5-杂氮脱氧胞苷去甲基化作用对白血病细胞株HL-60中SHP-1和C-kit基因表达的影响

本研究旨在探讨SHP-1及C-kit基因在急性白血病HL-60细胞中的表达情况及5-杂氮脱氧胞苷(5-azaCdR)去甲基化作用对SHP-1及C-kit表达的影响。用RT-PCR方法检测药物处理组HL-60细胞与对照组SHP-1、C-kit基因的mRNA的表达水平。用甲基化特异性聚合酶链反应(M SP)检测HL-60细胞中SHP-1、C-kit基因的甲基化状态改变。结果表明,在原本不表达SHP-1 mRNA的HL-60细胞中,经过5-aza-CdR的去甲基化作用后,SHP-1可以重新表达,而使原来高表达的C-kit mRNA水平下降。当0.5、1、2μmol/L 5-aza-CdR分别作用于白血病细胞株时,去甲基化作用增强,SHP-1 mRNA的表达水平呈上升趋势,C-kit mRNA的表达水平呈下降趋势,两两比较表明差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HL-60细胞株中SHP-1 mRNA表达缺如,经去甲基化作用后表达恢复,说明SHP-1基因高度甲基化与白血病发生有关;白血病形成中可能存在C-kit mRNA表达的异常增高。5-aza-CdR对SHP-1与C-kit的表达水平的影响呈剂量依赖性,浓度越高,SHP-1平均表达水平越高,C-kit mRNA表达水平越低,在特定的一个浓度下,呈现时间依赖性。SHP-1 mRNA与C-kit mRNA表达呈负相关,提示白血病细胞中SHP-1表达的降低或缺如消弱了对C-kit信号通路的负调控而在白血病形成中发挥作用。

AsO3对Molt—4细胞系P15^IMK4b基因的去甲基化作用

目的：探讨砷剂与甲基化及基出表达的关系。方法：以As2O3处理因高甲基化致P15^IMK4b基因失活的T淋巴母细胞白血病细胞系Molt-4细胞，采用甲基敏感酶限制件酶切PCR、RT-PCR、流式细胞仪和免疫细胞化学染色检测加药前后门5基出洲A甲基化、dmA和蛋自表达的变化及对细胞周期的影响。结果：As2O3处理48h后，P15基因甲基化减低至消失，P15mRNA恢复表达，P15蛋自表达增加26．12％(P<0．05)，细胞阻滞于Gn、G4期。结论：As2O3可通过去除P15抑癌基因甲基化、恢复其表达治疗白血病。

槲皮素对膀胱癌细胞生长抑制相关基因的去甲基化作用

本研究观察槲皮素对膀胱癌细胞的增殖抑制效应及对肿瘤细胞生长相关基因高甲基化程度水平的影响，阐明槲皮素抗膀胱癌细胞的相关机制。

普鲁卡因酰胺诱导肝癌细胞启动子区甲基化的GSTP1基因重新表达

目的 研究HepG2肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化与GSTP1基因表达的关系 ,并探讨普鲁卡因酰胺用于诱导因甲基化失活的GSTP1基因重新表达的可能性。方法 分别用 5 -杂氮 - 2′ -脱氧胞苷 (5 -Aza -CdR)和普鲁卡因酰胺处理HepG2细胞后培养 ,甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞中GSTP1基因的甲基化状况 ,RT -PCR和Westernblot分别检测细胞中GSTP1mRNA和GST -π的表达。结果 HepG2细胞在去甲基化药物处理前 ,GSTP1基因完全甲基化 ,GSTP1基因不表达 ;药物处理后 ,普鲁卡因酰胺组和 5 -Aza -CdR组GSTP1基因有表达。结论 肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化可抑制GSTP1基因表达 ,普鲁卡因酰胺与 5 -Aza

5-氮-2′-脱氧胞苷诱导膀胱癌BIU87细胞RASSF1A基因的表达

5-氮-2’-脱氧胞苷（5-Aza—CdR）是一种特异性甲基转移酶抑制剂，通过去甲基化作用可使多种CpG岛高甲基化的抑癌基因重新表达恢复抑癌功能。本研究旨在观察5-Aza-CdR对膀胱癌BIU87细胞RASSF1A基因表达的影响。

地汐他滨治疗骨髓增生异常综合征的研究进展

地汐他滨（decitabine）又称为5-杂氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-2＇-deoxycytidine，5AZA-CdR），是一种2＇-脱氧胞苷类似物。1964年由Pliml和Storm首次合成。1968年研究证实地汐他滨有抗肿瘤活性且表现为剂量相关的双重机制，高浓度时具有细胞毒作用，低浓度时具有去甲基化作用。1993年Zagonel等报道小剂量地汐他滨治疗骨髓增生异常综合征（MDS）有效，地汐他滨治疗MDS的临床疗效在随后的临床试验中得到了进一步肯定。2006年5月2日FDA已批准地汐他滨用于MDS治疗。我们就地汐他滨药理学及近年来在MDS中的临床研究进展作一综述。