去整合素金属蛋白酶10基因启动子区多态性变化与腔隙性脑梗死发病风险的关系

目的观察腔隙性脑梗死患者去整合素金属蛋白酶(ADAM)10基因启动子区多态性变化,分析此多态性变化与腔隙性脑梗死发病风险的关系。方法研究对象为173例腔隙性脑梗死患者(梗死组)和297例非脑血管病体检者(对照组),采用Snapshot分型技术检测ADAM10基因启动子区rs653765和rs514049位点多态性,采用B型彩色多普勒超声仪测量颈动脉内膜中层厚度(CIMT);比较两组位点多态性及其与梗死组性别、年龄、CIMT的关系。结果梗死组ADAM10基因rs653765位点CC基因型频率显著低于对照组(P=0.008 0)、隐性模型CT+TT基因型频率显著高于对照组(OR=0.54,95%CI为0.36~0.81,P=0.002 9),T等位基因频率显著高于对照组(OR=1.95,95%CI为1.37~2.79,P=0.000 2);两组ADAM10基因rs514049位点的基因型频率和等位基因频率无显著差异(P>0.05)。携带ADAM10基因rs653765位点T等位基因的男性发生腔隙性脑梗死的风险显著升高(OR=1.51,95%CI为1.00~2.28,P=0.048),而≥70岁人群中携带CT基因型或T等位基因者发生腔隙性脑梗死的风险显著升高(OR=1.69,95%CI为1.00~2.85,P=0.046);ADAM10基因rs653765和rs514049位点的多态性与腔隙性脑梗死患者CIMT无明显相关。结论 ADAM10基因rs653765位点T等位基因可能与腔隙性脑梗死的发病有关。

解整合素-金属蛋白酶10及肝细胞配体B2在乙肝-肝纤维化-肝癌患者中的表达

目的探讨解整合素-金属蛋白酶10(ADAM10)、肝细胞配体B2(Ephrin-B2)在“肝炎-肝纤维化-肝癌”轴中的表达以及二者与肝纤维化之间的相关性。方法选取400例HBV感染患者为研究对象,以病情的严重程度分为肝纤维化组(200例)、肝细胞癌组(200例),将肝纤维化组进一步分为以下4个亚组:乙型肝炎组(56例)、轻度纤维化组(87例)、中度纤维化组(34例)、肝硬化组(23例),另外选取200例健康体检患者为健康对照组,对比组间血清ADAM10、Ephrin-B2、肝功能指标、肝纤维化指标;免疫组化检测健康肝组织、乙肝不同分级肝纤维化肝组织、肝癌组织间ADAM10与Ephrin-B2表达。采用t检验进行单因素分析,二元logistic进行多因素分析,皮尔逊相关性检测相关性,受试者工作特征(ROC)曲线进行诊断价值分析。结果ADAM10、Ephrin-B2、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、凝血酶原时间(PT)、白蛋白(ALB)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)水平在乙型肝炎组、轻度肝纤维化组、中度肝纤维化组、肝硬化、肝细胞癌组依次升高,且均显著高于健康对照组(P<0.05),免疫组化检测显示ADAM10、Ephrin-B2二者阳性表达在乙肝肝纤维化组织与肝癌组织中显著高于健康肝组织,且随着乙肝肝纤维化的进展Ephrin-B2、ADAM10表达显著升高。ADAM10高表达组和Ephrin-B2高表达组AST、ALT、PT、ALB、LN、Ⅳ-C、HA、PC-Ⅲ显著高于ADAM10低表达组和Ephri-B2低表达组(P<0.05)。患者血清ADAM10与Ephrin-B2呈显著正相关(P<0.05),ADAM10、Ephrin-B与血清AST、ALT、PT、ALB、LN、Ⅳ-C、HA、PC-Ⅲ以及肝纤维化分期呈显著正相关(P<0.05)。ADAM10、Ephrin-B2、AST、ALT、PT、ALB、LN、Ⅳ-C、HA、PC-Ⅲ为HBV感染患者患“肝炎-肝纤维化-肝癌”轴进展的影响因素。ADAM10诊断肝纤维化、肝细胞癌曲线下面积(AUC)分别为0.680、0.713,敏感度为0.821、0.794,特异度为0.577、0.639;Ephrin-B2诊断肝纤维化、肝细胞癌AUC为0.663、0.730,敏感度为0.757、0.834,特异度为0.651、0.693。结论ADAM10、Ephrin-B2与“肝炎-肝纤维化-肝癌”轴进展呈递增表达关系,ADAM10、Ephrin-B2可能在HBV感染患者肝纤维化和肝细胞癌发生和发展进程中发挥了重要作用,ADAM10、Ephrin-B2有希望成为“肝炎-肝纤维化-肝癌”轴疾病诊断和病情监测的重要血清标记物。

解整合素金属蛋白酶10与激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞的增殖及成骨分化

背景:众多研究发现,激素性股骨头坏死的病理进展与骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化异常有关,其中解整合素金属蛋白酶10(A disintegrin and metalloproteases 10,ADAM10)高度参与此过程,但具体作用机制尚不清楚。目的:探讨ADAM10对激素性股骨头坏死患者来源骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响及其可能机制。方法:选择23例激素性股骨头坏死患者和17例股骨颈骨折患者,于术中无菌条件下取股骨近端骨髓,采用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞,分别得到激素性股骨头坏死患者来源骨髓间充质干细胞(S-BMSCs)和股骨颈骨折患者来源骨髓间充质干细胞(F-BMSCs),体外培养至第3代,采用CCK-8检测两组细胞增殖活性;茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察两组细胞成骨分化能力;qRT-PCR和Western blot检测两组细胞中ADAM10 mRNA和蛋白表达水平。采用ADAM10过表达载体慢病毒感染S-BMSCs,再联合Notch信号通路抑制剂DAPT进行处理,CCK-8检测细胞增殖活性;茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察细胞成骨分化能力;qRT-PCR检测细胞中成骨标志物碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素mRNA表达水平;Western blot检测细胞中Notch信号通路相关蛋白Notch1、NICD、Hes1表达水平。结果与结论:(1)S-BMSCs的增殖活性、成骨分化能力及ADAM10表达水平均显著低于F-BMSCs(均P <0.01);(2)ADAM10过表达后S-BMSCs增殖活性、成骨分化能力及碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素mRNA表达水平和Notch1、NICD、Hes1蛋白表达水平均显著升高(P <0.05);然而,DAPT联合干预可显著抑制ADAM10过表达对S-BMSCs增殖活性和成骨分化能力的促进作用,并抑制Notch信号通路的活化;(3)结果表明,ADAM10在S-BMSCs中低表达,ADAM10过表达可增强S-BMSCs的增殖活性及成骨分化能力,其作用机制可能与激活Notch信号通路有关。

去整合素金属蛋白酶10和高迁移率族蛋白B1在声门型喉癌患者中的表达及预后分析

目的探讨去整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloprotease 10,ADAM10)和高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)与声门型喉癌患者病理特征及预后关系分析。方法回顾性收集2017年3月~2020年12月于南京医科大学附属南京医院确诊及治疗的声门型喉癌患者50例(观察组),另取相对喉癌组织切缘0.5cm以上部位标本作为对照组。观察并比较ADAM10和HMGB1在两组中的阳性表达率,分析其阳性表达与声门型喉癌患者的病理特征关系。单因素分析影响声门型喉癌预后的危险因素,Cox多因素回归分析声门型喉癌患者不良预后的独立危险因素。结果ADAM10和HMGB1在观察组的阳性表达率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。声门型喉癌组织中的ADAM10与淋巴结转移和T分级差异比较有统计学意义,而与年龄、性别、饮酒史、吸烟史、分化程度差异比较无统计学意义(P>0.05);HMGB1与分化程度差异比较有统计学意义(P<0.05),而与年龄、性别、饮酒史、吸烟史、淋巴结转移、T分级差异比较无统计学意义(P>0.05)。单因素分析结果表明,淋巴结转移、T分级、分化程度、ADAM10、HMGB1是患者预后的影响因素。Cox多因素回归分析结果表明,淋巴结转移、T3+T4分级、低分化程度、ADAM10阳性、HMGB1阳性为声门型喉癌患者预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论ADAM10和HMGB1可作为声门型喉癌不良预后的风险评估指标。

解整合素金属蛋白酶10通过介导Wnt/β-catenin信号通路促进子宫内膜癌细胞上皮-间质转化

目的:探讨解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)对子宫内膜癌(EC)细胞上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法:收集84例EC患者的新鲜癌组织及癌旁组织标本,采用qRT-PCR检测癌组织及其癌旁组织中ADAM10 mRNA表达水平。以人EC细胞株HEC-1B作为研究对象,采用ADAM10过表达慢病毒感染HEC-1B细胞,并联合Wnt/β-catenin信号通路特异性抑制剂XAV939进行干预,再将细胞分为空白对照组(blank)、慢病毒阴性对照组(Lv-NC)、ADAM10过表达慢病毒组(Lv-ADAM10)和Lv-ADAM10+XAV939组。采用qRT-PCR检测感染后各组细胞中ADAM10 mRNA表达水平;划痕和Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;Western blot法分析各组细胞中ADAM10及EMT相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达水平。结果:EC患者癌组织中ADAM10 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。与blank组或Lv-NC组比较,Lv-ADAM10组细胞中ADAM10 mRNA和蛋白表达水平以及N-cadherin、Vimentin、β-catenin、Snail、MMP2和MMP9等蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05),而E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),同时细胞迁移和侵袭能力显著增强(均P<0.05)。与Lv-ADAM10组比较,LvADAM10+XAV939组细胞中N-cadherin、Vimentin、β-catenin、Snail、MMP2和MMP9等蛋白表达水平显著降低(均P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05),且细胞迁移和侵袭能力明显降低(均P<0.05)。结论:ADAM10在EC组织中高表达,其过表达可促进HEC-1B细胞的EMT进程,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

解整合素-金属蛋白酶33基因位点多态性与哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征的相关性研究

气道高反应是支气管哮喘的高危因素或是支气管哮喘的前期表现,如果支气管哮喘得不到控制,则会出现气道重塑、肺功能下降,进一步发展出现慢性阻塞性肺疾病的病理改变及临床特点,后期即成为哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征（ACOS）。哮喘和气道高反应性被认为是慢性阻塞性肺疾病（COPD）的危险因素,在我国2013年COPD诊治指南中已明确提出。

去整合素金属蛋白酶10在糖尿病冠状动脉支架内再狭窄中作用的研究

目的:探讨去整合素金属蛋白酶10(ADAM10)在糖尿病冠状动脉(冠脉)支架内再狭窄(ISR)中的作用。方法:在17头糖尿病猪和10头正常猪的冠脉内置入雷帕霉素洗脱支架,6个月后行冠脉造影,留取发生和未发生ISR的冠脉组织,Western blot检测ADAM10表达水平。在人主动脉平滑肌细胞(HASMC)中感染ADAM10的过表达和敲减病毒,BrdU检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移能力。分别用低糖培养基、高糖培养基、晚期糖基化终末产物-牛血清白蛋白(AGE-BSA)、AGE-BSA+AGE受体(RAGE)抗体培养HASMC,实时定量RT-PCR和Western blot检测ADAM10表达水平。结果:在糖尿病组中,未发生ISR和发生ISR的冠脉组织中ADAM10的表达均高于非糖尿病组(3.36±1.27对2.11±2.05,10.48±4.72对6.72±1.36,P均<0.01)。在非糖尿病组和糖尿病组,发生ISR的冠脉组织中ADAM10的表达均高于未发生ISR的冠脉组织(P均<0.01)。BrdU实验显示,在低糖培养基和高糖培养基中,ADAM10过表达的HASMC增殖均明显高于转染空载体的HASMC(2.25±0.07对1.87±0.08,2.47±0.10对2.07±0.10,P均<0.05);而ADAM10敲减的HASMC增殖均明显低于转染空载体的HASMC(1.34±0.10对1.87±0.08,1.46±0.09对2.07±0.10,P均<0.05);ADAM10过表达和ADAM10敲减的HASMC在高糖培养基中的增殖均明显高于低糖培养基(P均<0.05)。细胞划痕实验显示,在低糖培养基和高糖培养基中,ADAM10过表达的HASMC迁移距离均明显大于转染空载体的HASMC[(1.02±0.12)mm对(0.65±0.04)mm,(1.26±0.06)mm对(0.78±0.06)mm,P均<0.05)],而ADAM10敲减的HASMC迁移距离均明显小于转染空载体的HASMC[(0.26±0.06)mm对(90.65±0.04)mm,(0.43±0.14)mm对(0.78±0.06)mm,P均<0.05)];ADAM10过表达和ADAM10敲减的HASMC在高糖培养基中的迁移距离均明显大于低糖培养基(P均<0.05)。与低糖培养基相比,高糖培养基和AGE-BSA中HASMC ADAM10 mRNA和蛋白的相对表达水平均明显升高(P均<0.05);与AGE-BSA相比,AGE-BSA+RAGE抗体中HASMC ADAM10 mRNA和蛋白的相对表达水平均明显降低(P均<0.05)。结论:ADAM10在糖尿病发生ISR的冠脉中表达显著升高,ADAM10高表达促进动脉平滑肌细胞增殖和迁移,高糖环境及AGE均可促进ADAM10的表达,ADAM10可能参与了糖尿病冠脉ISR的发生与发展。

解整合素金属蛋白酶10在重度子痫前期胎盘中的表达及其意义

目的通过对孕妇胎盘组织中解整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10)的检测,探讨ADAM10与子痫前期发病的关系。方法选择2009年9月至2012年3月在北京大学人民医院产科住院分娩的30例重度子痫前期(子痫前期组)和30例正常孕妇(正常妊娠组),采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测两组孕妇胎盘组织中ADAM10mRNA的表达,并采用免疫组化二步法和蛋白质印迹法(Western Blot)检测胎盘组织中ADAM10蛋白的表达。结果 ADAM10表达于胎盘组织的细胞滋养细胞和合体滋养细胞的细胞浆和细胞核中。子痫前期组中ADAM10mRNA及蛋白的表达均明显高于正常妊娠组(P<0.05)。结论重度子痫前期胎盘组织中ADAM10的过度表达可能与子痫前期的发生和发展有关。

去整合素金属蛋白酶10(ADAM10)在喉癌组织中的表达和临床意义

目的研究去整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloprotease 10,ADAM10)在喉癌中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR法(n=21)与组织芯片免疫组化法(n=62)检测ADAM10在喉癌组织与正常黏膜组织中的表达情况,并分析其差异。结果实时荧光定量RT-PCR结果显示喉癌组织中ADAM10表达显著高于正常黏膜组织中的表达(P<0.001),其倍数为2.691±1.568。组织芯片结果显示ADAM10在喉癌组织中阳性面积百分比为15.243±7.824,在正常黏膜组织中则为1.887±1.918,喉癌组织中ADAM10的表达量高于正常黏膜组织(P<0.001)。ADAM10的表达与组织学分级相关,与其他临床参数无关。结论 ADAM10在喉癌组织中有高表达,其表达与肿瘤组织学分级相关。

解整合素-金属蛋白酶33基因F1、L1、T1位点多态性与维吾尔族成人哮喘的相关性研究

目的探讨解整合素-金属蛋白酶33基因（ADAM33）F1、L1、T1位点单核苷酸多态性与新疆维吾尔族成人支气管哮喘的相关性。方法采用限制性片段长度多态性方法分析206例维吾尔族成人支气管哮喘患者（哮喘组）与140例维吾尔族成人健康体检者（对照组）ADAM33基因F1、L1、T1位点单核苷酸多态性,并对其中部分进行基因检测验证。结果两组ADAM33基因T1位点3种基因型分布差异有统计学意义（χ^2=10.472,P=0.005）,等位基因频率分布差异有统计学意义（χ^2=11.192,P=0.001,OR=1.883,95%CI=1.296～2.737）。与AA基因型比较,G等位基因的携带者（AG、AG＋GG）基因型均能明显增加哮喘发生的危险（P分别为0.003、0.009,OR分别为3.889、1.815,95%CI分别1.523～9.928、1.156～2.850）。结论 ADAM33基因T1位点单核苷酸多态性与新疆维吾尔族成人支气管哮喘具有明显相关性。

胰腺癌患者解整合素样金属蛋白酶10与吉西他滨化疗敏感性的关系分析

目的研究胰腺癌患者肿瘤组织中解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)水平与吉西他滨化疗敏感性的关系。方法选取四川大学华西医院2015年1月至2017年1月胰腺癌患者79例,采用吉西他滨化疗前,利用免疫组织化学染色法对癌组织样本ADAM10蛋白表达水平进行检测,分析ADAM10蛋白表达与患者临床病理参数、化疗效果和预后的关系。结果ADAM10蛋白在胰腺癌患者中的总阳性率为98.74%,其中阳性高表达65.82%;其表达水平与患者分化等级、浸润分期、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。化疗效果显示,吉西他滨对ADAM10阳性高表达组患者治疗总有效率为42.31%,明显低于ADAM10低表达组患者的66.67%(P<0.05);Pearson分析表明,ADAM10表达与胰腺癌吉西他滨化疗敏感呈负相关(r=-0.457,P<0.001)。两年随访显示,ADAM10蛋白高表达组患者的中位生存时间、无病生存率、总生存率明显低于低表达组(P<0.05)。结论胰腺癌组织中ADAM10蛋白表达水平可以作为吉西他滨化疗敏感性的生物标志。

散结镇痛理气方对原发性肝癌中人解整合素样金属蛋白酶10表达影响的实验研究

目的观察散结镇痛理气方对原发性肝癌大鼠体内人解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)表达的影响并探讨其临床效用。方法90只大鼠随机分为正常组、模型组及给药组,每组30只,模型组及正常组以DEN诱导构建大鼠原发性肝癌模型,给药组予散结镇痛理气方汤剂,正常组及模型组则予等量生理盐水灌胃。观测比较肝组织的病理学特征及ADAM10及相关因子在各组大鼠肝脏组织中的表达。结果模型组、给药组ADAM10的阳性表达率显著高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05),但给药组在给药干预后则显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),且有肿瘤质量体积的缩减,差异有统计学意义(P<0.05),肝细胞变性坏死亦有一定程度改善。结论散结镇痛理气方通过对肝癌组织中ADAM10的表达抑制,阻断肝癌形成与发展进程。

血清C-反应蛋白及去整合素金属蛋白酶10水平与2型糖尿病合并慢性心力衰竭的关系研究

目的探讨血清C-反应蛋白(HS-CRP)及去整合素金属蛋白酶10(ADAM10)水平与2型糖尿病合并慢性心力衰竭的关系。方法选择慢性心力衰竭患者322例,其中2型糖尿病合并慢性心力衰竭患者146例,非2型糖尿病合并慢性心力衰竭患者108例,选择单纯性2型糖尿病患者68例作为对照组。比较2型糖尿病合并慢性心力衰竭组与非2型糖尿病合并慢性心力衰竭组患者C-反应蛋白及去整合素金属蛋白酶10水平的变化。结果慢性心力衰竭组较单纯性糖尿病组HS-CRP[(7.262±0.263)比(5.514±0.359)mmol/L]及ADAM10[(7.80±0.38)比(4.59±0.24)mmol/L]显著增高(P<0.05),2型糖尿病合并慢性心力衰竭组与单纯性2型糖尿病组HS-CRP及ADAM10显著增高(P<0.05)。结论C-反应蛋白及去整合素金属蛋白酶10在2-型糖尿病合并慢性心力衰竭患者发病中具有重要作用。

胎儿皮肤β1整合素与基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2表达的意义

目的:探讨胎儿皮肤中β1整合素与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)表达的意义。方法:选取11～25周胎儿背部皮肤25例,采用苏木精-伊红染色、免疫组化和反转录(RT)-PCR分别从蛋白质、mRNA水平检测β1整合素与MMP-2及TIMP-2的表达情况。结果:13～21周胎儿的皮肤表皮由3层逐渐发展为4层,毛囊和皮脂腺等皮肤附属结构由开始发育到结构的形成,基底层细胞β1整合素均为阳性,表皮外层角蛋白(K)10染色阳性细胞数逐渐增多,胎龄11～13周与23～25周时相比差异有统计学意义(P<0.01)。MMP-2与TIMP-2表达水平均呈逐渐升高趋势,两种基因在胎龄11～13周与23～25周时相比差异均有统计学意义(P=0.000)。结论:人胎儿期表皮基底层增殖细胞主要为表皮干细胞,随胎龄增加,终末分化细胞的比例明显增高。MMP-2和TIMP-2对皮肤的生长发育、结构功能的维持具有重要的调节作用。

高糖增加大鼠肺微血管内皮细胞基质金属蛋白酶10基因表达

目的 研究葡萄糖对培养血管内皮细胞表达的影响。方法 大鼠肺微内皮细胞在高浓度糖(高糖)和正常浓度糖培养基中培养24 h,作基因芯片分析。结果 在超过4000个基因芯片显示的基因中,高糖引起509个基因表达增加,961基因表达减少。其中细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)10基因表达增加6.06倍,Wilcoxon配对符号秩检验P=0.0001。结论 MMP10在高糖环境下培养的大鼠肺内皮细胞表达增加,可能对糖尿病慢性并发症的形成过程起一定作用。

去整合素-金属蛋白酶23蛋白在结肠癌组织中的表达及其与生物学行为的关系

结肠癌是临床最常见的消化道恶性肿瘤之一，其发生、发展和转移是一个多步骤、多阶段和多基因共同参与的病理变化过程，其中癌基因的激活和抑癌基因的失活是其重要分子病理作用机制。去整合素一金属蛋白酶23（ADAM23）是一种新发现的抑癌基因，近年来研究发现ADAM23基因的表达下降或活性缺失参与了恶性肿瘤发生和发展过程，在多种癌细胞的生长、分化和调控中起着负性调控功能。本研究旨在探讨ADAM23蛋白在结肠癌及癌旁正常结肠组织中的表达差异，并分析ADAM23蛋白的表达与结肠癌患者的生物学行为的关系。现报告如下。

基质金属蛋白酶-10基因敲除对植入肺腺癌细胞株A549的裸鼠皮下移植瘤生长及细胞凋亡的影响

目的探讨基质金属蛋白酶-10(MMP-10)基因敲除对植入肺腺癌细胞A549的裸鼠皮下移植瘤生长及细胞凋亡的影响。方法将人肺腺癌细胞A549细胞分为实验组和对照组,分别含MMP-10基因低表达序列、无用RNA序列。将12只裸鼠随机分为实验组及对照组各6只,皮下接种相应的细胞悬液。每2~3 d测量肿瘤大小,绘制肿瘤增长曲线。25 d后处死裸鼠,取皮下肿瘤,比较两组裸鼠瘤体体积,并通过流式细胞术检测两组瘤体细胞凋亡情况。结果两组肿瘤体积均随时间延长而增长,且对照组肿瘤增长速度较实验组快,实验结束时对照组瘤体体积为(920.12±196.77)cm^3,大于实验组的(462.33±188.11)cm^3(P<0.05)。实验组凋亡晚期细胞和坏死细胞比例为(20.46±2.29)%,高于对照组的(1.22±0.21)%(P<0.05)。结论 MMP-10在肺腺癌细胞株A549裸鼠皮下移植瘤的生长过程中起重要作用,敲除MMP-10基因可促进癌细胞凋亡、坏死。

F10基因过表达及沉默对绒癌细胞系JAR侵袭相关蛋白酶表达的影响

目的 F10基因是本研究前期发现在葡萄胎中高表达的新基因,本文为明确F10过表达和沉默对绒癌细胞系JAR侵袭性的影响,探讨F10基因与部分侵袭相关蛋白的关系。方法通过细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的绒癌细胞系JAR。取SPF级裸鼠30只,随机均分为F10过表达组、未处理组、F10沉默组,每组10只,依次接种F10基因过表达的JAR细胞、未处理的JAR细胞和F10基因沉默的JAR细胞株,于接种5周后处死裸鼠收获皮下肿瘤,采用免疫组织化学及Western blot检测方法,比较不同组瘤体组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)及金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1),血浆纤溶酶原激活物抑制因子(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)等侵袭相关蛋白酶的表达差异。结果免疫组化法检测结果显示:F10、MMP-2、8、11、16、19在F10过表达组、未处理组、F10沉默组中间的表达依次递减,差异有统计学意义(P<0.05),TIMP-1、PAI-1在F10过表达组中分别为0.118±0.029、0.174±0.005,在未处理组中分别为0.214±0.028、0.289±0.009,在F10沉默组中分别为0.430±0.017、0.517±0.074,3组间的表达差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,F10、MMP-2、8、11、16、19蛋白在F10沉默组、未处理组、F10过表达组依次递增(P<0.001),而TIMP-1及PAI-1蛋白表达水平依次递减(P<0.001)。结论 F10通过上调MMP-2、8、11、16、19的表达,下调TIMP-1、PAI-1表达,参与调节绒癌细胞的增殖,从而可能参与调节绒癌的侵袭和转移。