浙贝母提取液在大鼠尿液、粪便中的原型成分及代谢产物分析

目的 分析浙贝母提取液在大鼠尿液、粪便中的原型成分及代谢产物。方法 UPLC-Q-TOF-MS分析采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源;正负离子扫描。结果 在大鼠尿液中共检测出化学成分28种,其中原型成分19种,代谢产物9种;在大鼠粪便中共检测出化学成分53种,其中原型成分37种,代谢产物16种,去除重复后,共检测出化学成分66种,其中原型成分45种,代谢产物21种;粪便、尿液中共有原型成分24种,粪便中独有成分15种,尿液中独有成分6种;粪便、尿液中共有代谢成分6种,粪便中独有成分11种,尿液中独有成分4种。浙贝母主要活性成分贝母素甲、贝母素乙代谢途径包括Ι相代谢(羟基化、氧化脱氢、还原加氢)、Ⅱ相代谢(硫酸化)。结论 该方法快速准确,简单可行,可用于解析浙贝母体内过程,阐明其药效物质基础。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析香连丸的化学成分与小鼠体内的入血成分及代谢产物

目的采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术研究香连丸的体内外物质基础,对香连丸的主要成分、入血的原型成分及代谢产物进行定性分析。方法采用Thermo Accucore C_(18)柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm),0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,流速为0.4 mL·min^(-1),进样量为4μL。采用电喷雾(ESI)离子源,正、负离子扫描模式下采集质谱信息。结果通过分析各成分的精确相对分子质量、保留时间、二级碎片等质谱信息,并与对照品的质谱信息和相关文献信息进行比对,最终在香连丸提取液中共鉴定出75个化学成分,主要为生物碱类、倍半萜类、黄酮苷类、柠檬苦素类和有机酸类等成分。此外,在给药后的小鼠血浆中共鉴定出16个原型成分和15个代谢产物。血浆中发现的原型成分以生物碱为主,这些成分在体内的代谢途径主要有羟基化、去甲基化、还原、水解、氢化和葡萄糖醛酸化等。结论该方法可用于快速且全面地鉴定香连丸的体内外化学成分,其分析结果为进一步阐明香连丸的药效物质基础提供依据。

小儿扶脾颗粒体内原型成分分析及网络药理学研究

小儿扶脾颗粒是由经典名方“参苓白术散”精简化裁而来,具有健脾益气、和胃化积的功效,临床中常用来治疗小儿脾胃气虚、运化失职、消化不良等疾病,但是其药效成分及作用机制有待进一步研究。通过整合网络药理学与体内原型成分分析对小儿扶脾颗粒的主要活性成分及其分子作用机制进行研究,有助于增加数据库分析结果的真实与可靠性,为进一步临床精准用药、质控标志物的筛选奠定基础。基于BATMAN-TCM分析平台构建小儿扶脾颗粒“化学成分-靶标”网络,为了验证筛选得到的活性成分,应用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术对口服给药后大鼠血液及尿液中的药物成分进行分析。进而针对鉴定得到的体内原型成分,利用BATMAN-TCM分析平台构建“体内原型成分-靶标-通路”网络,探讨小儿扶脾颗粒的分子作用机制。基于BATMAN-TCM平台初步分析得到小儿扶脾颗粒6味药材的86个活性成分,其中仅有18.6%的化学成分进一步在大鼠的体内被检测到。利用基于体内分析得到的46个原型成分构建“体内原型成分-靶标-通路”网络,发现小儿扶脾颗粒通过辛酸、十八酸等8个主要活性成分干预胃酸分泌、胰岛素分泌等生物学过程实现健脾和胃的功效。该研究揭示了小儿扶脾颗粒的主要活性成分及其作用机制,为小儿扶脾颗粒物质基础及作用机制研究提供了一定的参考价值。

关黄柏水提物在大鼠血清、尿液和粪便中原型成分及其代谢产物的UPLC-Orbitrap Fusion Lumos Tribrid-MS鉴定

目的:应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱质谱法(UPLC-Orbitrap Fusion Lumos Tribrid-MS分析关黄柏水提物在正常大鼠血清、尿液及粪便中的原型成分及其代谢物,探讨关黄柏在大鼠体内的药效物质基础。方法:采用ACQUITY UPLC?CSHTMC18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱(0~15 min,2%~25%B;15~25 min,25%~50%B;25~28 min,50%~98%B),流速0.3 mL·min^(-1),进样量10μL,柱温40℃。运用加热电喷雾离子源(HESI),扫描范围m/z 100~1 000,正离子模式采集数据。通过比较给药后样品和空白样品的差异,对灌胃给予关黄柏水提物后大鼠血清、尿液和粪便中的原型成分及其代谢产物进行鉴定。结果:灌胃给予关黄柏水提物后,从大鼠血清、尿液及粪便中鉴定和表征了70个外源性成分,包括15个原型成分和55个代谢产物。其中15个原型成分包括12个生物碱和3个柠檬苦素,55个代谢产物包括52个生物碱和3个柠檬苦素。关黄柏水提物在大鼠体内的代谢途径主要包括脱饱和、甲基化、氧化、硫酸化及葡萄糖醛酸结合等反应。结论:生物碱在大鼠体内进行Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢,柠檬苦素类在大鼠体内主要进行Ⅰ相代谢,可为进一步解析关黄柏体内过程,阐明其药效物质基础提供实验依据。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析白术及其炮制品入血成分

目的:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS法对白术及其4个炮制品的入血成分进行识别,对比炮制前后差异,探讨其在大鼠体内的药效物质基础。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术进行分析,结合MarkView 1.2.1和Peak View软件,根据保留时间、精确相对分子质量、二级质谱裂解碎片及文献报道比对,对生白术、麸炒白术、土炒白术、焦白术及漂白术的入血成分进行初步分析鉴定。结果:共鉴定出15个共有入血成分,均为原型成分,依次为5-羟甲基糠醛、苯甲酸、2-氨基苯乙烯、邻甲氨基苯甲酸甲酯、莨菪亭、7-羟基香豆素、苯乙酸对羟基苯乙酯、薯蓣皂素、(+)-eudesma-4(14),7(11)-dien-8-one、8β-ethoxyasterolid、黄樟素、β-金合欢烯、邻苯二甲酸二正丁酯、棕榈酸、muscone。结论:该研究对白术及炮制品入血成分进行了较全面的分析,初步阐明了白术的药效物质基础,可为其后续实验研究提供参考。

基于UHPLC-Q-TOF/MS的地榆化学成分分析及大鼠体内代谢研究

目的采用超高效液相色谱和-四级杆串联飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)法分析地榆水提物在大鼠血清、尿液及粪便中的原型成分及代谢产物,探讨地榆中活性成分在大鼠体内的代谢途径。方法采用Thermo Acclaim^(TM) RSLC 120 C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm,2.2μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),进样量3μL,柱温40℃。运用电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 50~1500,正、负离子模式采集数据。通过比较灌胃地榆水提物后大鼠血清、尿液和粪便样品和空白组样品的差异,对原型成分及其代谢产物进行鉴定。结果灌胃给予地榆水提物后,从大鼠血清、尿液及粪便中鉴定出69个外源性成分,包括24个原型成分和45个代谢产物。其中24个原型成分包括16个酚类成分、7个三萜类成分及1个单萜烯醇苷。地榆水提物在大鼠体内的代谢途径主要包括还原、甲基化、脱水、氧化、硫酸化及葡萄糖醛酸结合等。结论所鉴定出的原型成分和代谢产物可为进一步解析地榆体内代谢过程,阐明其药效物质基础提供实验依据。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的桑白皮大鼠体内入血成分研究

目的:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)初步分析大鼠口服给药桑白皮后的入血成分。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱;流速400μL/min;柱温40℃;进样量5μL。采用电喷雾离子源,正、负离子模式下采集一、二级质谱数据,利用自建二级质谱数据库及相应裂解规律匹配法,结合文献数据鉴定血清中化学成分。结果:在给药后的大鼠血清中分析表征出了10个化学成分,均为原型成分,依次为:3,4-二羟基苯甲醛、咖啡酸、2,4-二羟基苯甲酸、秦皮乙素、葛根素、7-羟基香豆素、壬二酸、桑色素、桑辛素P、6-姜酚。结论:血清中鉴定出的原型成分可能是桑白皮潜在的活性成分,为其药效物质基础研究提供了依据。

复方中化学成分的变化及其发挥作用的精彩之旅

方剂是长期临床实践经验积累的宝贵财富,在预防和治疗疾病方面发挥了重要作用,在全世界范围获得了越来越广泛的认可。因此,阐明方剂在体内外的物质暴露形式是揭示其预防和治疗疾病的先决条件。该综述系统总结了复方中化学成分的变化及其发挥作用的精彩之旅,包括化学成分在该过程中可能的分子转化及其药理作用。方剂在煎煮过程中新生成一系列化合物,包括降解产物,聚合物、自组装超分子,中药汤剂是一个包含上述多类型成分的宝库。中药汤剂口服后,其化合物通过人体的肠道屏障、血脑屏障等多道屏障,经过肠道菌群、微生物代谢酶、内源性酶(主要是肝脏中的酶)的代谢、转化、修饰,形成了新的化合物、配合物、自组装超分子等新形式。该综述将为探索方剂体内活性成分暴露形式提供了重要参考。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的感冒清热颗粒入血成分分析

目的:分析大鼠口服给予感冒清热颗粒后的入血成分。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术,根据保留时间、精确相对分子量和二级质谱裂解碎片,结合对照品及文献报道比对,对感冒清热颗粒入血成分进行分析。结果:共表征了大鼠血清中的40个化学成分,其中,原型成分31个,代谢产物9个。结论:建立的UPLC-Q-TOF-MS/MS方法初步分析了感冒清热颗粒的入血成分,入血成分主要为黄酮类化合物。

基于UPLC-Q-TOF-MS^(E)技术分析栀子-川芎药对化学成分及入血成分

目的:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS^(E))技术对栀子-川芎药对的化学成分及入血成分进行识别,初步阐明其可能的药效物质基础。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS^(E)技术进行分析,结合Progenesis QI和Progenesis SDF Studio软件,根据保留时间、精确相对分子质量、二级质谱裂解碎片及对照品,鉴定和表征栀子-川芎药对体内外成分。结果:在栀子-川芎药对样品溶液中鉴定出20种化学成分,其中环烯醚萜类化合物4种,二萜类化合物4种,有机酸类化合物5种,苯酞类化合物4种,内酯类化合物3种。在给药小鼠血浆样品中鉴定出18种原型成分,7种成分来源于栀子,10种成分来源于川芎,1种栀子、川芎共有成分。结论:该研究对栀子-川芎药对水煎液及其入血成分进行了较全面的研究,初步阐明了栀子-川芎药对的药效物质基础,为其后续实验研究提供参考。

基于UPLC-Q-TOF/MS鉴定健脾益肠散大鼠体内外源物成分

目的基于UPLC-Q-TOF/MS技术研究健脾益肠散在正常大鼠体内的原型成分和代谢产物,归纳总结不同类型化合物的体内代谢规律。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸水(B),梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,柱温30℃,电喷雾离子源(ESI),在正、负离子模式下对色谱流出物进行质谱检测。结果从大鼠血浆、尿液、粪便中鉴定出34个原型成分、79个代谢成分,主要代谢途径包括氧化、还原、甲基化、葡糖醛酸结合、硫酸结合等。结论对健脾益肠散在大鼠体内的外源物成分进行快速有效的定性,为揭示其功效成分的作用机制提供物质基础。

基于UPLC-QE-Orbitrap-MS法的芪蛭降糖胶囊血清药物化学研究

目的对芪蛭降糖胶囊进行血清药物化学分析,阐明其口服吸收后的入血成分。方法采用UPLC-QE-Orbitrap-MS技术,对芪蛭降糖胶囊醇提物、空白血清、含药血清进行对比分析,根据精确分子量、分子式、碎片离子对比标准品及文献相关信息,明确血中移行成分。结果共鉴定并表征了36种成分,包含15种原型成分、21种代谢产物。原型成分包括酚酸类、环烯醚萜苷类、黄酮类、三萜皂苷类化合物,代谢产物主要为原型成分发生羟基化、去羟基化、甲基化、去甲基化、乙酰化、硫酸酯化等反应得到的产物。结论该方法快速、准确,可用于鉴定芪蛭降糖胶囊的入血成分,可为明确该制剂药效物质基础、提升其质量控制标准提供科学依据。

炒菟丝子在大鼠胆汁中的化学成分分析

运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术研究炒菟丝子在大鼠胆汁中的原型成分及其代谢产物,并明确其在胆汁中的代谢转化规律.采用Agilent ZORBAX HPLC Eclipse Plus C 18(100 mm×3 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),进样量3μL,柱温30℃.运用电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 50~1200,正、负离子模式下采集胆汁样品谱图信息.结合相关文献信息自建库,从含药胆汁中共鉴定出28种化学成分,其中原型成分4种,代谢产物24种,炒菟丝子在胆汁中发生代谢转化类型有甲基化、葡萄糖醛酸化、氧化脱氢等.就炒菟丝子在大鼠胆汁的化学成分进行分析和代谢过程研究,可为后期炒菟丝子的体内代谢过程及其药效物质基础研究提供依据和参考.

秦岭岩白菜入血成分及其代谢产物的UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS分析

目的:研究秦岭岩白菜提取物在大鼠体内的入血原型成分及代谢产物。方法:采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS)技术,通过比对秦岭岩白菜提取液、空白血清和含药血清的图谱差异,根据保留时间、相对分子质量,以及一级、二级离子碎片,解析秦岭岩白菜提取物经大鼠灌胃给药后血清中的原型成分和代谢产物,检测条件为流动相选择甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~40 min,5%~95%A;40~45 min,95%A),流速设定0.3 mL·min^(-1),进样量1μL,加热电喷雾离子源,检测范围m/z 80~1200,正、负离子扫描模式。结果:大鼠口服给药后,共在血清中检测到35个移行成分,其中6个为原型成分,29个为代谢产物。经鉴定6个原型成分分别为熊果苷、mallonanoside A、岩白菜素、ardimerin、水杨酸、鞣花酸,29个代谢产物主要是来自含有没食子酸、mallonanoside A、岩白菜素、儿茶素、鞣花酸等结构单元的化合物代谢物,其代谢途径主要为葡萄糖醛酸化、硫酸酯化、甲基化等,以Ⅱ相代谢为主。结论:入血成分及其代谢产物可能是秦岭岩白菜体内直接作用的药效成分,其中mallonanoside A、岩白菜素、鞣花酸在体内既可以原型成分入血,又可以经过Ⅱ相代谢发挥药效;而秦岭岩白菜药材中的其他大多数化学成分在体内可能主要是先通过水解等途径转化为没食子酸、岩白菜素、儿茶素等简单结构,再进一步发生Ⅱ相代谢。

基于UHPLC-Q/TOF-MS技术鉴定青钱柳叶在大鼠体内的入血成分及代谢产物

目的研究青钱柳叶在大鼠体内的入血成分及代谢产物。方法采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q/TOF-MS)鉴定大鼠血清中的化学成分,通过比对青钱柳叶、空白血清和含药血清的图谱差异,解析青钱柳水提液经大鼠灌胃后血清中的原型成分和代谢产物。结果共鉴定得到15个入血成分,6个为原型成分,9个为原型成分的代谢产物。入血的原型成分主要为咖啡酰奎宁酸类、黄酮类和皂苷类,代谢途径主要有甲基化和羟基化。结论该研究表明入血的原型成分可能是青钱柳叶的有效成分,为阐明其药效物质基础提供了一定的依据。

吴茱萸致肝毒性部位在大鼠体内的多样性分析

利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)技术对吴茱萸肝毒性部位给药后大鼠胆汁、尿液、粪便中的原型成分及其代谢产物进行分析,共检测到23个原型成分和10个代谢产物。采用正离子MS^(E)扫描模式采集质量范围m/z 50~1200的数据,通过与UNIFI软件数据库比对,以及各成分的保留时间、精确的一级和二级质谱信息,结合化合物的裂解规律和已有文献报道,共鉴定出29个化学成分,包括23个原型成分和6个代谢产物。进一步由代谢产物逆向追踪原型成分,推测出可能的代谢途径。这些成分在体内的主要代谢途径有葡萄糖醛酸结合、硫酸酯化、甲酰基化、羟基化、去甲基化等。基本明确了吴茱萸肝毒性部位在大鼠胆汁、尿液和粪便中的主要存在形式及代谢途径,为揭示吴茱萸肝毒性物质基础提供了参考依据。

基于UPLC-HRMS的大鼠体内栀子多成分序贯代谢研究

目的采用序贯代谢方法结合超高效液相色谱-高分辨质谱联用(UPLC-HRMS)技术,鉴定给药后不同血浆样品中的原型成分与代谢产物,研究栀子化学成分在大鼠体内不同部位的代谢情况。方法首先制备栀子提取液,然后通过肠灌流和封闭肠环法分别收集肠壁代谢、肠道菌群代谢、肝代谢的血浆样品,ig给药后收集综合代谢血液样品,结合UPLC-HRMS对各个样品所含成分进行分析与鉴别。结果从栀子提取液中共检测到环烯醚萜苷类、萜类、有机酸类和栀子黄色素类等46个化学成分。序贯代谢研究结果表明,在肠代谢样品中检测到38个原型入血成分和22个代谢产物,肝代谢样品中检测到25个原型入血成分和16个代谢产物,综合代谢组样品中检测到14个原型入血成分和10个代谢产物。结论基于序贯代谢方法,解析栀子在大鼠体内的原型入血成分与代谢产物,不同代谢部位成分的差异为阐明栀子代谢成分在体内的生物转化过程提供了依据。

基于胃肠动力障碍模型大鼠的气滞胃痛颗粒血清药物化学初步研究

目的利用血清药物化学研究胃肠动力障碍模型大鼠灌胃气滞胃痛颗粒后的入血成分。方法采用超高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱技术,确定胃肠动力障碍大鼠口服气滞胃痛颗粒提取物后血中移行成分及其代谢产物。结果胃肠动力障碍模型大鼠灌胃给予气滞胃痛颗粒后血清中检测25个移行成分,4个原型入血成分及21个代谢成分,并对其中的18个成分进行了结构推测。结论血中移行成分及代谢产物可能为气滞胃痛颗粒发挥促胃肠动力的体内直接作用物质,为明确气滞胃痛颗粒药效物质基础提供了科学依据。

基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS的羊红膻血清药物化学分析

目的:对羊红膻药材进行血清药物化学研究,分析其体内入血成分。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-轨道肼高分辨质谱联用(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,通过比对羊红膻药材、空白血清和含药血清的图谱差异,解析羊红膻水提液经大鼠灌胃后血清中的原型成分和代谢产物。结果:给药后,从血清中鉴定了43个吸收入血成分,其中19个为原型成分,24个为原型成分的代谢产物。入血的原型成分主要为咖啡酰奎宁酸类、黄酮类和小分子酚酸类。结论:该研究较为全面地阐释了羊红膻水提液在大鼠血中的移行成分,为进一步研究其药效物质和作用机制奠定基础。

UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术研究真武汤在大鼠体内入血成分及药动学

目的:研究真武汤在大鼠体内的入血成分及其代谢物,并对4种入血成分进行药动学研究。方法:采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术结合Compound Discover 3.0软件,通过对比真武汤样品、空白血浆、给药血浆色图谱,鉴定并推测真武汤在大鼠血浆中的原型化合物及代谢物。在此基础上,对苯甲酰新乌头原碱、白术内酯Ⅲ、芍药苷、6-姜酚进行药动学研究。结果:共鉴定了24种原型化合物和18种代谢物,主要代谢途径为氧化、还原、水解、去甲基、去亚甲基、去苯甲酰基、葡萄糖醛酸化等。药动学结果显示,4种成分的C_(max)在131.7~351.1 ng·mL^(-1),t_(max)在0.53~1.58 h,t_(1/2)在4.82~7.24 h,AUC_(0~24)在804.1~1980.7 ng·h·mL^(-1),AUC_(0~∞)在882.7~2108.8 ng·h·mL^(-1),MRT_(0~24)在5.47~6.89 h,MRT_(0~∞)在6.58~9.36 h。结论:分析了真武汤的入血成分并进行药动学研究,对真武汤体内药效物质基础及其临床应用研究提供实验依据。