低分子肝素对大鼠创伤性深静脉血栓形成中促细胞分裂原活化蛋白激酶通路的影响

观察低分子肝素治疗大鼠创伤性深静脉血栓形成的效果,从基因水平探讨低分子肝素治疗创伤性深静脉血栓形成的作用机制。将150只SD大鼠采用定量击打双侧大腿+双后肢石膏固定的方式造模,再将造模后5天有血栓形成的大鼠,随机分为药物治疗组和对照组,分别用低分子肝素和生理盐水进行干预,第一次干预后3h,各组随机取10只大鼠股静脉血管及其主要属支,采用Trizol一步法提取总RNA,运用Gene-chip Rat Genome 4302.0芯片测定股静脉RNA表达。倍数变化分析筛查出差异性表达基因,进一步行path-way分析。结果表明:对照组比较,药物组血栓消退率较高(x2=4.698,P<0.05);有1229个基因呈现差异性表达,该基因主要参与了MAKP、Ca2+、细胞因子及受体信号传导通路,参与MAPK通路的始动基因如IL1、TGF、FGF及其受体,末端效应基因如c-Junn、ur77、p53等均呈现上调。低分子肝素可调控促细胞分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路并影响血栓的预后。

杜氏盐藻MAPK基因cDNA的克隆及其进化分析

以杜氏盐藻Dunaliella salina总RNA为模板，根据其它物种MAPK基因的保守序列设计一对简并引物，通过RT—PCR技术扩增获得1条297bp的cDNA片段。再以此片段为模板设计引物，通过RACE技术获得杜氏盐藻MAPK基因的全长序列。杜氏盐藻MAPK基因由664个氨基酸组成，大小为1994bp。在Genebank中进行Blastp检索，发现其与许多物种的MAPK基因具有较高的相似性（55．6％～69．7％）。系统进化分析进一步证明，杜氏盐藻MAPK与衣藻Chlamydomonas reinhardtiiMAPK亲缘关系最近。

MAPKs在细菌所致细胞凋亡中的作用

MAPK家族是与细胞生长、分化、凋亡等密切相关的信号转导途径中的关键物质,它在介导细胞凋亡过程中起着重要的作用。近年研究发现MAPK途径在调控细菌诱导细胞凋亡的过程中发挥了极为重要的作用。探讨细菌诱导细胞凋亡的发生发展过程与MAPK信号途径中各成员间的关系,有助于从分子水平上更好地阐明病原微生物的致病机制,可能为开发新型抗感染药物提供新的靶点。

有机氯农药雄性生殖毒性中MAPK信号转导途径的作用机制

促有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导途径与细胞生长、分化、凋亡等密切相关,在介导细胞凋亡过程中起着重要作用。近年研究发现MAPK途径在调控有机氯农药诱导雄性生殖毒性中发挥了极为重要的作用,并且发现活性氧的大量生成是介导有机氯农药作用于MAPK途径的关键性物质。探讨有机氯农药诱导细胞凋亡的发生发展与MAPK信号途径关系,有助于从分子水平上深入的阐明有机氯农药诱导雄性生殖障碍的作用机制。

益智仁对脑老化小鼠认知能力及相关信号蛋白表达的影响

目的 探讨益智仁（Alpinia oxyphylla fructus,AOF）对D-半乳糖致脑老化小鼠学习记忆能力的影响及机制.方法 给小鼠连续皮下注射D-半乳糖,建立脑老化动物模型,用被动回避实验、Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,用Western blot检测海马突触素（Syn）、促细胞分裂原活化蛋白激酶（MAPK）、蛋白激酶C（PKC）的表达水平.结果 ①被动回避实验：脑老化组的潜伏期[（119.80±101.80）s]显著短于对照组[（279.30±31.64）s]（P＜0.01）,错误次数[（4.4±1.3）次]显著多于对照组[（1.8±0.9）次]（P＜0.01）;而AOF低、中、高剂量组的潜伏期[（170.25±68.31）s,（226.31±73.25）s,（263.20±70.55）s]显著长于脑老化组（P＜0.05,P＜0.01）,中、高剂量组的错误次数[（2.8±1.2）次,（2.3±0.9）次]显著少于脑老化组（P＜0.05,P＜0.01）.②水迷宫实验：脑老化组的逃避潜伏期显著长于对照组（P＜0.01）,在原先放置平台象限的停留时间显著短于对照组（P＜0.01）;而AOF低、中、高剂量组的逃避潜伏期显著短于脑老化组（P＜0.05）,中、高剂量组在原先放置平台象限的停留时间显著长于脑老化组（P＜0.05,P＜0.01）.③Western blot实验：与对照组相比,脑老化组海马Syn、MAPK、PKC的表达显著降低,而AOF组可显著提高Syn、MAPK、PKC的表达.结论 益智仁可显著改善脑老化小鼠的学习记忆能力,其机制可能与上调海马Syn、MAPK、PKC的表达有关.

苦参碱对皮肤角质形成细胞IL-17R、p-p38 MAPK和炎症因子的影响

目的考察苦参碱(matrine,Mat)对皮肤角质形成细胞(keratinocytes,KC)系HaCaT细胞白细胞介素-17受体(IL-17R)、p-p38 MAPK表达的影响,及其对HaCaT细胞分泌白细胞介素(IL)-6、IL-8、MIP-3α等炎症因子的影响。方法采用RT-PCR方法检测Mat对皮肤KCIL-17R mRNA表达的影响;采用流式细胞术检测Mat对HaCaT细胞IL-17R蛋白含量的影响;采用Western blot方法检测Mat对HaCaT细胞表达p-p38 MAPK的影响;ELISA法检测Mat对HaCaT细胞分泌炎症因子IL-6、IL-8及MIP-3α的影响。结果Mat可降低HaCaT细胞表达IL-17R和p-p38 MAPK,以及降低HaCaT细胞IL-6、IL-8、MIP-3α等炎症因子的分泌。结论Mat可通过抑制IL-17R的表达,阻止p38MAPK的磷酸化过程而具有抗炎作用。

MAPK^(ERK1/2)信号通路在狼疮肾炎外周血单个核细胞表达白细胞介素-6mRNA中的作用

目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶-细胞外调节激酶1/2(MAPKERK1/2)信号通路在狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)中自发高水平表达白细胞介素(IL)-6mRNA中的作用。方法分离培养患者PBMC,利用蛋白免疫印迹法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测MAPKERK1/2磷酸化活化程度和IL-6mRNA表达水平,并与正常人群比较。结果26例LN患者与21名健康对照者比较,LN患者PBMCMAPKERK1/2信号通路呈高度活化状态,体外培养可自发表达高水平IL-6mRNA,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。应用特异性阻断剂PD98059阻断LN患者PBMCMAPKERK1/2信号通路活化可显著抑制IL-6mRNA的自发高表达。结论LN患者PBMC中MAPKERK1/2信号通路异常活化,并在PBMC自发高水平表达IL-6mRNA中起作用。