伊伐布雷定及去甲伊伐布雷定的血药浓度测定及初步药动学研究

目的：建立高效液相色谱-质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中伊伐布雷定及去甲伊伐布雷定浓度并用于人体药动学研究。方法血浆样品处理均采用乙腈沉淀蛋白法，以地西泮为内标。质谱条件均采用电喷雾离子源（ESI）、正离子和多反应离子监测（MRM）模式进行检测。结果本方法伊伐布雷定线性范围为0.0967～145.0500 ng/ml，r＝0.9971，最低定量浓度为0.0967 ng/ml，去甲伊伐布雷定线性范围为0.0505～30.2700 ng/ml，最低定量浓度为0.0505 ng/ml， r＝0.9975。两者日内、日间RSD均＜15%。提取回收率为＞78.5%。结论该方法简单、灵敏、可靠，适用于伊伐布雷定及去甲伊伐布雷定人体药动学研究。

LC-MS/MS法测定我国健康受试者48h内伊伐布雷定和去甲伊伐布雷定的尿排泄率

目的:研究健康受试者单次和多次口服盐酸伊伐布雷定片后,伊伐布雷定和其活性代谢产物去甲伊伐布雷定的尿排泄特征。方法:10例健康受试者单次和多次口服盐酸伊伐布雷定片5 mg。在服药前以及服药后48 h内分不同时间段采集尿样,记录尿液体积,用LC-MS/MS检测尿液中伊伐布雷定和去甲伊伐布雷定的浓度,计算伊伐布雷定和去甲伊伐布雷定的平均累计排泄率。结果:受试者单次口服盐酸伊伐布雷定片后,尿液中伊伐布雷定48 h的平均累积排泄率为(14.03±4.65)%;去甲伊伐雷定的平均累积排泄率为(2.02±0.44)%。受试者多次口服盐酸伊伐布雷定片,尿液中伊伐布雷定48 h的平均累积排泄率为(22.63±4.01)%;去甲伊伐雷定的平均累积排泄率为(3.60±1.12)%。结论:本研究所建立的LC-MS/MS方法简便、灵敏、专一性强,可以用于尿液中伊伐布雷定和去甲伊伐布雷定的检测。健康受试者口服盐酸伊伐布雷定片后,尿液中以原型及活性代谢产物去甲伊伐布雷定排泄的量较少。

HPLC-MS/MS联用技术定量测定人血浆中伊伐布雷定及其代谢产物

为了定量测定人血浆中伊伐布雷定和去甲伊伐布雷定浓度,建立了HPLC-MS/MS联用方法以地西泮为内标,V(甲醇)∶V水(5mM醋酸铵+1%甲酸)=80∶20的混合溶液为流动相,Diamosil C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式检测。用于定量分析的离子对分别为m/z469.2→177.1(伊伐布雷定),m/z455.2→177.1(去甲伊伐布雷定),m/z285.1→193.1(地西泮)。伊伐布雷定的标准曲线线性范围为0.101 3～101.3μg/L,定量下限为0.101 3μg/L;去甲伊伐布雷定的标准曲线线性范围为0.085～25.5μg/L,定量下限为0.085μg/L。日内、日间精密度的RSD<15%,平均回收率>75%。

伊伐布雷定人体药动学研究

目的评价伊伐布雷定在中国人群中药代动力学特性。方法将30名健康受试者随机平均分为3组,分别给予2.5、5、7.5 mg伊伐布雷定片,给药后8、15、30、45 min和1、1.5、2、3、4、6、9、12、24、36、48 h分别采集静脉血,并用HPLC-MS/MS法进行血药浓度检测。结果单次口服盐酸伊伐布雷定片后,血浆中伊伐布雷定的t1/2为(4.4±1.0)、(5.2±1.2)、(4.6±1.2)h;C max为(15.1±4.1)、(35.9±8.9)、(48.2±9.6)ng·ml-1;AUC(0～48)为(64.4±14.2)、(169.6±33.1)、(215.6±55.6)ng·h·ml-1;去甲伊伐布雷定的t1/2为(7.9±1.4)、(9.9±1.2、(9.8±1.3)h;C max为(1.8±0.7)、(3.1±1.6)、(6.3±1.0)ng·ml-1;AUC(0～48)为(13.4±2.8)、(23.9±9.4)、(44.1±9.2)ng·h·ml-1。结论 2.5～7.5 mg伊伐布雷定片在中国人群体内代谢呈线性动力学。

LC-MS/MS法测定人血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物的浓度

目的：建立测定人血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物浓度的方法。方法：血样以叔丁基醚提取后,采用液-质联用（LC-MS/MS）法进样测定。色谱柱为Waters C18,流动相为5 mmol/L醋酸铵-甲酸-甲醇（70∶0.1∶30）,流速为0.3 ml/min,柱温为30℃,内标为氨溴索;采用电喷雾离子化（ESI）离子源,以多反应监测（MRM）模式检测,伊伐布雷定、去甲伊伐布雷离子对的m/z分别为469.2/177.1、455.2/177.1。结果：伊伐布雷定、去甲伊伐布雷定血药浓度分别在0.48~120、0.16~40 ng/ml范围内线性关系良好（r分别为0.999 8和0.999 7）;方法回收率分别为96.35%~98.33%、96.20%~102.50%;日内、日间RSD均〈7%;血浆样品长期冻存（-20℃冷冻1个月）稳定性良好,反复冻融3次及室温放置4 h条件下,样品浓度均无显著变化。结论：本方法快速、简便、灵敏、准确,可用于伊伐布雷定的药动学研究。