14-去氧穿心莲内酯/β-环糊精包合作用的研究

目的研究β-环糊精对14-去氧穿心莲内酯的包合作用。方法采用微波辅助饱和水溶液法制备14-去氧穿心莲内酯-β-环糊精包合物,紫外分光光度法测定包合物的包合常数,并确定14-去氧穿心莲内酯β-环糊精的包合比例,红外分光光度法及核磁共振法确证包合物的形成。结果14-去氧穿心莲内酯与β-环糊精形成了包合物,包合常数为1315.789mol·L-1,包合比例为1∶1。结论β-环糊精可以包合14-去氧穿心莲内酯,且包合效果较好。

超滤法和HPLC法测定14-去氧穿心莲内酯的血浆蛋白结合率

目的测定14-去氧穿心莲内酯在大鼠与人血浆中的蛋白结合率。方法超滤法和HPLC法测定14-去氧穿心莲内酯在大鼠与人血浆中的血浆蛋白结合率。结果 14-去氧穿心莲内酯与大鼠和人血浆中的平均血浆蛋白结合率分别为(93.88±2.16)和(95.55±0.83)%。结论 14-去氧穿心莲内酯与大鼠和人血浆蛋白均具有很强的结合能力,而且无明显的浓度依赖性。

去氧穿心莲内酯的大鼠肠吸收特征研究

目的检测并分析去氧穿心莲内酯的油水分配系数和大鼠肠道吸收特性。方法采用摇瓶法和大鼠在体肠灌流模型,运用UPLC法测定去氧穿心莲内酯的油水分配系数、化学生物稳定性及其在肠灌流液和胆汁中的含量。结果去氧穿心莲内酯在pH=6.5的缓冲液的油水分配系数Log P=1.45±0.12,其化学和生物稳定性均良好;在十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收率分别为30.29%、28.39%、22.04%和34.63%;去氧穿心莲内酯胆汁排泄量为灌流药物总量的0.146%。结论去氧穿心莲内酯在大鼠的各肠段均有吸收,不同肠段吸收率无显著性差异。

14-去氧穿心莲内酯-β-环糊精包合机制的研究

目的从包合比例、主客体分子间相互作用、包合部位和包合稳定性方面研究阐明14-去氧穿心莲内酯和β-环糊精形成包合物的机制。方法采用差示热分析法确证包合物的形成,紫外法测定包合常数并计算热力学常数,IR、1H-NMR确证包合部位。结果包合常数(Ka)值为1 292.631 L/mol;包合过程ΔG=-16.854 8;ΔH=-25.532;ΔS=-0.029 12。由IR和1H-NMR可以看出包合物中14-去氧穿心莲内酯五元内酯环及十氢萘环部分发生了变化。结论形成包合物的主客体比例为1∶1,范德华力在包合过程中起主要作用,包合部位为十氢萘环及五元内酯环,形成的包合物常温下比较稳定。

两个穿心莲内酯苷的波谱学研究

利用柱色谱对穿心莲地上部分的提取物进行分离,得到3,14-二去氧穿心莲内酯苷和14-去氧穿心莲内酯苷。利用核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)以及双量子滤波相关谱(DQFCOSY)、总相关谱(TOCSY)、异核多量子相干谱(HMQC)、异核多键相关谱(HMBC),解析这两个化合物的结构。确定了1H-NMR的氢信号和13C-NMR的碳信号的归属,并且用NOESY对3,14-二去氧穿心莲内酯苷的立体结构进行了研究。

反相色谱法快速测定3种穿心莲内酯含量

利用高效液相色谱法测定穿心莲叶及浸膏中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯含量 ,采用 WatersSymm etryshield C18色谱柱及甲醇提取方法。结果表明 ,穿心莲内酯在 0 .14～ 1.31μg范围内呈线性 ,脱水穿心莲内酯与去氧穿心莲内酯分别在 0 .14～ 1.2 9μg、0 .14～ 1.2 2μg范围内呈线性 ,相关系数 r分别为 0 .9976、0 .9913、0 .9985 ,该法可用于快速测定 3种内酯含量 ,对于穿心莲的质量评价有一定参考作用。

HPLC-ELSD测定穿心莲超分子提取物中三种穿心莲内酯的含量

目的建立穿心莲超分子提取物中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯和14-去氧穿心莲内酯的含量测定方法。方法HPLC—ELSD；色谱柱：Agilent ZORBAX Extent—C18（4．6mm×250mm，5μm）；检测器：蒸发光散射检测器（ELSD）；流动相：乙腈-水，线性梯度洗脱，流速0．8mL·min^-1，柱温：40℃。结果穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯和14-去氧穿心莲内酯线性范围分别为0．920～9．200μg（r=0．9996），0．397～3．952μg（r=0．9993）和0．395～3．936μg（r=0．9993）；三者的回收率分别为98．9％、97．8％和98．4％，RSD分别为1．1％、2．2％和2．1％（n=6）。结论本法简便，快捷，结果真实可靠，可用于穿心莲超分子提取物穿心莲内酯等有效成分的含量测定。

UPLC特征图谱及指标成分定量测定法评价穿心莲提取物质量

目的：利用UPLC法测定穿心莲提取物中穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量，同时建立穿心莲提取物的特征图谱，为其质量的全面评价提供依据。方法：采用Waters ACQUITY UPLCBEH—C18色谱柱（2．1mm×50mm，1．7μm）；以乙腈（A）-水（B）为流动相，梯度洗脱（0～2min，20％～25％A；2～5min，25％-35％A；5～7min，35％A；7～10min，35％～55％A）；流速为0．5mL／min；检测波长为220nm；柱温为室温；进样量1tzL。结果：穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯分别在6．3～202．0Ixg／mL、3．4—108．8斗g／mL、3．8—120．8μg／mL、12．0—384．0斗g／mL内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率在97．2％-103．9％，RSD均小于3．0％（n=6）；在特征图谱研究中，以穿心莲内酯为参照峰，标定了7个共有峰，指认了其中4个峰，指纹图谱与对照图谱相似度均大于0．9。结论：该方法简便、快速、准确，为穿心莲提取物的生产和储存提供了质量评价依据。

基于体内外相关性的穿心莲片内酯成分溶出度测定条件的筛选

为提高穿心莲片的质量控制水平,建立与体内吸收具有良好相关性的体外溶出度测定方法,本试验以穿心莲片中的活性内酯类成分为研究对象,首先采用HPLC法测定了穿心莲片中穿心莲内酯、新穿心莲内酯、14-去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯在不同pH值溶出介质(pH 1.0盐酸、pH 4.5乙酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液和水)及不同转速(50、75和100 r/min)条件下的溶出曲线;然后采用LC-MS/MS法测定Beagle犬口服穿心莲片后4种活性内酯类成分在不同时间点的血药浓度。利用Phoenix软件分别拟合穿心莲片中4种内酯的体外溶出和体内吸收过程,考察不同条件所得的体外溶出率与体内吸收分数的相关性,以确定与体内吸收具有最好相关性的体外溶出度测定条件。结果显示,4种穿心莲内酯在以pH 4.5乙酸盐缓冲液为溶出介质、转速100 r/min条件下测得的溶出率与体内吸收分数的相关性最佳,表明该条件为评价穿心莲片体外溶出的合理条件,可用来评价穿心莲片的质量。

玄参的化学成分研究

利用正、反相硅胶以及各种色谱技术进行分离,经理化性质和光谱分析鉴定中药玄参(Scrophularia ningpoensis)有效成分。从玄参(S.ningpoensis)根的乙醇提取物中分离了8个化合物,分别鉴定为14-去氧-12(R)-磺酸基穿心莲内酯(14-deoxy-12(R)-sulfo and rographolide,Ⅷ)、肉桂酸(cinnamic acid,Ⅰ)、对羟基肉桂酸(p-hydroxycinnamic acid,Ⅱ)、丁二酸(succinic acid,Ⅲ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅳ)、胡萝卜甙(daucosteol,Ⅴ)、葡萄糖(gluose,Ⅵ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅶ)。Ⅷ为在玄参中首次发现的天然化合物。

RP-HPLC法同时测定复方苦木消炎片中5种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定复方苦木消炎片（穿心莲和苦木）中5种成分的含有量。方法该药物50%乙醇提取液的分析采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相乙腈（A）-0.1%磷酸（B）,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长254 nm（0~26 min,4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮）、225 nm（26~40 min,穿心莲内酯）、205 nm（40~55 min,新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯）。结果4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮、穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯分别在0.055~1.378、0.099~2.470、0.045~1.115、0.041~1.030、0.073~1.813μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.6%、99.1%、97.1%、101.0%、97.8%,RSD（n=6）分别为1.3%、0.98%、1.3%、1.6%、1.7%。结论该方法简便快捷,可用于复方苦木消炎片的质量控制。