对黄豆苷原具转化作用的耐氧突变株Aeroto-AUH-JLC140未知代谢产物分离、鉴定及抗氧化活性测定

【目的】与原出发菌株AUH-JLC140相比,耐氧突变株Aeroto-AUH-JLC140在其生长过程中产生一种未知物质,且该未知物质的产生与添加底物黄豆苷原无关。对该未知物质进行分离纯化和结构鉴定,并测定其产生动态及抗氧化活性。【方法】利用高效液相色谱对未知物质进行分离,经紫外吸收图谱、质谱、核磁共振氢谱和碳谱等分析,对未知物质进行结构鉴定;通过1,1-二苯基-2-苦味酰基自由基(DPPH)清除试验测定其抗氧化活性。【结果】Aeroto-AUH-JLC140产生的未知物质被鉴定为吲哚,接种后15 h菌株产吲哚最高,所产吲哚量为19.89 mg/L。浓度为0.2 mmol/L(即23.40 mg/L)的吲哚除对DPPH自由基具有明显清除作用外,还能有效降低脑心浸液(BHI)液体培养基的氧化-还原电位。【结论】耐氧突变株Aeroto-AUH-JLC140产生的未知代谢产物为吲哚,菌株通过产生吲哚降低培养基氧化-还原电位,进而为该菌株的生长提供适宜的低氧微环境。

兼性肠球菌Enterococcus hirae AUH-HM195对黄豆苷原的开环转化

【目的】从褐马鸡粪样中分离对大豆异黄酮黄豆苷原具有转化作用的功能微生物菌株。【方法】在厌氧工作站内对褐马鸡新鲜粪样进行梯度稀释后涂板,从板上挑取单菌落与底物黄豆苷原厌氧混合培养,用高效液相色谱检测底物被转化情况。【结果】分离出一株对黄豆苷原具开环转化作用的革兰氏阳性兼性好氧菌株AUH-HM195(EU919863),经BLAST比对,该菌株的16S rDNA基因全序与肠球菌属菌株Enterococcus hirae(DSM20160)的相似性为100%。根据保留时间、代谢产物最大紫外吸图谱以及核磁共振氢谱和碳谱等分析结果,将菌株Enterococcu shirae AUH-HM195降解黄豆苷原的代谢产物确定为去氧甲基安哥拉紫檀素。纯化后的代谢产物在手性柱上出现两个物质峰,其对映体过量率为66.9%。【结论】细菌菌株Enterococcus hirae AUH-HM195为国内外首次报道的对黄豆苷原具有开环转化作用的肠球菌属菌株,同时也是第一个报道的对大豆异黄酮具有转化作用的兼性微生物菌株。