高效液相色谱串联质谱法测定人尿液中左旋苯环壬酯及其代谢物去甲基左旋苯环壬酯的浓度

目的:建立高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS法)同时测定人尿液中左旋苯环壬酯及其代谢物去甲基左旋苯环壬酯的浓度。方法:尿液样品利用自动化固相萃取仪进行处理,提取液直接进样,使用HPLC-MS/MS测定。采用SHIMADZU Shim-Pak XR C8(2.1 mm×50 mm,2.2μm)色谱柱,乙腈-0.5%甲酸水溶液为流动相以,梯度浇脱,流速0.4 mL·min-1,柱温40℃,进样量20μL。电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),左旋苯环壬酯、去甲基左旋苯环壬酯及内标d3-左旋苯环壬酯的检测离子对分别为:m/z 358.2→156.2、m/z 344.2→142.2和m/z 361.0→159.0。结果:尿液中左旋苯环壬酯和去甲基左旋苯环壬酯线性范围分别为10~4000 pg·m L^(-1)和25~8000 pg·m L^(-1),标准曲线的相关系数(r2)均大于0.99。批内、批间精密度及准确度的相对标准差和相对误差均小于15%,尿液基质对左旋苯环壬酯和去甲基左旋苯环壬酯测定无干扰。结论:本研究建立HPLC-MS/MS法同时定量测定人尿液中的左旋苯环壬酯和去甲基左旋苯环壬酯,灵敏度高,特异性强,耗时短,能够快速测定尿液样品,提供准确可靠的分析结果,已成功应用于临床样品的分析。临床研究结果显示,中国健康受试者单次服用1 mg和2 mg左旋盐酸苯环壬酯片后,尿液中左旋苯环壬酯的48 h累积排泄量分别为(0.185±0.150)μg和(0.598±0.352)μg。

HPLC法测定盐酸左旋去甲基苯环壬酯片的含量及有关物质

目的：建立盐酸左旋去甲基苯环壬酯（ demethyl levophencynonate hydrochloride，L-LPC）片的含量及有关物质的分析方法。方法采用高效液相色谱法；色谱柱Capcel PAK C18柱， MGⅡ5μm，4．6 mm ×250 mm，Col：No．A4AD 02992（Shiseido，日本）；流动相甲醇∶乙腈∶0．05 mol/L醋酸钠缓冲溶液（pH 5．0）为4∶3∶3；流速1．0 ml/min；检测波长220 nm；进样量20μl；柱温为室温。结果方法回收率为（100．15±0．73）％；溶液在8 h保持稳定（RSD为0．36％）；在0．1～50μg/ml范围内线性关系良好，其回归方程为Y＝81558X-4768．3（R2＝1，n＝3）。结论所建立的方法简便、准确、灵敏，专属性强，为该制剂含量测定、半成品测定及制剂稳定性研究提供了方法学依据。