去天门冬氨酸血管紧张素Ⅰ减轻大鼠心肌微血管内皮细胞缺血/再灌注损伤

目的探讨去天门冬氨酸血管紧张素Ⅰ(DAA-Ⅰ)对大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)缺血/再灌注损伤的影响。方法分离培养大鼠CMECs,建立模拟缺血/再灌注模型,完全随机分组,分为对照组、模拟缺血/再灌注组(SI/R组)、模拟缺血/再灌注+DAA-Ⅰ(2.5、3.75、5.0μmol/L)组。MTT检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,TUNEL法检测细胞凋亡,采用Western blot检测GRP78/Bip、CHOP/GADD153、pro-caspase-12、cleaved-caspase-12蛋白的表达。结果与对照组相比较,SI/R组CMECs增殖能力明显降低(P<0.01),凋亡率显著上升(24.85%±0.67%比3.55%±0.11%,P<0.01)。与SI/R组相比,SI/R+DAA-Ⅰ组细胞增殖能力明显升高(P<0.01)并呈剂量依赖性,细胞迁移率上升(P<0.01)并呈剂量依赖性,凋亡率明显下降(15.18%±0.40%比24.85%±0.67%,P<0.01)并呈剂量依赖性。与对照组相比较,SI/R组和SI/R+DAA-Ⅰ组的GRP78、CHOP/GADD153、cleaved-caspase-12表达明显上升(均为P<0.01)。与SI/R组相比,SI/R+DAA-Ⅰ组的GRP78、CHOP/GADD153、cleaved-caspase-12表达明显降低(均为P<0.01)。结论 DAA-Ⅰ可显著抑制缺血/再灌注损伤诱导的CMECs凋亡,促进CMECs存活,改善细胞功能,其保护作用可能与下调ERS相关蛋白的表达有关。

内质网应激在去天门冬氨酸血管紧张素Ⅰ减轻心肌微血管内皮细胞缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨内质网应激在去天门冬氨酸血管紧张素Ⅰ(des-aspartate-angiotensin I,DAA-I)抑制大鼠心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMECs)缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤中的作用及机制。方法分离培养大鼠CMECs,建立模拟(simulation,S)I/R损伤模型,按电脑随机数字表法随机分组,分为对照组、SI/R损伤组、SI/R损伤+4-苯基丁酸钠(4-phenylbutyric acid,4-PBA;内质网应激抑制剂)组、SI/R损伤+DAA-I组、SI/R损伤+DAA-I+Compound C[腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphateactivated protein kinase,AMPK)特异性抑制剂]组。噻唑蓝法(MTT法)检测细胞增殖能力,缺口末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡,Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,CHOP)、AMPK蛋白表达和磷酸化水平。结果与对照组比较,SI/R损伤组CMECs细胞增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(4.02%±0.85%vs.26.21%±2.97%,P<0.05)。与SI/R组比较,SI/R+4-PBA组CMECs细胞增殖能力明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);SI/R+DAA-I组CMECs凋亡率明显降低,差异有统计学意义(26.21%±2.97%vs.16.18%±2.93%,P<0.05);SI/R+DAA-I+Compound C组CMECs凋亡率稍微降低,差异无统计学意义(26.21%±2.97%vs.21.68%±3.37%,P>0.05)。与对照组比较,SI/R组GRP78、CHOP蛋白表达明显升高(P<0.05),p-AMPK稍升高。与SI/R组比较,SI/R+4-PBA组GRP78、CHOP蛋白表达明显降低(P<0.05);SI/R+DAA-I组GRP78、CHOP蛋白表达明显降低(P<0.05),p-AMPK明显升高(P<0.05);SI/R+DAA-I+Compound C组GRP78、CHOP蛋白表达轻度降低(P<0.05),p-AMPK明显升高(P<0.05),但低于SI/R+DAA-I组(P<0.05),差异均有统计学意义。结论内质网应激参与大鼠CMECs的I/R损伤,DAA-I可显著抑制CMECs在I/R损伤过程中的内质网应激,其分子机制可能与激活AMPK途径相关。

步长脑心通胶囊对血管性痴呆大鼠认知功能及脑组织血管紧张素Ⅱ、精氨酸加压素含量的影响

目的:观察步长脑心通对血管性痴呆大鼠认知功能及脑组织血管紧张素Ⅱ、精氨酸加压素含量的影响,并与甲磺酸双氢麦角毒碱作用效果进行比较。方法:实验于2005-07/11在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所七室完成。①选用清洁级15～18月龄Wistar大鼠48只,雌雄不拘,体质量(200±20)g。按随机摸球法将48只大鼠分为4组:假手术组、模型组、中药组和西药组(阳性对照组),每组12只。除假手术组外(进行假手术),其余组大鼠均采用改良Pulsinellis四血管阻断法建立血管性痴呆模型。中药组:以0.45g/(kg·d)剂量灌胃步长脑心通混悬液,由咸阳步长制药有限公司生产,由黄芪、乳香、没药、全蝎、地龙等16味中药组成,0.4g/粒;西药组:以0.32mg/(kg·d)剂量灌胃甲磺酸双氢麦角毒碱混悬液,该药由瑞士山德士药厂与天津华津制药厂合作生产,生产批号:970141,1mg/片;假手术组和模型组灌胃同容量生理盐水;每天分早、中、晚3次。术后当天开始用药,连续8周。②于造模前,造模后2,4,8周进行穿梭箱检查,以主动回避反应比率表示大鼠的认知能力。于给药结束后采用放射免疫分析法测定大鼠大脑皮质、下丘脑、海马血管紧张素Ⅱ、精氨酸加压素含量。③对数据进行单因素方差、均数间多重比较q检验;数据间相关性处理采用直线相关分析。结果:造模过程中如有动物死亡则补充相应只数,最终进入结果分析的大鼠保持为48只。①主动回避反应比率:模型组和中、西药组大鼠术后2,4,8周明显低于假手术组(P<0.01);2个治疗组均明显高于模型组(P<0.01);两治疗组间比较,差异不明显(P>0.05)。②血管紧张素Ⅱ含量:模型组大鼠大脑皮质、下丘脑和海马明显高于假手术组(P<0.01),中、西药组明显低于模型组(P<0.01),两治疗组间差异不明显(P>0.05)。③精氨酸加压素含量:模型组大鼠大脑皮质、下丘脑和海马明显低于假手术组(P<0.01);中、西药组明显高于模型组(P<0.01);中药组大脑皮质、下丘脑明显高于西药组(P<0.05),在海马与西药组相近(P>0.05)。④相关性分析结果:假手术组、模型组、中药组和西药组大鼠海马血管紧张素Ⅱ含量与主动回避反应比率呈负相关(r=-0.894,-0.872,-0.928,-0.880,P<0.05),而上述各组大鼠海马精氨酸加压素含量与主动回避反应比率呈显著正相关(r=0.912,0.892,0.937,0.897,P<0.05)。结论:步长脑心通改善血管性痴呆模型大鼠认知功能的作用可能是通过降低海马等脑组织血管紧张素Ⅱ含量、提高精氨酸加压素含量而实现,作用效果与甲磺酸双氢麦角毒碱相当。

高血压性脑梗塞急性期血浆和脑脊液心钠素血管紧张素Ⅱ及精氨酸加压素变化及其意义

选择有高血压病史１年以上的脑梗塞患者５６例，用放免分析法测定其血浆和胞脊液心钠素（ＡＮＦ）、血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）和精氨酸加压素（ＡＶＰ）水平的变化。结果：高血压性脑梗塞患者血浆和脑脊液ＡⅡ和ＡＶＰ水平均显著增高（Ｐ均＜０．０１）；而ＡＮＦ在血浆中明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），在脑脊液中却变化不明显（ｐ＞０．０５）。表明此３种调节多肽均参与了高血压性缺血性脑损害的病理生理过程。同时提示，测定脑脊液或血液中ＡⅡ和ＡＶＰ的含量变化对判断脑梗塞患者缺血性脑损害程度及恢复情况可能有一定帮助。

血管性痴呆50例脑脊液血管紧张素Ⅱ、精氨酸加压素变化与P300潜伏期的相关性(英文)

目的研究血管性痴呆(VD)患者脑脊液血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),AVP含量变化,P300潜伏期(P300PL)变化及意义。方法病例分组:VD组50例;对照组为CNS非器质性疾病患者26例。运用简易精神状态量表(MMSE),P300PL,Hachinski缺血量表(HIS)、社会功能活动调查(FAQ)评定其认知功能。用放射免疫分析法(RIA)测定血浆、脑脊液(CSF)AngⅡ,AVP含量。结果VD组患者CSFAngⅡ含量(103.6±17.4)ng/L显著高于对照组(35.2±18.2)ng/L(t=2.759,P<0.01),而CSFAVP含量(1.6±0.5)ng/L显著低于对照组(3.2±0.7)ng/L(t=2.876,P<0.01);VD组患者P300PL(438±39)ms比对照组(331±36)ms显著延长(t=2.692,P<0.01),而MMSE评分VD组14.4±7.6比对照组27.4±2.2显著降低(t=2.747,P<0.01)。结论脑内AngⅡ,AVP含量变化在VD的发病中可能起重要作用。

基于水溶性CdTe量子点-绿原酸-血管紧张素Ⅰ相互作用的荧光可逆调控

在水相中合成了巯基丙酸(MPA)包覆的CdTe量子点(QDs),采用透射电子显微镜和原子力显微镜对其进行表征.利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱和红外光谱研究了CdTe QDs与绿原酸(CHA)的相互作用.结果表明,CHA可显著猝灭CdTe QDs的荧光,在一定的浓度范围内,荧光猝灭值与CHA的浓度呈现一定的线性关系.推断其主要猝灭机理为动态猝灭,并实现了荧光光谱法测定CHA.向CdTe QDs-CHA体系中加入血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)后,CdTe QDs荧光在一定浓度范围内逐渐恢复,从而实现了CdTe QDs的荧光可逆调控.CdTe QDs荧光的猝灭与恢复过程对于荧光传感的设计以及荧光可逆调控机理的研究具有指导意义.

L-精氨酸-NO途径抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大反应

目的探讨L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)对心肌细胞血管紧张素Ⅱ受体(angiotensin Ⅱ receptor,ATR)及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)表达的影响,进而阐述L-Arg对病理性心肌肥大的影响作用及相关机制。方法用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ATⅡ)、ATR抑制剂、L-Arg和(或)L-NAME(L-硝基精氨酸甲酯)分别作用于心肌细胞,然后以[3H]-亮氨酸参入法检测细胞蛋白合成速率、比色法检测一氧化氮(NO)生成量、RT-PCR及Western blot检测ATR及p38MAPK的表达水平。结果①给予L-Arg可缓解ATⅡ引起的心肌细胞NO合成量下降,减弱血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensin receptor type1,ATR1)表达及下调p38MAPK蛋白磷酸化水平,并降低心肌细胞蛋白合成速率给予ATⅡ或L-Arg均未影响血管紧张素Ⅱ-2受体(angiotensin receptor type 2,ATP2)的表达水平;②心肌ATR1表达水平及p38MAPK蛋白磷酸化水平均与NO合成量之间存在线性负相关。多元逐步回归分析显示在ATR1与ATR2中,仅ATR1的表达水平与p38MAPK蛋白磷酸化水平之间存在回归关系。结论①L-Arg可致心肌细胞NO合成量增加,后者可抑制ATR1介导的p38MAPK蛋白磷酸化水平上调,进而抑制心肌细胞肥大反应;②ATR2未参与上述过程。

血管性痴呆患者脑脊液中血管紧张素Ⅱ和精氨酸加压素含量与认知功能的相关性

目的 探讨血管性痴呆 (VD)患者脑脊液中血管紧张素Ⅱ (angiotensinⅡ ,AngⅡ )、精氨酸加压素 (argininevaso presin ,AVP)含量的变化 ,事件相关电位P30 0 潜伏期 (P30 0 Peaklatency,P30 0 PL)变化和意义。方法 (1)认知功能评价 :运用简易精神状态量表 (MMSE)、P30 0 潜伏期 (P30 0 PL)、Hachinski缺血量表 (HIS)、社会功能活动调查 (FAQ)量表 ;(2 )病例分组 :VD组 5 0例 ;对照组 2 6例 ,为中枢神经系统非器质性疾病患者 ;(3)用放射免疫分析法 (RIA)测定患者脑脊液 (CSF)中AngⅡ、AVP含量。结果 VD组患者CSF中AngⅡ含量显著高于对照组 (10 3.6 5± 17.4 2 ,35 .18± 18.2 4 ) ,而AVP含量显著低于对照组 (1.6 1± 0 .4 7,3.2 4± 0 .72 ,P <0 .0 1) ;P30 0 PL显著延长 (4 38.4 2± 38.73,331.37± 35 .86 ) ,而MMSE评分显著降低 (14 .4 2± 7.6 1,2 7.4 3± 2 .15 ,P <0 .0 1)。结论 脑内AngⅡ、AVP含量变化在VD的发病中可能起重要作用。

同型半胱氨酸在大鼠血管平滑肌细胞上通过激活ERK1/2信号通路促进血管紧张素Ⅱ受体1表达

目的观察同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)血管紧张素Ⅱ受体1(angiotensinⅡreceptor type 1,AT1R)蛋白表达的影响。方法从大鼠胸主动脉分离、培养VSMCs,并用平滑肌特异性肌纤蛋白(α-SMA)进行免疫荧光鉴定;用10、100和300μmol/L 3个不同浓度的Hcy孵育VSMCs,或在加入Hcy的同时加入5μmol/L的ERK1/2通路阻断剂U0126,48h后用免疫印迹法检测磷酸化的ERK1/2及AT1R的蛋白表达。结果经鉴定,成功分离、培养VSMCs。10、100和300μmol/L 3个不同浓度的Hcy均可上调VSMC的AT1R蛋白表达量(与溶剂对照组比较,P<0.05)。但3个浓度的Hcy组间差异无统计学意义(P>0.05)。10μmol/L的Hcy可增加VSMC的ERK1/2磷酸化(P<0.05),激活ERK1/2信号通路。ERK1/2通路抑制剂U0126可完全阻断Hcy导致的ERK1/2磷酸化,并取消Hcy导致的AT1R上调。结论 Hcy可通过激活ERK1/2信号通路促进大鼠VSMC AT1R的表达,这一结果可能有助于揭示高Hcy血症与高血压的内在联系。

血管损伤后酪氨酸激酶活性变化与血管紧张素Ⅱ介导的血管平滑肌细胞迁移

目的 本研究旨在探讨蛋白酪氨酸激酶活性变化在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )介导的血管平滑肌细胞 (VSMC)迁移中的作用。方法 体外培养VSMC ,采用 [γ 3 2 P] ATP掺入法、改良Boyden′schamber法和细胞化学的方法 ,观察AngⅡ干预前后VSMC胞浆内PTK活性的变化 ,粘着斑、肌动蛋白纤维丝的动态组装变化以及迁移能力的变化 ,探讨AT1 R拮抗剂、AT2 R拮抗剂以及酪氨酸激酶抑制剂对上述观测指标的影响。结果 (1 )AngⅡ可以剂量依赖性诱导VSMC内胞浆PTK激活 ;(2 )AngⅡ刺激后 ,VSMC粘着斑表达增强 ,肌动蛋白丝数量明显增加 ,纵向平行排列 ;(3)AngⅡ刺激后VSMC发生迁移 ;(4 )AT1 R拮抗剂CV 1 1 974可显著抑制上述生物学效应 ,AT2 R拮抗剂PD1 2 331 9对此无明显的作用 ;酪氨酸激酶抑制剂Genistein可显著但不能完全抑制上述生物学效应。结论 AngⅡ通过AT1 R介导调节VSMC内粘着斑和肌动蛋白丝动态组装 ,进而改变VSMC的迁移能力 ;酪氨酸激酶的激活参与AngⅡ介导的VSMC迁移的信号转导调控 ;由于完全抑制PTK活性尚不能完全抑制AngⅡ诱导的VSM Cs跨膜迁移 ,因此VSMCs迁移的调控可能还有其他的信号转导通路的参与。

高同型半胱氨酸血症与血脂异常及肾素-血管紧张素系统的关系

目的探讨高同型半胱氨酸(HCY)血症与血脂异常、肾素-血管紧张素系统的关系。方法选取236例内科住院患者,检测血清HCY水平;再根据HCY升高的发病情况分为高HCY组和正常HCY组。比较两组血脂、空腹血糖、尿酸(UA)及肾素-血管紧张素系统(RAS)指标(血管紧张素Ⅱ、肾素、醛固酮)的差异,并分析两组高血压、糖尿病及心电图异常的发病情况。结果在所有检测对象中,HCY升高发病率29.2%。高HCY组体重显著高于正常HCY组(P<0.05),三酰甘油、UA水平显著高于正常HCY组(P<0.01,P<0.001),而高密度脂蛋白胆固醇显著低于正常HCY组(P<0.05);肾素活性、血管紧张素Ⅱ、醛固酮水平在高HCY组呈现下降趋势,但仅血管紧张素Ⅱ差异有统计学意义(P<0.01)。血脂异常、高UA更多见于高HCY组(P<0.01);高HCY组高血压病发病率显著高于正常HCY组(P<0.05)。经维生素B6、叶酸治疗后,高HCY血症患者HCY水平明显降低(P<0.05),但血脂水平治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。结论高HCY血症患者高血压病发病率增高,常合并血脂异常、高UA,高HCY血症与RAS存在一定关联。维生素B6、叶酸能够降低血HCY水平。

2型糖尿病合并高血压患者同型半胱氨酸与血管紧张素转换酶的相关性分析

目的了解2型糖尿病合并高血压患者血清同型半胱氨酸(HCY)及血管紧张素转换酶(ACE)的水平变化及相关性。方法测定52例单纯2型糖尿病、64例2型糖尿病合并高血压及54例健康体检者(健康对照)的HCY、ACE等指标,并做比较及相关性分析。结果 3组的HCY、ACE、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)指标之间差异具有统计学意义(P<0.01),2型糖尿病合并高血压患者的HCY及ACE水平明显高于单纯2型糖尿病患者;2型糖尿病合并高血压患者血清HCY、ACE水平与各指标相关性分析中,HCY与ACE呈显著正相关(r=0.744,P<0.01),且与患者血压控制有关。结论 2型糖尿病血清HCY和ACE水平与合并高血压有关,二者呈高度相关,联合测定对了解2型糖尿病合并高血压病情发展及预后具有一定临床价值。

N_ω-硝基-L-精氨酸和谷氨酸单氨钠对高血压大鼠血浆血管紧张素II的影响

目的:观察长期使用L-精氨酸(L-NNA)和谷氨酸单氨钠(MSG)后高血压大鼠血浆血管紧张素II(angiotensinII,ANGII)的变化。方法:建模后每日腹腔注射L-NNA和MSG,于7、30、70d用放免法测定大鼠血浆ANGII的质量浓度。结果:(1)高血压组各时期的血压均明显高于对照组(P<0 05);注射L-NNA组的血压在7d与高血压组无明显差异,但30、70d显著增高(P<0 05);注射MSG组的血压显著低于高血压组和注射L-NNA组,但仍未恢复至正常水平。(2)对照组大鼠各时期血浆ANGII的质量浓度介于(162 6±49 1)与(181 5±37 8)μg/L之间,高血压组大鼠血浆ANGII的质量浓度均高于对照组,7d时无差异,但30、70d差异显著(P<0 05);注射L-NNA后,ANGII的质量浓度升高明显,其中30、70d具有显著差异(P<0 05),而注射MSG组大鼠血浆ANGII的质量浓度明显降低(P<0 05),但仍然高于对照组和高血压组(P<0 05)。结论:一氧化氮可有效的减少外周组织ANG的分泌,其降压作用可能通过有效的降低血液中ANG的质量浓度来实现。

血管紧张素Ⅱ上调血管平滑肌细胞富含半胱氨酸蛋白61的表达

目的探讨血管紧张素Ⅱ对培养鼠血管平滑肌细胞富含半胱氨酸蛋白61的影响及其可能的转导通路。方法组织贴块法培养血管平滑肌细胞,血管紧张素Ⅱ处理平滑肌细胞15min、30min、60min、180min,PD98059在血管紧张素Ⅱ刺激细胞前1h加到培养基中,用逆转录聚合酶链反应和Westernblotting检测分析富含半胱氨酸蛋白61的表达。结果逆转录聚合酶链反应分析显示用1μmol/L血管紧张素Ⅱ刺激细胞培养15min、30min富含半胱氨酸蛋白61的表达与对照组相比明显增加;同时细胞外信号调节激酶1/2活性高于对照组(P<0.01),60min时仍有表达,180min时减弱;细胞外信号调节激酶1/2特异性抑制剂PD98059(20μmol/L)能阻断血管紧张素Ⅱ上调富含半胱氨酸蛋白61的表达并抑制增加的磷酸化细胞外信号调节激酶1/2活性。结论血管紧张素Ⅱ通过细胞外信号调节激酶1/2促进血管平滑肌细胞上调富含半胱氨酸蛋白61表达,这可能是血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖的一个重要机制。

急性颅脑损伤后血浆精氨酸加压素和血管紧张素Ⅱ含量变化的临床意义

目的 研究急性颅脑损伤后血浆中精氨酸加压素（ＡＶＰ） 和血管紧张素Ⅱ（ＡＴ－ Ⅱ） 含量的变化及临床意义。方法 用放射免疫法（ＲＩＡ） 检测７５ 例急性颅脑损伤患者，３０ 例非颅脑损伤患者和３０ 例健康者的血浆中ＡＶＰ和ＡＴ－ Ⅱ含量，进行分析和观察其临床意义。结果 ７５ 例急性颅脑损伤后血浆中ＡＶＰ和ＡＴ－ Ⅱ含量明显高于非颅脑损伤组（ Ｐ＜ ００１） ，非颅脑损伤组高于健康者组（ Ｐ＜ ００１） 。急性颅脑损伤组中ＡＶＰ和ＡＴ－ Ⅱ含量与ＧＣＳ评分负性相关。结论 ＡＶＰ和ＡＴ－ Ⅱ参与了颅脑损伤的病理生理过程，病情越严重，血浆中ＡＶＰ和ＡＴ－ Ⅱ含量越高。提示ＡＶＰ和ＡＴ－ Ⅱ也可作为观察急性颅脑损伤严重程度的指标之一。

去甲肾上腺素及血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌细胞胰岛素受体及胰岛素受体底物1酪氨酸磷酸化的综合效应

目的:初步探讨去甲肾上腺素(NE)与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠心肌细胞胰岛素受体β亚基(Ins-Rβ)及胰岛素受体底物1(IRS-1)酪氨酸磷酸化的综合效应,以及心肌胰岛素抵抗的机制。方法:培养新生大鼠心肌细胞。按照浓度梯度,将相同浓度的NE与AngⅡ的混合液加入培养基中,培养72 h后,采用Western blotting法检测胰岛素信号分子蛋白表达水平。另于每个实验组中加入AngⅡ受体阻断剂氯沙坦,分别观察NE与AngⅡ的独立效应。结果:相同浓度的NE与AngⅡ混合液可引起心肌细胞Ins-R、IRS-1及葡萄糖转运体4(GLUT4)等蛋白表达减少,Ins-Rβ亚基酪氨酸磷酸化等蛋白表达减少,IRS-1酪氨酸磷酸化蛋白表达增加(P<0.05)。1μmol/L氯沙坦对Ins-Rβ亚基酪氨酸磷酸化蛋白表达无显著影响(P>0.05),可减少IRS-1酪氨酸磷酸化蛋白表达(P<0.05)。结论:相同浓度的NE与AngⅡ的共同作用可降低大鼠心肌细胞Ins-Rβ酪氨酸磷酸化水平,升高IRS-1酪氨酸磷酸化水平。NE为引起Ins-Rβ酪氨酸磷酸化水平降低的主要原因,AngⅡ升高为IRS-1酪氨酸磷酸化水平升高的主要原因。

N-乙酰半胱氨酸对血管紧张素Ⅱ致成纤维细胞增殖及纤维连接蛋白表达的作用研究

目的:探讨不同浓度N-乙酰半胱氨酸(NAC)对血管紧张素Ⅱ致成纤维细胞(CFs)增殖及纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法:分离培养1~3日龄SD大鼠乳鼠的CFs,分组加入不同浓度的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及NAC进行干预。1组加入普通培养基(含10%FBS的DMEM培养液);2组在普通培养基中加入终浓度为2.5×10-7μmol/L的AngⅡ;3组在普通培养基中加入终浓度为5.0×10-7μmol/L的AngⅡ;4组在普通培养基中加入终浓度为5.0×10-7μmol/L的AngⅡ和5.0μmol/L的NAC;5组在普通培养基中加入终浓度为5.0×10-7μmol/L的AngⅡ和10.0μmol/L的NAC。采用免疫荧光法检测各组FN的蛋白表达水平;CCK8法检测各组CFs的增殖活性,RT-PCR检测各组FN的mRNA表达水平。结果:与1组相比,2组CFs增殖活性、FN mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P均<0.01)。与1组及2组相比,3组CFs增殖活性、FN mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P均<0.01)。在培养基中加入NAC进行干预,4组和5组与3组相比,CFs增殖活性、FN mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P均<0.01);5组较4组CFs增殖活性、FN mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P均<0.01)。结论 :NAC在抑制CFs增殖及减轻FN在心肌间质沉积的过程中发挥重要作用。

去天冬氨酸血管紧张素-1对人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的观察天冬氨酸血管紧张素-1(des-aspartate-angiotensin1,DAA-1)对过氧化氢致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用。方法实验分为正常对照组,过氧化氢模型组,过氧化氢加DAA-1组(低剂量、中剂量、高剂量组)。倒置显微镜下观察细胞形态、密度。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,比色法测定细胞培养液中超氧化物歧化酶,活性、丙二醛及乳酸脱氢酶浓度。免疫细胞化学方法测定组织纤维蛋白溶酶原激活物,Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子表达量。逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定细胞内皮素1和血栓调节蛋白mRNA的表达。结果DAA-1能明显抑制过氧化氢所致的细胞活力的降低[0.443±0.024vs.0.317±0.024,P<0.01],减少细胞内乳酸脱氢酶释放[(102.35±9.87)U/Lvs.(242.78±16.10)U/L,P<0.01],提高超氧化物歧化酶活力[(19.10±2.33)U/mLvs.(8.16±3.48)U/mL,P<0.01],并呈剂量依赖性作用;能明显减少内皮细胞在氧化过程中丙二醛的生成[(1.35±0.19)U/mLvs.(2.33±0.48)U/mL,P<0.01],增加组织纤维蛋白溶酶原激活物蛋白表达,减少Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子蛋白表达;并能明显抑制内皮素mRNA的表达和提高血栓调节蛋白mRNA的表达。结论DAA-1对过氧化氢所致人脐静脉内皮细胞损伤具有明显的保护作用。

健康大学生血清血管紧张素Ⅱ、一氧化氮、同型半胱氨酸水平的四时观测及其与神经质、生活事件的关联性研究

目的了解健康大学生血清血管紧张素Ⅱ(AT-Ⅱ)、一氧化氮(NO)、同型半胱氨酸(Hcy)水平的四时变化规律,探讨其与神经质及生活事件的关联性。方法选取2011年12月—2012年10月北京、山东、山西三地中医药大学大二年级身心健康的在校学生308名,使用自拟健康状况调查问卷、艾森克人格问卷简式量表中国版(EPQ-RSC)、青少年生活事件自评量表进行身心健康状况调查,分别在冬至、春分、夏至、秋分4个节气前后3 d进行血清AT-Ⅱ、NO、Hcy水平检测,分析不同神经质及生活事件健康大学生四时血清AT-Ⅱ、NO、Hcy水平。结果308名大学生中,秋分节气北京1名女大学生因病休学未继续参与调查,因此307名大学生进入统计。根据EPQ-RSC神经质得分及生活事件得分进行分组,分为低神经质低生活事件组(A组,n=41)和高神经质高生活事件组(B组,n=34)。健康大学生四时血清AT-Ⅱ、NO、Hcy水平间差异均有统计学意义(P<0.05),其中血清AT-Ⅱ水平冬至最高、秋分最低,血清NO水平冬至最高、夏至最低,血清Hcy水平春分最低、夏至最高。B组夏至血清AT-Ⅱ水平低于A组,血清NO水平高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组四时血清Hcy水平间差异均无统计学意义(P>0.05);两组四时血清AT-Ⅱ、NO、Hcy水平变化幅度和趋势均不同;B组出现了更多的郁闷、善太息等情绪及躯体不适,类似中医肝疏泄不足的表现。结论健康人群血清AT-Ⅱ、NO、Hcy水平有四时变化的规律;3个指标的血清水平与神经质、生活事件密切相关;从中医理论分析,其可能与肝的疏泄功能是否良好相关。

高龄患者硬膜外阻滞期间用硝普钠降压对血管紧张素-Ⅱ和精氨酸加压素的影响

目的 研究硬膜外阻滞前后使用硝普钠降压对血管紧张素 -Ⅱ (A -Ⅱ )、精氨酸加压素 (AVP)水平的改变及临床意义。方法 择期手术患者 40例 ,平分为两组 :组Ⅰ (n =2 0 )为胸段硬膜外阻滞 (TEA) ,组Ⅱ (n =2 0 )为腰段硬膜外阻滞 (LEA)。在硬膜外阻滞前后分别应用硝普钠控制性降压 (DH) ,使MAP降低 3 0 % (和基础值相比 ) ,并维持 15min。测定A -Ⅱ、AVP的浓度。结果 组Ⅰ在阻滞前低血压期间血浆中A -Ⅱ浓度明显增高 (P <0 .0 1) ,AVP浓度无明显增高 (P >0 .0 5 ) ,在阻滞后低血压期间血浆AVP浓度明显增高 (P <0 .0 1) ,而AⅡ无明显增加 (P >0 .0 5 )。组Ⅱ在阻滞前低血压期间血浆中AⅡ浓度明显增高 ,AVP浓度无明显增高 ;在阻滞后低血压期间血浆AVP和AⅡ浓度均明显增高 (P <0 .0 1)。结论 高龄患者硬膜外阻滞前低血压时A -Ⅱ作用增加 ,而TEA期间AVP维持血压的作用增加 ,LEA期间A