HPLC法测定蒙药嘎日迪-13味丸中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯、去氢木香内酯含量

目的:HPLC法同时测定蒙药嘎日迪-13中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯和去氢木香内酯含量。方法:甘草苷核甘草酸铵色谱条件:迪马色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.4%磷酸(B)梯度洗脱,0-10 min(16%-18%A),10-30 min(18%A),30-40 min(18%-27%A),40-85 min(27%-45%A),85-86 min(45%-16%A);柱温:30℃;检测波长:237 nm;流速:1 m L·min-1。木香烃内酯和去氢木香内酯色谱条件:迪马色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(65:35),检测波长:225 nm,柱温30℃,流速1.0 m L·min-1,结果:甘草苷、甘草酸铵线性范围分别为0.10-1.2μg(r=0.999 9)、0.341-4.092μg(r=1.000 0);平均回收率分别为97.07%和100.13%,RSD分别为1.00%和1.84%(n=5)。木香烃内酯和去氢木香内酯线性范围分别为0.12-1.2μg(r=1.000 0),0.106-1.06μg(r=1.000 0);平均回收率分别为98.44%和98.90%,RSD分别为2.21%和3.38%。结论:该方法专属性强,重复性好,可用于蒙药嘎日迪-13中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯和去氢木香内酯含量测定。

反相高效液相色谱法同时测定归脾丸(浓缩丸)中甘草苷、阿魏酸、甘草酸铵、去氢木香内酯的含量

目的建立反相高效液相色谱法同时测定归脾丸(浓缩丸)中甘草苷、阿魏酸、甘草酸铵、去氢木香内酯的含量。方法色谱柱为C18柱(Gemini NX 250 mm×4.6 mm,5μm),以0.05%甲酸(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长237 nm。结果建立了同时检测归脾丸(浓缩丸)中甘草苷、阿魏酸、甘草酸铵、去氢木香内酯含量测定方法,各阴性样品无干扰,且样品分离良好,无杂质峰影响,并进行了方法学验证。结论本方法快捷可行,灵敏度、线性、专属性等均达到含量测定方法要求,适宜于归脾丸中多指标成分的同时分析和质量控制。

新型去氢木香内酯/郁金香素A拼接螺环氧化吲哚的合成及其抗白血病活性

开发天然产物优势骨架的多样性衍生物库是天然有机化学的一个重要课题。本文以脯氨酸、靛红和去氢木香内酯/郁金香素A为起始原料,通过[3+2]环加成反应,N-氧化反应和分子内1,2-迁移导致的扩环反应,得到8个未见文献报道的新型目标产物去氢木香内酯/郁金香素A拼接螺环氧化吲哚(4a~4h),总产率43%~63%,dr值>20∶1,其结构经^(1)H NMR,^(13)C NMR和HR-MS(ESI-TOF)表征,化合物4e的相对构型通过单晶X-射线衍射进一步进行了确定。采用MTT法研究了(4a~4h)对人白血病细胞(K562)的体外抗肿瘤活性。结果表明:去氢木香内酯拼接螺环氧化吲哚(4b,4c)和郁金香素A拼接螺环氧化吲哚(4f,4g)对K562具有一定的抑制活性。

高效液相色谱法同时测定清热祛瘀液中丹皮酚、木香烃内酯、去氢木香烃内酯的含量

目的建立同时测定清热祛瘀液中丹皮酚、木香烃内酯和去氢木香烃内酯的反相高效液相色谱法。方法采用CAPCELL PAK C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(70:30),流速1.0 ml/min,检测波长:215 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果丹皮酚在浓度范围0.7541~60.3291μg/ml(r=0.9996)、木香烃内酯在浓度范围1.1563~92.5074μg/ml(r=0.9999)、去氢木香烃内酯在浓度范围1.3818~110.5445μg/ml(r=0.9998),线性良好,三种物质检出限(LOD)为0.01~0.04μg/ml、定量限(LOQ)为0.03~0.13μg/ml;三种物质平均回收率为97.0%~103.5%,回收率RSD为1.3%~1.8%(n=6)。结论该方法操作简便,重复性好,准确度高,可用于清热祛瘀液的含量测定及质量控制。

去氢木香内酯抗肿瘤作用机制研究进展

去氢木香内酯是从菊科云木香属植物木香Aucklandia lappa Decne.的根部提取的一种倍半萜内酯类化合物,是木香的主要活性成分之一,有抗菌、消炎、抗病毒、抗溃疡、抗糖尿病和抗肿瘤等药理活性。近年,去氢木香内酯在抗肿瘤领域引起了广泛关注。研究发现,去氢木香内酯能抑制肿瘤细胞的增殖和迁移能力,对肺癌、宫颈癌等癌症有抑制作用。其抗肿瘤机制主要包括抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞侵袭和迁移、诱导肿瘤细胞凋亡和逆转肿瘤细胞多药耐药。本文对近年来去氢木香内酯的抗肿瘤作用机制进行了详细综述,旨在为该类药物在临床肿瘤治疗中提供新的理论支持、新的思路以及参考。

UPLC-MS/MS法测定心可舒胶囊中木香烃内酯与去氢木香内酯的含量

目的 建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定心可舒胶囊中木香烃内酯与去氢木香内酯的含量。方法 以Waters ACQUITY UPLC?BEH C18(1.7μm×2.1 mm×100 mm)为色谱柱,流动相为0.1%甲酸-乙腈(梯度洗脱),流速为0.3 ml/min,柱温35℃,进样量2μl;质谱采用电喷雾离子源(ESI)、正离子扫描模式,以多反应监测模式(MRM)进行数据采集,木香烃内酯的定量离子对为m/z 233→187,去氢木香内酯的定量离子对为m/z 231→185。结果 木香烃内酯与去氢木香内酯分别在0.0430~2.1498μg/ml、0.0439~2.1970μg/ml浓度范围内线性关系良好(r≥0.9913),平均加标回收率为102.60%和95.56%,RSD分别为3.6%与2.3%。3批样品木香烃内酯的含量范围为5.267~5.574 mg/g,去氢木香内酯的含量范围为4.822~5.191 mg/g。结论 所建方法能有效测定心可舒胶囊中木香烃内酯与去氢木香内酯的含量,可为完善该制剂的质量标准提供借鉴。

去氢木香烃内酯通过抑制SREBP2/PCSK9表达改善非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的实验研究

目的:研究去氢木香烃内酯改善非酒精性脂肪肝(NAFLD)脂代谢的作用机制。方法:使用斯泼累格·多雷(SD)大鼠构建NAFLD模型,并用去氢木香内酯干预,记录大鼠体质量、肝湿重、肝指数等指标;苏木精-伊红(HE)染色及马松(Masson)染色观察肝脏病理变化;比色法检测甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)等指标;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹(WB)实验检测胆固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)、前蛋白转化酶枯草溶菌素9蛋白(PCSK9)表达情况。结果:成功构建了大鼠NAFLD模型,HE及Masson染色显示模型组大鼠肝脏脂肪变性和炎性细胞浸润显著,去氢木香烃内酯干预后缓解。与模型组比较,药物低剂量组、高剂量组及阳性药物组肝指数、TC、TG、AST、ALT、MDA水平降低,SOD水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模型组肝脏组织中SREBP2基因及SREBP2、PCSK9蛋白表达均有所升高(P<0.05);而低剂量给药组、高剂量给药组、阳性药物组肝脏组织中SREBP2基因及SREBP2、PCSK9蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,低剂量给药组、高剂量给药组、阳性药物组肝脏组织中SREBP2基因及SREBP2、PCSK9蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:去氢木香烃内酯能显著减轻NAFLD大鼠脂代谢异常,与抑制SREBP2和PCSK9表达相关,为NAFLD治疗提供新理论依据。

HPLC测定肉桂、木香中桂皮醛、木香烃内酯和去氢木香内酯

目的:建立以高效液相色谱法测定肉桂、木香CO2超临界萃取物中桂皮醛、木香烃内酯和去氢木香内酯含量的方法。方法:色谱柱为Agilent HC-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长210nm,流速1.0mL/min,柱温30℃。结果:桂皮醛进样量在148.5～1732.5ng与峰面积有良好的线性关系,平均回收率为99.65%,RSD为0.72%;木香烃内酯进样量在69.42～809.9ng与峰面积有良好的线性关系,平均回收率为99.57%,RSD为1.28%;去氢木香内酯进样量在70.32～820.4ng与峰面积有良好的线性关系,平均回收率为98.90%,RSD为0.81%。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于肉桂、木香CO2超临界萃取物的质量控制。

近红外光谱法快速测定木香中木香烃内酯与去氢木香内酯的含量

本文主要研究近红外光谱法在快速测定木香药材中木香烃内酯与去氢木香内酯含量的应用。采用近红外漫反射光谱法采集木香的近红外光谱,以HPLC测量值为参考值,运用偏最小二乘法(PLS)建立木香烃内酯与去氢木香内酯含量的定量模型,并用未知样品验证该模型。结果表明所建定量模型的校正集内部交叉验证相关系数(R2)、校正均方差(RMSEC)和内部交叉验证均方差(RMSECV)分别为0.9783、0.161和0.374;经外部验证的预测相关系数(r2)和预测均方差(RMSEP)分别为0.9546和0.162。该方法操作简便,测定快速,结果准确,无污染,可用于木香药材中木香烃内酯与去氢木香内酯含量的快速测定。

提取木香中木香烃内酯及去氢木香内酯影响因素的初步研究

目的考察溶媒、温度、加热时间对木香活性成分木香烃内酯和去氢木香内酯的影响。方法用水和乙醇回流提取木香,分别将其提取物控制在不同的温度和时间范围内加热,用HPLC法测定木香烃内酯和去氢木香内酯的含量变化。结果醇提取物中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量远远高于水提取物,以乙醇为溶媒,两成分含量变化小;以水为溶媒,随着温度升高,加热时间延长,两成分下降明显,尤其是木香烃内酯。结论溶媒、温度对木香烃内酯影响最为显著,时间因素次之,在含有木香的制剂工艺制备过程中要充分考虑这些影响因素,最大程度地保留有效成分。

HPLC测定胃肠康胶囊中芍药苷、木香烃内酯、去氢木香内酯、橙皮苷及升麻苷的含量

目的：建立胃肠康胶囊（白芍、木香、防风等）的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法在同一色谱条件（色谱柱：phenomenex Luna 5μ C18（2）100A，流动相：乙腈-水梯度洗脱，流速：0．8mL／min，柱温：30℃）下对制剂中芍药苷、木香烃内酯、去氢木香内酯、橙皮苷、升麻苷进行定量测定。结果：木香烃内酯在0．102～2．04μg范围内线性关系良好，r=0．9999，平均回收率101.43％，RSD=0．87％；去氢木香内酯在0．0991～1．982μg范围内线性关系良好，r=0．9999，平均回收率100．46％，RSD=1．34％；芍药苷在0．15～3．0μg范围内线性关系良好，r=0．9999，平均回收率100．14％，RSD=1．19％；橙皮苷在0．948～1．896μg范围内线性关系良好，r=0．9999，平均回收率101．09％，RSD=1．72％；升麻苷在0．0932～1．864μg范围内线性关系良好，r=0．9999，平均回收率99．98％，RSD=1．14％。结论：所建立的方法可在同一色谱条件下检测出5个成分，可用于该制剂的质量控制。

丛枝菌根真菌对云木香根产量及其木香烃内酯和去氢木香烃内酯含量的影响

目的:研究丛枝菌根(AM)真菌在人工栽培条件下对云木香根产量及其有效成分含量的影响。方法:采用室温盆栽方法,设不种接AM真菌组为CK组,设接种阿密蔻菌根组为AM组,每组5个重复,每个重复1盆,共5盆,每盆栽种云木香3株。采用文献方法计算菌根侵染率和侵染强度,采用称重法测定云木香根产量,采用高效液相色谱法测定木香烃内酯、去氢木香烃内酯的含量。结果:AM组与CK组的侵染率分别为(86.22±3.28)%、0(P<0.05),侵染强度分别为(52.12±2.14)%、0(P<0.05);两组间根增质量率和木香烃内酯、去氢木香烃内酯及总内酯的含量比较差异有统计学意义(P<0.05)。与CK组比较,AM组云木香根产量提高了(50.96±2.12)%,云木香根中木香烃内酯、去氢木香烃内酯及总内酯的含量分别增加了65.55%、97.42%、85.42%,内酯类成分间的结构比有所改变。结论:外源性AM真菌的加入能明显提高云木香根的品质。

拈痛丸中木香烃内酯与去氢木香内酯含量的HPLC法测定

目的:建立拈痛丸中木香烃内酯与去氢木香内酯含量测定的方法。方法:采用RP-HPLC法,Diamonsil-C18柱,甲醇-水(67∶33)为流动相;流速1.0 ml/min;检测波长225 nm;柱温30℃。结果:木香烃内酯的平均回收率为98.8%,方法精密度(RSD)为1.62%(n=6);去氢木香内酯的平均回收率为100.6%,方法精密度(RSD)为1.46%(n=6)。结论:所建方法可用于拈痛丸中木香烃内酯与去氢木香内酯的含量测定。

HPLC法同时测定利胆排石片中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量

目的建立以HPLC法同时测定利胆排石片中木香烃内酯和去氢木香内酯含量的方法。方法色谱柱：依利特SinoChrom ODS—BP柱（4．6mm×200mm，5μm），流动相：乙腈-水（体积比为65：35），流速：1．0mL·min^-1，检测波长：225nm，柱温：室温。结果木香烃内酯和去氢木香内酯的质量浓度分别在6．160—123．200mg·L“和4．600—92．000mg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数分别0．9997和0．9996；平均回收率分别为100．6％和99．9％，RSD分别为1．0％和0．9％。结论本方法可作为利胆排石片的质量控制方法之一。

高效液相色谱法测定调经活血片中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量

目的建立高效液相色谱法测定调经活血片中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量方法。方法Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸溶液(65∶35);检测波长:225 nm。结果木香烃内酯和去氢木香内酯的平均回收率分别为101.6%和98.4%,RSD(n=6)分别为2.34%和2.27%。结论方法简便、准确,可作为调经活血片的定量控制方法。

去氢木香内酯抑制人肝癌细胞系HepG2增殖及促凋亡

目的研究去氢木香内酯(Dehy)对人肝细胞癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,并对分子机制进行一定的探索。方法将HepG2细胞分为对照组、Dehy 10、20、30、40及50μmol/L组。MTT法检测细胞增殖;Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡;Western blot检测p-IκBα、IκBα、nuclear-p65和total-p65蛋白表达。结果与对照组相比,Dehy明显呈剂量与时间依赖性抑制HepG2细胞的增殖,并显著诱导HepG2细胞凋亡(P<0.05或P<0.01);p-IκBα、nuclear-p65蛋白表达水平明显下调(P<0.05或P<0.01),IκBα蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01),而total-p65未见明显变化。结论Dehy抑制HepG2细胞增殖和诱导凋亡,其作用机制可能与下调NF-κB通路有关。

高效液相色谱法测定沉香曲中羌活醇、异欧前胡素、木香烃内酯和去氢木香内酯的含量

目的 建立HPLC法测定沉香曲中羌活醇、异欧前胡素、木香烃内酯和去氢木香内酯的含量。方法 色谱柱为Hypersil C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流速：0.9 mL min-1;检测羌活醇和异欧前胡素的流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液（67：33）,检测波长：312 nm;检测木香烃内酯和去氢木香内酯的流动相为乙腈-甲醇-1%冰醋酸溶液（45：24：31）,检测波长：225 nm。结果 羌活醇和异欧前胡素进样量分别在0.018 6～0.372 0μg（r=0.999 2）、0.011 2～0.224 0μg（r=0.999 1）与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为96.6%、98.0%,RSD分别为1.6%、1.2%（n=6）;木香烃内酯和去氢木香内酯进样量分别在0.041 4～0.828 0μg（r=0.999 5）、0.010 8～0.216 0μg（r=0.999 7）与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.0%、96.2%,RSD分别为1.4%、1.1%（n=6）。结论 该方法测定结果准确性强、灵敏度高、重复性好。

去氢木香内酯对实验性大鼠肝损伤的保护作用

目的:研究去氢木香内酯对大鼠肝损伤模型的保护作用。方法:以氨基半乳糖、四氯化碳建立大鼠肝损伤模型,分别设正常对照组、模型组、阳性药对照组(0.2 mg/kg)、去氢木香内酯高、中、低剂量组(45 mg/kg,15 mg/kg,5 mg/kg),测定各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、天门冬酸氨基转移酶(Aspartate Aminotransferase,AST)活性及肝组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。另以HE、Masson染色,对各组大鼠肝脏作病理检查。结果:与模型组相比,去氢木香内酯可显著降低大鼠血清ALT、AST的活性及MDA的含量(P<0.05),减轻大鼠肝脏坏死性病理改变。结论:去氢木香内酯对大鼠肝脏损伤有较好的保护作用。

HPLC法同时测定好胃来软胶囊中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量

建立同时测定好胃来软胶囊中木香烃内酯和去氢木香内酯含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Dikma C18,流动相为乙腈-水（V/V,55∶45）,流速为1.0 ml/min,检测波长为225 nm,柱温为25℃,进样量为10μl。结果：木香烃内酯、去氢木香内酯检测质量浓度线性范围分别为24.00-108.00μg/ml（r=0.999 7）、20.88-93.98μg/ml（r=0.999 8）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈1%;加样回收率分别为98.71%-100.00%（RSD=0.25%,n=6）、96.88%-99.18%（RSD=0.40%,n=6）。结论：该方法操作简便、稳定性和重复性好,可用于好胃来软胶囊中木香烃内酯和去氢木香内酯含量的同时测定。