苦参素对成纤维细胞增殖及Ⅲ型原胶原mRNA表达的影响

目的：研究苦参素对成纤维细胞增殖及Ⅲ型原胶原ｍＲＮＡ表达的影响，探讨其抗纤维化的作用机制。方法：用ＭＴＴ法及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分别检测ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞增殖及Ⅲ型原胶原ｍＲＮＡ的表达。结果：苦参素能明显抑制成纤维细胞增殖及Ⅲ型原胶原ｍＲＮＡ的表达，并呈剂量依赖性。结论：苦参素可通过抑制成纤维细胞增殖及Ⅲ型原胶原ｍＲＮＡ的表达而起到抗肝纤维化作用。

血清Ⅲ型原胶原含量与肝纤维化的关系（附102例肝活检分析）

为进一步研究血清Ⅲ型原胶原（ＰＣⅢ）含量与肝纤维化的关系，对肝炎患者血清ＰＣⅢ含量与肝炎组织学变化进行对比分析．方法：用ＲＩＡ法测定６１６例急、慢性肝炎及肝硬化患者的血清ＰＣⅢ含量，其中１０２例同时做肝活检，按照Ｋｎｏｄｅｌｌ肝组织炎症活动性指数标准记分．结果：急、慢性肝炎及肝硬化患者血清ＰＣⅢ含量明显高于正常人，差异有显著性（Ｐ＜ｏ．０５～０．０１）．其升高的血清ＰＣⅢ含量与肝细胞坏死范围及门管区炎症程度无相关性（ｒ＝０．４９４，Ｐ＞０．０５），而与肝纤维化程度呈正相关（ｒ＝０．６６８，Ｐ＜０．０１）．结论：血清ＰＣⅢ测定是判断慢性肝炎及肝硬化时肝纤维化程度的有用指标．

盐析法从原胶碱液中提取紫胶色酸

研究了以原胶为原料,经碱溶除杂后的盐析工艺分离提取紫胶色酸的方法。通过对盐析过程影响因素的分析,建立了盐析法提取紫胶色酸的数学模型并确定了最佳工艺条件:氯化钠加入量9.64g、转速800r/min、盐析温度34.5℃、盐析时间25min、碱液浓度0.188mol/L,最佳工艺条件下原胶盐析溶液稀释后的吸光度值达到0.3508。在得到的紫胶色酸盐析溶液的基础上,研究了钙盐沉降方法对紫胶色酸产品的析出效果,结果表明,钙盐沉降中,氯化钙用量为3g/L时,提取率即达95.42%,色酸产品中蒽醌类化合物含量达到31.28%,pH为3.633。通过DSC、FTIR的分析发现紫胶色酸产品中所含有的杂质可能主要为钙盐沉降过程中所包裹的紫胶树脂。

高效液相色谱-串联质谱法测定蜂胶原胶中氯霉素的残留量

建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定蜂胶原胶中氯霉素残留量的分析方法。样品用叔丁基甲醚溶解,氢氧化钠溶液去除黄酮类等杂质,叔丁基甲醚层加正己烷降低氯霉素的溶解度,再用乙酸钠缓冲液反萃氯霉素,反萃溶液调至碱性后用乙酸乙酯萃取,经浓缩、复溶和过滤后,进行测定。采用甲醇-水(65∶35,体积比)为流动相,反相Atlantis T_3色谱柱进行液相色谱分离,电喷雾负离子电离(ESI-),多反应监测模式(MRM)进行检测,内标法定量。结果表明,氯霉素在0.1~5.0μg/L范围内线性关系良好;方法的定量下限(S/N≥10)为0.3μg/kg;在0.3、0.6、3.0μg/kg加标水平下,氯霉素的平均回收率为97.3%~103%,相对标准偏差为4.8%~6.4%。该法的灵敏度、准确度和精密度均符合兽药残留检测的要求。

单纯结膜转位术与联合视原胶原植入术治疗翼状胬肉的疗效观察

目的对翼状胬肉切除行结膜转位与联合视原胶原植入治疗翼状胬肉的临床效果进行观察和评价。方法对我院就诊的翼状胬肉患者56例(60只眼)随机分为A组和B组,A组采用翼状胬肉切除联合结膜转位术,B组进行翼状胬肉切除联合结膜转位及视原胶原植入术,对术后的炎症反应、并发症、视力、眼压、翼状胬肉复发率等进行了动态观察。结果术眼均未见排斥反应及并发症,随访观察11个月,B组有3只眼复发,复发率为10%;A组有5只眼复发,复发率为16.7%。两组比较差异无统计学意义,B组复发程度轻于A组。结论翼状胬肉切除行结膜转位与联合视原胶原植入术均可以有效地降低术后的复发程度,联合视原胶原植入术可减轻术后复发程度,是手术治疗翼状胬肉的一种安全、有效的方法。

肝病患者Ⅲ型原胶原和甲胎蛋白的测定

Ⅲ型原胶原(PCⅢ)是诊断早期肝纤维化的重要指标之一,而甲胎蛋白(AFP)对晚期肝硬化及肝癌有重要临床意义.二者之间的含量变化在临床上的诊断意义还报告不多.为探索其临床价值,特恻定35例肝硬化及29例肝癌病人血清之PCⅢ和AFP,结果如下.

整合素诱导酪氨酸磷酸化蛋白在成纤维细胞原胶原基因表达中的作用

目的：研究粘附分子整合素的细胞内信号传导途径之一——酪氨酸磷酸化在成纤维细胞表达原胶原基因中的作用。方法：利用抗整合素单抗及相应二抗的交联作用，模拟整合素在成纤维细胞表面簇集而诱导酪氨酸磷酸化，用蛋白印迹和ＲＴ－ＰＣＲ技术分别检测诱导生成的酪氨酸磷酸化蛋白和Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ水平；并观察阻断酪氨酸磷酸化后，酪氨酸磷酸化蛋白和Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的变化。结果：整合素β１亚基在成纤维细胞表面簇集可诱导相对分子质量分别为９８０００和６５０００的酪氨酸磷酸化蛋白，且Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的表达显著增加（Ｐ＜０．０１）；阻断酪氨酸磷酸化，不仅酪氨酸磷酸化蛋白显著减少（Ｐ＜０．０１），而且Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的表达也降低（Ｐ＜０．０５）。结论：整合素β１亚基在成纤维细胞表面簇集诱导的酪氨酸磷酸化蛋白在Ⅰ型原胶原基因表达中具有重要作用。

高龄男性血清Ⅰ型原胶原氨基端前肽水平变化的独立相关因素研究

目的探讨高龄(≥80岁)男性血清I型原胶原氨基端前肽(P1NP)水平变化的独立相关因素。方法对495例高龄男性进行伴随疾病和生活方式的调查,并进行血清P1NP、血生化、性激素和贫血等指标的检测,运用多元回归分析方法筛选影响高龄男性血清P1NP水平变化的独立相关因素。结果经单因素分析,2型糖尿病、晒太阳、室外运动、喝牛奶、甲状旁腺素(PTH)、25-羟基维生素D、白蛋白、肌酐、血钙、血磷、血铁、叶酸、铁蛋白与高龄男性血清P1NP水平有关(均P<0.05)。经多元回归分析,PTH、室外运动、血钙、血磷、血肌酐均是影响高龄男性血清P1NP水平变化的独立相关因素(均P<0.05)。结论积极防治肾功能损害、降低血清PTH水平、养成良好的生活方式,可能是降低高龄男性血清P1NP水平的重要方法。

携带人Ⅰ型а1原胶原基因荷斯坦奶牛胚胎的发育研究

克隆了人Ⅰ型а1原胶原的cDNA基因,将克隆的基因连接到改造后的乳腺特异性表达载体pGC1上,经电穿孔法转染到成纤维细胞中,利用核移植技术获得携带人Ⅰ型а1原胶原基因牛胚胎。最终获得8枚转基因的囊胚,证明用核移植方法获得的携带人Ⅰ型а1原胶原蛋白基因的荷斯坦奶牛胚胎能够正常发育。

基于近红外法的紫胶原胶主组分快速预测模型构建

采用化学法测定了紫胶原胶中的树脂、蜡质和色素的含量,用傅里叶变换近红外光谱技术采集原胶的近红外光谱数据,得到原始光谱,通过光谱预处理方法消除噪声,最后以偏最小二乘法(PLS)建立回归模型。最终得到紫胶中树脂、蜡质和色素含量的近红外光谱分析模型,其树脂、蜡质和色素的最优校正集决定系数(R2c)分别为0.961、0.812和0.828,交叉验证标准误差(RMSECV)分别为1.96、0.28和0.065;验证集的最优决定系数(R2p)分别为0.957、0.808和0.793,预测标准误差(RMSEP)分别为0.940、0.124和0.101。建立的紫胶原胶主组分近红外检测模型的准确度、稳定性及预测性能良好,为紫胶原胶主组分快速分析方法的建立提供了新思路。

健脾补肾活血方治疗女性绝经后骨质疏松效果及对血清1型原胶原氨基末端前肽、β-胶原特殊序列水平的影响

目的探讨健脾补肾活血方用于治疗女性绝经后骨质疏松的临床疗效及对血清1型原胶原氨基末端前肽(P1NP)、β-胶原特殊序列(β-Crosslaps)的影响。方法手术后入住加强护理病房(ICU)且需要使用机械通气的患者58例随机分为观察组和对照组各29例,观察组给予健脾补肾活血方,对照组给予复方氨基酸螯合钙胶囊,治疗结束后观察两组临床疗效,分析不同治疗方案对血清P1NP和β-Crosslaps的影响。结果观察组治疗后显效12例,有效13例,临床有效率为86.21%,显著高于对照组的62.07%。观察组治疗后骨密度由治疗前的(0.512±0.73)ρ·g^(-1)·cm^(-2)增加至(0.671±0.84)ρ·g^(-1)·cm^(-2),显著高于对照组(P<0.05)。两组治疗前后血清P1NP、β-Crosslaps含量均显著降低,观察组两项指标显著低于对照组(P<0.05)。结论健脾补肾活血方治疗女性绝经后骨质疏松临床疗效显著,可有效减轻患者临床症状,并有效降低患者血清P1NP、β-Crosslaps含量。

芦荟原胶中芦荟甙的含量测定

芦荟原胶中芦荟甙的含量测定中药系（福州３５０００３）郭素华福建省医学科学研究所（福州３５０００１）邓思珊，齐一萍福州附属人民医院（福州３５０００４）陈志春芦荟（ＡｌｏｅＶｅｒａ）是百合科肉质草本植物，它除了用作药物之外，在化妆品、饮料及食品等工业中也...

2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病患者血清网膜素、视黄醇结合蛋白4和Ⅰ型原胶原氨基端前肽水平及意义分析

目的探讨2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清网膜素、视黄醇结合蛋白-4(RBP4)和Ⅰ型原胶原氨基端前肽(PINP)水平变化及其临床意义。方法2019年6月~2021年12月我院诊治的T2DM合并NAFLD患者102例(轻度39例,中度34例,重度29例)和T2DM患者98例,使用超声检查行脂肪肝分度,采用ELISA法检测血清网膜素、RBP4和PINP水平,应用受试者工作特征曲线(ROC)评估各指标诊断NAFLD严重程度的效能。结果T2DM合并NAFLD患者血清网膜素和PINP水平分别为(45.4±12.4)ng/mL和(29.6±6.2)ng/mL,显著低于T2DM患者【分别为(68.3±15.6)ng/mL和(35.8±7.3)ng/mL,P<0.05】,而血清RBP4水平为(26.6±5.1)mg/L,显著高于T2DM患者【(20.1±4.6)mg/L,P<0.05】;重度NAFLD患者血清网膜素和PINP水平分别为(40.7±4.9)ng/mL和(25.8±3.7)ng/mL,显著低于中度患者【分别为(45.2±5.6)ng/mL和(29.9±4.0)ng/mL,P<0.05】或轻度患者【分别为(49.1±6.2)ng/mL和(32.2±3.3)ng/mL,P<0.05】,而血清RBP4水平为(30.3±3.0)mg/L,显著高于中度患者【(26.5±2.8)mg/L,P<0.05】或轻度患者【(23.9±3.1)mg/L,P<0.05】;联合血清网膜素、RBP4和PINP诊断T2DM合并重度NAFLD的曲线下面积(AUC)为0.856,其灵敏度、特异度和准确度分别为86.2%、79.5%和81.4%,显著高于三项指标单独评估(其AUC分别为0.744、0.752和0.704,P<0.05)。结论T2DM合并NAFLD患者血清网膜素和PINP水平显著降低,而RBP4水平显著升高,利用这些指标的变化规律可能能帮助临床判断合并脂肪肝的程度,值得进一步研究。

Ⅰ型原胶原氨基端前肽在2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝病中的作用

目的研究在2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝病(NAFLD)患者体内血清Ⅰ型原胶原氨基端前肽(PINP)及25-羟维生素D〔25(OH)D〕的变化及其作用。方法选取T2DM患者84例,分为(T2DM)组42例、T2DM合并NAFLD组42例及健康对照组(NC组)45例,单纯NAFLD组40例。检测各组空腹血糖(FPG)、肝功能、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FIns)、D〔25-(OH)D〕及血清PINP水平;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果各组性别、年龄无显著差异(P>0.05);25-(OH)D水平在T2DM组及T2DM合并NAFLD组显著降低(P<0.05)。T2DM+NAFLD组PINP显著降低(P<0.05)。PINP与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、25-(OH)D呈显著正相关(r=0.247、0.253,P均<0.05),与体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、HbA1c、FPG、FIns、HOMA-IR、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)呈显著负相关(r=-0.164、-0.296、-0.421、-0.394、-0.162、-0.413、-0.334、-0.231,P均<0.05)。多元线性逐步回归分析:FPG、HbA1c、TG、TC是PINP水平的独立影响因素。二分类Logistic回归分析显示:PINP、25-(OH)D是T2DM合并NAFLD的保护因素。结论血清PINP与T2DM合并NAFLD糖脂代谢密切相关,对其发生发展起保护作用。

测定酞酰化明胶取代度所需原胶的研究

测定酞酰化明胶的取代度通常多采用甲醛滴定法。此方法的优点是简便、快速。其原理是:在pH中性和常温条件下,明胶分子侧链上的氨基酸能很快地与甲醛发生缩合反应,在固定甲醛量不变的情况下,滴定时所消耗的碱量直接当作该明胶改性前原有的和改性后尚存留的氨基数的一个量度。其反应式为: 具体方法是,准确称取1克明胶,置于250ml锥形瓶中,加入100ml蒸馏水。

多发性骨髓瘤患者的血清PINP、DKK1和SFRP3水平及其临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者的血清I型原胶原氨基端前肽(PINP)、dickkopf Wnt信号通路抑制因子1(DKK1)和分泌型卷曲相关蛋白3(SFRP3)水平及其临床意义。方法纳入150例MM患者(MM组)及150健康体检者(对照组)。比较两组研究对象之间、不同临床分期MM患者之间、不同临床疗效MM患者之间的血清DKK1、PINP、SFRP3水平。采用Logistic回归模型分析治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平与MM患者临床疗效的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平对MM患者临床疗效的预测效能。结果MM组患者治疗前血清DKK1、PINP和SFRP3水平高于对照组(P<0.05);Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期MM患者治疗前血清DKK1、PINP、SFRP3水平依次升高(P<0.05);有效组患者治疗前血清DKK1、PINP、SFRP3水平低于无效组(P<0.05)。治疗前血清DKK1、SFRP3、PINP水平升高是影响MM患者临床疗效的独立危险因素(P<0.05)。治疗前血清DKK1和SFRP3水平对MM患者临床疗效无预测价值(曲线下面积<0.5,P>0.05),而治疗前血清PINP水平对MM患者的临床疗效有一定的预测价值(曲线下面积=0.663,P<0.05)。结论MM患者治疗前的血清DKK1、PINP和SFRP3水平高于健康人群,且与疾病严重程度有关,是MM患者临床疗效的影响因素。治疗前血清PINP水平对预测MM患者的临床疗效有一定的价值。

bFGF对人α1(I)原胶原基因启动子活性的调控

目的 观察bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及调控α1(I)原胶原基因序列的作用。 方法 用组织块法培养人皮肤成纤维细胞并传代，采用BrdU掺入的ELISA法，测定不同浓度的bFGF对成纤维细胞增殖的影响。构建三种人α1(I)原胶原基因5' 侧翼序列与报告基因氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的重组质粒，用FuGENE转染试剂转染成纤维细胞，同时用p-sv-b-GAL表达质粒转染细胞作为阳性对照组，ELISA法测定经bFGF处理后成纤维细胞CAT的表达量。 结果 在体积分数2%或10%小牛血清培养条件下，bFGF加入浓度从0.25 ng/ml增至64.00 ng/ml，作用24 h后，各组细胞增殖数值之间差异有显著性意义（P<0.05）。用三种重组质粒分别转染细胞，bFGF处理24 h后，CAT相对表达量测定结果提示， bFGF组与对照组相比差异有显著性意义（P<0.05）。 结论 bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖有抑制作用,对胶原基因启动序列具有负性调控作用，且存在剂量依赖关系。

整合素表达对硬皮病成纤维细胞合成原胶原的影响

目的 研究硬皮病成纤维细胞整合素表达对成纤维细胞合成原胶原的影响。方法 运用硫代修饰的整合素反义寡核苷酸阻断硬皮病成纤维细胞表面相应整合素亚基的表达 ,RT PCR检测整合素表达抑制后硬皮病成纤维细胞原胶原mRNA量的变化。结果 反义寡核苷酸能特异抑制硬皮病成纤维细胞相应整合素亚基的表达 ;整合素α5或 β1 亚基表达减少的成纤维细胞 ,原胶原proα1(Ⅰ )、proα1(Ⅲ )mRNA均显著降低。结论 降低硬皮病成纤维细胞整合素的表达 。