高效液相色谱法测定脊柱结核化疗后组织内利福平和去乙酰利福平的浓度

目的研究正规化疗后脊柱结核病椎抗结核药物的分布特点,为脊柱结核化疗与手术方案的改进提供理论依据。方法将36例应用2SHRZ/6HRZ化疗方案结合手术治疗的脊柱结核患者按病灶有无硬化壁分为硬化骨组和非硬化骨组。化疗第4周手术,术晨服药后2h内取患者病椎组织、病椎组织外"亚健康骨"(距病灶边缘4mm范围内、外"亚健康骨"分为A、B2段)、血浆及髂骨,采用高效液相色谱法测定上述样本的药物浓度。结果利福平(RFP)和去乙酰利福平(De-RFP)血药浓度高于髂骨"、亚健康骨"及病椎组织中的药物浓度;B段"亚健康骨"与髂骨内的RFP均达到了各自的杀菌浓度水平;A段"亚健康骨"在非硬化骨病例中的RFP均达到了各自的杀菌浓度,而在硬化骨病例中RFP却在最低抑菌浓度(MIC)10倍以下;硬化骨病灶中的RFP浓度低于各药的最低抑菌浓度,药物浓度与A段"亚健康骨"相似,低于壁外围B段"亚健康骨";而非硬化骨病灶中的RFP浓度仅为各药的最低抑菌浓度,低于外周A、B2段"亚健康骨"。结论 RFP和De-RFP在脊柱结核患者正常骨与距病灶较远的"亚健康骨"中可达到有效治疗浓度,而在有硬化骨的病灶及邻近的"亚健康骨"中难以达到有效的药物浓度。在手术治疗脊柱结核彻底清除病灶的同时,应切除周围邻近的部分"亚健康骨"。

检测人血浆中利福平及其主要代谢物25-去乙酰利福平浓度的高效液相色谱法

目的：建立检测人血浆中利福平及其主要代谢物２５－去乙酰利福平浓度的高效液相色谱法，并用于药代动力学研究。方法：所用色谱柱是ＺｏｒｂａｘＯＤＳ（５μｍ，４．６ｍｍ×２５０ｍｍ），采用梯度洗脱，流动相Ａ和Ｂ由甲醇、乙腈和０．１ｍｏｌ·Ｌ－１ＮａＨ２ＰＯ４组成（流动相Ａ三者的体积比为３５∶２５∶４０，Ｂ为５０∶２５∶２５），以利福贲丁作为内标物，检测波长为３３６ｎｍ。结果：血浆标准曲线为：利福平，ＣＲＭＰ＝６．９１８Ａｐ／Ａｉｎ－０．０６４，ｒ＝０．９９９９；２５－去乙酰利福平，ＣＤＥＳ＝１０．９１Ａｄ／Ａｉｎ－０．０２９，ｒ＝０．９９９７。两者从血浆提取的平均回收率分别为９１．８％和８４．７％。批内和批间ＲＳＤ均＜８．６％。结论：本法可用于药代动力学和临床研究。

利福平人体内主要代谢物的分离与鉴定

体外碱水解到福平制备21—去乙酰利福平；薄层层析法分离，高效液相色谱—紫外检测器及光电二极管阵列检测器定性利福平体内代谢物为21—脱乙酰利福平。

合理应用利福平

利福平，又名甲哌利福霉素，简称RFP，是半合成的利福霉素类衍生物，砖红色结晶，难溶于水，对热稳定。具有高效低毒、口服方便等优点。口服吸收良好，1～2小时血药浓度达峰值，但个体差异很大。食物可减少吸收，应空腹服用：对氨基水杨酸（PAS）和巴比妥类药能延缓或减少其吸收，不宜同服。血浆蛋白结合率较高。T为1／2～4小时，有效血药浓度可维持6～12小时。吸收后分布于全身组织。穿透力强，能进入细胞、纤维空洞、痰液及胎儿体内。当脑膜炎症时，也可渗入脑脊液中，药物浓度可达血药浓度的20％。在肝内代谢，主要代谢产物去乙酰利福平，仍有抗菌活性，为利福平的1／8～1／10。长期口服利福平可诱导肝药酶，加快自身及其他药物的代谢。主要经胆汁排泄，形成肝肠循环。经粪与尿排泄，患者的尿、粪、痰均可染成橘红色。