睾丸精原细胞瘤中p27^(kip1)、p21^(ras)、p16的表达及其临床意义

目的 探讨 p2 7kip1、p2 1ras、p16在精原细胞瘤中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化 S- P法检测 4 6例精原细胞瘤组织、10例正常睾丸组织 p2 7kip1、p2 1ras、p16蛋白的表达情况。同时用 PCR法检测 2 7例精原细胞瘤组织 p16和 p2 1基因的缺失情况。结果 p2 7kip1在精原细胞瘤组织中的阳性表达率为 4 8.9% (2 2 / 4 5 ) ,显著低于正常睾丸组织的 90 .0 % (P<0 .0 5 ) ,p2 7kip1蛋白在精原细胞瘤组织中的阳性表达与淋巴结和远处器官转移相关 (P<0 .0 5 ) ,与组织学分型无关 ;p2 1ras、p16蛋白在精原细胞瘤组织中的阳性表达率分别为 4 2 .2 % (19/ 4 5 )和 6 0 .0 % (2 7/4 5 ) ,与正常睾丸组织比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 p16、p2 1ras蛋白在精原细胞瘤组织中的表达与组织学类型及淋巴结转移无相关性 (P>0 .0 5 )。p2 1基因无纯合子缺失。p16基因纯合子缺失率为 4 4 .4 % (12 / 2 7) ,其缺失率与精原细胞瘤的组织学类型、淋巴结和远处器官转移无关。p2 7kip1、p2 1ras及 p16阳性表达率之间有相关性 (P<0 .0 5 )。结论 p2 7kip1蛋白的低表达或缺失可能与精原细胞瘤的发生、浸润转移有关 ,可作为估计精原细胞瘤预后的良好指标。 p16基因的缺失和表达下降可能是精原细胞瘤发生的早期事件。

12-脂氧化酶影响胃癌细胞AGS中P21及bcl-2的表达

目的研究12-脂氧化酶(12-LOX)对胃癌细胞中P21、bcl-2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达的影响及与ERK1/2信号传导通路的关系。方法胃癌细胞AGS常规培养于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中24h至对数生长期,改用无血清RPMI-1640培养基培养24h加入干预药物。P21、bcl-2及p-ERK1/2表达采用Western blot法测定。分别采用100nmol/L的12-LOX催化合成产物12-羟基廿碳四烯酸(12-HETE)及40μmol/L的12-LOX特异性抑制黄苓素干预AGS细胞24h,测定P21、bcl-2及p-ERK1/2含量;采用ERK抑制剂PD98059预处理AGS细胞2h后,再分别用100nmol/L的12-HETE及40μmol/L黄苓素干预24h后再测定P21、bcl-2及p-ERK1/2含量。结果经100nmol/L的12-HETE干预24h后,p-ERK1/2、P21、bcl-2均显著高于末干预组(P<0.05),而40μmol/L黄苓素干预24h后,p-ERK1/2、P21、bcl-2显著低于对照组(P<0.05);采用ERK抑制剂PD98059预处理AGS细胞2h后再分别用100nmol/L的12-HETE及40μmol/L黄苓素干预与未采用PD98059预处理组相比,PD98059预处理后12-HETE干预组bcl-2水平低于仅用12-HETE干预组,PD98059预处理后黄苓素干预组bcl-2水平高于仅用黄苓素干预组(P<0.05)。而PD98059预处理后2组P21水平含量均无明显差异。结论 12-LOX对胃癌细胞P21及bcl-2表达具有调节作用,12-LOX通过其合成产物12-HETE促进ERK1/2的磷酸化,并通过ERK1/2途径调节bcl-2的表达,P21的表达不受ERK1/2途径调控。

细胞周期抑制蛋白p21与肾脏疾病

肾脏细胞增殖与凋亡异常在肾脏疾病中具有重要意义 ,其调控最终发生在细胞周期水平上 ,细胞周期抑制蛋白p2 1属于负向细胞周期调控蛋白 ,与多种肾脏疾病中细胞增殖和凋亡异常有关 ,可能影响肾脏疾病进展 。

p21^(WAF1)在小儿肾母细胞瘤组织中的表达及临床意义

目的:探讨p21WAF1 在肾母细胞瘤中的表达水平,评价p21WAF1 的检测对肾母细胞瘤的诊断和预后判断的应用价值。方法:用免疫组织化学技术检测32 例小儿肾母细胞瘤(肿瘤组)和7 例小儿非瘤肾组织(对照组)石蜡标本中p21WAF1的表达,分析p21WAF1 的表达与肾母细胞瘤组织学分型、临床肿瘤分期和淋巴结转移间的关系。结果: 1) p21WAF1 在非瘤肾组织中存在基础水平的表达; 2) p21WAF1 在肾母细胞瘤中的表达与其组织学分型、临床肿瘤分期和淋巴结转移相关。结论: p21WAF1 的表达在一定程度上有助于肾母细胞瘤的诊断和预后判断。

乳腺癌组织中p33^(ING1b)和p^(53)及C-erbB-2表达对预后评估的意义

目的:探讨p33ING1b,p53,原癌基因C-erbB-2在乳腺癌的发生发展中的生物学特征及其对预后评估的意义。方法:应用EVISION免疫组化法,检测了80例乳腺癌标本中C-erbB-2,p33ING1b,p53的表达,及13例癌旁正常组织p33ING1b的表达。结果:乳腺癌组及对照组中p33ING1b均阳性表达,乳腺癌组织中表达犤65%(52/80)犦有明显下降,两组之间差异有显著性意义(χ2=25.138,P<0.01),p33ING1b,p53,C-erbB-2在乳腺癌组织中表达阳性率分别为65%,60%,61%。其中p33ING1b的表达与雌激素受体和孕激素受体水平呈正相关(r=0.371,r=0.537,P<0.05)p33ING1b,p53与肿瘤大小、腋窝淋巴结有无转移呈负相关(r=-2.09,r=-0.537,P<0.05)。C-erbB-2与组织学分级,淋巴结有无转移呈正相关(r=0.371,P<0.05),与雌、孕激素受体水平呈负相关(r=-0.387,r=-0.440,P<0.05)。结论:p33ING1b基因的表达可能需要p53基因的协同,两者共同作用于细胞的生长、凋亡和转化,保证机体发挥正常的功能,抑制肿瘤的发生。ING1是抑癌基因,其蛋白p33ING1b在乳腺癌中低表达,对乳腺癌的发生发展可能起重要作用,p33ING1b,p53,C-erbB-2可作为判断乳腺癌恶性程度及预后的重要指标。

大鼠脑组织经反复高加速度暴露后bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶的表达(英文)

背景:反复高正加速度(+Gz)暴露可引起脑损伤,但其病理机制尚不清楚。目的:了解反复高正加速度(+Gz)暴露后大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶基因的表达变化,探讨细胞凋亡在反复高+Gz暴露所致脑损伤中的病理作用。设计:以SD大鼠为研究对象的随机对照实验研究。单位:一所医院的航空医学研究中心。材料:选用体质量为180～220g健康雄性SD大鼠26只,随机分成对照组和+Gz暴露组,其中对照组4只,+Gz暴露组22只。干预:将大鼠固定于动物离心机的转臂上,头朝向离心机轴心,+Gz暴露组条件为G值+14Gz,增长率1.5G/s,峰值持续时间45s,共作用3次,两次中间间歇0.5h。对照组大鼠亦在动物离心机上经历类似实验步骤,所承受的G值为+1Gz。分别于暴露后0.5,6.0,24.0和48.0h断头取脑。用半定量反转录聚合酶链反应方法检测对照组和+Gz暴露后0.5,6.0,24.0和48.0h大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶mRNA表达水平,并用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测脑组织中凋亡细胞。主要观察指标:各组大鼠+Gz暴露后大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶mRNA表达水平。结果:+Gz重复暴露后6h,大鼠脑组织bcl-2mRNA表达水平(0.32±0.08)明显低于对照组(0.69±0.15),bax,p53和ICEmRNA表达水平犤(.55±0.09),(

乳腺癌中组蛋白乙酰化与p21^WAF1的表达研究

目的探讨乳腺癌中乙酰化的组蛋白H3、H4及p21^WAF1的表达变化及其意义。方法采用HE染色鉴定乳腺癌的病理形态变化；应用免疫组织化学法检测p21^WAF1在80例乳腺癌组织与80例正常乳腺组织中的表达；免疫印迹法检测乙酰化的组蛋白H3、H4及p21^WAF1蛋自在80例乳腺癌组织及80例正常乳腺组织中的表达。结果·HE染色可见，与正常的乳腺组织相比，乳腺癌组织结构及细胞形态有明显的异型性。免疫组化结果显示：p21^WAF1。在80例乳腺癌组织中有49例阳性表达（61．25％）；而80例正常乳腺组织中只有3例弱阳性表达（3．75％），两种组织中的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫印迹法结果表明，p21^WAF1蛋白在乳腺癌中的表达高于正常组织，乳腺癌组为0．78±0．095、正常乳腺组为0．65±0．055；乙酰化的组蛋白H3、H4在正常乳腺组织中的表达比乳腺癌组织高，其中乙酰化的组蛋白H3正常乳腺组为2．35±0．340、乳腺癌组为1．07±0．067，乙酰化的组蛋白H4正常乳腺组为3．44±0．202、乳腺癌组为1．11±0．086，两者表达差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论组蛋白乙酰化与p21^WAF1蛋白的表达变化与乳腺癌的发生发展有关。

Forskolin对人胃癌细胞增殖影响的实验研究

目的 :探讨毛喉萜 (Forskolin)的抗胃癌作用。方法 :采用MTT比色法、克隆形成法观察Forsko lin对SGC 790 1细胞的作用 ,利用免疫细胞化学方法检测其对rasp2 1、p5 3蛋白表达的影响。结果 :Fors kolin可明显抑制SGC 790 1细胞增殖 ,经Forskolin处理细胞 3d后 ,rasp2 1、p5 3蛋白表达均有明显下降 ,P <0 0 1。结论 :Forskolin能明显抑制人胃癌SGC 790 1细胞增殖 ,其作用可能与降低rasp2 1、p5 3蛋白表达有关。

丙型肝炎病毒非结构蛋白4B对肝癌细胞c—myc和p53蛋白表达的影响

目的 探讨丙型肝炎病毒非结构蛋白4B（HCV-NS4B）对c-myc和p53蛋白在肝癌细胞表达的影响.方法 采用构建好的HCV-NS4B表达载体,以脂质体转染法转染HepG2细胞.逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）,琼脂糖凝胶电泳证实HCV-NS4B在HepG2细胞稳定表达.随后采用细胞免疫化学法半定量分析c-myc和p53蛋白在HepG2细胞的表达.结果 转染HCV-NS4B后,NS4B转染组c-myc平均光密度值为0.53±0.17,较空白对照组及空白载体组显著升高（P＜0.05）.NS4B转染组p53蛋白平均光密度值为0.28 ±0.13,较空白对照组及空白载体组显著下降（P＜0.05）.结论 HCV-NS4B可诱导肝癌细胞中c-myc/p53失衡,促进细胞增殖,与肝癌发生有关.

下调HDAC6表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响及机制

目的:探讨下调HDAC6表达对乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法:分别用HDAC6 siRNA和阴性siRNA转染乳腺癌MCF-7细胞,以未处理的MCF-7细胞为空白对照,分别用RT-PCR和Western blot方法检测细胞HDAC6与p21基因和蛋白的表达,CCK-8试剂盒和流式细胞术分别检测细胞增殖与细胞周期,并用TUNEL法检测细胞凋亡。结果:干扰效果验证结果显示,HDAC6 siRNA转染能有效降低MCF-7细胞HDAC6 mRNA和蛋白的表达(均P<0.05),而阴性siRNA无此作用(P>0.05)。与空白对照组比较,HDAC6 siRNA组细胞增殖受到明显抑制,细胞G0/G1期比例增加,S期比例减少,细胞的凋亡率明显增加(均P<0.05);阴性siRNA组无上述改变(均P>0.05)。HDAC6 siRNA组细胞p21 mRNA与蛋白的表达均较空白对照组和阴性siRNA组明显升高(均P<0.05)。结论:下调HDAC6的表达能抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,诱导细胞G0/G1期阻滞,并促进细胞凋亡,其机制可能与升高p21表达有关。

p21和p53在肾间质纤维化大鼠中表达的研究

目的动态观察p21和p53在单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠模型中的表达，以及依那普利对其表达的调节。方法将SD大鼠随机分为假手术组（SOR组）、单侧输尿管结扎组（UUO组）和依那普利治疗组（EnT组），每组30只。用Masson染色的方法动态观察梗阻侧肾脏病理变化，用RT—PCR的方法检测梗阻肾皮质p21mRNA和p53mRNA的变化；并观察依那普利对肾皮质p21和p53表达的调节。结果在UUO大鼠模型早期，肾皮质p21mRNA和p53mRNA的表达即有明显增高，随着梗阻时间的延长，p21和p53的表达逐渐增强，二者具备相关性；依那普利能明显抑制p21和p53的表达。结论p21和p53在UUO大鼠肾皮质呈高表达，依那普利可抑制其表达。p21可能通过p53参与介导了。肾小管间质纤维化的发病过程。