采用TUNEL方法 ,计数阳性细胞数。结果 :bax在肝癌细胞中呈低表达 ,阳性率为 2 0 .7% ,与在癌旁组织中的表达 (65 .1 % )相比存在统计学差异 (P <0 .0 1 )。Bcl 2在肝细胞癌与癌旁组织中均呈低表达 ,表达率分别为 1 7.2 %和2 4.1 % ,二者间不存在统计学差异。Bcl 2和bax的阳性表达率与肝癌组织学分级无明显相关性。细胞凋亡指数在肝癌细胞中的表达率 (1 0 .3 2 %± 4.87% )低于在癌旁组织中的表达 (1 6.1 4%± 4.92 % ) (P <0 .0 1 )。在肝细胞癌和癌旁组织中 ,bax阳性组与阴性组细胞凋亡指数间有统计学差异 (P <0 .0 1 ) ,bcl 2阳性组与阴性组细胞凋亡指数无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :bcl 2和bax的变化影响肝细胞的凋亡状态 ,bax起到更关键的作用。凋亡指数有可能成为判定肝细胞癌变的指标 。

原发性肝细胞癌细胞凋亡的研究

通过对原发性肝细胞癌细胞凋亡的研究，探讨其生物学及临床意义，采用细胞凋亡的原位末端标记技术，检测了 １７ 例正常肝组织（包括癌周边肝组织）及 １８ 例原发性肝细胞癌组织中的细胞凋亡情况。结果：正常肝组织及癌周边肝组织的细胞凋亡数平均值分别为 ２２±１３ 及 ２６±０７９，而肝细胞癌组织为 １２３±２６。本结果表明：正常肝组织及肝癌周围肝组织中有较低的细胞凋亡数，而肝癌组织中有较高的细胞凋亡数，二者相比具有显著性差异， Ｐ＜ ０００５。

原发性肝细胞癌细胞增殖、凋亡及P16表达和肿瘤分化程度关系的研究

目的 :探讨原发性肝细胞癌 (HCC)中细胞增殖、凋亡及P16的表达与肿瘤分化程度的关系。方法 :采用免疫组化法对 5 0例HCC患者 (HBsAg均阳性 )癌细胞增殖细胞核抗原Ki 6 7和P16的表达进行了定位和半定量分析 ,用Tunel法对细胞凋亡进行检测 ,对结果进行统计学分析。结果 :HCC细胞分化程度越差 ,细胞增殖能力越强 ,凋亡细胞越少 ,P16和肿瘤分化程度负相关。结论 :HCC细胞中Ki 6 7和凋亡及其调控基因P16与HCC的分化程度有关 ;HCC细胞中增殖 凋亡失调 ,是导致HCC发生发展的重要原因 ;P16的表达与细胞增殖和凋亡相关 ,通过导入野生型P16诱导HCC中细胞凋亡或抑制其增殖 。

一氧化氮诱导肝癌细胞凋亡过程bcl-2和bax mRNA表达水平的变化

目的 探讨在一氧化氮 (NO)诱导肝癌细胞凋亡过程 bcl- 2和 bax m RNA表达水平的动态变化。 方法 用 NO供体硝普钠 (SNP)诱导 SMMC- 772 1和 Hep G2 肝癌细胞株凋亡 ,RT- PCR的方法检测 bcl- 2、bax m RNA表达水平 ,并采用凝胶分析系统进行半定量分析。 结果 1.0 mmol/ L SNP可降低 SMMC- 772 1和 Hep G2 细胞 bcl- 2、bax m RNA的表达水平 ,提高 bax/ bcl- 2 m RNA的比值并呈时间依赖性。Hep G2 细胞 bcl- 2和 bax m RNA降低的幅度较 SMMC- 772 1细胞小 (P<0 .0 5 ) ,开始变化的时间也较 SMMC- 772 1细胞迟。 结论 NO诱导肝癌细胞株的凋亡 ,可能与其 bcl- 2、bax m RNA表达水平变化导致 bax/ bcl- 2 m

肝癌细胞凋亡相关基因bcl-2及bax的表达意义

目的 :探讨凋亡抑制基因和凋亡促进基因bax表达与肝癌生物学行为的关系及对肝癌预后的关系。方法 :用免疫组化LSAB法测定 40例肝癌细胞和 16例正常肝组织的bcl -2和bax蛋白表达水平。结果 :bcl -2及bax蛋白表达率在正常肝组织及肝细胞癌分别为 12 5 %、45 0 %、87 5 %、5 2 5 % ,两组间差异有显著性 (P <0 0 5 )。bcl-2、bax蛋白表达与肿瘤病理分级、分期、淋巴结转移及患者预后相关。结论 :bcl-2和bax蛋白的表达参与了肝癌的发生及进展 ,并存在相互作用的关系。bcl -2蛋白表达在肝癌有独立预后价值。

细胞凋亡调节基因bcl-2、p53在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的 探讨细胞凋亡调节基因bcl -2、p5 3在卵巢浆液性囊腺癌中的表达 ,以及这种表达与临床指标、生物学行为之间的关系。方法 用免疫组化S -P法检测bcl-2、p5 3在肿瘤组织中的表达。结果 肿瘤原发灶和相应淋巴结中 ,bcl -2、p5 3表达与淋巴结转移、临床分期、组织学分期有一定关系。结论 bcl -2、p5 3在卵巢浆液性囊腺癌的发展中起重要作用 。

亚砷酸对肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及其Bcl-2表达的影响

目的探讨亚砷酸(AA)对人肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及其Bcl-2表达的影响。方法采用MTT比色法检测AA作用后的BEL-7402细胞增殖抑制率,流式细胞术检测BEL-7402细胞周期及凋亡细胞,HE染色法观察凋亡细胞的形态,RT-PCR检测BEL-7402细胞的Bcl-2mRNA,免疫组化法检测细胞的Bcl-2蛋白。结果1.0～8.0μmol/L的AA可使BEL-7402细胞增殖抑制率上升,能诱导BEL-7402细胞凋亡并阻滞细胞周期于S、G2/M期,呈剂量依赖性;8.0μmol/L的AA作用BEL-7402细胞48h后,细胞呈现明显的凋亡形态改变,其Bcl-2mRNA及蛋白表达明显减弱。结论AA体外有抑制BEL-7402细胞增殖及诱导凋亡的作用,且呈时间、剂量依赖性,其作用机制可能与降低其Bcl-2表达有关。

原发性肝细胞癌细胞凋亡、增殖与肿瘤分化程度的关系

为探讨原发性肝细胞癌 (HCC)中细胞增殖和凋亡与肿瘤分化程度的关系 ,采用免疫组化法对 5 0例HCC患者 (HBs Ag均阳性 )癌细胞增殖细胞核抗原 Ki- 6 7的表达进行了定位和半定量分析 ,并用 Tunel法对细胞凋亡进行检测。结果显示 ,Ki- 6 7以棕黄色颗粒状位于细胞核膜中 ,胞膜和胞质中阴性。认为 HCC细胞中 Ki- 6 7和凋亡表达与 HCC的分化程度有关 ;HCC细胞中增殖 /凋亡失调是导致 HCC发展的重要原因 ;诱导 HCC中细胞凋亡或抑制其增殖 ,可望提高临床治疗效果。