层理鞭枝藻pecF基因的N端缺失及其表达

采用PCR技术 ,以层理鞭枝藻DNA为模板 ,扩增藻红蓝蛋白重组酶F基因 (pecF)部分DNA片段 ,从而获得pecF的N端缺失突变 ,该片段 (pecFn)的大小为 4 86bp .把pecFn插入pBluscript的多克隆位点得重组质粒pBlu pecFn ,经DNA序列测定 ,与文献报道的pecF基因该部分序列一致 .表达载体pGEMD经PvuⅡ、XhoⅠ双酶切消化 ,与pecFn连接 ,酶切鉴定pecFn已正确插入到该表达载体中 .将表达质粒pGEMD pecFn转化E .coliBL2 1(DE3) ,细胞经IPTG诱导 ,获得了高效表达 ,表达蛋白质的分子量为 18kDa。