牙鲆Ⅰ型甲腺原氨酸脱碘酶基因片段的克隆及序列分析

在GenBank中查找到已知的斑马鱼、奥尼罗非鱼、金头鲷、爪蟾等物种的Ⅰ型甲腺原氨酸脱碘酶的基因序列并运用Primer Premier 5.0软件对这些物种的Ⅰ型甲腺原氨酸脱碘酶基因序列进行同源性分析。依据同源性较大的保守区基因序列设计一对引物,并提取变态期牙鲆仔鱼总RNA作为模板进行RT-PCR,得到一条cDNA片段。将产物连接到T载体中,转化、扩增重组质粒。提取大肠杆菌中的重组质粒进行DNA测序。将DNA测序所得到的基因序列翻译成蛋白序列和已知的奥尼罗非鱼、金头鲷、底鳉、斑马鱼的Ⅰ型甲腺原氨酸脱碘酶基因序列进行同源性分析。结果显示,利用RT-PCR的方法扩增出一条280 bp的目的基因片段,比对结果发现其和奥尼罗非鱼、金头鲷、底鳉、斑马鱼的Ⅰ型甲腺原氨酸脱碘酶基因的蛋白序列的同源性分别为85%,83%,81%,71%。对蛋白序列进行生物信息学分析发现整个蛋白序列中无信号肽,无糖基化位点,无跨膜结构域,但含有一个典型的T4_deiodinase结构。在N-端第69～70区段有β-折叠中心;第35～37区段可能形成转角或无规则卷曲;第8～13区段,第16～20区段等区段是柔性区域。D1蛋白N端第8～11区段,第47～55区段,第90～91区段为优势抗原表位区域。本实验所获得的基因序列是前尚未见报道的牙鲆Ⅰ型甲腺原氨酸脱碘酶基因序列的一部分,为进一步研究该基因的结构与生物学功能奠定了基础。

Ⅰ型碘化甲状腺原氨酸脱碘酶为含硒半胱氨酸酶

作者和其它学者已经报道了将从大鼠肝脏提取的分子量为1.9～2.4kb 的聚(A)^+RNA 注入卵母细胞之后,在卵母细胞中有Ⅰ型5′脱碘酶活性表达。他们现已建立一个含单向信息流的按片段大小分出的大鼠肝cDNA 基因库。

妊娠期患不同甲状腺疾病产后胎盘碘化甲状腺原氨酸脱碘酶表达的变化

目的探讨孕妇在不同甲状腺疾病及自身免疫状态时，胎盘Ⅱ型和Ⅲ型碘化甲状腺原氨酸脱碘酶（D2、D3）表达的变化。方法选择处于不同甲‘状腺功能及自身免疫状态的孕妇为研究对象，并以既往无甲状腺疾病及相关疾病史、妊娠期甲状腺功能正常且抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）阴性的孕妇作为对照，用RT．PCR法对所获得的足月产孕妇的胎盘组织进行D2、D3的检测，观察表达的变化。结果胎盘组织中同时存在D2和D3的表达。在甲减未控制组产妇胎盘中，D2的相对灰度值为0．916±0．035，高于正常对照组的0．833±0．029（P〈0．05）；而D3的相对灰度值低于正常对照组（0．766±0．038与0．848±0．052），但差异无统计学意义（P〉0．05）。妊娠前或妊娠中有甲亢或甲减的孕妇，经过有效治疗，分娩前甲状腺功能已控制在正常范围的产妇，其胎盘D2及D3的表达与正常对照组比较差异无统计学意义（P均〉0．05）。甲状腺功能正常但TPOAb阳性的产妇，其胎盘D2和D3的相对灰度值分别为0．842±0．032、0．837±0．053，与正常对照组相比差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论人类胎盘组织中D2和D3并存。在母体甲减时，胎盘中D2的表达增强，D3的表达有所减弱，这种变化可能对稳定母体与胎儿间甲状腺激素输送起有益的作用。

碘化甲腺原氨酸脱碘酶的研究进展

甲状腺激素是哺乳动物生长发育的重要调节激素，碘化甲腺原氨酸脱碘酶是调控甲状腺激素的主要蛋白酶。其可分为3种类型，有相似的结构，但功能各异，在不同的组织器官，如大脑、子宫、胎盘和肝脏等发挥着不同的生理作用。甲状腺疾病、非甲状腺疾病病态综合征及糖尿病等内分泌疾病，以及一些药物的使用等均能影响其活性。

DIO1抑制喉鳞状细胞癌侵袭转移的机制研究

目的研究碘甲原氨酸脱碘酶Ⅰ(DIO1)在喉鳞状细胞癌(LSCC)侵袭转移中的调控作用。方法将TU686细胞分为对照组(正常TU686细胞)和DIO1过表达组(转染DIO1),并根据过表达量继续分为DIO1-1μg组、DIO1-2μg组。RT-qPCR检测DIO1基因表达,CCK-8实验检测细胞增殖能力,PI/DAPI染色检测细胞凋亡情况,划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,基因探针富集分析相关基因集的富集情况,Western blot检测DIO1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、p-S6K1、p-4EBP1、p-Akt蛋白表达水平。结果DIO1过表达组DIO1 mRNA、蛋白水平高于对照组(P<0.01)。24、48、72 h,DIO1过表达组光密度值低于对照组(P<0.01)。DIO1过表达组PI染色阳性比例高于对照组(P<0.01)。DIO1过表达组相对迁移距离短于对照组(P<0.01)。DIO1过表达组迁移及侵袭能力低于对照组(P<0.01)。DIO1表达与上皮间质转化、mTORC1信号通路相关基因集的表达呈负相关(NES<0)。DIO1-1μg组、DIO1-2μg组E-cadherin高于对照组,N-cadherin、Vimentin、p-S6K1和p-4EBP1低于对照组(P<0.01)。DIO1-1μg组、DIO1-2μg组与对照组p-Akt比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论DIO1可作为抑癌基因,在LSCC侵袭转移中起关键作用。

海洋无脊椎动物甲状腺激素信号通路的研究进展

在脊椎动物中,甲状腺激素信号通路是调控生长、发育和机体能量代谢必不可少的信号通路之一,并且参与了两栖类和鱼类的变态反应。近来,越来越多的证据表明,在海洋无脊椎动物中存在内源性的甲状腺激素、甲状腺激素受体等信号通路的成员分子,而且这些分子参与了海洋无脊椎动物的发育和变态过程。这表明在海洋无脊椎动物中存在与脊椎动物类似的甲状腺激素信号通路。综述了海洋无脊椎动物中甲状腺激素信号通路的相关研究进展,旨在为研究甲状腺激素在海洋无脊椎动物的生物学功能及其作用机制提供基础资料。

DIO3基因在肿瘤发病机制中的作用研究进展

碘甲腺原氨酸脱碘酶3(DIO3)基因是编码3型碘甲状腺原氨酸脱碘酶的印迹基因。大量研究显示,DIO3基因与多种疾病的发生、发展相关,特别是在肿瘤的发病中扮演重要角色。DIO3基因可影响肿瘤细胞增殖和分化,参与肿瘤的发生、发展过程,可能成为肿瘤药物治疗的新靶点。该文就DOI3基因在肿瘤发病机制中作用的研究进展作一综述。