原癌基因蛋白C-MYC和C-FOS在良性胆道狭窄瘢痕组织中的表达及相关性研究

目的观察原癌基因c-myc,c-fos蛋白在良性胆道狭窄瘢痕组织中的表达和分布,探讨其与良性胆道狭窄形成的相关性。方法应用免疫组化SP法,检测c-myc,c-fos蛋白在20例肝外胆管瘢痕组织、12例肝内胆管瘢痕组织和10例正常胆管组织中的表达和分布。对其阳性表达结果进行比较分析。结果在肝外胆管瘢痕组织和肝内胆管瘢痕组织的成纤维细胞、胆管上皮细胞及血管内皮细胞中c-myc,c-fos呈强阳性表达,而正常胆管组织中无表达。肝外、肝内胆管瘢痕组织中c-myc,c-fos的表达与正常胆管组织差异有显著性意义(P<0.01),肝外与肝内胆管瘢痕组织中c-myc,c-fos的表达差异无显著性意义(P>0.05)。在肝外胆管瘢痕组中c-myc与c-fos蛋白两者的表达成正相关(r=0.75,P<0.05)。在肝内胆管瘢痕组中c-myc与c-fos蛋白两者的表达亦成正相关(r=0.68,P<0.05)。结论肝外、肝内胆管瘢痕组织中c-myc和c-fos癌基因受激活,可能参与了成纤维细胞的分化增殖、胶原合成与降解以及对细胞因子的调控,并导致瘢痕增生。原癌基因c-myc,c-fos与良性胆道狭窄瘢痕形成密切相关,两者具有协同性。

c-myc基因蛋白在外阴白斑和外阴鳞癌中的表达及临床意义

目的 研究 c- myc基因蛋白在外阴白斑和外阴鳞癌中的表达 .方法 采用 SABC免疫组化法 ,对 71例外阴白斑和 2 1例外阴鳞癌标本进行 c- myc基因蛋白检测 .结果 c- myc基因蛋白在正常组织中主要分布在细胞核 ,外阴白斑各型和鳞癌组织中主要分布在细胞浆 .外阴白斑各型与鳞癌组相比较 ,经 χ2 检验 ,正常组 (χ2 =1 1 .0 72 ,P<0 .0 5 )、增生组(χ2 =5 .6 92 ,P<0 .0 5 )、硬化萎缩组 (χ2 =1 6 .488,P<0 .0 5 )、混合组 (χ2 =6 .497,P<0 .0 5 )和不典型增生组 (χ2 =1 .0 72 ,P>0 .0 5 ) .2 1例鳞癌标本 , 级 , 级 , 级中 c- myc蛋白的阳性率分别为 1 0 0 .0 % (9/9) ,85 .7% (6 /7) ,6 0 .0 % (3 /5 ) .结论 c- myc基因蛋白的表达和分布与外阴白斑分型有关 ,外阴鳞癌和不典型增生组织中表达阳性率明显高于外阴白斑各型 ,c-

大鼠缺血半暗带区神经元凋亡与磷酸化C-Jun氨基末端激酶及原癌基因c-Myc表达的相关性

目的观察大鼠永久性局灶脑缺血皮质缺血半暗带区(IP)磷酸化应激活化激酶/C-Jun氨基末端激酶(P-SAPK/JNK)及原癌基因c-Myc mRNA转录的表达情况,探讨IP区神经细胞凋亡的可能机制。方法健康雄性Sprague-Dawley大鼠72只,随机分为假手术组和永久性大脑中动脉阻塞(pMCAO)后1、3、6、12、24 h组,每组12只。线栓法制备大鼠pMCAO模型,提取缺血不同时间点大鼠脑皮质IP区的组织。应用原位细胞凋亡(TUNEL)检测法分析IP区皮质神经元的凋亡情况,采用免疫组织化学法分析脑缺血后P-SAPK/JNK细胞的表达情况,采用Western-blot检测P-SAPK/JNK蛋白含量;采用实时定量PCR技术检测c-Myc mRNA的转录水平。结果①大鼠pMCAO后3 h,IP区TUNEL阳性细胞和P-SAPK/JNK阳性细胞均明显增加,12 h达高峰,与假手术组比较,差异有统计学意义,P<0.01。②Western-blot结果证明,大鼠pMCAO后3 h,P-SAPK/JNK蛋白水平增加,12 h达高峰,各时间点与假手术组比较,差异有统计学意义,P<0.01。③实时定量PCR结果表明,大鼠pMCAO后6 h,IP区c-Myc mRNA的转录水平明显上调,12 h达高峰,均高于假手术组,差异有统计学意义,P<0.01。④IP区皮质P-SAPK/JNK蛋白水平与神经元凋亡及c-Myc mRNA转录水平均呈正相关系(r=0.985,P<0.01;r=0.887,P<0.05)。结论 pMCAO模型IP区神经元的凋亡可能与JNK/c-Myc信号通路的激活有关。

反义抑制C-myc蛋白表达对人胆管癌细胞株体外增殖的影响

【目的】探讨反义抑制C-myc蛋白的表达对人胆管癌细胞QBC939体外增殖的影响。【方法】采用常规方法培养QBC939细胞，合成C-mycASODN及Ns0DN，并将其转染QBC939细胞；用Western-blot法检测转染AS（）DN组（转染组）、转染NSODN组（无义组）及空白对照组细胞中c-myc蛋白的表达；通过四甲基噻唑蓝（MTT）实验检测各组细胞在体外的存活率。【结果】无义组与空白对照组灰度值比较无显著性差异（P〉0．05）；转染组的灰度值显著低于空白对照组（P〈0．01）；转染不同浓度（Mmol／L）的cmycASODN后，各组细胞的存活率分别为：0．5组为79．6％、1．0组为75．0％、2．0组为70．9％、4．0组为59．1％、8．0组为47．3％，均显著低于空白对照组（P〈0．01）。【结论】反义抑制c-myc蛋白的表达后，人胆管癌细胞在体外的增殖受到了抑制，且其抑制作用随着c-mycASODN浓度的增加而增强。

复发转移性胃癌患者HER2基因扩增、蛋白表达及预后的关系

目的探讨复发转移性胃癌肿瘤原发灶HER2基因扩增与蛋白表达的相关性,及与临床病理特征和预后的关系。方法收集237例复发转移性胃或胃食管交界处腺癌肿瘤原发灶标本,分别应用荧光原位杂交法(FISH)和免疫组织化学法(IHC)检测HER2基因扩增和蛋白的表达。结果 FISH检测HER2基因扩增18.1%(43/237);IHC检测HER2蛋白表达-、1+、2+、3+分别为160例(67.5%)、34例(14.3%)、17例(7.2%)和26例(11.0%)。HER2总体阳性率(FISH+或IHC 3+)为19.0%(45/237)。FISH与IHC方法总的符合率较好,达92.4%(219/237),呈显著正相关(r=0.696,P<0.01)。HER2更常见于胃食管交界处腺癌、肠型胃癌及分化较好的胃癌。胃癌HER2阳性表达与肝、肺等广泛的转移相关。对215例接受全身化疗的患者进行生存分析显示,HER2阳性状态与较差的生存时间相关。结论胃癌HER2基因扩增及蛋白表达具有较好的一致性。胃癌HER2的表达与预后差相关。

hBMP_7基因转染对兔骨髓间充质干细胞增殖及胶原合成的影响

使用含hBMP7基因的重组逆转录病毒液感染兔骨髓间充质干细胞 (BMSc) ,MTT法检测细胞增殖能力 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,3 H脯氨酸掺入法检测Ⅰ型胶原合成和表达情况。结果显示 ,经hBMP7基因转染的BMSc与空载体转染及未转染的BMSc在细胞增殖、细胞周期表现方面无显著性差异 ,经转染的BMSc合成胶原显著高于空载体转染和未转染者。提示采用逆转录病毒介导转染BMSc后能促进细胞的胶原合成 ,对BMSc增殖和细胞周期无显著影响 。

放疗诱导宫颈癌细胞凋亡与c-myc蛋白表达

目的 :探讨在放射治疗前、中宫颈癌细胞凋亡与c myc蛋白表达的关系 .方法 :对 4 8例宫颈癌患者分别于放疗前、放疗 2 0Gy/ 2wk取活检 ,石蜡包埋 .应用原位缺口末端标记法 (TUNEL)检测细胞凋亡 ,应用免疫组化SP法对c myc蛋白进行检测 .结果 :4 8例宫颈癌患者放疗前、放疗 2 0Gy ,凋亡阳性率分别为 6 7%和 85 % ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;宫颈鳞癌患者病理分级增高 ,临床分期越晚凋亡阳性率均有降低 ,但无显著性差异 .放疗前c myc蛋白阳性表达率为 86 % ,放疗2 0Gy其表达率为 4 3% ,显著性降低 (P <0 .0 1 ) ;放疗 2 0Gy,c myc蛋白表达与凋亡有明显相关 .结论 :c

肺神经内分泌癌组织中c-myc和E2F1蛋白表达的临床病理意义

目的:探讨转录因子c-myc和E2F1蛋白在肺神经内分泌癌组织中的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组化SP法检测90例多种肺神经内分泌癌组织中c -myc及E2F1蛋白表达,并分析其与各临床病理指标的关系。结果:c- myc和E2F1蛋白表达定位于癌细胞核;c- myc蛋白表达与组织学类型、临床分期、淋巴结转移、肿瘤大体类型以及预后相关,P<0. 05(P值分别为0. 041、0 .003、0 .019、0. 033和0 .000),与患者性别、年龄无关,P>0 05(P值分别为0 069 和1 000);E2F1表达与组织学类型、临床分期、淋巴结转移、肿瘤大小、预后有关,P<0 .05(P值分别为0. 000、0. 001、0. 000、0 .011和0 .000),与患者性别、年龄无关,P>0. 05(P值分别为0. 105和0 .844)。结论:c- myc、E2F1 蛋白在肺神经内分泌癌的发生、演进过程中起着重要作用,并可作为分子指标检测患者预后。

原癌基因c-met在肺癌组织中的表达

目的 :研究c met蛋白、mRNA和增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearanti gen ,PCNA)在肺癌浸润和转移中的表达及意义。方法 :应用免疫组化SP法检测 62例肺癌组织及 2 9例转移灶中c met蛋白的表达和肺癌组织中PCNA的表达 ,应用原位杂交的方法检测肺癌组织中c metmRNA的表达。结果 :62例肺癌中c met蛋白和mRNA的表达与分化程度、肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移相关 ,P <0 0 5。淋巴结转移站数与c met蛋白的表达亦相关 ,P <0 0 5 ;且c met蛋白在淋巴结转移灶的染色强度( 0 2 186± 0 0 2 83 )远高于相应原发灶的染色强度 ( 0 13 62± 0 0 2 66) ,P <0 0 1。PCNA标记指数 (labelingindex ,LI)与TNM分期、淋巴结转移有显著的相关性 ,P <0 0 5。c met蛋白阳性表达组PCNA LI( 0 63± 0 2 5 )显著高于c met蛋白阴性表达组 ( 0 48± 0 19) ,P <0 0 5。结论 :c met能增强肺肿瘤细胞的浸润转移能力 ,并促进肿瘤细胞增殖 。

癌基因C-MYC与结肠癌染色体不稳定的研究

目的探讨癌基因C-MYC的表达对人类结肠癌细胞系DLD1染色体稳定性的影响。方法建立四环素调控的C-MYC稳定表达的细胞系DLD1tTA-C-MYC,Western blot检测C-MYC的稳定表达。C-MYC持续稳定表达1、5、7和14d后,对细胞进行DAPI染色,在荧光显微镜下计数染色体不稳定细胞的百分比。结果Western blot显示C-MYC的表达在72h后达最高峰。C-MYC表达关闭的DLD1细胞中,染色体不稳定细胞的百分比为1.51%;而C-MYC持续表达1、5、7和14d后的DLD1细胞中,染色体不稳定细胞的百分比分别为2.2%、3.6%、4.7%和6.13%(P<0.01)。结论C-MYC的高表达可导致DLD1结肠癌细胞非整倍体数染色体的形成,也是造成结肠癌染色体不稳定的重要因素。

c-myc蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其与HPV16/18 E6蛋白表达的关系

目的:检测c-myc蛋白在宫颈鳞癌中的表达,并探讨c-mye蛋白表达与HPV16/18 E6蛋白表达之间的关系。方法:采用免疫组化SP法对21例慢性宫颈炎、40例宫颈上皮内瘤(CIN)和71例浸润性宫颈鳞癌进行c-myc蛋白和HPV16/18 E6蛋白检测。结果:慢性宫颈炎、CINⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级c-myc蛋白阳性率均很高,而浸润性宫颈鳞癌c-myc蛋白阳性率下降(P<0.05);HPV16/18 E6阳性组和HPV16/18 E6阴性组之间c-myc蛋白阳性率差异无显著性。结论:浸润性宫颈鳞癌c-myc蛋白表达明显下降,c-myc蛋白表达与 HPV16/18 E6蛋白表达之间无相关性。

胃癌及其癌前病变中细胞凋亡及其调控基因的表达

目的 :通过观察胃癌及其癌前病变中细胞凋亡及其调控基因p5 3、bcl- 2、c-myc的表达 ,探讨其在胃癌恶性转化进程中的作用。方法 :利用DNA末端标记技术 (TdT -mediateddUTP -biotinnickendlabeling ,TUNEL法 )和免疫组织化学 (streptavidin/peroxidase ,S -P法 ) ,原位观察了 46例胃癌、2 0例癌前病变、2 4例正常粘膜中的凋亡细胞和p5 3、bcl- 2、c-myc的表达。结果 :癌前病变和胃癌中凋亡指数显著高于正常粘膜 (P <0 0 1) ,癌前病变组高于胃癌组 (P <0 0 1)。p5 3、bcl- 2、c -myc蛋白在胃癌中阳性率分别为 6 0 9%、6 7 4%、73 2 % ,均高于正常粘膜组(P <0 0 1) ;在癌前病变中 3种蛋白阳性表达率分别为 40 %、95 %、5 8 8% (P <0 0 1)。胃癌中p5 3、bcl- 2蛋白阳性细胞凋亡指数分别低于阴性组 (P <0 0 5 ) ,c -myc蛋白阳性组细胞凋亡指数高于阴性组 (P <0 0 1)。结论 :细胞凋亡调控异常在胃癌发生中可能起重要作用。p5 3、bcl- 2蛋白分别抑制细胞凋亡 ,c -myc蛋白在胃癌中促进细胞凋亡。

Skp2、C-myc、p27在宫颈癌组织中的表达及其意义

目的:探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)、C-myc及p27蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、宫颈癌组织中表达及其临床意义。方法:利用免疫组化S-P法检测Skp2,p27和C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌石蜡组织中的表达情况,分析Skp2、C-myc蛋白与宫颈癌临床病理特征的关系,并且分析3者在宫颈癌组织中表达相互关系。结果:Skp2、C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中阳性表达率表达逐渐增高(Skp2:0%,15.38%,57.5%;C-myc:13.33%、15.38%、55.00%);而p27则相反(73.33%,69.23%,35.00%);Skp2的表达与临床分期,分化程度,淋巴结转移有关;C-myc的表达与肌层浸润深度有关;Skp2和p27在宫颈癌中表达呈负相关(r=-0.641,P<0.05);Skp2和C-myc在宫颈癌中表达呈正相关(r=0.646,P<0.05);C-myc和p27在宫颈癌中表达无相关性(r=0.032,P>0.05)。结论:Skp2及C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌发展中表达逐渐升高,而p27表达逐渐降低;Skp2与C-myc表达呈正相关,Skp2与p27呈负相关。C-myc、Skp2、p27联合检测对判断宫颈癌的发生、发展及预后有重要意义。

晚期非小细胞肺癌肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1和ERCC1基因表达的研究

目的:探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1、ERCC1基因表达水平及其临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR技术检测49例晚期NSCLC肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1、ERCC1 mRNA表达水平,对照分析其与患者临床特征、吉西他滨/卡铂方案的化疗反应以及预后的关系。结果:肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1表达水平呈正相关(rs=0.332,P<0.05),而ERCC1无相关(rs=0.258,P>0.05);肿瘤组织或外周血淋巴细胞中RRM1和ERCC1表达几乎同步(rs=0.634、0.351,P<0.05),但基因表达与患者的性别、年龄、吸烟状态、体力状况PS评分,以及肿瘤临床分期和组织学类型均无显著相关性(P均>0.05)。肿瘤组织中RRM1、ERCC1或外周血RRM1低表达者化疗有效率、中位生存期及1年生存率均高于高表达者,两者比较差异均有统计学意义(P<0.05),特别是肿瘤组织ERCC1低表达者有较高的2年生存率(P<0.05);而外周血ERCC1表达水平与化疗疗效以及预后均无相关性(P均>0.05)。结论:肿瘤组织中RRM1、ERCC1和外周血淋巴细胞中RRM1基因表达水平可能与晚期NSCLC患者吉西他滨/卡铂化疗的疗效以及预后密切相关。

肺癌组织中P-选择素和nm23蛋白的表达及其与肿瘤转移的关系

目的探讨P-选择素和nm23蛋白的表达与肺癌转移的关系。方法用免疫组化法检测20例癌旁肺组织和76例肺癌组织中P-选择素和nm23蛋白的表达。结果P-选择素在肺癌各组织学类型、组织学分级中表达差异无统计学意义,χ2=0.308,P=0.857;在肺癌淋巴结转移组中表达率62.00%(31/50),显著高于无淋巴结转移组34.62%(9/26),χ2=5.145,P=0.023;肺癌Ⅲ期、Ⅳ期中阳性率分别为71.43%(15/21)、82.35%(14/17),显著高于Ⅰ期23.81%(5/21)、Ⅱ期35.29%(6/17),χ2=17.000,P=0.000。nm23蛋白在肺癌各组织学类型、组织学分级、TNM分期中表达差异无统计学意义,χ2=2.952,P=0.086;在癌旁组织和肺癌中表达差异无统计学意义,χ2=1.868,P=0.172;在肺癌淋巴结转移组中表达率60.00%(30/50),显著低于无淋巴结转移组88.46%(23/26),χ2=6.566,P=0.010。结论P-选择素高表达提示肺癌高浸润风险,nm23蛋白对肺癌淋巴结转移起抑制作用,P-选择素高表达和nm23蛋白低表达有明显相关性。

高海拔地区藏族和汉族乳腺浸润性导管癌凋亡相关蛋白及凋亡指数的研究

目的探讨世居青海的藏汉族人乳腺浸润性导管癌组织中Bcl-2、Bax及Caspase-3和凋亡指数(AI)的表达差异。方法采用免疫组织化学法检测藏族和汉族各60例乳腺浸润性导管癌中Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达;采用原位DNA缺口末端标记法检测凋亡指数。结果藏族、汉族乳腺浸润性导管癌组织中Bcl-2的表达率分别为52.2%和38.3%,Bax表达率分别为76.7%和61.7%,Caspase-3表达率分别为60.0%和58.3%,藏族、汉族乳腺浸润性导管癌组织中AI阳性率分别为61.2%和60.0%,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论世居青海的藏族和汉族乳腺浸润性导管癌组织中Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达无差异,且乳腺浸润性导管癌组织中AI表达比较也无差异。

青年结直肠癌c-erbB-2蛋白高表达的病理学意义

目的 :探讨青年结直肠癌c erbB 2表达与临床病理特点之间的联系。方法 :采用流式细胞术对c erbB 2蛋白在青、老年结直肠癌中的表达加以定量检测和对比分析。结果 :青年组 62例中共有 46例c erbB 2阳性表达 ,而老年组 3 2例中有 15例阳性表达 ,二者之间差异有统计学意义 ,P <0 0 5。c erbB 2高表达与青年患者肿瘤组织学类型和浸润深度无明显关系 ,但与肿瘤分级和淋巴结转移密切相关 ,P <0 0 5 ,即分级高或有局部淋巴结转移的多呈高表达 ;反之 ,则几乎均为低表达或无表达。与老年组对比 ,青年组分化程度低、浸润周围软组织或局部淋巴结发生转移的c erbB 2表达量显著升高 ,P <0 0 5。结论 :c erbB 2蛋白的表达对于判断青年结直肠癌恶性程度及预后具有重要病理学意义。

胶质瘤c-myc基因表达水平与其细胞增殖和凋亡关系的研究

目的探讨胶质瘤细胞c-myc基因表达水平与肿瘤恶性程度、细胞增殖活性以及凋亡程度的关系。方法选择67例脑胶质瘤患者,其中Ⅰ～Ⅱ级者24例,Ⅲ级22例,Ⅳ级21例。应用原位杂交、原位细胞凋亡检测(TUNEL法)和免疫组织化学染色方法对其标本进行观察。结果67例患者中57例(85.1%)表达c-mycmRNA,56例(83.6%)表达c-Myc蛋白,两者表达水平呈正相关(rs=0.999,P<0.01),并均显示表达水平Ⅰ～Ⅱ级<Ⅲ级<Ⅳ级者(P<0.05或P<0.01);肿瘤细胞增殖活性和凋亡程度之间呈负相关(r=?0.775,P<0.01)。肿瘤细胞增殖活性随着肿瘤细胞c-Myc蛋白表达水平的升高而相应增强,而肿瘤细胞的凋亡则相应减少,c-Myc蛋白表达强阳性组与阳性组间,以及此两组与弱阳性组及阴性组之间比较,肿瘤细胞增殖活性和凋亡程度的差异均有显著性意义(均P<0.01)。结论c-myc基因表达水平对评价脑胶质瘤生物学行为具有临床参考价值。胶质瘤细胞c-myc基因表达异常增加可能会促进其细胞增殖和抑制其凋亡,并在胶质瘤的发生及恶性进展过程中起重要作用。

肾癌细胞c-myc的表达分布及其临床意义

目的：阐明ｃｍ ｙｃ 表达在肾癌发生、发展中的作用及临床意义。方法：利用免疫组织化学 Ａ Ｂ Ｃ 法结合微波抗原修复和流式细胞技术，对ｃｍ ｙｃ 蛋白在 ５２ 例肾癌组织及 １４ 例癌旁正常肾组织中的表达进行了定性、定量的测定。结果：肾癌组织中ｃｍ ｙｃ 蛋白的阳性率和阳性细胞率分别为７６．９２％ 和６５．４５％ ±２９．１９％ ，高于正常肾组织的１４．２９％ 和８．５９％ ±３．６６％ （ Ｐ ＜ ０．００５）。ｃｍ ｙｃ在肾癌组织中５５．７７％ 分布于胞浆，２１．１５％ 分布于胞核，而在正常肾组织则全部分布于胞核。其胞浆表达在病理 Ｇ２、 Ｇ３ 级高于 Ｇ１ 级（χ２＝ ９．２４４， Ｐ ＜ ０．００５）；临床分期 Ｔ３、 Ｔ４ 期高于 Ｔ１、 Ｔ２ 期（ Ｐ＜ ０．００１）。结论：ｃｍ ｙｃ 的胞浆表达促进肾癌的发生、发展，并与恶性程度、临床分期有关，是预后不良的重要指征。