乳腺浸润性癌组织人表皮生长因子受体-2基因扩增状态与蛋白表达的比较研究

研究了乳腺浸润性癌组织人表皮生长因子受体-2在两种不同检测中对于基因扩增及蛋白表达的检测结果差异。选取2020年3月—2022年3月阳光融和医院收治的100例乳腺癌根治术患者(经病理证实均为乳腺浸润性导管癌)作为研究对象,后续比对中依据抛币法,将所有研究人员划分为人数均等的两组,其中免疫组实施全自动免疫组化检测;杂交组实施荧光原位杂交检测,将各组患者在检测期间对相应蛋白表达、基因扩增的结果进行评估,并记录二者之间的相关性及与其他项目的关系。经过相应检测后发现,两种检测方式均可在临床中广泛应用,通过联合使用后,可以为后续用药及患者预后情况进行准确评估。

通脉汤方对实验性动脉粥样硬化家兔胸主动脉表皮生长因子受体和c-myc基因表达的影响

目的探讨通脉方对实验性动脉粥样硬化家兔胸主动脉表皮生长因子受体和c-myc基因表达的影响。方法日本大耳白兔40只,随机分为4组:①对照组10只,以普通饲料喂养,每日两次;②模型组10只,以高胆固醇饲料[胆固醇0.5g/(kg.d)、蛋黄2g/(kg.d)和猪油2g/(kg.d)]喂养,每日两次;③通脉汤方低剂量组(简称低剂量组)10只,高胆固醇饲料喂养(剂量同模型组),同时予通脉汤方灌胃,每只剂量相当于生药7.3g/(kg.d),分上下午两次给药;④通脉汤方高剂量组(简称高剂量组)10只,高胆固醇饲料喂养(剂量同模型组),同时予通脉汤方灌胃,每只剂量相当于生药21.9g/(kg.d),分上下午两次给药;共喂养16周。运用免疫组织化学染色法检测主动脉表皮生长因子受体的表达,同时用内参比逆转录聚合酶链反应定量分析c-mycmRNA在主动脉的表达。结果模型组主动脉表皮生长因子受体及c-mycmRNA表达显著高于对照组(分别为0.327±0.030比0.209±0.006,P<0.01;0.52±0.11比0.34±0.07,P<0.01);高剂量组主动脉表皮生长因子受体及c-mycmRNA表达显著低于模型组(分别为0.242±0.014比0.327±0.030,P<0.01;0.41±0.07比0.52±0.11,P<0.05);低剂量组与模型组比较无显著差异(分别为0.301±0.027比0.327±0.030P>0.05;0.44±0.09比0.52±0.11P>0.05)。结论①动脉粥样硬化时促进血管平滑肌细胞增殖的表皮生长因子受体及原癌基因c-mycmRNA表达增强。②通脉汤方通过抑制血管壁表皮生长因子受体及c-myc基因的表达,从而抑制血管平滑肌细胞增殖。

肝细胞癌表皮生长因子受体3的表达及其临床意义

检测表皮生长因子受体3(ErbB3)在肝细胞癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达,探讨ErbB3在肝细胞癌中表达的临床意义。采用Western blot检测肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织和正常肝组织中ErbB3蛋白的表达。应用ErbB3抗体对60例HCC进行免疫组织化学染色,并通过测定ErbB3在HCC中的表达水平分析其与临床特性的相关性。结果显示,(1)ErbB3在正常肝组织中表达缺失,在HCC表达上调(t=4.082,P<0.05)。同一标本中,ErbB3在HCC的表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=4.184,P<0.05)。(2)伴有血管侵犯的HCC组中ErbB3的表达水平高于不伴有血管侵犯组(P<0.05)。有肝外转移的HCC组中ErbB3的表达水平高于不伴有肝外转移组(P<0.05)。ErbB3的表达水平与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤结节数目无关。(3)ErbB3表达阳性的HCC组中患者无进展生存期低于阴性组(P<0.05)。ErbB3在HCC中表达上调,在正常肝组织中表达缺失;ErbB3在HCC表达上调与血管侵犯和肝外转移呈正相关;ErbB3表达水平与患者无进展生存期呈负相关。

原癌基因c-erbB2和EGFR表达与大鼠肺纤维化的相关性

目的研究原癌基因c-erbB2和肺表皮生长因子受体(EGFR)的表达与大鼠肺纤维化的相关性,探讨肺纤维化的发生机制。方法采用博莱霉素气管注射法制造鼠肺纤维化模型。30只Wistar大鼠随机分为模型组和对照组,分别于第1、14、28天处死大鼠5只并留取标本,采用免疫组化SP法检测在不同程度肺纤维化条件下c-erbB2和肺内源性EGFR的表达,分析其与肺纤维化的相关性。结果①模型组c-erbB2和EGFR表达在各时间点均与对照组有统计学差异(P<0.01);②模型组c-erbB2表达1d最显著,EGFR表达28d达到顶峰,与同组其他时间点均有统计学差异(P<0.01);③模型组c-erbB2和EGFR水平在第14天与最低水平组(分别为第28天和第1天)比较有统计学差异(P<0.01);④模型组c-erbB2和EGFR表达与肺纤维化程度密切相关(相关系数r分别为-0.835和0.77,P<0.01)。结论 c-erbB2活化的同时,EGFR表达也逐渐增强,且c-erbB2、EGFR的活化水平与肺纤维化程度密切相关;c-erbB2和EGFR激活可能参与了肺纤维化的发生。

乳腺癌标本中BRCA-1蛋白表达与HER-2基因的临床意义

目的探讨乳腺癌标本中乳腺癌易感基因1（BRCA-1）和原癌基因人类表达生长因子受体2（HER-2）与疾病的相关性。方法选择百色市人民医院2013年1～12月乳腺外科手术切除患者85例,BRCA-1采用免疫组化法检测,HER-2采用荧光复位杂交检测。比较BRCA-1基因和HER-2在不同病理类型和是否有淋巴结转移患者中的差异。结果 BRCA-1基因在85例乳腺癌病理标本中,导管内癌阳性率为62.3%（5/8）,浸润性导管癌阳性率为77.3%（54/70）,乳腺髓样癌阳性率为71.4%（5/7）,差异无统计学意义（P〉0.05）。BRCA-1基因在有淋巴转移患者中阳性率为62.9%（22/35）,无淋巴结转移患者阳性率为82.5%（33/40）,差异有统计学意义（P〈0.05）。HER-2基因在85例乳腺癌病理标本中,阳性检出率为48.2%（41/85）;有淋巴转移患者阳性率为88.6%（31/35）例,无淋巴结转移患者阳性率为25.0%（10/40）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 BRCA-1基因、HER-2基因与乳腺癌的发生、发展有密切的关系,对早期预防、诊断、治疗乳腺癌有重要意义。

表皮生长因子受体与宫颈癌的研究进展

表皮生长因子受体（EGFR）是具有酪氨酸激酶活性的原癌基因c-erbB-1的表达产物。大量的研究显示,EGFR参与并促进了宫颈癌的发生及进展,并可作为一个判断预后的指标。因此,针对EGFR为靶点治疗宫颈癌的药物基础和临床研究备受关注。

标本离体固定时间对荧光原位杂交技术检测乳腺浸润性导管癌HER2基因的影响

目的探讨标本离体固定时间对荧光原位杂交(FISH)技术检测乳腺浸润性导管癌HER2基因的影响。方法选择原发性乳腺浸润性导管癌患者116例,将每例患者同一癌组织标本分成5份,根据标本离体固定时间将标本分为A组(5 min)、B组(30 min)、C组(60 min)、D组(90 min)、E组(120 min),每组各116例。采用FISH法检测各组HER2基因,观察各组HER2基因荧光镜检结果,比较各组HER2基因阳性检出率。结果 A、B、C组荧光显微镜下的细胞轮廓完整性、背景干净度均优于D、E组,且橘红/绿色荧光信号强度及数量均强于或多于D、E组。A、B、C组HER2基因阳性检出率均高于D、E组(均P <0. 005)。结论标本离体固定时间可影响FISH法检测乳腺浸润性导管癌HER2基因的结果,标本离体固定时间以30 min内为宜,最长不应超过60 min。

乳腺癌组织p16基因甲基化与ER、PR、HER2及p53表达的关系

目的探讨乳腺癌组织中p16基因甲基化与相关受体表达的相关性,进一步提高乳腺癌的诊断水平。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测86份乳腺癌组织及40份乳腺癌患者血清中p16基因的甲基化状态;采用免疫组化SP法检测乳腺癌组织中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(HER2)及p53基因表达,分析各指标之间及与乳腺癌之间的关系。结果乳腺癌组织及血清中p16基因甲基化率分别为29.1%、27.5%;15例ER、PR、HER2均为阴性表达者(三阴乳腺癌),p16基因甲基化率为86.67%(13/16),非三阴乳腺癌71例,p16基因甲基化率为16.9%(12/71),P<0.01。p16基因甲基化与ER、PR蛋白表达呈负相关(r=-0.425、-0.512,P均<0.05),与HER2表达呈正相关(r=0.443,P<0.05);与p53表达无明显相关性。结论 p16基因甲基化是乳腺癌中常见的分子改变,其与ER、PR、HER2联合检测可作为乳腺癌早期诊治及预后判断的重要指标。

KLK10和HER-2/neu基因在结肠癌中的表达及临床意义

目的:分析人组织激肽释放酶10(kallikreins10,KLK10)和人类表皮生长因子受体2(human epidermal receptor 2,HER-2)/neu与结肠癌临床病理之间的关系,探讨其与结肠癌临床预后的关系和他们之间的相关性.方法:用MaxVisionTM免疫组织化学方法检测的67例结肠癌患者的病理标本,10例结肠腺瘤组织以及10例正常结肠组织KLK10和HER-2/neu单/多克隆抗体在结肠癌、结肠腺瘤及正常结肠组织的表达情况,并对其结果进行了统计学分析.结果:KLK10和HER-2/neu在结肠癌的阳性率分别均为62.7%(42/67),56.7%(38/67);KLK10和HER-2/neu在结肠癌组织中的表达明显高于结肠腺瘤及正常结肠黏膜组织中的表达,差异有显著性统计学意义(P<0.05);在结肠癌组织中KLK10表达与结肠癌的TNM分期、分化程度、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),结肠癌组织中KLK10的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、病理分型、远处转移均无相关性(P>0.05).在结肠癌组织中HER2表达与结肠癌的TNM分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),结肠癌组织中HER2/neu的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、病理分型、分化程度、远处转移均无相关性(P>0.05);在结肠癌组织中KLK10的表达与HER-2/neu的表达呈正相关(r=0.260,P<0.05).结论:结肠癌组织中KLK10和HER-2/neu的阳性表达率明显高于结肠良性病变及正常结肠组织.在结肠癌组织中KLK10表达和HER-2/neu表达呈正相关.KLK10和HER-2/neu表达在结肠癌的发生发展过程中以及淋巴结转移过程中起重要作用.因此可以作为临床判定结肠癌预后的参考指标.

表皮生长因子受体跨膜区编码序列的克隆

目的 :克隆表皮生长因子受体跨膜区 ( Transm em brane,TM )编码序列 ,为构建跨膜型超抗原和细胞因子的表达载体奠定基础。方法 :以表达 c- erb- B2癌基因的中国卵巢癌细胞系 HO- 8910细胞的 RN A逆转录产物( c DNA)为模板 ,用两条针对 c- erb- B2全长基因序列中编码 TM区序列特异性的引物 ,采用 RT- PCR方法克隆 T M区片段并测序。结果 :实验克隆的 TM编码序列 ,经测序证实与 Genbank中接受号为 M11730的 TM区序列完全一致 ;与接受号为 X0 336 3的 TM区序列存在 G→ A的多态性。结论 :成功地克隆了 TM编码序列 ,并证实源于中国的卵巢癌细胞系 H O- 8910中所包含的表皮生长因子受体基因中编码的 TM区序列存在多态性。

翼核果素对肝癌HepG2细胞增殖、迁移的影响

目的研究翼核果素对肝癌HepG2细胞增殖、迁移的影响。方法通过CCK-8法、克隆形成实验、划痕实验、荧光定量聚合酶链反应(PCR)、Western印迹研究翼核果素对肝癌HepG2细胞的影响。结果与空白对照组比较,翼核果素对HepG2细胞增殖、集落形成有显著抑制作用,可显著降低细胞迁移率,对原癌基因(c-Myc)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)3 mRNA表达有显著的抑制作用,对细胞骨架蛋白β微管蛋白(tubulin)、埃兹蛋白(Ezrin)表达有显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01),但对c-Jun mRNA表达无明显影响(P>0.05)。结论翼核果素对HepG2细胞增殖迁移有抑制作用,机制可能与下调c-Myc、FGFR3、β-tubulin、Ezrin表达有关。

乳腺癌患者HER2基因表达状态及临床病理意义探讨

人类表皮生长因子受体2（HER2）定位于17号染色体q12-21,是具有酪氨酸激酶活性的跨膜生长因子受体。乳腺癌HER2基因扩增或蛋白过表达,与疾病进展和预后相关。目前临床上选用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）法进行筛查,

乳腺癌组织中原癌基因BMI-1及人表皮生长因子受体-2表达与外周血微转移的关系

目的观察乳腺癌患者乳腺癌组织中原癌基因BMI-1、人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)阳性表达情况,探讨乳腺癌组织BMI-1、HER-2与外周血微转移的关系。方法89例乳腺癌患者,均采用实时荧光定量PCR法检测人乳腺珠蛋白mRNA相对表达量;依据检测结果,89例患者中发生外周血微转移者41例为微转移组,未发生外周血微转移者48例为无微转移组。比较2组血清缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、基质金属蛋白酶-9(matrix metallopeptidase-9,MMP-9)水平,乳腺癌组织BMI-1、HER-2阳性表达率;多因素logistic回归分析乳腺癌患者发生外周血微转移的影响因素。结果微转移组血清HIF-1α[52.32(49.61,59.12)ng/L]、MMP-9[50.12(46.95,55.74)μg/L]水平及乳腺癌组织BMI-1、HER-2阳性表达率(78.05%、85.37%)均高于无微转移组[47.89(43.12,53.41)ng/L、48.12(43.21,51.06)μg/L、43.75%、47.92%](P<0.05)。血清HIF-1α(OR=1.780,95%CI:1.695~1.876,P=0.003)、MMP-9(OR=1.611,95%CI:1.521~1.913,P=0.004)及乳腺癌组织BMI-1(OR=7.000,95%CI:2.314~21.179,P=0.001)、HER-2(OR=9.666,95%CI:3.225~28.971,P<0.001)是乳腺癌患者发生外周血微转移的影响因素。结论乳腺癌患者癌组织BMI-1、HER-2表达升高;乳腺癌组织BMI-1、HER-2与乳腺癌患者发生外周血微转移有关。

bcl-2及c-Met基因在表皮生长因子受体基因不同突变肺癌细胞株中的表达

目的 通过检测bcl-2及c-Met基因在表皮生长因子受体（EGFR）基因不同突变类型的肺癌细胞株中的表达,初步探讨bcl-2及c-Met基因与非小细胞肺癌（NSCLC）耐药的相关性.方法 采用直接测序法验证A549、HCC827和H1975细胞中EGFR基因突变情况;免疫细胞化学法检测bcl-2及c-Met的蛋白表达水平;反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测bcl-2 mRNA水平;突变扩增阻滞系统（ARMS）法检测人恶性胸腔积液中EGFR基因突变情况.结果 直接测序法证实A549细胞为EGFR野生型,HCC827细胞为EGFR外显子19del突变,H1975细胞为EGFR 21外显子L858R与20外显子T790M双突变.免疫细胞化学染色结果显示c-Met及bcl-2蛋白均定位在细胞质,其阳性表达强度从高到低依次为HCC827、A549和H1975细胞.RT-PCR结果显示bcl-2 mRNA在HCC827和A549细胞中高表达（10.93±1.90、7.13±1.33）,与H1975细胞（0.83±0.15）相比,差异均有统计学意义（P=0.013,P=0.000）;然而bcl-2 mRNA表达水平与恶性胸腔积液脱落细胞中EGFR基因突变类型无关.结论 HCC827细胞（EGFR 19del）中bcl-2与c-Met基因和蛋白表达水平明显高于H1975细胞（EGFR L858R/T790M）,EGFR不同的突变类型可能与不同的信号通路相关.

结直肠癌术前区域动脉灌注化疗联合腹腔镜手术对患者血清EGFR HER-2 MMP-2表达及远期预后的影响

目的探讨结直肠癌(CRC)术前区域动脉灌注化疗(PRAC)联合腹腔镜手术对患者表皮生长因子受体(EGFR)、人类表皮生长因子受体(HER-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达及远期预后的影响。方法选取2014年1月至2015年12月在石家庄市中医院就诊的CRC患者164例,依据随机数字表法分为对照组81例(腹腔镜手术治疗)与研究组83例(PRAC联合腹腔镜手术治疗)。观察两组手术情况,治疗前后均测定患者血清EGFR、HER-2、MMP-2表达水平,统计患者并发症发生情况,比较患者治疗后1、3年预后情况及治疗后3年复发、转移情况。结果研究组术中出血量少于对照组(t=8.895,P=0.000)。两组治疗前后血清EGFR、HER-2、MMP-2表达水平差值比较,差异有统计学意义(t=6.357、3.509、6.345,P均<0.05)。两组并发症总发生率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.245,P=0.620)。研究组治疗后1年生存率(77/83,92.77%)显著高于对照组(61/81,75.31%),治疗后3年生存率(52/83,62.65%)显著高于对照组(29/81,35.80%),差异均有统计学意义(χ^(2)=9.371、14.039,P=0.002、0.000);随访中,研究组患者发生肝转移、肺转移、骨转移及局部复发共19例,对照组共31例,两组比较差异有统计学意义(χ^(2)=4.576,P=0.032)。结论PRAC联合腹腔镜手术能减少CRC患者术中出血量,降低血清EGFR、HER-2、MMP-2表达水平,远期生存率高且复发率少。

P53、Her-2和Ki67在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义

目的探讨P53、Her-2和Ki67在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法,分别研究128例甲状腺乳头状癌肿瘤组织,56例甲状腺腺瘤组织,以及9例正常甲状腺组织标本中P53、Her-2和Ki67的表达。结果 P53、Her-2和Ki67在正常甲状腺组织中无阳性表达。甲状腺乳头状癌组织中P53阳性表达率为85.15%(109/128),高于腺瘤组织的26.78%(15/56)(P<0.05)。甲状腺乳头状癌组织中Her-2阳性表达率为25.78%(33/128),高于腺瘤组织的12.49%(7/56)(P<0.05)。甲状腺乳头状癌和腺瘤组织中的Ki67阳性率分别为38.28%(49/128)和23.21%(13/56),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 P53、Her-2对临床评估甲状腺乳头状癌的发生、发展及预后有一定指导意义,Ki67对鉴别甲状腺乳头状癌无明确临床意义。

组织工程化血管的生成及修复:大鼠血管内皮细胞增殖与碱性成纤维细胞生长因子的关系

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(碱性成纤维细胞生长因子)对血管内皮细胞增殖的影响及其促细胞增殖作用与原癌基因c-fos和c-myc表达之间的关系。方法:实验于2002-06/2003-02在广东医学院附属医院整形外科研究所实验室完成。在建立血管内皮细胞体外培养模型的基础上,通过氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷参入实验,Northern印迹分析,观察碱性成纤维细胞生长因子对血管内皮细胞DNA合成及原癌基因表达的影响。结果:碱性成纤维细胞生长因子作用血管内皮细胞后16h,血管内皮细胞氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷参入率开始明显增加(P<0.05),24h达高峰(P<0.01);碱性成纤维细胞生长因子显著诱导原癌基因c-fos和c-myc表达,其表达活性分别于1h和2h达到高峰。结论:碱性成纤维细胞生长因子是血管内皮细胞的强效有丝分裂原,其对血管内皮细胞DNA合成的促进作用与原癌基因c-fos和c-myc表达明显相关。c-fos和c-myc原癌基因表达变化参与了碱性成纤维细胞生长因子促血管内皮细胞DNA合成过程,合理调控其表达变化有增强碱性成纤维细胞生长因子促血管内皮细胞增殖的生物学效应,为碱性成纤维细胞生长因子广泛而有效地应用于组织工程血管形成和血管移植及组织修复提供强有力的理论依据。

Her-2和PTEN蛋白在胃腺癌中的表达及意义

目的探讨人类表皮生长因子2(Her-2)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)在胃腺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学法检测临朐县人民医院2009年6月至2012年7月经手术常规病理证实的66例胃腺癌组织和25例正常胃组织中Her-2和PTEN的表达情况。结果 Her-2在癌组织中的阳性表达率明显高于正常组织,Her-2在浸润全层组的阳性率明显高于浸润黏膜层肌层组(45.5%vs 15.2%);Her-2在有淋巴结转移组的阳性率显著高于无淋巴结转移组(34.8%vs 25.8%)。PTEN在癌组织中的阳性表达率明显低于正常组织,PTEN在浸润全层组的阳性率显著低于浸润黏膜层肌层组(13.6%vs 22.7%);在有淋巴结转移组的阳性率显著低于无淋巴结转移组(7.6%vs 28.8%)。Her-2和PTEN在胃腺癌中的表达水平与患者年龄、性别、肿瘤直径和肿瘤的分化程度差异显著(P<0.05)。结论 Her-2的过表达与PTEN低表达或失表达,对胃癌的发生、发展及预后可能起重要作用。