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原生质体非对称电融合获得不结球白菜胞质杂种 被引量:23
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作者 侯喜林 曹寿椿 +1 位作者 佘建明 陆维忠 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期532-537,共6页
以不结球白菜OguCMS‘91H秋 10 0’ (不育系 )和‘91H秋 2 1’ (保持系 )为试材 ,研究了不同交流场强、交流频率、直流脉冲场强、直流幅宽及脉冲次数对非对称细胞融合效果的影响。结果表明 ,不结球白菜电融合的最适电场条件为交流场强... 以不结球白菜OguCMS‘91H秋 10 0’ (不育系 )和‘91H秋 2 1’ (保持系 )为试材 ,研究了不同交流场强、交流频率、直流脉冲场强、直流幅宽及脉冲次数对非对称细胞融合效果的影响。结果表明 ,不结球白菜电融合的最适电场条件为交流场强 2 0V/cm、交流频率15 0 0kHz、直流场强 2 0 0V/cm、直流脉冲幅宽 4 0 μs、直流脉冲次数 3次。融合产物用KM8P1培养基进行包埋培养 ,获得了 383块小愈伤组织 ,其中 32块分化出芽 ,形成 2 0株完整植株 ,驯化后栽培成活 8株 ,ZS2 、ZS6 、ZS8等 3株不育 ,后用保持系花粉授粉 ,分别收获种子。对胞质杂种的分子。 展开更多
关键词 不结球白菜 电融合 再生植株 胞质杂种 原生质 白菜
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原生质体非对称融合获得胡萝卜(Daucus carota L.)种内胞质杂种 被引量:20
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作者 司家钢 朱德蔚 +1 位作者 杜永臣 赵志伟 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期128-132,共5页
用紫外线辐射处理胡萝卜雄蕊瓣化型不育材料 7 0 8(供体 )的原生质体 ,与经 15mmol/L碘乙酰胺预处理的来源于可育材料 6 6 3的原生质体 (受体 )电融合 ,获得了 33株再生植株。所有再生植株营养体形态特征与受体亲本一致 ,染色体数目为... 用紫外线辐射处理胡萝卜雄蕊瓣化型不育材料 7 0 8(供体 )的原生质体 ,与经 15mmol/L碘乙酰胺预处理的来源于可育材料 6 6 3的原生质体 (受体 )电融合 ,获得了 33株再生植株。所有再生植株营养体形态特征与受体亲本一致 ,染色体数目为 18条 ,是二倍体。RAPD分析表明 ,所有再生植株核基因型与受体亲本一致 ;线粒体特异性引物 -STS4 引物PCR扩增中 ,所有再生植株均得到了与供体亲本一致的谱带 ,而与受体亲本不同 ,认为 33株再生植株均为胞质杂种。对 4株再生植株进行花期形态学鉴定 ,全部为雄蕊瓣化型不育株 ,进一步证实获得的为胞质杂种 ,雄蕊瓣化型细胞质不育性已由 7 0 8供体转移到受体可育材料 6 6 3中。 展开更多
关键词 原生质 非对称融合 胡萝卜 种内胞质杂种 非对称原生质融合 细胞质雄性不育性
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非对称灭活双亲原生质体融合法选育产果糖基转移酶的米曲霉新菌株的研究 被引量:5
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作者 何小妮 蒋波 +2 位作者 王玉海 张毅 陈子健 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第5期993-997,共5页
本文以生产果糖基转移酶的米曲霉SBB201(Aspergillus oryzae SBB201)为出发菌株,通过紫外联合氯化锂诱变获得产酶性能与生长性能各自优良的米曲霉菌株UV-A与UV-B,采用非对称灭活法对这两株菌株的原生质体进行紫外以及热灭活双灭活,然后... 本文以生产果糖基转移酶的米曲霉SBB201(Aspergillus oryzae SBB201)为出发菌株,通过紫外联合氯化锂诱变获得产酶性能与生长性能各自优良的米曲霉菌株UV-A与UV-B,采用非对称灭活法对这两株菌株的原生质体进行紫外以及热灭活双灭活,然后在PEG作为融合剂的介导下进行原生质体双亲融合,筛选出一株果糖基转移酶生产能力有较大提高的米曲霉新菌株,其酶活力达到了172.95 U/g,比出发菌株提高了64.57%。 展开更多
关键词 米曲霉 果糖基转移酶 非对称灭活 原生质融合
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植物原生质体非对称融合及其在育种上的应用 被引量:11
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作者 刘继红 邓秀新 《生命科学》 CSCD 1999年第A01期88-91,共4页
关键词 植物 原生质 非对称融合 育种 影响因素
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凤尾菇和香菇原生质体非对称融合 被引量:13
5
作者 王澄澈 梁枝荣 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2000年第3期413-415,共3页
The protoplasts of auxotrophic mutant monokaryon of Pleurotus. sajor-caju was used as recipient parenL the protoplasts of wild dikareon of Lentinus edodes were heat-inactivated and used as nuclear donor parent. The fu... The protoplasts of auxotrophic mutant monokaryon of Pleurotus. sajor-caju was used as recipient parenL the protoplasts of wild dikareon of Lentinus edodes were heat-inactivated and used as nuclear donor parent. The fusants of two parents showed some their individual characteristics and physiological difference between themselfs. Thrugh protoplast re-isolation and reversion of one randomly selective fusant, two parents had been recovered and the donor parent achieved some new physiological characteristics such as faster mycelial growth and earier fruiting.This experiment result showed that the idea and the method of polarized protoplast fusion used in this study may be used as routine procedure for strain improvement in adible fungi. 展开更多
关键词 凤尾菇 香菇 原生质 非对称融合 杂交育种
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凤尾菇和盖囊侧耳原生质体非对称融合的研究 被引量:7
6
作者 梁枝荣 赵良启 《菌物系统》 CSCD 北大核心 1999年第4期440-444,共5页
盖囊侧耳的双核体原生质体经过灭活处理作为供体与带有营养缺陷型标记的凤尾菇单核体原生质体受体融合,得到大量生长速度和菌落形态差异较大的融合子,这些融合子主要显示了供体菌株的特性,数次转接和进行原生质体再分离后,有的融合... 盖囊侧耳的双核体原生质体经过灭活处理作为供体与带有营养缺陷型标记的凤尾菇单核体原生质体受体融合,得到大量生长速度和菌落形态差异较大的融合子,这些融合子主要显示了供体菌株的特性,数次转接和进行原生质体再分离后,有的融合子再生菌株恢复了供体亲本的遗传特性,同时获得了一些新的生理特证。结果表明原生质体非对称融合可以作为食用菌原生质体融合育种的一种有效方式。 展开更多
关键词 盖囊侧耳 凤尾菇 原生质 非对称融合
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非对称灭活原生质体融合法选育头孢菌素C高产菌株 被引量:1
7
作者 蒲静 雷悦 +2 位作者 张世野 张成钢 徐威 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期167-170,共4页
目的选育高产头孢菌素C产生菌。方法分别以紫外线和加热灭活头孢菌素C产生菌Cephalosporium acremonium 18-U5和Cephalosporium acremonium 18-M6原生质体,并将两种灭活的原生质体经PEG4000融合,从融合株中筛选头孢菌素C高产菌株。结果... 目的选育高产头孢菌素C产生菌。方法分别以紫外线和加热灭活头孢菌素C产生菌Cephalosporium acremonium 18-U5和Cephalosporium acremonium 18-M6原生质体,并将两种灭活的原生质体经PEG4000融合,从融合株中筛选头孢菌素C高产菌株。结果获得高产头孢菌素C的顶头孢霉融合株Cephalosporium acremonium F20,发酵单位达4 655 mg.L-1。与双亲菌株相比分别提高了42.4%和34.9%。结论非对称灭活原生质体融合法选育头孢菌素C高产菌株的方法值得推广。 展开更多
关键词 头孢菌素C 顶头孢霉 原生质 融合 非对称灭活
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凤尾菇和裂褶菌原生质体非对称融合研究(英文) 被引量:11
8
作者 梁枝荣 安沫平 通占元 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2001年第1期111-115,共5页
具有双重营养缺陷型的裂褶菌单核体突变菌株的原生质体经过灭活处理后作为供体与同样带有营养缺陷型标记的风尾菇单核体原生质体融合,得到大量生长速度和菌落形态差异较大的多核体和双核体融合子.这些融合子主要显示了供体菌株的特性... 具有双重营养缺陷型的裂褶菌单核体突变菌株的原生质体经过灭活处理后作为供体与同样带有营养缺陷型标记的风尾菇单核体原生质体融合,得到大量生长速度和菌落形态差异较大的多核体和双核体融合子.这些融合子主要显示了供体菌株的特性,数次转接后,有的融合子从多核体转变成双核体,有的融合子完全恢复了供体亲本双核体的遗传特性,同时获得了一些有意义值得继续探讨的新的生理特性,如菌丝体在木屑 皮以及废棉培养料上生长速度较快,在平板培养基和木屑培养料上均较早较快地形成原基和子实体等.结果表明原生质体非对称融合是一种效率较高的融合方式,可以作为食用菌育种的一种有效途经. 展开更多
关键词 裂褶菌 凤尾菇 非对称融合 灭活供 复活 原生质 亲种
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原生质体非对称融合法获得花椰菜与ogura CMS甘蓝型油菜种间杂种 被引量:4
9
作者 惠志明 刘凡 +2 位作者 简元才 申书兴 赵泓 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期2372-2372,共1页
关键词 花椰菜 甘蓝型油菜 原生质 种间杂种 细胞质雄性不育系 融合 非对称 CMS 自交不亲和系 亲本繁殖
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灵芝原生质体电融合选育高产多糖菌株的研究 被引量:10
10
作者 高明侠 苗敬芝 +2 位作者 曹泽虹 董玉玮 吕兆启 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第6期89-91,共3页
采用灵芝原生质体电融合技术选育高产多糖菌株,通过电融合方法对紫芝(Ganoderma sinese)和赤芝(Ganoderma lucidnm)原生质体电融合条件进行了研究,表明灵芝原生质体电融合的最佳条件为:脉冲强度10 kV,脉冲间隙24μs,脉冲次数3次/s,最高... 采用灵芝原生质体电融合技术选育高产多糖菌株,通过电融合方法对紫芝(Ganoderma sinese)和赤芝(Ganoderma lucidnm)原生质体电融合条件进行了研究,表明灵芝原生质体电融合的最佳条件为:脉冲强度10 kV,脉冲间隙24μs,脉冲次数3次/s,最高融合率为0.038%。10 L罐发酵结果,选育的融合菌株GL-18的生物量和多糖含量分别为17.52 g/L和1.88 g/L,均高于亲本菌株。 展开更多
关键词 灵芝 原生质 电融合 选育 多糖
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原生质体电融合构建酵母多倍体的研究 被引量:14
11
作者 曾云中 左小明 +2 位作者 吴雪昌 张冬妮 陈士怡 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期264-270,共7页
为考察将STA基因导入酿酒酵母的可能性和研究糖化酵母在不同核倍性下STA基因的表达效应,从酿酒酵母HU-TY-1A及糖化酵母5101-7C、5206-1B、5301-14D出发,通过原生质体电融合技术,构建了11株核倍性分别为2n、4n、5n及8n的酵母多倍体.所用... 为考察将STA基因导入酿酒酵母的可能性和研究糖化酵母在不同核倍性下STA基因的表达效应,从酿酒酵母HU-TY-1A及糖化酵母5101-7C、5206-1B、5301-14D出发,通过原生质体电融合技术,构建了11株核倍性分别为2n、4n、5n及8n的酵母多倍体.所用电融合参数为:交变电场强度200v/cm,频率1MHz;电脉冲强度9kv/cm,宽度40μsec,脉冲数2个,间隔10sec,波形为方波.在糖化酵母单一亲株融合组合中,融合株检出采用菌落形态作为初检指标取得一定效果.其它融合组合则采用遗传标记检出更为可靠.所得融合率约为5×10^(-5)—1×10^(-3).所有融合株经15代以上传代培养,遗传稳定. 展开更多
关键词 酵母菌 真菌 原生质 电融合 多倍
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虎杖原生质体分离纯化及电融合初步研究 被引量:5
12
作者 周国海 陈雪香 +2 位作者 雷勇 王腊霜 曹庸 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1145-1149,共5页
以野生虎杖根状茎芽为外植体诱导虎杖愈伤组织,选取生长状况良好的愈伤组织作为原生质体分离材料,通过L16(44)正交试验对虎杖原生质体分离条件进行优化.结果表明:1.4%纤维素酶R-10,0.1%果胶酶,17%甘露醇的酶液,酶解时间7h,虎杖原生质体... 以野生虎杖根状茎芽为外植体诱导虎杖愈伤组织,选取生长状况良好的愈伤组织作为原生质体分离材料,通过L16(44)正交试验对虎杖原生质体分离条件进行优化.结果表明:1.4%纤维素酶R-10,0.1%果胶酶,17%甘露醇的酶液,酶解时间7h,虎杖原生质体分离效果最好.在80r/min振荡分离后虎杖原生质体得率为46.2%.以800r/min的离心速度纯化,纯化的原生质体得率为43.8%,其中原生质体的成活率为75%.通过对虎杖原生质体进行融合,原生质体的融合率为20.2%. 展开更多
关键词 虎杖 原生质 分离纯化 电融合
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马铃薯叶肉原生质体电融合参数优化及杂种植株再生 被引量:9
13
作者 蔡兴奎 柳俊 谢从华 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期494-498,共5页
以马铃薯栽培种“中薯2号”的无性系3#、8#和野生种Solanum chacoense叶肉原生质体为融合试材,优化马铃薯高效融合的电融合参数。研究表明,在交变电场(AC)100 V/cm、AC作用时间20 s、直流脉冲电压(DC)1 100 V/cm、DC脉冲时间60 μs、脉... 以马铃薯栽培种“中薯2号”的无性系3#、8#和野生种Solanum chacoense叶肉原生质体为融合试材,优化马铃薯高效融合的电融合参数。研究表明,在交变电场(AC)100 V/cm、AC作用时间20 s、直流脉冲电压(DC)1 100 V/cm、DC脉冲时间60 μs、脉冲数1次时,双核融合率可达40%以上。融合产物经过4-5个月的培养获得再生植株。对首先再生的15个株系通过RAPD标记检测,证明均为体细胞杂种。所用引物C-01能够同时扩增出杂种植株中双单倍体亲本11 00 bp和670 bp的特征带以及野生种S.chacoense亲本510 bp的特征带。 展开更多
关键词 马铃薯 原生质 电融合参数 RAPD 脉冲
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食用菌灭活原生质体电融合及属间融合产物的鉴定分析 被引量:13
14
作者 曾荣 刘祖同 张树庭 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期149-154,共6页
食用菌因其显著的营养、保健、药用及综合利用价值受到世人青睐。原生质体融合技术则为食用菌的育种和遗传学研究提供了一条很好的途径。食用菌的种内、种间乃至属间、目间的原生质体融合均已有过报道,但这些工作大多利用营养缺陷型标... 食用菌因其显著的营养、保健、药用及综合利用价值受到世人青睐。原生质体融合技术则为食用菌的育种和遗传学研究提供了一条很好的途径。食用菌的种内、种间乃至属间、目间的原生质体融合均已有过报道,但这些工作大多利用营养缺陷型标记的亲株,采用化学融合法完成。这种融合的效率较低,对亲株的标记繁琐费时,甚至会对菌株性状产生不良影响。最近,一种具有较高融合效率的物理融合法——电融合法以及非遗传性标记法分别被一些研究者所采用。本研究将原生质体电融合法与灭活标记法相结合来获得食用菌的属间融合产物,并采用包括同工酶分析和RAPD(或AP-PCR)方法在内的分子生物学方法,对食用菌属间杂交后代的遗传学特性进行初步探讨。 1 展开更多
关键词 食用菌 原生质融合 电融合 属间融合产物
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猕猴桃酒优质酵母的筛选及原生质体电融合条件初探 被引量:5
15
作者 张江波 岳田利 +1 位作者 高振鹏 袁亚宏 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第8期12-16,共5页
通过对发酵力、耗糖速率的测定,结合发酵过程中酸度的变化,从16株酵母菌中筛选出2株作为原生质体电融合的亲本菌株,对其原生质体制备及再生条件进行了研究。确定了两亲本的灭活条件和原生质体电融合的2项基本参数。结果表明,两亲本的最... 通过对发酵力、耗糖速率的测定,结合发酵过程中酸度的变化,从16株酵母菌中筛选出2株作为原生质体电融合的亲本菌株,对其原生质体制备及再生条件进行了研究。确定了两亲本的灭活条件和原生质体电融合的2项基本参数。结果表明,两亲本的最佳酶解去壁条件为酶量16mg/mL,酶解时间60min,亲本WF58最佳热灭活时间为15min,亲本WF65最佳紫外灭活时间为40min;采用BTX830型细胞融合仪,最佳的脉冲场强为2000V/cm,最佳的脉冲时间是30μs。 展开更多
关键词 猕猴桃酒酵母 原生质电融合 双亲灭活 原生质制备和再生
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空间电融合的烟草原生质体再生植株分析 被引量:4
16
作者 李秀根 陈爱地 +1 位作者 王六发 郑慧琼 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期361-368,共8页
报告了在"神舟四号"飞船中通过电融合获得的烟草融合细胞,经地面培养获得再生植株。空间飞行样品再生愈伤组织的频率为地面对照的3倍多,而植株再生频率却比地面对照约低20%,约有32%的再生植株可能具有杂种性状。选取叶形状变... 报告了在"神舟四号"飞船中通过电融合获得的烟草融合细胞,经地面培养获得再生植株。空间飞行样品再生愈伤组织的频率为地面对照的3倍多,而植株再生频率却比地面对照约低20%,约有32%的再生植株可能具有杂种性状。选取叶形状变化最为明显的H23号植株与黄花品种进行回交,回交一代的叶比原始材料宽,花的颜色与亲本黄花品种相同,表明空间微重力环境中融合的烟草原生质体能够再生植株,获得有繁殖能力的杂种。 展开更多
关键词 微重力 电融合 脱液泡原生质 烟草 细胞杂种
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龙眼荔枝属间原生质体电融合 被引量:14
17
作者 赖钟雄 陈振光 《福建农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期347-352,共6页
由龙眼的幼胚培养诱导、筛选出松散型胚性愈伤组织 ,由之建立了胚性悬浮细胞系 ;用同样的方法建立了荔枝的松散型胚性愈伤组织系 .龙眼的胚性悬浮细胞和荔枝的胚性愈伤组织在含纤维素酶和果胶酶各 10 .0g· L-1的 CPW- 13M的酶解液... 由龙眼的幼胚培养诱导、筛选出松散型胚性愈伤组织 ,由之建立了胚性悬浮细胞系 ;用同样的方法建立了荔枝的松散型胚性愈伤组织系 .龙眼的胚性悬浮细胞和荔枝的胚性愈伤组织在含纤维素酶和果胶酶各 10 .0g· L-1的 CPW- 13M的酶解液中酶解 ,经纯化后可得到较为纯净的原生质体 .采用电融合方法进行两种原生质体融合处理 ,获得了适宜的融合参数 ,融合率达 2 0 %以上 .融合产物经初步培养 。 展开更多
关键词 龙眼 荔枝 原生质电融合 属间融合
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原生质体电融合酵母多倍体生理特性的研究 被引量:6
18
作者 左小明 曾云中 +1 位作者 吴雪昌2张冬妮 朱晓平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期58-64,共7页
对原生质体电融合技术获得的11株酵母多倍体融合株,进行了一系列生理特性的分析比较,结果发现,在电融合过程中,融合株的细胞体积及DNA含量并不随着核倍性呈线性递增,而是有其特殊的变化规律。当糖化酵母sta1、sta2和... 对原生质体电融合技术获得的11株酵母多倍体融合株,进行了一系列生理特性的分析比较,结果发现,在电融合过程中,融合株的细胞体积及DNA含量并不随着核倍性呈线性递增,而是有其特殊的变化规律。当糖化酵母sta1、sta2和sta3在细胞核中各自纯合时,明显表现出表达的剂量效应。其中sta1、sta2纯合的融合株,在YEPS培养中,GA分泌可被淀粉大量诱导,表现出一定的二次生长特性。从分析结果推测。 展开更多
关键词 酵母 原生质 电融合 多倍 生理特性
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原生质体电融合选育米曲霉新菌株的研究 被引量:2
19
作者 唐洁 车振明 +1 位作者 李拴美 赵旭壮 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期219-223,共5页
本实验对米曲霉AS3.951和CICC2339的原生质体进行紫外灭活,然后对灭活双亲用CRY-3型细胞电融合仪进行原生质体电融合。通过筛选得到EF113和EF222两株融合株,其酶活力分别达到了7680U/g和7200U/g,远高于酶活低的亲本菌株AS3.951。
关键词 米曲霉 原生质 紫外灭活 电融合
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金色链霉菌原生质体电融合 被引量:8
20
作者 张瑾阳 吕婉瑜 +1 位作者 韩卫华 李焕娄 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期163-168,共6页
为了提高去甲基金霉素的发酵效价,将金霉素链霉菌产生去甲基金霉素的变株的原生质体与金霉素高产变株热灭活的原生质体,用非交流电场法和交流电场法进行了电融合。在非交流电场法实验中。先用25%PEG将原生质体聚集,再以BAEKON 2000和S... 为了提高去甲基金霉素的发酵效价,将金霉素链霉菌产生去甲基金霉素的变株的原生质体与金霉素高产变株热灭活的原生质体,用非交流电场法和交流电场法进行了电融合。在非交流电场法实验中。先用25%PEG将原生质体聚集,再以BAEKON 2000和SDⅡ型二种基因转移仪,采用几种不同的实验参数(脉冲强度、宽度和个数)进行融合,皆未能提高融合频率。交流电场法融合实验用SD3000细胞融合仪,当原生质体在交流电场(频率0.5MHz,强度800v/cm,作用时间60s)中形成串珠状后,施加直流脉冲(脉冲强度7kv/cm,宽度20μs,间隔0.5s,个数3),融合频率为2×10^(-4)左右,比50%PEG诱导的融合频率(2.5×10^(-5)高约一个数量级。对225株融合子进行了初筛发酵和效价测定。结果表明,其中效价高菌株所占百分数高于对照组(去甲基金霉素产生菌不同营养缺陷型的融合子),而且85%以上的融合子只产生去甲基组分。尽管融合子的发酵效价皆不稳定,但经过几次自然分离后仍获得了产量比出发菌株提高一倍左右并只产生去甲基组分较为稳定的融合子菌株。 展开更多
关键词 原生质 电融合 金霉素链霉菌
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