急性肾缺血再灌注损伤模型小鼠线粒体去乙酰化酶3的表达

背景:对比剂肾病已经成为医院获得性急性肾损伤的主要原因之一,其本质是肾脏的急性缺血再灌注损伤,其中去乙酰化酶3在其中发挥的作用还不清楚。目的:探索不同肾脏缺血时间对去乙酰化酶3表达的影响及其与线粒体损伤相关指标的关系。方法:构建C57BL/6J小鼠急性肾脏缺血模型,给予不同的缺血时间(15,20,25,30 min),再灌注48 h。根据缺血时间,分为对照组、假手术组、缺血15,20,25,30 min再灌注组,每组8只。术后48 h,检测血清肌酐、尿素氮水平,TUNEL试剂盒检测肾组织细胞凋亡情况,荧光素酶发光法检测肾组织ATP水平,苏木精-伊红染色观察肾组织病理变化,透射电镜下观察线粒体变化,Western blot检测去乙酰化酶3和线粒体动力相关蛋白1、线粒体融合蛋白1的表达。结果与结论:①血清肌酐、尿素氮、组织病理评分及凋亡指数在各缺血组中逐渐升高;②肾组织线粒体结构损伤在各缺血组中逐渐加重,ATP含量总体下降;③正常对照组与假手术组及缺血15min再灌注组的去乙酰化酶3蛋白水平无差异;与缺血15min再灌注组比较,缺血20 min再灌注组的去乙酰化酶3蛋白水平升高(P<0.05),缺血25 min继续升高(P<0.05),缺血30 min表达最高(P<0.05);④与假手术组比较,线粒体融合蛋白1在缺血15-20 min升高(P<0.05);与缺血15 min再灌注组比较,线粒体融合蛋白1在缺血25 min和30 min进一步升高(P<0.05);⑤缺血15 min再灌注组的线粒体动力相关蛋白1水平达高峰,与缺血15 min再灌注组比较,缺血20 min再灌注组的线粒体动力相关蛋白1水平有所下降(P<0.05),缺血25 min再灌注组进一步下降(P<0.05);⑥相关性研究发现,ATP与去乙酰化酶3存在显著负相关(r=-0.77,P<0.05),去乙酰化酶3与线粒体动力相关蛋白1存在负向相关性(r=-0.52,P<0.05),去乙酰化酶3与线粒体融合蛋白1存在正向相关性(r=0.72,P<0.05);⑦结果表明,肾脏缺血再灌注损伤时,ATP水平下降会刺激肾组织线粒体去乙酰化酶3表达呈现时间依赖性增高,进而促进线粒体融合,抑制线粒体裂解,起到保护线粒体、维持能量代谢的作用,提示去乙酰化酶3可能是减轻肾脏缺血再灌注损伤的干预靶点。

血清组蛋白去乙酰化酶3和热休克蛋白90水平与急性心肌梗死患者心室重构的相关性及预后评估价值

目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)、热休克蛋白90(HSP90)对急性心肌梗死(AMI)患者心室重构及预后的评估价值。方法选取2021年1月至2022年6月北京市昌平区中西医结合医院收治的128例AMI患者为研究组,记录患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后6个月内发生的不良心血管事件,根据结果将患者分为预后不良组(n=33),预后良好组(n=95)。同期选择年龄、性别相仿的110例健康体检志愿者为对照组。采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中HDAC3、HSP90的表达水平,超声心动图检测心室重构参数。Pearson法分析AMI患者血清中HDAC3、HSP90与心室重构指标的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析HDAC3、HSP90水平对AMI患者预后不良的评估价值。结果与对照组相比,研究组患者血清中HDAC3、HSP90水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心房内径(LAD)、左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室后壁舒张末期厚度(PWD)、左心室后壁收缩末期厚度(PWS)、左心室心肌质量指数(LVMI)均大于对照组(P均<0.05),左心室射血分数(LVEF)低于对照组(P<0.05);血清HDAC3、HSP90水平与LVEDD、LAD、LVPWT、PWD、PWS、LVMI呈正相关(P均<0.05),与LVEF呈负相关(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清HDAC3、HSP90水平预测AMI患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.858、0.864,二者联合预测的AUC为0.947,高于单一指标检测。结论HDAC3、HSP90在AMI患者血清中均呈高水平,早期检测二者可作为评估AMI患者心室重构及预后不良的血清标志物。

运动对骨骼肌线粒体去乙酰化酶3(SIRT3)的影响

Sirtuins(SIRT)是NAD依赖的组蛋白去乙酰化酶,属于沉默信息调节因子家族,参与物质代谢及应激反应,与细胞寿命密切相关。Sirtuin 3(SIRT3)是哺乳动物线粒体中重要的去乙酰化酶,在骨骼肌中高表达,参与能量代谢并影响机体的衰老、细胞死亡和肿瘤发生。研究表明,适度运动会增加骨骼肌中的SIRT3含量并进一步影响脂肪代谢。目前,骨骼肌线粒体中SIRT3在运动中的变化引起学者的普遍关注。主要介绍了SIRT3的生理功能及运动对骨骼肌SIRT3的影响,深入研究运动中骨骼肌SIRT3的变化机制对运动抗衰老及运动防肥减肥具有重要的意义。

急性冠脉综合征患者血清组蛋白去乙酰化酶3水平的临床观察

目的探讨急性冠脉综合征患者血清组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)水平的变化及其临床意义。方法按照冠脉造影结果及临床表现将104例患者分为冠脉造影正常组25例,稳定型心绞痛组28例,急性冠脉综合征组51例。急性冠脉综合征组再分为不稳定型心绞痛和急性心肌梗死两个亚组,其中不稳定型心绞痛组32例,急性心肌梗死组19例。所有病例检测入院第2天清晨空腹的血清HDAC3水平。结果急性冠脉综合征组血清HDAC3水平较冠脉造影正常组和稳定型心绞痛组显著升高(P<0.01);且急性心肌梗死组血清HDAC3水平较不稳定型心绞痛组显著升高(P<0.01)。结论 HDAC3有望成为急性冠脉综合征的炎性标记物。

组蛋白去乙酰化酶3在星形细胞瘤中的表达及其临床意义

目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在星形细胞瘤中的表达及其临床意义。方法选择华中科技大学同济医学院附属同济医院1996年1月—2008年1月收治的283例原发性星形细胞瘤患者和52例复发患者,其中WHO分级Ⅱ级59例,Ⅲ级26例,Ⅳ级250例;收集其手术切除标本,提取典型病变区域制作成组织芯片(TMA)。采用荧光定量PCR检测HDAC3在肿瘤干细胞、胶质瘤贴壁细胞和星形细胞瘤组织中的表达,对TMA进行免疫组化染色。结果 HDAC3在肿瘤干细胞NCH421k和NCH441中的平均相对表达量为1.14和0.95,在胶质瘤贴壁细胞中为2.04,在星形细胞瘤中为1.06。HDAC3在瘤细胞胞核和胞质中呈阳性表达。HDAC3胞核总阳性表达率为16.7%(56/335),其中WHO分级Ⅳ级者为13.6%(34/250),WHO分级Ⅲ级者为0,WHO分级Ⅱ级者为37.3%(22/59);HDAC3胞质总阳性表达率为49.3%(165/335),其中WHO分级Ⅳ级者为42.0%(105/250),WHO分级Ⅲ级者为65.4%(17/26),WHO分级Ⅱ级者为72.9%(43/59)。23例复发患者两次TMA保存完整,其中5例WHO分级恶化,18例WHO分级无恶化。5例WHO分级恶化患者中,HDAC3胞核染色强度减弱2例,稳定2例,增强1例;胞质染色强度稳定4例,增强1例。18例WHO分级无恶化患者中,HDAC3胞核染色强度减弱2例,稳定13例,增强3例;胞质染色强度减弱4例,稳定9例,增强5例。HDAC3胞核阳性表达率与患者整体生存率呈正相关(r=0.148,P=0.007),阳性表达强度与WHO分级Ⅳ级患者生存率呈负相关(r=-0.503,P=0.037);HDAC3胞质阳性表达强度与患者整体生存率呈负相关(r=-0.140,P=0.014),阳性表达率与WHO分级Ⅳ级患者生存率呈负相关(r=-0.544,P=0.013)。结论胞核HDAC3的高表达预示较好的预后。HDAC3在胞核及胞质内的表达移位对胶质瘤的生物学特性起着重要调控作用。

去乙酰化酶3在人颈动脉粥样硬化斑块中的表达及其临床意义

目的检测人颈动脉粥样硬化斑块组织及正常颈动脉组织中去乙酰化酶3(SIRT3)的表达水平,分析其与颈动脉粥样硬化斑块形成的关系及临床意义。方法利用H&E染色、Masson’s trichrome染色及油红O染色对6例颈动脉组织进行粥样硬化斑块分期,利用免疫组化法和Western blot检测不同分期的斑块组织及正常颈动脉组织中SIRT3的蛋白表达差异,利用免疫荧光共定位法观察SIRT3的细胞定位。结果 6例组织分别为2例正常血管组织,2例Ⅰ期动脉粥样硬化组织,2例Ⅳ期动脉粥样硬化斑块组织,Western blot及免疫组化染色显示SIRT3在Ⅳ期颈动脉粥样硬化斑块组织中显著表达,正常血管组织及Ⅰ期粥样硬化血管组织中未见SIRT3表达;免疫荧光共定位染色结果显示,SIRT3在Ⅳ期斑块内的内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞内均有显著表达。结论SIRT3在颈动脉粥样硬化Ⅳ期斑块中表达显著增高,可能作为评估粥样硬化稳定性的一个重要指标。

去乙酰化酶3对线粒体功能和猪生长发育影响的研究进展

去乙酰化酶3(Sirt3)是去乙酰化酶家族的一员,具有高度的去乙酰基酶活性,对动物体的生长发育、衰老、代谢等生理过程具有调控作用。目前的研究表明,Sirt3可以激活超氧化物歧化酶、调控三羧酸循环和促进电子传递链3个途径,消除细胞内的活性氧(ROS),避免细胞的氧化损伤和线粒体膜电位的损伤,进而影响细胞凋亡与自噬;并可通过调控ROS、降低各种退行性疾病的发病率等途径减缓衰老。同时,Sirt3通过激活AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)等途径影响肌肉的发育。对猪的研究表明,不同Sirt3突变型猪的肌肉色值和失水率等肉质指标存在差异,且Sirt3对脂肪酸氧化和酮体生成有一定的影响。在对与猪Sirt3蛋白有较高同源性的牛进行的研究中发现,不同Sirt3突变型的牛体长、体高、肌肉脂肪含量等指标存在显著差异。作者总结了Sirt3对线粒体的能量代谢和细胞氧化损伤的调控机制及其对细胞凋亡、细胞自噬和机体衰老的影响,阐述了猪Sirt3蛋白的部分理化性质及其对猪生长发育的作用机制,以期为了解和挖掘该基因在猪肌肉和脂肪发育中的生物学作用,以及家畜生产性状改良提供理论依据。

红霉素对香烟烟雾刺激的人巨噬细胞组蛋白去乙酰化酶3表达影响的实验研究

目的:探讨红霉素对香烟烟雾刺激的人巨噬细胞组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)表达的影响。方法:体外培养人类单核细胞系U937细胞,用佛波脂(PMA)将其诱导分化为人巨噬细胞。按传统方法制备好香烟烟雾提取物(CSE)用于实验。将传代后的细胞分组:对照组、CSE组、红霉素+CSE组、HDAC特异性抑制剂曲古霉素(TSA)组。采用比色法检测细胞HDAC总活性;Western blot检测HDAC3和NF-κB蛋白表达;通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中TNF-α的浓度。结果:1%CSE刺激人巨噬细胞引起细胞HDAC总活性减弱和HDAC3蛋白表达下降,诱导转录因子NF-κB活性增高,释放TNF-α;红霉素(1μg/ml)预孵育24 h可以增强CSE抑制的巨噬细胞HDAC3蛋白表达,下调NF-κB蛋白表达,抑制TNF-α的合成和释放。结论:红霉素通过上调HDAC3蛋白表达水平而抑制香烟烟雾诱导增强的转录因子NF-кB活性,进而影响炎症介质TNF-α的合成调控。

组蛋白去乙酰化酶3与动脉粥样硬化斑块稳定性的研究进展

动脉粥样硬化斑块破裂及血栓形成是急性冠脉综合征及冠心病猝死的主原因。因此，斑块的稳定性在一定程度上决定了冠状动脉硬化性疾病的预后。

小胶质细胞组蛋白去乙酰化酶3在低压低氧诱导的氧化应激中的作用

目的探究低压低氧对脑内氧化应激的影响及小胶质细胞HDAC3在其中的作用。方法将野生型小鼠置于模拟海拔高度6000米的低压舱中连续饲养7 d,随后取小鼠海马组织并提取RNA,实时定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测氧化应激标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)的mRNA,以及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factors-1α,HIF-1α)和组蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylases 3,HDAC3)的mRNA。利用低氧培养箱[0.1%(体积分数)O2]对小胶质细胞系BV2细胞进行低氧处理,蛋白质免疫印迹和real-time PCR法检测iNOS、SOD、HDAC3和HIF-1α的蛋白及mRNA水平,以及利用活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒和流式细胞术检测氧化应激水平。然后敲低或抑制小胶质细胞系HDAC3表达或活性,并进行低氧处理,检测上述相关因子及ROS的变化。最后,利用小胶质细胞特异性敲除HDAC3的小鼠进行低压低氧[0.1%(体积分数)O2]处理,检测干预小胶质细胞HDAC3表达之后iNOS的表达水平。结果体内实验结果显示低压低氧处理显著增加小鼠脑内iNOS和SOD的mRNA;体外实验结果显示低氧处理导致BV2细胞iNOS、HDAC3和HIF-1α的蛋白水平升高,且iNOS和SOD的mRNA也增加。流式分析结果显示低氧处理导致BV2细胞ROS水平上升。敲低或抑制HDAC3则可以显著抑制低氧诱导的ROS产生和iNOS上调。特异性敲除小胶质细胞HDAC3可以显著抑制低压低氧处理导致的小鼠脑组织中iNOS上调。结论低压低氧可引起脑组织及小胶质细胞氧化应激水平升高,抑制小胶质细胞HDAC3可减轻低压低氧诱导的氧化应激。

组蛋白去乙酰化酶3、TGF⁃β1在狼疮肾炎组织病理中的表达及其临床意义

目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)、转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)在系统性红斑狼疮患者肾脏病理中的表达及其临床意义。方法选取2017年6月至2020年9月海口市人民医院诊治的53例系统性红斑狼疮患者为SLE组;及10例原发性肾病综合征(NS)为对照组。比较两组患者肾脏病理组织中的表达情况,分析其表达水平与狼疮肾炎(LN)患者的各种临床表现、实验室特征以及肾脏病理类型的关系。应用t检验及单因素方差分析进行组间比较,Pearson或Spearman检验进行相关分析。结果HDAC3主要表达于肾脏肾小管上皮细胞中。SLE组患者肾组织中HDAC3的表达水平高于对照组[(6.32±2.31)vs(3.12±1.81)],差异有统计学意义(P<0.05)。伴有肾间质纤维化的LN患者HDAC3表达高于无纤维化患者[(6.78±2.19)vs(2.43±2.01)],差异有统计学意义(P<0.05)。肾脏组织HDAC3、TGF⁃β1表达均与血肌酐、浆膜炎、口腔溃疡、关节炎、间质性肺炎、神经系统损害、24小时尿蛋白及血液系统损害有关(P<0.05),肾小球组蛋白乙酰化酶3表达的水平与TGF⁃β1主要表达水平呈正相关(r=0.745,P<0.05)。结论LN患者的肾小球HDAC3,TGF⁃β1的表达水平较对照组增高,伴有肾间质纤维化的LN患者HDAC3表达高于无纤维化患者,考虑HDAC3可能参与LN患者纤维化的发病。

血清组蛋白去乙酰化酶3、胱抑素C和清蛋白对大面积心肌梗死的预测价值

目的探讨血清组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)、胱抑素C(CysC)和清蛋白水平对大面积心肌梗死的预测价值。方法急性心肌梗死(AMI)患者102例,按住院期间是否发生心功能不全和/或心源性休克分为两组:不伴心功能不全和/或心源性休克组63例,伴心功能不全和/或心源性休克组39例。再按肌酸激酶同工酶(CK-MB)峰值是否大于200IU/L分为两组:CKMB峰值大于或等于200IU/L病例组(n=58)和CK-MB峰值小于200IU/L病例组(n=44)。所有患者入院第2天清晨检测血清HDAC3、CysC和清蛋白水平。结果与未发生心功能不全和/或心源性休克组比较,发生心功能不全和/或心源性休克组的患者血清HDAC3和CysC水平显著升高(P<0.01),血清清蛋白水平显著降低(P<0.01)。与CK-MB峰值小于200IU/L病例组患者对比,CK-MB峰值大于200IU/L病例组患者的血清HDAC3和CysC水平显著升高(P<0.01),血清清蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论血清HDAC3、CysC和清蛋白水平对大面积心肌梗死有一定预测价值,有利于判断患者的预后。

组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)抑制剂通过抑制核因子kB减轻乙醇诱导的人肠上皮Caco-2细胞损伤

目的研究组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在酒精诱导的肠上皮细胞炎症和通透性中的作用和机制。方法培养Caco-2细胞达到分化,采用(10、25、50、100.200)mmol/L乙醇对其进行处理,通过廛哇蓝(MTT法)检测乙醇对细胞活性的影响,实时定量PCR检测Caco-2细胞HDAC3 mRNA水平,Western blot法检测其蛋白水平,从中筛选出适宜的乙醇浓度。将分化的Caco-2细胞分为对照组、乙醇组(50 mmol/L乙醇处理60 min)和RGFP966预处理组(乙醇处理前用2 p.mol/L HDAC3抑制剂RGFP966预处理1 h)。EUSA检测培养的细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,电阻仪检测跨上皮电阻值(TER),Western blot法检测细胞中闭合蛋白(occludin)、密封蛋白1(claudin-1)以及磷酸化的核因子kBp65(p-NF-i<Bp65)、核因子kB抑制蛋白(IkB)的蛋白水平。结果(10、25、50)mmol/L乙醇对细胞活力无明显影响,这些浓度的乙醇处理后HDAC3 mRNA和蛋白表达均升高,且具有剂量依赖性。与对照组相比,乙醇处理组细胞TNF-α含量和p-NF-KBp65蛋白水平增加,TER值与occludin、claudin-1和IkB蛋白水平均降低;与乙醇处理组相比,RGFP966预处理组细胞TNF-α含量和p-NF-KBp65蛋白水平均降低,TER值与occludin、claudin-1和IkB蛋白水平均增加。结论抑制HDAC3能够减弱乙醇诱导的肠上皮细胞炎症和通透性,可能是通过抑制NF-kB的活化发挥作用的。

组蛋白去乙酰化酶3通过抑制AICD维持T细胞自稳（英文）

为探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在T细胞自稳中的作用,采用Lox P-cd4cre酶系统在胸腺CD4^+CD8^+双阳性T细胞(DP)中敲除hdac3基因.hdac3基因敲除小鼠不影响T细胞在胸腺中的发育,但导致外周T细胞显著降低,而且,hdac3基因敲除的外周T细胞主要以活化/效应/记忆表型为主.机制分析表明,hdac3基因敲除的外周T细胞凋亡增加并伴随细胞增殖加速,同时,Fas和Fas配体阳性细胞比率以及Fas配体的表达显著增加.体外TCR活化不影响正常外周T细胞的凋亡,但导致hdac3基因敲除的外周T细胞凋亡显著增加.实验结果表明,HDAC3通过抑制活化诱导的细胞凋亡维持外周T细胞自稳.

锰超氧化物歧化酶和去乙酰化酶3的表达在凶险性前置胎盘伴胎盘植入中的临床意义

目的凶险性前置胎盘(PPP)合并胎盘植入严重威胁孕产妇的生命安全。文中探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、去乙酰化酶3(SIRT3)的改变与SIRT3在PPP伴胎盘植入孕产妇胎盘中的表达,及其在滋养细胞侵袭与胎盘植入的联系。方法收集 2014年 1月至 2018年 6月安徽省妇幼保健院 90例 PPP合并胎盘植入孕产妇胎盘组织,按照胎盘绒毛侵入子宫肌层深度分为粘连组(30例)、植入组(30例)及穿透组(30例);对照组纳入正常胎盘组织30例。采用免疫组织化学SP法和Western blot法检测研究组和对照组胎盘组织中MnSOD与SIRT3的表达,并进行比较分析。结果免疫组化和Westernblot结果表明,与对照组相比较,胎盘植入组中MnSOD与SIRT3表达明显,且随着胎盘植入程度的增加而降低;Western blot结果表明,对照组MnSOD/β-actin与SIRT3/β-actin相对蛋白表达分别为(0.39±0.05)、(0.41±0.04),均分别高于粘连组([ 0.35±0.04)、(0.32±0.02)]、植入组([ 0.28±0.02)、(0.20±0.03)]和穿透组([ 0.23±0.01)、(0.17±0.02)],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PPP合并胎盘植入胎盘组织及侵袭的滋养细胞中MnSOD与SIRT3表达明显降低,两者均参与了胎盘植入的发生发展过程。

组蛋白去乙酰化酶3在神经系统疾病中的研究进展

近年来在染色体重组和转录调控方面的研究大大提升了人们对于基因调节的认识。在多种神经系统疾病中,组蛋白去乙酰化抑制剂(HDACi)可以促进神经保护和损伤修复。在脑部的海马、皮质和小脑,组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)是表达量最高的一类组蛋白去乙酰化酶。并且HDAC3是一种具有神经毒性的蛋白质。因此,本文将对HDAC3在神经系统疾病中的研究进展进行综述。

组蛋白去乙酰化酶3对恒定型自然杀伤性T细胞发育和功能的调控作用

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)缺失对恒定型自然杀伤性T细胞(iNKT)数量、发育表型和细胞因子产生功能的影响,确定HDAC3在iNKT细胞发育和功能发挥中的调控作用。方法:采用T细胞特异的hdac3基因敲除(HDAC3KO)及其野生型正常对照(WT)小鼠,每种小鼠各取3~5只,分离小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和肝脏淋巴细胞,采用细胞表面抗体染色和流式细胞术检测HDAC3对iNKT细胞数量和发育表型的变化,实验至少重复3次。采用HDAC3KO小鼠及其同系B6.SJL小鼠,每种小鼠各取4~6只;提取以上2种小鼠骨髓细胞,混合后经尾静脉注入经γ射线照射的B6.SJL小鼠,以制备骨髓混合嵌合体模型,8周后流式细胞术检测不同骨髓来源iNKT细胞在胸腺的产生和发育,实验重复3次。选取HDAC3KO和WT小鼠,每种各取小鼠3~5只;采用iNKT细胞特异激活剂半乳糖神经酰胺腹腔注射4 h后,收集各组小鼠脾脏淋巴细胞和血清,分别采用细胞内染色、流式细胞术和酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测HDAC3作用下iNKT细胞因子水平,实验至少重复3次。结果:与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠胸腺和外周免疫器官中iNKT细胞比例和数量均明显降低(P<0.05),且HDAC3KO小鼠胸腺iNKT细胞中CD44-NK1.1-和CD44+NK1.1-细胞比例明显升高(P<0.05),而CD44+NK1.1+、CD122+、CD69+和DX5+细胞比例明显降低(P<0.05)。骨髓混合嵌合体实验,与正常B6.SJL小鼠来源的骨髓细胞比较,来源于HDAC3KO小鼠的骨髓细胞产生的iNKT细胞数量明显减少(P<0.05),同时iNKT细胞中CD44+NK1.1+细胞比例也明显降低(P<0.05)。细胞因子胞内染色和ELISA法检测,与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠iNKT细胞和血清中IFN-γ和IL-4水平均明显降低(P<0.05)。结论:HDAC3缺失通过内源性机制导致iNKT细胞数量减少,细胞发育成熟受阻;同时HDAC3缺失导致iNKT细胞因子产生功能明显降低。提示HDAC3在iNKT细胞的发育和功能发挥中具有重要调控作用。

组蛋白去乙酰化酶3在心血管疾病中的研究进展

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)是表观遗传的一种修饰酶,其与染色质结构和基因转录调控密切相关。HDAC3属于第Ⅰ类组蛋白去乙酰化酶,研究报道HDAC3在心脏发育过程中起着关键的作用,最新研究发现HDAC3在心血管疾病中发挥着重要的调控作用。本文主要围绕Ⅰ类组蛋白去乙酰化酶家族中的HDAC3,综述其定位和酶活性与先天性心脏病、冠心病、心肌疾病、心力衰竭、心律失常的关系,为心血管疾病临床治疗提供新的药物靶点。

组蛋白去乙酰化酶3在小鼠心肌纤维化中的作用及机制研究

目的探究组蛋白去乙酰化酶3 (HDAC3)在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌纤维化中的作用及机制。方法首先,根据随机数表法将20只雄性C57BL/6小鼠分为Sham组和ISO组,每组10只。采用Western blot和免疫组织化学染色法检测两组小鼠心肌组织中HDAC3的蛋白表达状况。为进一步探讨HDAC3对小鼠心肌纤维化的表型影响及潜在机制,后续将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为Sham组、RGFP966组、ISO组、ISO+RGFP966组,每组10只。采用ISO皮下多点注射的方式构建小鼠心肌纤维化模型,分别采用HDAC3特异性抑制剂RGFP966干预,二维心脏超声检测小鼠心脏功能参数,包括射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)、左室收缩末期内径(LVESD)和左室舒张末期内径(LVEDD);马松染色观察各组小鼠心肌纤维化状况;实时荧光定量PCR检测各组小鼠心肌组织中胶原蛋白1、胶原蛋白3及结缔组织生长因子(CTGF)的m RNA表达水平;最后,Western blot检测Klotho及促纤维化相关信号分子的蛋白表达水平。结果 ISO组小鼠心肌组织中HDAC3蛋白相对表达量较Sham组的明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);进一步分析,与Sham组比较,ISO组小鼠射血分数明显降低、短轴缩短率明显降低、左室舒张末期内径和左室收缩末期内径明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与Sham组比较,ISO组小鼠心肌组织胶原沉积明显增多、CollagenⅢ及CTGF的m RNA含量明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与Sham组比较,ISO组小鼠心肌组织中Klotho蛋白表达明显降低、P-Smad和α-SMA的蛋白表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与ISO组比较,ISO+RGFP966组小鼠的射血分数明显增加、短轴缩短率明显增加、左室舒张末期内径和左室收缩末期内径明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与ISO组比较,ISO+RGFP966组小鼠心肌组织胶原沉积明显降低、CollagenⅠ、CollagenⅢ及CTGF的m RNA含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);心肌组织中Klotho蛋白表达明显升高、P-Smad3和α-SMA的蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论心肌纤维化时,心肌组织HDAC3的蛋白表达水平明显增加,抑制HDAC3可通过上调Klotho改善心肌纤维化。

长链非编码RNA组蛋白去乙酰化酶3通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路调控肝癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡

目的研究长链非编码RNA组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的调控机制。方法运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常肝细胞MIHA、肝细胞癌细胞SK-Hep1中HDAC3的表达;将si-NC组(转染si-NC)、si-HDAC3组(转染si-HDAC3)、si-HDAC3+DMSO组[转染si-HDAC3并用二甲基亚砜(DMSO)处理]、si-HDAC3+MHY1485组[转染si-HDAC3并用哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制剂MHY1485处理]用脂质体法转染至SKHep1细胞;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室检测细胞迁移侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法(Westernblotting)检测细胞中Akt激酶、翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体p70S6激酶蛋白(S6K1)、磷酸化核糖体p70S6激酶蛋白(p-S6K1)的蛋白表达。结果与正常肝细胞MIHA(1.00±0.06)相比,肝细胞癌细胞SK-Hep1中HDAC3表达(4.38±0.34)显著上调(P<0.05)。敲减HDAC3后,SK-Hep1细胞的增殖、迁移、侵袭能力均得到明显下调,凋亡能力得到明显上调。有趣的是,敲减HDAC3后,SK-Hep1细胞中mTOR信号通路关键基因Akt、4E-BP1、p-S6K1的表达均明显下调,并且激活mTOR信号通路可部分逆转敲减HDAC3对肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡调控作用。结论长链非编码RNAHDAC3可调控肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,其机制可能与mTOR信号通路相关,可为肝癌的治疗提供新的作用靶点。