核桃花中绿原酸、新绿原酸和隐绿原酸的提取工艺优化及其抗氧化活性研究

目的探讨干燥核桃花中绿原酸、隐绿原酸和新绿原酸的最佳提取工艺及其抗氧化活性。方法采用超声波辅助乙醇法提取核桃花中的绿原酸、新绿原酸和隐绿原酸,以提取温度、乙醇体积分数、提取时间和料液比为自变量,以得率的总评归一值(overall desirability,OD)为因变量,应用响应面对提取工艺进行优化,并通过体外实验评价了其抗氧化活性。结果最佳提取工艺为:温度77℃、乙醇体积分数67%、提取时间28 min,料液比1:23(g/mL)。此时,绿原酸、新绿原酸和隐绿原酸的总提取率最佳,OD值可达0.91,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基和羟自由基的半数抑制浓度(half-maximal Inhibitory concentrations,IC50)值分别为41.63、41.68和34.43μg/mL。结论优选出的工艺稳定可行,且提取液具有较好的体外抗氧化活性,为核桃花中绿原酸类成分的进一步开发利用提供了理论基础。

绿原酸及其同分异构体对人血浆阿司匹林酯酶活性的影响

目的探究绿原酸及其同分异构体对人血浆阿司匹林酯酶活性的影响。方法以高效液相色谱法测定阿司匹林酯酶体外培养体系中水杨酸(SA)和阿司匹林(ASA)的浓度,以CSA/(CASA+CSA)反映阿司匹林酯酶的活性。通过空白对照组和添加单体成分的实验组间阿司匹林酯酶活性的变化来分析各成分对阿司匹林酯酶活性的影响。结果实验组与空白对照组之间差异没有显著性。结论在本实验浓度下,绿原酸及其同分异构体对酯酶影响不明显,为临床同时使用阿司匹林与含有该类化合物的中药或中药制剂提供理论依据。

高效液相色谱法测定青梅花、枝、叶中绿原酸类化合物

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定青梅非果部位(花、枝、叶)中新绿原酸(NCA)、绿原酸(CA)及隐绿原酸(CCA)3种绿原酸异构体的含量。方法:采用高效液相色谱法梯度洗脱,使用LunaC18色谱柱,以体积分数2%乙酸溶液和乙腈为流动相,二极管阵列检测器在波长328nm处进行检测。结果:该方法线性范围宽,3种绿原酸异构体的线性范围均为5～200μg/mL,NCA、CA、CCA的检出限分别为0.21、0.16、0.29μg/mL,定量限分别为0.76、0.50、0.98μg/mL,测得青梅花、枝、叶的30%乙醇提取物中3种绿原酸异构体的总含量分别为(48.26±0.11)、(10.82±0.04)、(21.33±0.08)μg/g。结论:该方法简便、快速、准确,青梅花、枝、叶是优良的绿原酸类化合物天然资源。

HPLC测定金银花中绿原酸、新绿原酸和异绿原酸的含量

目的:建立同时测定金银花中绿原酸、新绿原酸和异绿原酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Luna C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),检测波长240 nm,柱温25℃。结果:绿原酸、新绿原酸和异绿原酸在0.013~0.526 mg/mL内呈良好线性关系(r为0.9993);平均加样回收率分别为99.53%、99.73%、100.23%,RSD分别为4.27%、2.49%、1.58%(n=6)。结论:该方法可靠、稳定、重现性好,可作为金银花中绿原酸、新绿原酸和异绿原酸的含量测定方法。

苗药了哥王中瑞香烷二萜原酸酯类成分及其抗肿瘤活性研究

目的:研究苗药了哥王Wikstroemia indica(L.) C.A.Mey.中瑞香烷二萜原酸酯类成分及其抗肿瘤活性。方法:采用硅胶柱色谱、RP-C_(18)反相柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱和半制备液相色谱等分离纯化技术获得了哥王中的瑞香烷二萜原酸酯类成分,再根据其理化性质和波谱数据鉴定各化合物的结构,并采用MTT法对化合物1、3、5进行抗肝癌HepG_(2)细胞株的活性评价。结果:从苗药了哥王中分离得到5个瑞香烷二萜原酸酯类化合物,分别鉴定为:6α,7α-dihydyoxyhuratoxin(1)、simplexin(2)、12β-acetoxyhuratoxin(3)、excoecafolin D(4)、pimelea factor P_(2)(5)。此类化合物对肝癌HepG_(2)细胞的增殖均有明显的抑制作用。结论:其中,化合物1为新化合物,化合物2~5为首次从该植物中分离得到,化合物3对肝癌HepG_2细胞增殖的抑制作用最佳,IC_(50)值为(5.75±0.15)μg/mL。

基于新绿原酸的紫外吸收和电化学双信号响应的Al^(3+)分析新方法研究

目的 利用新绿原酸(NCGA)与Al^(3+)的相互作用,建立一种基于NCGA的紫外吸收和电化学双信号响应的Al^(3+)分析新方法。方法 基于NCGA与单壁碳纳米管(CNTs)之间的π-π堆积作用,构建了NCGA/CNTs/GC电极。利用差分脉冲(DPV)技术和修饰电极在+0.23 V的氧化电流的下降对Al^(3+)进行定量分析。基于NCGA对Al^(3+)在325 nm处的吸收降低同时伴随365 nm新峰生成的紫外光谱响应,并且在277和340 nm处出现等吸收点,利用365 nm和325nm处的吸光度值之比(A_(365)/A_(325))对Al^(3+)进行定量分析。结果 基于NCGA的分析方法对Al^(3+)的紫外吸收在0.1~100μmol·L^(-1)呈现出良好的线性关系,检测限为0.034μmol·L^(-1);基于NCGA的修饰电极对Al^(3+)的电流响应在0.01~0.1,0.1~10和10~100μmol·L^(-1)呈现良好的线性关系,检测限为0.45 nmol·L^(-1)。生理浓度的其他金属离子和生理活性物质对两种信号测定方法均无明显干扰。在NCGA的紫外分析方法和电化学分析方法下,大鼠血清的加标回收率分别为97.4%~101%(n=3)和98.5%~99.4%(n=3)。结论 本方法具有良好的线性、选择性和准确度,并被成功用于大鼠中Al^(3+)的准确定量。该方法有望应用于Al^(3+)相关的生理和病理事件研究。

一测多评法同时测定枇杷叶标准汤剂中3种绿原酸

目的建立一测多评法同时测定枇杷叶标准汤剂(枇杷叶)中3种绿原酸的含量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Agilent 5 HC C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相乙腈-0.4%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长327 nm。以绿原酸为内标,建立新绿原酸、隐绿原酸的相对校正因子,测定其含量。结果绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸在各自范围内线性关系良好(r>0.999 6),平均加样回收率97.22%~97.66%,RSD 1.16%~1.85%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法简便可靠,耐用性好,可用于枇杷叶标准汤剂的质量控制。

近红外光谱法快速测定烟草中的绿原酸、新绿原酸和芸香苷

为了加快烟草中绿原酸、新绿原酸、芸香苷含量的分析速度,采用183个烟草(烤烟)样品绿原酸、新绿原酸、芸香苷含量的高效液相色谱法测定值及其近红外(NIR)光谱,通过多元散射、一阶导数+附加散射校正光谱预处理和偏最小二乘法建立了NIR预测模型,并进行了内部交叉验证和30个烟叶样品的外部预测验证。结果表明:模型的预测值与化学测定值的平均相对偏差分别为0.545%、0.709%、1.954%,RSD各为0.83%、3.18%、1.426%。该方法可用于批量烟草中绿原酸、新绿原酸、芸香苷的快速测定。

氯原酸与异氯原酸薄层扫描的定量研究

本文采用薄层扫描外标两点法,测定了银翘解毒片中单味药金银花的抗菌有效成分氯原酸与异氯原酸的含量和回收率分别是:0.22%、0.56%,99.5%、99.7%。

Box-Behnken Design-响应面法优化绿原酸转化为新绿原酸的工艺研究

利用Box-Behnken-响应面法优化绿原酸转化为新绿原酸的工艺条件。在单因素实验基础上,采用Box-Behnken Design实验设计,考察反应温度、反应时间及p H值对新绿原酸产率的影响,优化绿原酸转化为新绿原酸的工艺参数,得到模型预测公式。优化条件为:反应温度107℃,反应时间60 min,p H值为4.72时新绿原酸产率为64.20%,与模型预测值接近,方程拟合良好。采用优选工艺制备新绿原酸并精制纯化,分别运用HPLC、1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等方法对其进行含量测定和结构表征,结果表明纯化后纯度达98.78%,收率为87.37%。

HPLC法同时测定野马追药材中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定野马追药材中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸的含量。方法 Phenomenex C18(250×4.6mm,5μm);流动相:乙腈:0.2%醋酸水溶液(11:89);流速为1.0m L/min,检测波长:327nm,柱温:30℃。结果绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸的回收率分别为100.03%、100.09%、99.97%;线性范围分别为0.34~6.8μg、0.41~8.2μg、0.29~5.8μg。三种成分的线性关系良好,精密度、稳定性、重复性的RSD均低于3%。结论该方法简便,准确,灵敏,为野马追的质量控制提供了参考。

UPLC法测定不同产地白术中新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸的含量

目的建立同时测定不同产地白术中新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸的UPLC质量分数的方法。方法采用UPLC-DAD法,色谱柱为Waters BEH C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相为乙腈-0.1%(质量分数)H3PO4,梯度洗脱;流速为0.25 mL/min;检测波长为325 nm;柱温为25℃。结果新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸的平均加样回收率分别为90%(RSD=2.0%)、93%(RSD=1.2%)、89%(RSD=1.5%),n=6。结论本方法简便、准确,适用于白术中新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸的质量分数测定。

野地瓜茎中3种绿原酸提取工艺的优化及抗氧化活性研究

以野地瓜茎中新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸得率的总评归一值为评价指标,采用响应面设计对野地瓜茎回流提取工艺进行优化。利用DPPH自由基和ABTS^(+)自由基清除率评价不同提取工艺下野地瓜茎提取物的抗氧化活性。结果表明,野地瓜茎提取物中3种绿原酸得率最佳的提取工艺为乙醇浓度63%、提取温度72℃、料液比1∶26(g/mL),经验证试验总评归一值为0.9201±0.0230。与预测值(0.9280)的偏差为0.85%,二项式拟合效果好;最佳工艺下野地瓜茎提取物对DPPH自由基、ABTS^(+)自由基清除活性的半数抑制浓度(IC_(50))分别为(24.32±0.52)、(67.52±0.89)μg/mL;相关性分析显示3种绿原酸对DPPH自由基和ABTS^(+)自由基清除能力贡献显著。

糖基原酸酯的电子轰击质谱研究

本文报道了糖基原酸酯在电子轰击质谱中可能的裂解途径，并经同位素标记和亚稳离子扫描证实了所提出的裂解过程。

超高效液相色谱法测定清咽糖中6种绿原酸类化合物的含量

目的建立超高效液相色谱法同时测定清咽糖中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸6种绿原酸类化合物的含量。方法采用Agilent Eclipse Plus C18 RRHD色谱柱(2.1 mm×150 mm, 1.8μm),以乙腈、0.4%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长327 nm,柱温35℃。结果 6种成分在相应的线性范围内呈良好的线性关系。精密度、重复性、稳定性实验中6种成分峰面积的相对标准偏差均小于3.0%,平均加样回收率为93.77%~104.37%,相对标准偏差为0.28%~1.86%。结论该方法具有良好的专属性和重现性,加样回收率实验符合要求,结果准确、稳定,适用于同时测定清咽糖中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量。

HPLC法同时测定青钱柳叶中绿原酸等4种多酚酸的含量

目的:建立青钱柳叶代用茶中绿原酸等4种多酚酸含量HPLC分析方法。方法:样品经过70%甲醇水溶液80℃水浴提取2小时,采用反相高效液相色谱外标法,色谱柱C18(250×4.6mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速1.0ml/min,柱温30℃,进样量20ul,4种多酚酸检测波长326 nm。结果:新绿原酸(0～84ug/ml范围呈良好的线性关系,相关系数1,加标回收率98.86%,精密度RSD为0.79%);绿原酸(0～102ug/ml范围呈良好的线性关系,相关系数1,加标回收率104.5%,精密度RSD为0.76%);隐绿原酸(0～110ug/ml范围呈良好的线性关系,相关系数0.999,加标回收率98.73%,精密度RSD为0.72%);咖啡酸(0～64ug/ml范围呈良好的线性关系,相关系数1,加标回收率99.97%,精密度RSD为0.73%)。用此法检测青钱柳叶代用茶,其中绿原酸含量较高约2.0～19mg/kg;隐绿原酸和新绿原酸含量较低约0.2～1.5mg/kg;不含咖啡酸。结论:该方法可以同时完成4种多酚酸的有效分离、定性和定量,标准曲线线性关系良好、检测结果可靠、样品前处理简单、检测操作过程便捷,可以作为青钱柳叶代用茶质量控制的检测方法。

桑椹中新绿原酸、绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含量测定

目的：建立同时测定桑椹中新绿原酸、绿原酸、芦丁和异槲皮苷4种有效成分含量的准确、精密的高效液相色谱方法。方法：实验中采用Syncronis a Q-C18（Thermo scientific;4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水作流动相,梯度洗脱,流速1 m L·min-1,检测波长350 nm。结果：新绿原酸、绿原酸、芦丁和异槲皮苷在质量浓度分别为0.00106~0.0424 mg/m L,0.00794~0.318 mg/m L,0.00214~0.0856 mg/m L,0.00136~0.0544 mg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系（r〉0.9996）;4种有效成分的平均回收率分别为97.7%,99.4%,97.4%,100.4%,RSD分别为1.39%,2.09%,0.62%,1.62%。结论：该方法简便、准确,分离效果好,可用于桑椹的质量评价。