苦参碱对U251胶质瘤细胞的增殖抑制和原癌基因表达的影响

目的 探讨苦参碱对胶质瘤细胞株 (U2 5 1细胞株 )的抑制作用及其作用机制。方法 用MTT比色法检测不同浓度苦参碱对U2 5 1细胞的增殖抑制 ,流式细胞仪观察苦参碱对U2 5 1细胞周期的影响 ,RT PCR观察原癌基因C myc表达的变化。结果 苦参碱对U2 5 1细胞增殖抑制作用成剂量依赖性 ,当浓度为 0 10g·L-1时 ,对U2 5 1细胞增殖的抑制率达到 5 3 7%± 6 0 %。流式细胞仪分析显示 ,用 0 10g·L-1苦参碱培养 3d ,细胞周期中G0 /G1期所占比例增高 ,S期占细胞周期的比例减低。RT PCR结果显示 ,随着苦参碱作用剂量的增加 ,C myc基因的表达被明显抑制。结论 苦参碱对人胶质瘤细胞系U2 5 1的增殖具有明显的抑制作用 ,并对原癌基因C

不同心脏负荷及心室内压变化对大鼠早期心肌原癌基因表达的影响

目的检测容量(VOL)和压力超负荷(POL)早期大鼠左心室内压变化诱导左心室心肌原癌基因cfos、cjun、cmyc、egr1mRNA表达时间变化和差异。方法测定假手术大鼠、及心脏超负荷后不同时间点左心室收缩压(LVSP)和内压谷值(LVDP)变化,用狭缝杂交检测各时间点左室心肌cfos、cjun、cmyc、egr1mRNA表达,用密度仪定量分析。结果与假手术组比较,不同心脏负荷后早期LVSP均下降(P<0.05),48hVOL组最低,POL组恢复至对照组水平;负荷后LVDP逐渐增高,POL后6h,VOL12h最高(P<0.05),后者48h与假手术组相近(P>0.05)。POL诱导原癌基因表达峰值早于VOL,48hcmyc、cjun出现第2次表达增加。VOL后1h检测到cfos、cjun、egr1、cmyc弱表达,48hcfos无表达,cjun表达减弱,cmyc和egr1仍有较高表达。结论VOL、POL后左室内压增加诱导不同的心肌cfos、cjun、cmyc、egr1表达增加的时间顺序,与LVDP增高无关,cfos、cjun、cmyc表达与LVSP增高有关,提示左心室主动收缩产生的室内压为诱导原癌基因表达的主要因素;心脏超负荷后心肌原癌基因可持续表达,不同负荷原癌基因表达的时间过程差异可能对发生不同类型心肌肥厚有重要影响。

c-fos原癌基因表达在脑缺血方面的研究进展

原癌基因是细胞内总体遗传物质的组成部分，人们将这类存在于生物正常细胞基因组中的癌基因称为原癌基因。原癌基因c-fos属于核内转录因子的一种，它可以与靶基因的调控元件结合直接调节转录活性。在脑缺血早期，原癌基因c-fos的异常表达对神经细胞具有重大意义。现就c-fos基因在缺血性脑血管疾病方面的研究进展作一综述。

非小细胞肺癌原癌基因表达与肿瘤药敏的关系

非小细胞肺癌原癌基因表达与肿瘤药敏的关系韩保惠，廖美琳，王恩忠，顾伟勇上海胸科医院（上海２０００３０）肺癌的发生、演变、恶性程度及预后与原癌基因的激活、抑癌基因的失活密切相关，这一点已被人们所熟知；另有证据表明：原癌基因的激活、抑癌基因的失活与肿瘤细...

心舒康对高血压左心室肥厚大鼠心肌原癌基因表达影响的实验研究

1实验材料 动物：健康雄性Wistar大鼠60只，体重180—220g，由黑龙江中医药大学实验动物中心繁育提供。合格证为黑动字第P00102004。药物：（1）心舒康。购于黑龙江省药材公司。由炙黄芪、枸杞、丹参、土鳖虫、瓜蒌、钩藤等9味中药组成。水浸泡4小时，煎煮2次，每次1小时，两次滤液混合，浓缩制成（即1g生药/ml）的水煎剂备用。（2）开博通片（卡托普利片），由中荚上海施贵宝制药有限公司生产。批号：030433Hg。

检测造血细胞原癌基因表达的原位杂交法

随着分子生物学研究的发展,核酸杂交技术已开始应用到细胞形态学诊断学上。用已知的癌基因片段(基因组DNA、cDNA或RNA)

脊神经节损伤与脊髓背角C-fos原癌基因表达

目的探讨脊神经节(DRG)不同损伤方式后,不同损伤时间的脊髓背角C-fos原癌基因蛋白表达情况,并探讨该蛋白表达程度与神经行为异常改变之间的关系。方法健康家兔42只随机分为手术对照组、机械性压迫组、炎性损伤组和正常对照组,制备相应的脊神经节损伤模型。术后检测动物神经行为改变,并对中枢神经伤害性刺激反应物C-fos原癌基因蛋白进行免疫组化检测分析。结果DRG损伤后1周,伤侧脊髓背角C-fos癌基因蛋白的阳性细胞数分别为手术对照组(47±17)、机械性压迫组(58±22)、炎性损伤组(55±20),均较正常对照组(28±18)显著增强(P<0.05);术后2,4,8周3个实验组结果也比对照组显著增强(P<0.05)。结论DRG损伤所导致动物脊髓背角伤害感受性神经元的过度兴奋,可能介导了神经细胞的兴奋性毒性损伤和伤肢的痛觉过敏。

脊神经节损伤与脊髓背角C-fos原癌基因表达之间关系的实验研究

目的：采用动物实验模型，探讨脊神经节（DRG）不同损伤方式，以及不同损伤时间，脊髓背角C－fos原癌基因蛋白的表达，以及该表达的程度与神经行为异常改变之间的关系。方法：健康家兔42只。实验分为：手术对照组、机械性压迫组、炎性损伤组和正常对照组。实验结果：DRG损伤后，伤侧脊髓背角C－fos原癌基因蛋白的表达显著增强（P＜0．05）。表明DRG损伤所导致脊髓背角伤害感受性神经元的过度兴奋，介导了神经细胞的兴奋性毒性损伤和伤肢的痛觉过敏。

三氧化二砷对支气管哮喘小鼠气道成纤维细胞增殖及原癌基因表达的影响

目的探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对体外培养的哮喘小鼠气道成纤维细胞(fibroblast,FB)增殖及原癌基因c-myc与c-sis表达的影响。方法实验分为7组,在体外培养的FB中分别加入生理盐水,1μmol地塞米松及浓度为0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L、4.0μmol/L的As2O3,在第1天、第3天、第5天、第7天后用记数法观察FB生长情况,并用流式细胞仪(FCM)检测不同浓度药物对各组FB增殖的影响及各组FB中c-myc与c-sis的阳性表达率。结果各种实验浓度的As2O3对FB均有抑制作用,并有时间及剂量依赖效应。流式细胞仪分析显示,随着As2O3浓度的增高,G1期细胞比例逐渐增高,G2/M期细胞比例降低,浓度为2.0μmol/L、4.0μmol/L的As2O3能显著抑制c-myc与c-sis的表达。结论As2O3能抑制FB的增生,其机制可能与其下调c-myc与c-sis的表达有关。

辛伐他汀含药血清对兔血管平滑肌细胞增殖及原癌基因表达的影响及意义

目的探讨辛代他汀对体外培养血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及机制。方法16只雄性新西兰兔随机分为血清对照组和三个不同剂量的辛伐他汀组(5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg) ,7d后采血并混合每组4只兔血 ,无菌分离制备分组辛伐他汀含药血清。采用内皮素 -1(ET -1)刺激原代培养兔主动脉VSMC建立增殖模型 ,采用MTT及3H -TdR法检测分组辛伐他汀含药血清对VSMC增殖的作用 ,采用免疫细胞化学方法检测VSMCc_myc、c_fos抗原表达、PT -PCR半定量检测c_myc及c_fosmRNA表达。结果与对照组相比 ,不同分组辛伐他汀含药血清呈剂量依赖性抑制血管平滑肌细胞增殖(P<0.05～0.01) ;免疫细胞化学及RT-PCR结果表明 ,辛伐他汀含药血清呈剂量依赖性抑制VSMCc_fos和c_mycmRNA及抗原表达(P<0.05～0.01)。

封闭负压引流技术对创面愈合过程中原癌基因表达的影响

目的研究封闭负压引流技术(vacuum assistedclosure,VAC)对启动创面愈合过程和减少细胞凋亡的作用。方法用免疫组化法检测猪急性皮肤缺损创面和人慢性创面原癌基因c myc、c jun和Bcl2表达变化,计算阳性表达细胞数和标记指数,观察创面愈合过程。结果①VAC治疗组猪急性皮肤缺损创面清洁无明显渗出,第6天即有较多新生上皮和肉芽组织,25d完全愈合。对照组创面有较多渗出和血痂,第6天出现少量新生上皮和肉芽组织,30d愈合。伤后即刻c myc、c jun和Bcl2表达量少,主要位于基底细胞的胞浆或胞核,伤后及VAC治疗后表达迅速显著增加,但表达至峰值后迅速下降。在伤后或VAC治疗后的12d内实验组表达始终高于对照组。②人慢性创面VAC治疗后分泌物明显减少,较快形成健康的肉芽组织。c jun主要表达在表皮基底细胞、真皮成纤维细胞和炎性细胞的胞浆,VAC治疗后阳性细胞数和标记指数显著减少。c myc和Bcl2主要表达在基底细胞的胞浆,VAC治疗后表达量显著增多,标记指数显著增大。结论VAC能快速启动猪急性皮肤创面和人慢性创面的愈合过程,减少修复细胞凋亡,使创面愈合加速。

一氧化氮在17-β雌二醇抑制血管平滑肌细胞增殖和原癌基因c-fos表达中的作用

实验利用大鼠血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells ,VSMC)作为模型 ,观察 17 β雌二醇 (E2 )对VSMC增殖和原癌基因c fos表达的影响 ,并探讨VSMC源性一氧化氮 (NO)在其中的作用。检测指标包括NO释放的测定、细胞计数、3 H Tdr掺入、噻唑蓝 (MTT)测定和c fosmRNA表达。结果显示 ,E2 ( 10 12 ～ 10 -8mol/L)呈浓度依赖性地促进VSMC中NO的释放 ;10 -8mol/LE2 能明显抑制 10 %小牛血清 (FCS)和 10 -7mol/L内皮素 1(ET 1)诱导的细胞增殖和DNA合成 ,E2 的抑制作用均可被雌激素受体 (ER)拮抗剂tamoxifen ( 10 -7mol/L)和一氧化氮合酶抑制剂L NAME( 10 -6 mol/L)明显减轻 ;E2 ( 10 -8mol/L)可明显抑制 10 -7mol/LET 1诱导的VSMCc fos表达 ,这种抑制作用可被L NAME ( 10 -6 mol/L)明显减轻。这些结果提示E2 能抑制VSMC增殖和原癌基因c fos表达 ,这和促进VSMC的NO释放密切相关 。

甲状腺乳头状癌并BRAF^(V600E)突变及原癌基因重排蛋白表达与其侵袭性的关系

目的探讨BRAFV600E突变及原癌基因重排(RET)蛋白表达并存与甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性的关系。方法收集50例PTC患者术后病理,分别用RT-PCR检测BRAFV600E突变,免疫组织化学SP法检测RET表达情况。分析BRAFV600E突变合并RET表达组(n=24)和BRAFV600E单突变或RET单表达组(n=19)的临床及病理特征。结果 BRAFV600E突变率、RET表达率分别为76%(38/50)、56%(28/50),存在BRAFV600E突变合并RET表达者占48%(24/50)。与BRAFV600E突变合并RET表达组比较,BRAFV600E单突变或RET单表达组肿瘤组织分化程度差,且甲状腺癌评分系统评分较高(P=0.011,P=0.022)。结论 BRAFV600E突变并存RET表达时提示PTC肿瘤组织分化差、更易出现实体亚型等侵袭性较高的病理亚型,有可能增加肿瘤相关死亡风险。

蛇六谷乙酸乙酯萃取物A1组分对人胃癌SGC-7901细胞增殖及bcl-2 Bax基因表达的影响

目的:探讨蛇六谷乙酸乙酯萃取物A1组分对人胃癌SGC-7901细胞株的增殖抑制作用及其作用机制。方法:用MTT法检测不同浓度A1组分对SGC-7901细胞的增殖抑制作用,光镜学观察A1组分对SGC-7901的细胞形态学变化,RT-PCR法观察A1组分对SGC-7901细胞bcl-2及Bax基因表达的影响。结果:A1组分对SGC-7901细胞增殖抑制作用为剂量依赖性,并具有明显的细胞形态学改变;RT-PCR结果显示,随着A1组分剂量的增加,具有明显的下调bcl-2基因及上调Bax基因水平的作用。结论:A1组分对人胃癌SGC-7901细胞的增殖具有明显的抑制作用,其抑制作用可能与下调bcl-2基因及上调Bax基因水平作用有关。

乳腺癌标本中BRCA-1蛋白表达与HER-2基因的临床意义

目的探讨乳腺癌标本中乳腺癌易感基因1（BRCA-1）和原癌基因人类表达生长因子受体2（HER-2）与疾病的相关性。方法选择百色市人民医院2013年1～12月乳腺外科手术切除患者85例,BRCA-1采用免疫组化法检测,HER-2采用荧光复位杂交检测。比较BRCA-1基因和HER-2在不同病理类型和是否有淋巴结转移患者中的差异。结果 BRCA-1基因在85例乳腺癌病理标本中,导管内癌阳性率为62.3%（5/8）,浸润性导管癌阳性率为77.3%（54/70）,乳腺髓样癌阳性率为71.4%（5/7）,差异无统计学意义（P〉0.05）。BRCA-1基因在有淋巴转移患者中阳性率为62.9%（22/35）,无淋巴结转移患者阳性率为82.5%（33/40）,差异有统计学意义（P〈0.05）。HER-2基因在85例乳腺癌病理标本中,阳性检出率为48.2%（41/85）;有淋巴转移患者阳性率为88.6%（31/35）例,无淋巴结转移患者阳性率为25.0%（10/40）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 BRCA-1基因、HER-2基因与乳腺癌的发生、发展有密切的关系,对早期预防、诊断、治疗乳腺癌有重要意义。

p21ras表达与非小细胞肺癌患者预后的分析

ｐ２１ｒａｓ表达与非小细胞肺癌患者预后的分析Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｐ２１ｒａｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｔｈｅｐｒｏｇｎｎｏｓｉｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｎｏｎ┐ｓｍａｌ┐ｃｅｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ...

肝癌长期生存患者临床病理特点及P53、c-myc表达研究

目的:探讨肝癌术后长期生存患者临床病理及P53、c-myc癌基因表达的特点和意义。方法:以启东肝癌高发区34例肝癌术后生存10年以上的病例(A组)作为研究对象,42例肝癌术后5年内死亡的病例(B组)为对照,进行临床病理特点观察,并用免疫组化方法检测肝癌及癌旁P53和c-myc表达。结果:肝癌组织中P53、c-myc表达阳性率分别为56.58%(43/76)和60.53%(46/76),A组中分别为47.06%(16/34)和50.00%(17/34),B组中分别为64.29%(27/42)和69.05%(29/42),两组相比无显著差异。癌旁组织中P53、c-myc表达阳性率分别为42.11%(32/76)和57.89%(44/76),A组中分别为26.47%(9/34)和41.18%(14/34),与B组中54.76%(23/42)、71.43%(30/42)相比差异有统计学意义。A组85.29%(29/34)的病人有完整包膜,显著多于B组的21.43%(9/42);5.88%(2/34)有门脉栓塞,38.24%(13/34)伴有肝硬化,显著低于B组(69.05%,78.57%)。结论:癌周组织中P53、c-myc表达与术后生存呈负相关;肝癌包膜完整、无门脉栓塞、无肝硬化的单结节病人,预后好,术后生存期明显延长。

美托洛尔对缺氧-再给氧心肌细胞C-FOS表达和游离钙的影响

目的和方法研究表明,c-fos是细胞核内重要的原癌基因,它的表达产物对细胞具有重要意义,c-fos的表达产物Fos单独不能与DNA结合,Fos和Jun通过亮氨酸拉链形成二聚体,即具有活性的转录因子复合物AP.1,AP.1通过顺式作用激活相关的基因,从而调节基因的表达与蛋白质的合成。在正常情况下,c-fos在细胞中仅有低水平表达,但在心肌缺血再灌注中c-fos表达迅速增加。心肌细胞在缺氧-再给氧(A/R)时会产生大量氧自由基,氧自由基可诱导原癌基因表达,原癌基因表达程度与心肌细胞复氧损伤程度及细胞内游离钙有关。Ca^(2+)超载可导致细胞不可逆损伤及细胞信息传递的紊乱,大量氧自由基生成及脂质过氧化物增强是心肌缺血再灌注损伤的主要机制之一。超氧化物岐化酶(SOD)作为重要的抗氧化酶可清除超氧阴离子自由基,保护心肌细胞,减轻心脏功能的损伤程度,其活性高低反映了机体清除氧自由基的能力。本研究通过培养心肌细胞,在细胞水平模拟心肌A/R损伤,用粘附式细胞仪,以荧光探针技术激光共聚焦扫描及免疫组化、灰度分析观察美托洛尔对培养心肌细胞A/R时细胞内钙(Ca^(2+))荧光强度、SOD活性及c-Fos表达的影响。结果心肌细胞A/R后,细胞内Ca^(2+)荧光强度升高,对照组为:167.3±32.8,0.3±0.04,A/R组为:562±128.6,97.6±12.8,P<0.01。细胞培养液中SOD活性、平均灰度值降低,P<0.01。美托洛尔组上述改变得到明显改善,细胞内钙(Ca^(2+))荧光强度显著降低为376±39.1,22.8±8.2,细胞培养液中SOD活性、平均灰度值显著增高,P<0.05。~#P<0.01与对照组比较*P<0.05与A/R组比较。结论本实验证实美托洛尔能可明显减少c-fos的表达,提高心肌细胞SOD活性,有效清除超氧阴离子自由基,保护细胞膜结构完整性及阻止Ca^(2+)内流,减轻Ca^(2+)超载,对A/R心肌具有良好的保护作用。美托洛尔是选择性阻滞心脏β1受体,保护机制可能通过调节细胞膜腺苷酸环化酶活性,减少钙离子内流,从而降低心肌氧耗量,改善缺血再灌注损伤。

固真方对成骨样细胞内蛋白激酶A活性的影响

中药固真方具有补肾益精、延缓衰老的作用,能促进脱氧核糖核苷酸（DNA）合成;促进与细胞增殖有关的原癌基因表达,抑制负性增殖调控基因的表达;增进甲状旁腺素（PTH）刺激后细胞内 Ca2+释出的反应性,表明固真方有助于细胞的增殖与分化。我们推想在促增殖过程中细胞内的信息传递过程可能表现活跃,为此,我们研究中药同真方对细胞内蛋白激酶 A（PKA）活性的影响。材料与方法1 材料1.1 细胞大鼠成骨样细胞株 ROS 17/2.8由美国哈佛医学院麻省总医院内分泌研究室转赠。