严重烧伤大鼠心肌[Ca^(2+)]i浓度变化及与原癌基因c-fos、c-myc表达的关系

目的 了解大鼠严重烧伤后心肌细胞胞内游离钙离子浓度 [Ca2 + ]i动态变化特征及与原癌基因c fos、c myc表达的关系。方法 复制Wistar大鼠 3 0 %体表面积 (TBSA)Ⅲ度烧伤模型 ,随机分为烧伤组、补液组、维拉帕米治疗组和对照组。烧伤后不同时相点处死动物。Fura 2 /AM测定大鼠心肌细胞胞内游离钙离子浓度 ,原位杂交技术检测心肌c fos、c mycmRNA的表达。结果 心肌细胞胞内游离钙离子浓度单烧组和补液组明显升高 (P <0 0 1) ,维拉帕米治疗组轻度升高 (P >0 0 5 ) ;在 0 5h、72h两个时相点 ,三个实验组心肌细胞 [Ca2 + ]i明显低于对照组 (P <0 0 1)。除了维拉帕米治疗组c fos、c myc表达与钙离子浓度无相关性 (r =0 74,P >0 0 5 ) ,其它各实验组c fos、c myc的表达与心肌细胞钙离子浓度成正相关性。结论 烧伤导致心肌细胞钙超载 ,补液不能阻止 [Ca2 + ]i升高。而烧伤后大鼠心肌细胞原癌c fos、c myc的表达与胞内游离钙离子浓度有密切关系 。

原癌基因c-myc,c-fos在自发性高血压大鼠左心室的表达

探讨ＳＨＲ左心室肥厚时原癌基因ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ表达的变化及其意义。方法１６周龄的雄性ＳＨＲ在测量收缩压和体重后处死，年龄、性别和数量配对的正常血压的ＷＫＹ为对照组。取左心室称重，异硫氰酸胍酸－酚氯仿一步法提取组织总ＲＮＡ，用３２Ｐ标记的ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓｃＤＮＡ探针行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，同时取左心室组织制备蛋白抽提物进行Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印溃杂交以及免疫组织化学染色观察ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ细胞定位及表达量。结果ＳＨＲ左心室组织ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ及癌蛋白表达量均明显高于ＷＫＹ，ｃ－ｍｙｃ癌蛋白主要定位于心肌成纤维细胞核中，ｃ－ｆｏｓ表达在ＳＨＲ与ＷＫＹ之间，以及心肌细胞与成纤维细胞之间无差别。结论成纤维细胞ｃ－ｍｙｃ的表达增高对ＳＨＲ左心室肥厚发展与维持有重要意义。

活血潜阳方对自发性高血压大鼠心肌肥厚组织原癌基因c-fos和c-myc表达的影响

目的:通过分析左心室心肌原癌基因c-fos和c-myc mRNA及蛋白的表达,探讨活血潜阳方改善自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rat,SHR)左心室肥厚的作用机制。方法:以10周龄的SHR为高血压左心室肥厚模型,随机分为SHR模型组,中药大、中、小剂量治疗组,西拉普利治疗组,年龄和性别相匹配的京都(Wistar-Kyoto,WKY)大鼠作为正常对照组,每组5只。灌胃14周后,取大鼠心脏组织,用原位杂交组织化学法和免疫组化法分别检测心肌c-fos和c-myc mRNA及蛋白的表达。结果:24周龄模型组SHR左心室肥厚心肌的原癌基因c-fos和c-myc mRNA及蛋白的表达与WKY大鼠比较明显增强(P<0.01)。与SHR模型组比较,大、中和小剂量活血潜阳方组大鼠左心室心肌组织中c-fos和c-myc mRNA的表达下降(P<0.05);大、中剂量活血潜阳方可降低c-myc蛋白的表达,但对c-fos蛋白表达的影响与模型组比较,差异未见统计学意义。结论:活血潜阳方可以下调SHR心肌组织中原癌基因c-myc的表达,可能是改善高血压左心室肥厚的重要机制之一,是否通过对c-fos表达的影响治疗左心室肥厚尚不能确定。

红景天甙对兔肺动脉平滑肌细胞增殖及c-fos、c-myc原癌基因表达的抑制作用

目的:研究红景天甙(salidroside,sal)对免肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖、DNA 合成和 c-fos、c-myc 原癌基因表达的影响,并初步探讨其作用机理。方法:应用离体培养的兔肺动脉平滑肌细胞,采用四唑盐比色试验(MTT)、~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入和斑点杂交的方法,观察平滑肌细胞的增殖、DNA 合成和 c-fos、c-myc 原癌基因表达。结果:sal(2.0×10^(-5)～64×10^(-5)mol/L)可明显抑制离体培养的兔肺动脉平滑肌细胞增殖、~3H-TdR 掺入和 c-fos、c-myc 原癌基因表达.sal(64×10^(-5)mol/L)可明显抑制去甲肾上腺素(10μmol/L)对 PASMC的促增殖作用(P<0.05),但 sal 与心得安(propranolol)合用并不增加对 PASMC 的抑制效应(P>0.05)。结论:红景天甙可抑制离体培养的兔肺动脉平滑肌细胞的增殖、DNA 合成和 c-fos、c-myc 原癌基因表达。

严重烧伤后大鼠心肌原癌基因c-fos、c-myc的表达

目的 研究严重烧伤后大鼠心肌细胞中c-fos、c-myc mRNA和蛋白的动态表达及意义。 方法 复制Wistar大鼠30%体表面积Ⅲ度烧伤模型，设烧伤组、补液组、维拉帕米治疗组和对照组，烧伤后在不同时相点处死动物取材。免疫组化方法检测c-fos、c-myc蛋白的表达，原位杂交法检测c-fos、c-myc mRNA的表达。 结果 各实验组c-fos、c-myc蛋白及mRNA表达随伤后时间推移逐渐增强达到峰值后下降。组间比较，烧伤组、补液组、维拉帕米组c-fos、c-myc表达呈依次降低，差异有显著性意义。 结论 严重烧伤可诱导心肌内早期反应基因c-fos、c-myc的表达。不论是烧伤组、补液组还是维拉帕米组，c-fos、c-myc mRNA水平及蛋白水平都有不同程度的表达。其表达不同于心肌梗死和压力超负荷病理状态下基因表达特点，提示三者间可能有着不同的信号转导机制和调节机制。

塔里木马鹿再生茸组织中原癌基因c-myc、c-fos的表达

为进一步确定原癌基因c-myc、c-fos对马鹿茸生长的作用,实验收集231头2至4岁公鹿产茸量的生产信息,并采用3头成年马鹿生长期为30天、60天的头茬鲜茸和3头成年马鹿割后生长30天、60天的再生鲜茸,通过荧光定量PCR技术对不同组织基因的表达定量分析。结果表明,在鹿茸生长早期c-myc在再生茸茸皮的表达量显著低于头茬茸(P<0.01)。c-myc基因在割后再生的60天鹿茸茸皮和软骨组织表达下调,与头茬茸60天的相比,表达有显著差异(P<0.05)。间充质细胞层和成软骨层c-myc基因的表达量很低,且表达没有差异。从30天到60天,c-fos基因割后再生的马鹿茸茸皮中的表达下调,而在软骨组织中表达上调。与头茬60天茸相比,表达均有显著差异(P<0.05)。而在间充质细胞层和成软骨层没有差异。c-fos基因头茬与割后再生的60天马鹿茸的表达趋势与生长期为30天的相同。与头茬茸比较,再生茸成软骨层组织c-fos基因表达有上调趋势。结论:原癌基因c-myc、c-fos对茸皮的生长主要是促进其表皮干细胞的增殖分化;而对软骨组织c-myc基因高表达有阻碍茸软骨骨化,减缓骨化进程的作用,c-fos基因低表达有抑制生茸期骨膜内生骨的过程。

硒对大鼠肝细胞凋亡和原癌基因c-myc、c-fos和c-jun表达的影响

目的 研究亚硒酸钠对大鼠肝细胞凋亡和原癌基因c myc、c fos和c jun表达的影响。方法 选用大鼠 ,每组 5只 ,用 5、10和 2 0 μmol/kg亚硒酸钠腹腔注射染毒。用末端标记法 (TUNEL)、流式细胞术检测细胞凋亡 ,用Northern斑点杂交方法研究原癌基因c myc、c fos和c jun的表达。结果 5、10和 2 0 μmol/kg的亚硒酸钠染毒大鼠 ,不仅能诱导大鼠肝细胞凋亡 ,细胞凋亡率均较对照组 ( 2 2 2± 0 43 ) %显著增高 ,分别为 ( 3 72± 1 76) % (P <0 0 5 )、( 5 82± 1 42 ) % (P <0 0 1)和 ( 11 76± 1 87) % (P <0 0 1) ,而且还存在着明显的剂量 反应关系。 5、10和 2 0 μmol/kg的亚硒酸钠也能引起大鼠肝细胞c myc、c fos和c junmRNA明显增多 ,免疫组化分析可以检测到表达产物c Myc ,c Fos和c Jun蛋白 ,说明这 3种原癌基因表达增强。结论 一定剂量的亚硒酸钠可以诱导大鼠肝细胞凋亡和原癌基因c myc、c fos和c

原癌基因蛋白C-MYC和C-FOS在良性胆道狭窄瘢痕组织中的表达及相关性研究

目的观察原癌基因c-myc,c-fos蛋白在良性胆道狭窄瘢痕组织中的表达和分布,探讨其与良性胆道狭窄形成的相关性。方法应用免疫组化SP法,检测c-myc,c-fos蛋白在20例肝外胆管瘢痕组织、12例肝内胆管瘢痕组织和10例正常胆管组织中的表达和分布。对其阳性表达结果进行比较分析。结果在肝外胆管瘢痕组织和肝内胆管瘢痕组织的成纤维细胞、胆管上皮细胞及血管内皮细胞中c-myc,c-fos呈强阳性表达,而正常胆管组织中无表达。肝外、肝内胆管瘢痕组织中c-myc,c-fos的表达与正常胆管组织差异有显著性意义(P<0.01),肝外与肝内胆管瘢痕组织中c-myc,c-fos的表达差异无显著性意义(P>0.05)。在肝外胆管瘢痕组中c-myc与c-fos蛋白两者的表达成正相关(r=0.75,P<0.05)。在肝内胆管瘢痕组中c-myc与c-fos蛋白两者的表达亦成正相关(r=0.68,P<0.05)。结论肝外、肝内胆管瘢痕组织中c-myc和c-fos癌基因受激活,可能参与了成纤维细胞的分化增殖、胶原合成与降解以及对细胞因子的调控,并导致瘢痕增生。原癌基因c-myc,c-fos与良性胆道狭窄瘢痕形成密切相关,两者具有协同性。

光生物素探针对白血病患者c-myc和c-fos原癌基因表达水平的检测

用国产光生物素标记探针,经RNA-DNA斑点杂交技术检测了41例白血病患者中c-myc和c-fos原癌基因的RNA表达水平。c-myc和c-fos的强阳性表达率分别为82.8%和76.6%,c-myc在急性白血病和慢性粒细胞白血病急变时表达水平明显高于慢性粒细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病及对照组,化疗完全缓解后表达水平下降,而与FAB分型无关;c-fos在AML的M_4和M_5中表达水平明显增高。提示c-myc表达与细胞增殖潜能有关,能为诱导缓解治疗结果的预测提供有意义的临床和生物学方面的信息,c-fos反映细胞分化状态,可作为白血病亚型分类的辅助指标之一。同时,本研究还探讨了光生物素探针标记技术的优越性,操作简便,方法敏感,可代替放射性核素探针在一般实验室的常规实验和诊断之用。

流动力对细胞原癌基因c-fos和c-myc表达的影响

目的研究流体力对脑微血管内皮细胞原癌基因cf-os和c-myc表达的影响,为探索微血管疾病机理提供一定实验依据。方法获取Wistar大鼠脑微血管进行细胞培养,在平行板流动小室中对所培养的细胞施加力学作用,并应用免役组织化学技术观察微血管内皮细胞原癌基因cf-os和c-myc的表达。结果不同的流动力对体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞cf-os和c-myc蛋白表达产生了不同的影响。cf-os蛋白表达在静态时非常低,但在4dynes/cm2和10dynes/cm2的流体力的作用下可诱导cf-os蛋白水平迅速增加,尤其是10dynes/cm2的流体力,并随着时间的延长而增加,到1h时达到高峰,随后cf-os蛋白表达量出现下降,2.5h时接近基础水平。c-myc蛋白在静态时表达也非常低,经流体力作用后缓慢增多。结论流体力的大小会影响cf-os和c-myc的表达,血液的力学信号传入细胞内并引起细胞的一些应答,也印证了cf-os和c-myc是被血液流体力作用短暂上调的基因,流体力与内皮细胞生长、增殖、损伤也有直接关系。

卡托普利对动脉粥样硬化家兔内皮素和血管紧张素Ⅱ的影响及其与原癌基因c-myc和c-fos的相关关系

为探讨卡托普利对动脉粥样硬化家兔内皮素和血管紧张素Ⅱ的影响及其与原癌基因c myc和c fosmR NA表达的相关性。将 53只日本大耳白兔随机分为对照组、胆固醇组及高、中、低剂量的卡托普利加胆固醇组。采用放射免疫法及原位逆转录聚合酶链反应技术分别测定不同实验阶段的内皮素及血管紧张素Ⅱ水平及原癌基因c myc和c fosmRNA阳性检出数。结果发现 ,(1 )胆固醇组内皮素水平显著性增高 ,随病程进展一直与血管紧张素Ⅱ呈显著正相关 (r=0 .90 1 1 ,P <0 .0 1 ;r=0 .82 75 ,P <0 .0 5) ;高剂量卡托普利加胆固醇组内皮素和血管紧张素Ⅱ水平较胆固醇组显著降低 ,中等剂量卡托普利加胆固醇组和低剂量卡托普利加胆固醇组与胆固醇组比较无显著性差异。 (2 )胆固醇组的主动脉内膜增厚 ,原癌基因c myc和c fosmRNA的表达增高 ,高剂量卡托普利加胆固醇组主动脉内膜增殖减轻 ,原癌基因c myc和c fosmRNA阳性信号亦显著性减少。 (3)各组内皮素与原癌基因c myc和c fosmRNA的阳性检出数呈显著正相关。结果提示 ,内皮素与血管紧张素Ⅱ、原癌基因c myc和c fos在动脉粥样硬化的形成和发展中始终呈显著正相关关系 。

全脑缺血大鼠原癌基因c-fos表达及小檗碱的影响

采用结扎大鼠双侧颈总动脉合并低血压后再恢复供血造成大鼠脑缺血再灌注模型，运用 斑点杂交技术，观察大鼠全脑缺血再灌注中海马ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的动态变化，并观察小檗碱 （Ｂｅｒ）的作用。结果表明，大鼠全脑缺血３０ ｍｉｎ后再灌注１０～１８０ｍｉｎ，海马ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ出现一过 性高表达，１ｈ达高峰，为假手术组的５．１倍。Ｂｅｒ２０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）×５ｄｉｐ显著抑制脑缺血诱导的 ｃ－ｆｏｓ高表达，且明显升高ＳＯＤ及ＧＳＨ－Ｐｘ活力，降低ＭＤＡ含量。这表明，脑缺血过程中ｃ－ｆｏｓ原 癌基因呈现一过性高表达，Ｂｅｒ的抗氧自由基及降低ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ水平的作用可能是其抗脑缺血 作用机制之一。

牛磺酸对肾性高血压大鼠肥厚心肌原癌基因c-fos表达的影响

目的观察牛磺酸(taurine,Tau)对肾血管性高血压大鼠肥厚心肌原癌基因c-fos表达的影响。方法建立二肾一夹(2K1C)肾动脉狭窄性高血压大鼠模型。羟脯氨酸法测定大鼠心肌胶原含量(myocardial collagen concentration,MCC);放免法测定心肌血管紧张素Ⅱ含量(myocardial local AngⅡconcentration,MAC)及醛固酮含量(myocardial local aldosterone concentration,MDC); 免疫组化方法检测c-fos蛋白表达,原位杂交方法检测c-fos mRNA表达。结果2K1C组大鼠尾动脉收缩压(systolic blood pres sure,SBP)、左心室/体重比(left ventricular weight index,LVWI),MCC,MAC及MDC较sham组显著增加(P<0.01);MCC与心肌MAC,MDC显著正相关(r=0.832 3,0.901 9,P<0.01);c-fos蛋白及c-fos mRNA表达高于sham组(P<0.01);Tau(50 mg·kg^(-1)·d^(-1),ig×8周)显著降低2K1C大鼠SBP,LVWI,MCC,MAC,MDC,心室肌c-fos mRNA及蛋白表达量亦明显下降(P<0.01)。结论Tau可通过降低心肌局部肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotension-aldosterone system,RAAS)活性及c-fos表达,从而抑制心肌细胞肥大及胶原纤维增生,有效防治肾血管性高血压心肌肥厚。

镉对大鼠肝细胞原癌基因c-fos、c-jun表达的影响

应用 Northern斑点杂交方法研究氯化镉对大鼠肝细胞原癌基因 c- fos、c- jun表达的影响。结果表明 ,5、10和 2 0 μmol/ kg氯化镉腹腔一次注射后 ,大鼠肝细胞 c- fos、c- jun m RNA较对照组明显增多。结果提示 ,氯化镉可以引起大鼠在体肝细胞原癌基因 c- fos、c-

癫痫模型大鼠海马原癌基因c-fos mRNA和蛋白质表达时程的研究

为了探讨癫痫发病机理与原癌基因的关系，将马桑内酯注入侧脑室，于大鼠癫痫发作后不同时间点取材海马，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析技术对海马ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ和Ｆｏｓ蛋白表达的动力学进行了定量研究，激光扫描仪定量分析表明：（１）ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ在０．５ｈ表达最高，依次渐减，至４ｈ几无表达；（２）Ｆｏｓ蛋白在１ｈ开始表达，２ｈ最多，以后渐少。以上结果表明：ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ和Ｆｏｓ蛋白的表达随癫痫的发生发展出现规律性变化，ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ是快速，一过性表达，Ｆｏｓ蛋白的表达滞后且延长。提示：ｃ－ｆｏｓ在癫痫发病的基因机制中发挥作用，本文对此进行了讨论。本实验为深入研究癫痫发病的分子机制奠定了基础。

缺碘低硒区与缺碘富硒区胎儿大脑皮层原癌基因c-fos,c-jun产物表达对比研究

目的 研究微量元素 Se与胎脑神经元原癌基因 c- fos,c- jun蛋白表达之间的关系。方法 在陕西缺碘低硒区 (宜君县 )缺碘富硒区 (紫阳县 )及对照组 (临潼县 ) 3地共解剖水囊引产胎儿胎脑 2 0例 ,通过免疫组化法检测胎脑大脑皮层神经元原癌基在 c- fos,c- jun蛋白产物的表达 ,并采集其脐血进行微量元素检测。结果 补碘近 2 0年后 ,3地碘水平已无明显差异 ,而 Se水平 3地则有显著差异 ,以紫阳为最高 ,宜君为最低 ;C- Fos,C- Jun蛋白表达以紫阳较强 ,宜君最弱。结论 Se的水平可影响胎脑大脑皮层神经元 C- Fos,C- Jun蛋白的表达 。

电针内关穴诱导大鼠延髓原癌基因c-fos表达

【目的】观察电针内关穴诱导大鼠延髓内的原癌基因c -fos表达及分布特点。【方法】采用抗FOS蛋白的免疫组织化学方法。【结果】电针内关穴可引起大鼠延髓内神经元的广泛c -fos表达 ,其FOS样免疫反应 (FOS -like -immunoreactivity ,FLI)阳性神经元广泛分布于延髓的孤束核、迷走神经背核、下橄榄核、楔束核、楔束外核、腹外侧网状核、疑核 ,网状结构中也散在分布着FLI神经元如网状巨细胞核等。【结论】提示电针“内关”穴激活了上肢的本体觉传导路 ,并且激活了延髓内与内脏信息相关的中枢核团。

SeO_2对原癌基因c-fos调控区P250的影响

背景与目的:已有研究表明,二氧化硒(SeO2)可诱导肺癌细胞株中c-fos蛋白高表达。本研究旨在通过研究SeO2对原癌基因c-fos调控区域P250的影响,探讨其调控机理。方法:构建c-fos启动区氯霉素乙酰化转移酶(chloramphenicolacetyl-transferase,CAT),然后转染HeLa癌细胞株,用不同浓度SeO2处理后观察细胞中CAT的活性。结果:不同浓度(3μmol/L、10μmol/L、30μmol/L)SeO2对转染了c-fosCATP250的HeLa癌细胞株作用后,其CAT的活性均增高,其积分光密度值分别为0.737±0.085、6.047±0.738、3.167±0.183,与对照组(0.490±0.046)相比,10μmol/L和30μmol/L浓度组的积分光密度值变化有统计学意义(P<0.05)。结论:SeO2可通过影响c-fos调控区域P250而发挥调控肿瘤细胞凋亡的生物学效应,SeO2可能具有潜在的抗肿瘤作用。

一氧化氮在17-β雌二醇抑制血管平滑肌细胞增殖和原癌基因c-fos表达中的作用

实验利用大鼠血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells ,VSMC)作为模型 ,观察 17 β雌二醇 (E2 )对VSMC增殖和原癌基因c fos表达的影响 ,并探讨VSMC源性一氧化氮 (NO)在其中的作用。检测指标包括NO释放的测定、细胞计数、3 H Tdr掺入、噻唑蓝 (MTT)测定和c fosmRNA表达。结果显示 ,E2 ( 10 12 ～ 10 -8mol/L)呈浓度依赖性地促进VSMC中NO的释放 ;10 -8mol/LE2 能明显抑制 10 %小牛血清 (FCS)和 10 -7mol/L内皮素 1(ET 1)诱导的细胞增殖和DNA合成 ,E2 的抑制作用均可被雌激素受体 (ER)拮抗剂tamoxifen ( 10 -7mol/L)和一氧化氮合酶抑制剂L NAME( 10 -6 mol/L)明显减轻 ;E2 ( 10 -8mol/L)可明显抑制 10 -7mol/LET 1诱导的VSMCc fos表达 ,这种抑制作用可被L NAME ( 10 -6 mol/L)明显减轻。这些结果提示E2 能抑制VSMC增殖和原癌基因c fos表达 ,这和促进VSMC的NO释放密切相关 。