去壁灵芝孢子粉水溶成分抑制头颈鳞癌细胞增殖及转移

目的探讨去壁灵芝孢子粉水溶成分(A-GSP)在头颈鳞癌细胞中的生物学作用。方法利用MTS法检测A-GSP在头颈鳞癌细胞系SCC15和SCC25中的细胞活力。采用平板克隆、划痕愈合实验和穿室实验探究A-GSP对头颈鳞癌细胞增殖、转移能力的影响。通过流式分析试剂盒检测A-GSP对头颈鳞癌细胞凋亡能力和细胞周期分布的影响。免疫蛋白印迹法检测A-GSP处理后上皮间质转化(EMT)分子和细胞周期蛋白的表达变化。结果A-GSP作用后,头颈鳞癌细胞的增殖能力减弱(F=62.72,P<0.0001),转移能力下降(F=95.7,P<0.0001),细胞凋亡能力增加(F=87.65,P<0.0001),G2/M期停滞(F=15.31,P<0.01)。此外,A-GSP处理导致上皮细胞标志物E-cadherin上调,间质细胞标志物Vimentin、N-cadherin、Snail、Slug下调,细胞周期激酶CDK1下调,P21和P27上调,但是,并未引起凋亡通路蛋白Caspase和Bax水平改变。结论A-GSP通过诱导细胞周期G2/M期停滞和抑制EMT从而抑制头颈鳞癌细胞的增殖转移。

去壁低渗法制备芦笋染色体标本的研究

应用去壁低渗法进行了芦笋染色体标本制备的研究,其结果是:芦笋种子根尖用2mmol/L的8-羟基喹啉预处理2h,2.0%纤维素酶+1.0%果胶酶37℃酶解45m in,酶解前后各固定1次,能得到效果较好的芦笋染色体标本图;芦笋品种“Atlas”的体细胞染色体数目为2n=20。

一种快速酶解去壁低渗制备植物染色体标本的方法

目前使用的“植物染色体标本酶解去壁低渗法”在不同的植物材料中虽然有不同程度的差异，但总的来说，都具有材料需量大和酶解时间较长等特点。我们在多年研究实践的基础上，对“酶解去壁低渗”的某些步骤进行了改进，经多次实验表明，适用于多种植物材料。现以大麦材料为...

去壁酶与酶解方式对曲霉原生质体释放的影响

研究了纤维素酶、蜗牛酶、溶菌酶以及菌丝体培养方式和酶解方式对黑曲霉和米曲霉菌丝释放原生质体的效应。发现黑曲霉菌丝原生质体制备最佳条件为固体透析培养菌丝体,2%纤维素酶,在平皿中,28℃和80r/min条件下酶解3h;米曲霉原生质体制备最佳条件为2%纤维素酶+1%蜗牛酶+5mmol/L二硫苏糖醇,酶解时间6h,其它条件与黑曲霉的相同。

去壁低渗法制备长寿沙田柚染色体标本的研究

为了给长寿沙田柚的染色体核型分析、细胞遗传学研究和良种培育提供参考依据,以其幼叶为研究材料,设计4种前低渗时间和12种酶解方式处理,对制片效果的影响进行了研究。结果表明:预处理后的材料经前低渗60min后,用0.2%纤维素酶∶0.2%果胶酶(3∶1,v/v)混合酶液37℃酶解80min,可得到理想的制片效果,背景干净,染色体分散、清晰。

桑树染色体制片的直接酸解去壁法及其实用性研究

本文研究出桑树染色体制片的直接酸解去壁法：直接取桑嫩芽幼叶投入“酸醇去壁固定液”（浓盐酸∶４５％醋酸∶纯乙醇＝１∶０．５∶０．５容积比）中３～５ｍｉｎ，然后将材料水洗几次浸入水中后低渗１０ｍｉｎ，再经染色即制备成染色体标本。验证了在保证染色体制片观察效果前提下，样本材料采集后在室温和冰箱保存的时间。并与其它制片方法从制片效果、工作效率、成本等方面进行比较。从而证明本方法具有操作简单、省时省力、成本低、效率高、有较大的实际应用价值。

桑树有丝分裂染色体观察新法探索实验——酸解去壁低渗法

取桑芽、幼叶经前处理后,用1N HCl酸解处理材料15分钟,再进行低渗滴片,制备桑有丝分裂染色本标本.经观察,用此法制备的染色体标本,同样可以达到酶解去壁低渗法的观察效果,而比酶解去壁低渗法极大的节约实验费用;与常规切片法、压片法相比,其染色体制备效果好,且操作程序更简捷.将该方法称作桑树酸解去壁低渗法.

去壁低渗法制备无融合生殖甜菜M14染色体标本

无融合生殖甜菜M14单体附加系为19条染色体甜菜,其中附加1条白花甜菜第9号染色体。为了探明无融合生殖甜菜M14的细胞及胚胎学机理,介绍了一种快速、简便观察分析无融合生殖甜菜染色体标本的制片方法及操作流程。取甜菜根尖分生区部位用0.2 mmol/L 8-羟基喹啉预处理,经前低渗的材料需先用甲醇∶冰醋酸(3∶1)固定4 h,再酶解去壁、后低渗,酶解时间大约0.5～2.0 h。利用滴片或凃片法通过荧光显微技术观察染色体标本,可以更加清晰地观察到染色体的自然裸露状态,附加的1条白花甜菜染色体游离于栽培甜菜染色体之外,更易于识别。此方法适用于无融合生殖甜菜,可为后续的染色体微分离及Fish荧光原位杂交等提供前提条件和技术保障。

去壁低渗制备水仙花根尖染色体标本实验条件的优化

用去壁低渗法制备水仙花根尖染色体标本,采用2×4型析因实验设计,探讨酸解时间和后低渗时间对水仙花根尖染色体标本制备的影响.结果表明酸解时间为14min、后低渗时间为8min时,中期分裂指数最高且染色体清晰、分散性好.

破壁与去壁灵芝孢子粉的化学成分与抗氧化活性比较

本研究以去壁灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉为原料,探究不同孢子壁加工工艺对灵芝孢子粉化学成分及抗氧化活性的影响。实验对比了两种灵芝孢子粉的水分、灰分、膳食纤维、蛋白质、总三萜、总多糖、微量元素、氨基酸等主要指标及其体外抗氧化活性。结果表明,去壁灵芝孢子粉在灰分、水溶性膳食纤维、蛋白质、总多糖、总三萜和水解氨基酸的含量分别是2.227%、8.810%、15.922%、12.129%、2.556%、6.744%,均高于破壁灵芝孢子粉,其中总多糖含量较破壁提高了近12倍。三萜的色谱图显示,去壁孢子粉中含有更丰富的萜类物质。对比两种孢子粉醇提相与水提相的抗氧化活性,去壁灵芝孢子粉醇提相显示出最强的抗氧化活性,在2 mg/mL的浓度下,总还原力和DPPH自由基清除率分别为1.114和89.860%;在0.5 mg/mL的浓度下,其ABTS^+自由基清除率为99.714%,与同浓度下V_C阳性对照组结果相当;在10 mg/mL浓度时,羟基自由基清除率达到84.301%。因此,去壁技术提高了灵芝孢子粉中关键物质含量,增强了其抗氧化能力。

去壁灵芝孢子粉幼龄大鼠安全性评价研究

目的研究去壁灵芝孢子粉6周重复给药对幼龄大鼠各系统发育的影响及其毒性反应。方法24日龄(postnatal day,PND24)幼龄SD(Sprague-Dawley)大鼠128只,采用体重均衡法分为溶媒对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组32只,雌雄各半,经口灌胃分别给予纯水、去壁灵芝孢子粉0.8、1.8和4.0 g/kg剂量,给药体积均为10 mL/kg,每天给药1次,连续给药6周(42 d),于停药次日、停药4周分别剖检每组雌雄大鼠10/16只、6/16只;检测常规毒性指标和生长发育、骨骼发育、行为学、性激素、免疫系统发育等指标。结果去壁灵芝孢子粉各剂量对幼龄SD大鼠临床症状、体重、摄食、性征发育、行为学、血液学、血清生化学、眼科、生长激素、性激素、骨骼系统发育、免疫学、组织病理学等指标均未见明显毒性影响;仅出现以高剂量为主的雌雄大鼠部分尿液指标可逆性异常(停药4周后恢复正常),考虑与供试品成分或其代谢产物经尿液排泄有关;各剂量组水迷宫实验中潜伏期时间减少、空间探索测定目标象限内时间百分比增加,提示学习记忆能力增强,考虑不排除可能与其药理学作用有关。结论去壁灵芝孢子粉对幼龄SD大鼠未见明显毒性反应,未观察到不良反应剂量(no-observed adverse effect level,NOAEL)为4.0 g/kg。

去壁灵芝孢子粉改善乳腺癌患者辅助化疗期间癌因性疲乏研究

目的观察去壁灵芝孢子粉对乳腺癌术后辅助化疗患者癌因性疲乏的防治效果,为使用现代工艺加工的传统中药有效改善肿瘤患者生活质量提供依据。方法采用随机数字表法将浙江省肿瘤医院2021年11月—2023年3月收治的74例接受乳腺癌术后辅助化疗的女性患者分为治疗组(37例)和对照组(37例)。2组均给予4周期表柔比星(或多柔比星脂质体)联合环磷酰胺辅助化疗及相应的对症治疗;治疗组化疗同时口服去壁灵芝孢子粉2 g·d^(-1)治疗,对照组口服安慰剂对照。对比分析2组治疗前后癌因性疲乏发生率及疲乏严重程度、T淋巴细胞亚群、血清炎症因子、肠道菌群变化,以及药物对血常规、肝肾功能的影响。结果治疗组化疗后癌因性疲乏发生率及Piper疲乏修正量表评分显著低于对照组(P<0.05);CD3^(+)、CD4^(+)、CD3-CD56^(+)比例较对照组显著升高(P<0.05),而CD8^(+)比值较对照组显著降低(P<0.05);IL-2、IL-10计数高于对照组(P<0.05),而IL-6、IL-8、C反应蛋白计数低于对照组(P<0.05);白细胞、中性粒细胞及血小板计数显著高于对照组(P<0.05);肠道菌群在属水平普拉梭菌丰度高于对照组;2组肝肾功能指标无明显差异。结论去壁灵芝孢子粉能显著降低乳腺癌患者辅助化疗期间癌因性疲乏的发生率及疲乏程度,抑制炎症因子,调节肠道菌群及机体免疫。

去壁灵芝孢子粉片的含量测定与免疫调节及心脏保护功能研究

目的 研究并评价“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的免疫调节和心脏保护作用。方法 首先运用UPLC-Q-TOFMS和比色法分析“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的主要化学成分,考察其对斑马鱼巨噬细胞减少症模型、斑马鱼心衰模型、H_(2)O_(2)诱导的心肌及内皮细胞氧化应激模型、脂多糖诱导的小胶质细胞炎症模型的影响,通过巨噬细胞形成能力、巨噬细胞吞噬能力、抗神经炎症能力、心脏收缩舒张改善能力、抗心肌及内皮细胞氧化应激损伤能力等多个指标评估其免疫调节及心脏保护作用。结果 “仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片可以提高巨噬细胞形成及吞噬能力,改善心脏收缩舒张功能,减少神经炎症并缓解心肌及内皮细胞因氧化应激而造成的损伤,从而起到免疫调节和心脏保护作用。结论 “仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片有望用于免疫功能调节及心脏功能保护。

基于精益理念的中药制药工业数据挖掘及生产工艺持续改进策略研究:以去壁灵芝孢子粉制药过程为例

在中药工业数字化转型进程中,如何高效治理和分析工业数据,科学挖掘并利用其中蕴藏的有价值信息来指导中药生产制造,一直是中药制药领域的研究热点和应用难点。该研究针对中药制药工艺较为粗放、产品质量一致性有待提高等现状,将贝叶斯网络、卷积神经网络、帕累托多目标优化算法等先进计算工具与Shewhart控制图、过程性能指数等精益六西格玛分析工具相结合,提出一种可深入挖掘历史工业数据,指导制药工艺持续改进的策略,并以去壁灵芝孢子粉生产制造过程为研究载体进行验证。通过该策略优化,获得了可使去壁灵芝孢子粉水分、细度、粗多糖和总三萜等关键质量属性的过程性能指数Ppk均不小于1.33的关键参数可行区间组合。结果表明,该方法具有较高的工业应用价值,为中药生产工艺的持续改进提供了实用方法。

去壁低渗法在黄瓜染色体核型分析中的应用

以黄瓜为材料,介绍了去壁低渗法在染色体核型分析制片中的操作技术要点,并对试验中的关键技术进行了重点说明。

半夏不同居群的细胞学研究

研究采用BSG去壁低渗法,对采集于不同地区、不同居群的半夏(Pinelliaternata)进行细胞学研究。研究结果表明:除文献已报道的半夏属有7,8,9和13四个染色体基数外,本研究发现,该属还存在10和23两个染色体基数,并发现半夏存在2n=75,80,84,66,92,100等染色体数目为本研究首次报道,同时分析讨论了不同居群半夏染色体倍性及数目多样性的关系。

燕麦属牧草根尖组织染色体观察方法的优化研究

针对通常采用的燕麦属牧草染色体观察的去壁低渗法,对该方法中的预处理和解离等环节进行了优化,即预处理用对二氯苯在20℃下处理4 h,固定,酸解离用1 mol/L HCl在60℃下处理10min,酶解离用20 g/L纤维素酶溶液在25℃下处理20 min,最后染色压片。通过研究发现优化后试验步骤简化,成本降低,且观察效果良好。

豌豆染色体制片技术的比较研究

采用3种不同的染色体制片技术,以豌豆(Pisum sativum)为材料,对常规压片(醋酸洋红染色)、孚尔根(Feulgen)核反应染色法和去壁低渗法(Giemsa染色)3种不同制片技术效果进行了比较,实验表明3种方法各有特点,去壁低渗法易获得分散细胞,有利于进行染色体核型分析。