遗传多样性高血压小鼠模型的建立与基因转录调控分析

目的探讨13个品系的遗传多样性高血压小鼠的血压表型差异、肾病理变化以及相关致病通路。方法将13个品系的遗传多样性小鼠分别与Cckbr-/-小鼠进行杂交,得到不同遗传背景的Cckbr+/+、Cckbr+/-、Cckbr-/-3种基因型的小鼠。利用BP-2000无创血压分析系统测量小鼠血压,利用Western Blot检测小鼠肾CCKBR蛋白表达变化,利用苏木素-伊红(HE)染色、免疫组化(IHC)检测小鼠肾组织病理学变化,利用转录组测序(RNA-Seq)分析筛选原发性高血压致病相关通路。结果3个特定小鼠品系(A/J、LOT、FIM)中,收缩压(systolic blood pressure,SBP)Cckbr-/-组较Cckbr+/+组具有显著性差异(P<0.05)。HE染色及IHC发现高血压对小鼠造成了一定程度的肾损伤。通过GO与Pathway富集分析,发现差异表达基因富集在新陈代谢与昼夜节律调节等方面。结论遗传多样性高血压小鼠在血压表型、病理特征及基因表达等方面呈现显著性差异,有效模拟了人群的遗传异质性对疾病表型的影响。

蓝莓果汁及不同纯度蓝莓花色苷对原发性高血压大鼠血压的影响

以蓝莓果汁及不同纯度的蓝莓花色苷提取物为原料灌胃12周龄原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和Wistar大鼠,研究花色昔提取纯化对其降压效果影响。采用蓝莓果汁(A组)(花色苷的质量分数为1.00%)及不同纯度的蓝莓花色苷提取物(花色苷的质量分数分别为8.66%(B组)、38.49%(C组)、94.42%(D组))灌胃SHR,灌胃剂量以花色苷含量计。其中,A组的灌胃剂量为94.4、472.1、944.2mg/kg(以体质量计,下同),B组的灌胃剂量为10.9、54.5、109.0mg/kg,C组的灌胃剂量为2.5、12.3、24.5mg/kg,D组的灌胃剂量为1.0、5.0、10.0mg/kg。结果表明:同剂量(花色苷当量)的蓝莓果汁与蓝莓皮渣提取物(不同纯度蓝莓花色苷提取物)相比,其对SHR的降压效果有显著差异(P<0,05),而同剂量不同纯度的蓝莓皮渣提取物对SHR的降压效果无显著差异(P>0.05)。其中,高剂量果汁(A组)和不同纯度蓝莓花色苷提取物(B、C、D组)灌胃SHR,灌胃后4或5h其收缩压分别降低了38.45、32.57、33.09、33.41mmHg。因此,蓝莓对高血压改善作用的功能成分是花色苷;蓝莓果汁的其他成分对花色苷的降血压功能有增强作用。

酸枣仁总皂甙对原发性高血压大鼠的降压作用

目的 观察酸枣仁总皂甙对原发性高血压大鼠 (SHR)的降压作用。方法 应用 10只SHRs,采用 2个 5×5拉丁方设计 ,分别于灌胃后 0 .5、1.5、3 .5、7.5h以及再次给药后 4h用间接测压法测量清醒SHR尾动脉血压。结果 不同剂量的酸枣仁总皂甙水溶液对SHR血压均有明显的降低作用 (P <0 .0 1) ,但不同剂量间作用差异不显著 (P >0 .0 5 )。

无患子皂苷对原发性高血压大鼠的影响

目的:探讨无患子皂苷对原发性高血压大鼠的降压作用及对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)和内皮素(ET)的影响。方法:采用原发性高血压大鼠模型,随机分为模型组、阳性药组(卡托普利)、无患子皂苷高、中、低3个剂量组,每组10只。每天给予各组大鼠相应药物灌胃给药1次,连续给药32 d。模型组以等量蒸馏水灌胃,分别于第1、3、7、32日每次的给药前及给药后1 h测定血压。末次给药后1 h,经腹主动脉取血,测定AngⅡ、Ald和ET的含量。结果:无患子皂苷给药降压作用明显;各给药组血浆中AngⅡ、Ald和ET浓度明显低于模型组(P<0.01);与模型组比,有显著性差异。结论:无患子皂苷具有降低原发性高血压鼠的血压作用,其作用机制可能与抑制血浆AngⅡ、Ald和ET水平有关。

当归对原发性高血压大鼠脑组织基因表达谱的影响

目的探讨当归对原发性高血压大鼠(SHR)大鼠脑组织基因表达谱的影响。方法将SHR分为当归组、模型对照组,并将同周龄的Wistar大鼠作为正常对照组。测定用药前后不同模型组尾动脉收缩压,分组给药4周后,取大鼠脑组织,提取RNA送博淼生物科技(北京)有限公司进行表达谱的测定。结果当归可降低SHR的血压水平。当归组与模型组比较,当归组的变化基因有326个,其中184个基因表达上调,142个基因表达下调:信号值变化幅度2倍以上的差异表达基因85个,上调的基因53个,下调的基因32个,在85个差异表达基因中,已知生物学过程的基因有38个(上调23个,下调15个),主要与信号传导途径的基因相关,另外也与代谢、转录及蛋白质结合等基因相关。结论当归具有一定的降压作用,并对SHR脑组织基因表达谱产生影响,可能主要通过信号传导途径发挥作用。

丹酚酸B对原发性高血压大鼠的降压作用机制研究

目的观察丹酚酸B对原发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,并探讨其可能的降压机制。方法将64只雄性SHR大鼠随机分为4组:模型组,阳性药组(依那普利组),丹酚酸B(SalB)高、低剂量组,另设正常对照组(16只健康大鼠),分别给予相应药物或蒸馏水。给药前分别测基础血压1次,给药后每2周测血压1次,给药10周后取一半大鼠检测各组大鼠血压,血浆肾素(PRA)、血管紧张素I(IAng-Ⅱ)、内皮素(ET)、心钠素(ANF)含量,血清一氧化氮(NO)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量。其余大鼠停药2周后再测上述指标。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血压、TG、NO、PRA、Ang-Ⅱ及MDA含量均明显升高(P<0.01);与模型组比较,丹酚酸B有明显降血压作用(P<0.01),丹酚酸B能够降低SHR的PRA、Ang-Ⅱ含量,升高ANF含量(P<0.05),能够降低血清TG含量(P<0.05),对血清ET、NO及TC含量无明显影响(P>0.05),能够降低血清MDA含量(P<0.05),但对血清SOD含量无明显影响(P>0.05)。结论丹酚酸B对SHR具有一定的降压作用,其机制可能与调节肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)、血清ANF、TG水平及抗氧化作用有关。

磁共振灌注结合乙酰唑胺负荷试验评估原发性高血压大鼠脑血管储备功能

目的探讨磁共振灌注结合乙酰唑胺负荷试验在评估原发性高血压大鼠(SHR)脑血管储备功能中的价值。方法选择12周龄WKY大鼠、12周龄SHR、20周龄SHR各10只,分别在静息状态、乙酰唑胺负荷状态下行磁共振灌注检查;选择额叶感兴趣区,测量乙酰唑胺负荷前、后局部脑血容量(rCBV)及平均通过时间(MTT),根据公式计算局部脑血流量(rCBF)及脑血管储备功能(CVR)。实验完成后处死动物,选取脑组织制成标本,光镜下观察感兴趣区的脑血管情况。结果 WKY 12周龄、SHR 12周龄、SHR 20周龄大鼠额叶感兴趣区CVR(%)分别为:(0.75±0.05)×100%、(0.40±0.03)×100%、(0.20±0.15)×100%,组间比较有统计学差异(P<0.05)。光镜下SHR 12周龄组大鼠微循环毛细血管数目增多;SHR 20周龄组脑小动脉及微小动脉管壁重塑。结论大鼠的脑血管随高血压病程延长发生不同的病理改变,脑血管储备功能不同程度减低;磁共振灌注法结合乙酰唑胺负荷试验可定性、半定量地评价SHR脑血管储备功能,为脑血管病亚临床期的诊断提供信息。

含血管紧张素转化酶抑制肽的酪蛋白水解物与紫薯提取物联用对原发性高血压大鼠血压的影响

以富含血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物为原料,灌胃12周龄雄性原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和正常雄性Wistar大鼠,研究富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和紫薯提取物对SHR血压的影响。用不同剂量的酪蛋白水解物(10、20、30、40 mg/kg,以体质量计,下同)和紫薯提取物(5.4、10.8、21.6、32.4 mg/kg,花青素含量为9.25%)分别灌胃SHR和Wistar大鼠。然后选用酪蛋白水解物的2个剂量组分别与紫薯提取物的3个剂量组联合灌胃SHR。用智能无创血压计测量SHR血压变化。结果表明:富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物,在实验灌胃剂量范围内均具有较好的降压效果,而且两者联用进行单次灌胃后降压效果显著提高(P<0.05)。其中酪蛋白水解物(10 mg/kg)分别与紫薯提取物3个剂量(5.4、10.8、21.6 mg/kg)联合灌胃SHR后4 h或者5 h,血压分别降低了(24.67±4.46)、(28.47±3.96)、(41.51±4.89)mm Hg。用酪蛋白水解物(20 mg/kg)分别与紫薯提取物的3个剂量(5.4、10.8、21.6 mg/kg)联合灌胃SHR后5 h或者6 h,SHR血压分别降低了(38.03±3.46)、(43.92±2.92)、(47.20±4.31)mm Hg。两者联用灌胃后对Wistar正常大鼠的血压无影响。另外,酪蛋白水解物2个剂量(10、20 mg/kg)和紫薯提取物(10.8 mg/kg)分别联合使用,间隔4 h灌胃1次,每天灌胃2次,SHR大鼠血压较灌胃前分别降低了(28.20±3.02)、(43.54±2.55)mm Hg,而且能较长时间维持在较低血压水平。因此,富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物联合食用对SHR的降压具有显著效果。

白沙绿茶提取物对原发性高血压大鼠降压效果的研究

目的:探讨白沙绿茶提取物对原发性高血压大鼠(SHR)的降压效果及其机制。方法:将60只原发性高血压大鼠(SHR)随机分为高血压对照组,苯磺酸氨氯地平组和白沙绿茶提取物高、中、低剂量组,共5组,每组12只。每日给予相应药物灌胃,对照组给予等量蒸馏水。每周对各组大鼠血压测量1次;7周末,自腹主动脉取血,用于测定血清一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,同时取心脏组织HE染色后观察病理组织形态学的变化。结果:与高血压对照组相比,白沙绿茶提取物三个剂量组与氨氯地平组均对大鼠的血压有一定的降低趋势,差异具有统计学意义(P<0.01),白沙绿茶提取物高(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))、中(100 mg·kg^(-1)·d^(-1))剂量组和氨氯地平组(0.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))可显著升高血清NO和SOD含量,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:白沙绿茶提取物可升高SHR大鼠血清NO和SOD水平以及降低血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,产生降压效应,同时能有效逆转高血压大鼠病理性心肌重构。

螺旋藻蛋白及其水解产物对原发性高血压大鼠血压的影响

以9周龄雄性原发性高血压大鼠(SHR)为受试动物,研究螺旋藻蛋白及其水解产物对SHR血压的影响。将螺旋藻蛋白、胃蛋白酶水解产物、胰蛋白酶水解产物及复合酶水解产物以高中低三个剂量(5、1、0.2g/kg)分别灌胃SHR,以生理盐水为对照,用鼠尾无创动脉测量仪测定灌胃0、1、2、3、4、5、6、7、8h后SHR的血压变化情况。结果显示:胃蛋白酶水解产物、胰蛋白酶水解产物及复合酶水解产物在0～8h内对SHR的血压升高具有明显的抑制作用,其中高剂量组复合酶水解产物在0～6h内降压效果最佳,血压维持在较低水平的时间最长,达到了6h,血压值下降了(23.1±1.0)mmHg(1mmHg=133.322Pa)。

ACEI发酵乳对原发性高血压大鼠的降血压效果

脱脂乳经灭菌后,接种4%(体积分数)发酵剂,37℃培养24 h,获得抑制血管紧张素转换酶活性较高的发酵乳。以发酵乳及其乳清为样品,每种样品分别以10 mL/kg和20 mL/kg两种不同剂量连续3 d灌胃原发性高血压大鼠。结果表明,它们均具有较好的降血压效果,其中以20 mL/kg剂量的乳清降压效果最好,最大降压值为(3.4±1.36)kPa,最低血压持续时间为5 h。

基于基因芯片技术研究针刺人迎穴对原发性高血压大鼠下丘脑相关基因表达谱的影响

目的:应用基因芯片技术探究针刺人迎穴对SHR大鼠下丘脑基因表达的影响。方法:雄性SHR大鼠20只随机分为人迎组和模型组,另取10只WKY雄性大鼠为对照组。人迎组每天针刺人迎穴,模型组和对照组不进行干预,共28 d,结束后取材,进行基因芯片分析,并对关键基因进行PCR技术验证。结果:模型组大鼠血压明显高于对照组(P<0.01);人迎组大鼠血压明显低于模型组(P<0.01)。基因芯片结果显示:不同组别之间基因的表达存在差异。与对照组比较,模型组的基因数据分析显示有129个上调,243个下调;与模型组比较,人迎组有167个上调,188个下调。PCR结果显示:干预前模型组基因KLK1数量明显低于对照组,干预后模型组基因KLK1表达明显高于对照组。干预后模型组基因EPHX2和CHI3L1表达的数量低于对照组。PCR结果与基因芯片的数据分析结果相一致。结论:针刺人迎穴可有效降低原发性高血压大鼠的血压,影响其下丘脑中有关基因的表达,其机制可能与针刺抗炎、基因EPHX2、KLK1和CHI3L1的表达有关。

葛根发酵液对原发性高血压大鼠的降血压作用

目的分析葛根发酵液对原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)的降血压作用。方法利用植物乳杆菌发酵葛根汁得到葛根发酵液,将SHR大鼠随机分为6组,空白对照组、依那普利组、葛根汁组、葛根发酵液低、中、高剂量组。通过不同剂量的单次灌胃和5周连续灌胃给药实验,测定受试动物的血压情况及血液中一氧化氮(NO)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,分析葛根发酵液的降血压能力。结果与空白对照组和葛根汁组相比,葛根发酵液低、中、高剂量组的SHR大鼠的血压显著降低(P<0.05),且在同等灌胃剂量下,葛根发酵液的降血压能力显著优于葛根汁。血液中NO和SOD含量的测定结果表明,中、高剂量的葛根发酵液能够显著提高SHR大鼠血清中NO和SOD的含量(P<0.05),而葛根汁组、低剂量组和依那普利组的大鼠血清中NO和SOD的含量升高不显著(P>0.05)。结论葛根发酵液对SHR大鼠具有良好的降血压作用。

显齿蛇葡萄叶总黄酮对原发性高血压大鼠的降血压研究

为了探讨显齿蛇葡萄叶总黄酮对原发性高血压大鼠的影响,采用超声波辅助提取,D-101大孔树脂纯化制备显齿蛇葡萄叶总黄酮,将SHR大鼠40只随机分成正常组、模型组、显齿蛇葡萄叶黄酮组(100、200和400 mg/kg)和依那普利组(5 mg/kg),显齿蛇葡萄叶黄酮组和依那普利组按照体重分别给予对应药物灌胃10周,分别在10周和12周测定血压及血清中各项指标。同时利用显齿蛇葡萄叶黄酮不同剂量喂养正常大鼠6个月,测定血压及血清各项指标。结果显示,显齿蛇葡萄叶黄酮治疗原发性高血压大鼠10周后能明显降低血压,另外也降低血清中血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、内皮缩血管肽和丙二醛的含量和提高一氧化氮、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽的含量,对正常Wistar大鼠喂养后发现对血压基本没有影响。提示显齿蛇葡萄叶黄酮对原发性高血压大鼠具有明显的降血压效果,潜在的机理可能与肾素-血管紧张素的-醛固酮系统(RAAS)调制和抗氧化系统有关,另外显齿蛇葡萄叶黄酮对正常大鼠的血压没有影响,表明显齿蛇葡萄叶黄酮可用来作为天然药物或功能食品来预防高血压。

卡托普利对不同证型原发性高血压大鼠疗效观察

目的:探讨卡托普利对肾阴虚和阴虚阳亢型原发性高血压大鼠的疗效。方法:SPF级雌性Wistar大鼠60只,造模后随机分为肾阴虚组和阴虚阳亢组,每组再分为模型对照组、模型未处理组和模型给药组,每组10只。测量两模型未作处理组的全血低切黏度,对其他四组大鼠测血压后,两模型给药组施以卡托普利治疗,两模型对照组给以同剂量的生理盐水,一周后测血压及全血低切黏度。结果:通过检测血压和全血低切黏度,发现卡托普利对肾阴虚和阴虚阳亢型高血压动物模型在降低血压和全血低切黏度的疗效上均有差异(P<0.05)。结论:卡托普利对不同中医证型高血压和全血低切黏度具有不同的疗效,卡托普利在降血压效果上阴虚阳亢模型效果优于单纯肾阴虚模型,为临床按中医理论辨证应用西药提供了一定的实验依据。

无患子皂苷对原发性高血压大鼠血压的影响及对血管内皮的保护作用研究

目的:观察无患子皂苷(Sap)对原发性高血压大鼠的血压影响和降压作用的时效关系以及对血管内皮活性物质NO、ET、TXB2、6-k-PGF1α的影响。方法:将50只SHR大鼠随机分为5组:模型组、卡托普利组、无患子皂苷大、中、小三个剂量组各10只,每天灌胃给药1次,模型组灌服等量蒸馏水。测各组给药后20 min、40 min、60 min、80 min、100 min、120 min的血压,另测给药后1 d,3 d,7 d,14 d,21 d,28 d,35 d大鼠尾动脉收缩压;于末次药后1 h,用3.5%水合氯醛麻醉大鼠,经腹主动脉取血,测ET、TXB2和6-K-PGI1α的含量,NO采用硝酸还原酶法测定。结果:Sap对SHR大鼠有明显的降压作用,无患子皂苷大剂量组35 d降压作用仍然明显;Sap各用药组均能明显增加SHR大鼠血清中NO及血浆中6-K-PGI1α的含量,无患子皂苷大剂量组、卡托普利组与模型组比较,有非常显著性差异(P<0.01),且能够显著降低大鼠血清ET和血浆TXB2的含量。结论:Sap能够明显降低SHR大鼠的血压,并对大鼠血管内皮活性物质NO、ET、TXB2、6-k-PGF1α的含量均产生一定影响,可能是其降压作用机制之一。

黄连清降合剂对原发性高血压大鼠血压及血浆(清)ET、NO、AngⅡ的影响

目的:探讨黄连清降合剂的降压作用及作用机制。方法:选用30只自发性高血压大鼠(SHR),随机分为5组,分别采用尾动脉法测SBP、放射免疫分析法测血浆ET及AugⅡ、硝酸还原酶法测血清NO。结果:黄连清降合剂能降低SHR的血压,对心率无明显的影响,能降低SHR的血浆ET、升高血清NO并调整二者的平衡,降低血浆AugⅡ。结论:黄连清降合剂对SHR有明显的降压效应,其机制为降低血浆ET和升高血清NO并调整二者的平衡、降低血浆AngⅡ。

CT灌注结合醋甲唑胺负荷试验对32周龄原发性高血压大鼠脑血管储备功能的初步研究

目的：探讨CT灌注结合醋甲唑胺负荷试验评估原发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat，SHR）脑血管储备功能变化的可行性，并与病理实验结果对照，评价其对亚临床期脑缺血患者的临床应用价值。方法：正常对照组、SHR组各10只行常规脑CT灌注扫描及醋甲唑胺灌胃后1.5~2.0 h脑CT灌注扫描，测量负荷前后感兴趣区脑血容量（cerebral blood volume，CBV）、脑血流量（cerebral blood flow，CBF）、平均通过时间（mean transit time，MTT）及达峰时间（time to peak，TTP）值，并作统计学分析；光镜下观察大鼠脑石蜡HE染色切片小动脉管壁厚度、微循环毛细血管网情况，通过TTC染色明确各组大鼠脑组织有无脑梗死灶。结果：CT灌注扫描：两组大鼠负荷前后自身比较，正常组CBV、CBF、MTT、TTP值差异均有统计学意义（P＆lt;0.05），且负荷状态下CBV、CBF值增加，MTT、TTP值缩短；SHR组差异均无统计学意义。组间比较，两组大鼠负荷前后CBV、CBF、MTT、TTP值差异均有统计学意义（P＆lt;0.05），且SHR大鼠CBV、CBF值减低，MTT、TTP值延长。 HE染色示SHR组小动脉及微小动脉管壁重塑，管壁增厚、硬化，微循环毛细血管网数目相对减少。TTC染色示SHR大鼠脑组织无明确脑梗死灶。结论：SHR较正常大鼠脑血管储备减低，醋甲唑胺负荷CT灌注成像可反映脑血管储备功能改变，对亚临床期脑缺血患者的病情评估具有重要临床指导意义。

Val-Glu-Pro对原发性高血压大鼠的体内降压作用

Val-Glu-Pro(VEP)是从钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中发现的一种血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽.以原发性高血压大鼠(SHR)为模型,检测单次口服和一周间口服VEP的降压效果,并通过Real-timePCR和酶联免疫吸附法(ELISA)探索其对肾素-血管紧张素系统(RAS)主要成分在SHR大鼠肾脏和血清中的表达调控作用.结果表明:口服VEP的最低有效降压剂量为5mg/kg,加大剂量后表现出剂量效应,最低加权收缩压(WSBP)出现在口服后6h,最低加权舒张压(WDBP)出现在口服后4 h.在一周间口服试验中,10 mg/kg VEP处理组的WSBP在第5日显著低于负对照组.此外,口服VEP显著下调了SHR大鼠肾脏中肾素(renin)、ACE、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)类型1受体(AT1)的mRNA表达,并上调AngⅡ类型2受体(AT2)的mRNA表达,说明VEP的降压效果可能与对RAS系统的抑制作用相关,在高血压的预防和治疗中具有潜在的应用前景.