去甲斑螯素与淫羊藿颗粒剂联合对原发性肝癌的效果

目的:探讨去甲斑螯素与淫羊藿颗粒剂联合对原发性肝癌的临床效果。方法:选取2017年1月~2021年9月福建中医药大学附属人民医院收治的原发性肝癌患者90例纳入本次研究,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组45例。对照组单独应用淫羊藿颗粒剂治疗,治疗组则给予去甲斑螯素与淫羊藿颗粒剂联合的方案治疗。治疗3个月后,比较两组近期疗效、肝功能及相关指标、远期生存情况。结果:治疗3个月后,治疗组的近期总有效率、白蛋白(ALB)高于对照组,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、甲胎蛋白(AFP)均低于对照组,差异存在统计学意义(P<0.05)。经24个月回访后发现,治疗组在6个月、12个月、18个月、24个月时的生存率均高于对照组,平均生存时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对原发性肝癌患者,采取去甲斑螯素与淫羊藿颗粒剂联合的给药方案后效果显著,能有效改善肝功能,延长其生存时间。

去甲斑螯素联合索拉菲尼对原发性肝癌的疗效分析

目的探究去甲斑螯素联合索拉菲尼对原发性肝癌(PHC)患者肝肾功能、白细胞水平及肝纤维化的影响。方法回顾性分析2015年1月至2019年8月该院收治的86例不可切除性PHC患者的临床资料,根据治疗方案的不同将86例PHC患者分为研究组和对照组,每组各43例,对照组在经肝动脉化疗栓塞术(TACE)后给予索拉菲尼治疗,研究组在对照组基础上给予去甲斑螯素治疗,两组均连续用药12周。比较两组临床疗效、不良反应、白细胞计数(WBC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、清蛋白(ALB)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、肝胆酸(CG)、透明质酸(HA)、三型前胶原肽(PC3)、层粘连蛋白(LN)、肝脏弹性值。结果研究组治疗总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前两组血清ALT、AST、ALB、BUN、SCr、WBC、CG、HA、PC3、LN水平、肝脏弹性值比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组血清ALT、AST、CG、HA、PC3、LN水平、肝脏弹性值较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组血清ALB、BUN、SCr、WBC水平较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后研究组血清ALT、AST、CG、HA、PC3、LN水平、肝脏弹性值较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后研究组血清ALB、BUN、SCr、WBC水平较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组总不良反应发生率略高于对照组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论去甲斑螯素联合索拉菲尼治疗PHC疗效确切,可有效改善患者肝肾功能,提高机体白细胞水平,减轻肝纤维化的发生,安全性良好,建议推广。

去甲斑螯素诱导的PP2A的抑制对提高CNE1的放射活性的影响

目的研究去甲斑螯素所诱导的蛋白磷酸酶2A(PP2A)的抑制对鼻咽癌细胞系CNE1及其裸鼠移植瘤放射增敏的影响。方法采用免疫共沉淀、流式细胞术等方法探讨去甲斑螯素(40μmol·L^(-1))或(和)放射处理(8 Gy)对鼻咽癌细胞CNE1及其裸鼠移植瘤PP2A活性、细胞周期、凋亡的影响情况,研究去甲斑螯素抑制PP2A后于放射作用下所诱导的鼻咽癌细胞CNE1及其移植瘤组织生物学现象的变化。结果去甲斑螯素协同放射处理相比较其他各处理组,G2/M期细胞显著聚集增多(45.71±2.015)%,凋亡率也明显提高(75.63±6.11)%,裸鼠移植瘤抑瘤率达到87.64%。结论 PP2 A的抑制显著诱导鼻炎癌细胞的凋亡与延迟移植瘤的生长,其很有可能成为提高鼻咽癌放射增敏作用的新靶点。

去甲斑螯素复合人工骨的理化性质及体内置入实验

[目的]测试复合去甲斑螯素(NCTD)的生物陶瓷理化性能并研究NCTD复合人工骨对成骨性能的影响和生物安全性。[方法]将10μg/ml的NCTD溶液,浸泡多孔生物陶瓷,并风干、冷冻干燥。分别对复合NCTD多孔生物陶瓷及普通生物陶瓷进行理化数据测量,包括气孔率、力学强度、钙磷比测定。将NCTD生物陶瓷置入骨缺损模型动物体内,取出标本进行组织学V-G染色,观察其对成骨性能的影响。定期检测动物的血常规、肝功能,评价置入物的生物毒性。[结果]复合NCTD后生物陶瓷,钙磷比由1.51变为1.49,力学强度由3.28 MPa变为3.20 MPa,空白与复合NCTD陶瓷上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。随置入时间延长,组织切片显示两组置入物残余明显减小,而新生骨量增加。在置入空白与复合NCTD生物陶瓷后,白细胞及血清谷丙转氨酶术前、术后1周、术后2周各时间点无明显变化,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]复合NCTD后的多孔生物陶瓷理化性质较普通生物陶瓷无差异。具有良好的促骨生长能力,无生物毒性。

去甲斑蝥素-泊洛沙姆407缓释剂和无水乙醇的肝癌瘤内注射疗效比较

目的 :观察去甲斑蝥素 -泊洛沙姆 40 7(NCTD- P40 7)缓释剂瘤内注射治疗中晚期肝癌的疗效。方法 :将 5 6例癌灶最大直径为 6～ 12 cm的中晚期肝癌患者随机分为 2组 ,治疗组 (2 9例 )在超声引导下经皮肝穿刺瘤内注射 NCTD- P40 7缓释剂和对照组 (2 7例 )瘤内注射无水乙醇 ,进行临床疗效观察比较研究。结果 :在生活质量、实体瘤变化及实验室指标变化方面 ,两组疗效比较无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;在生存期方面 ,12个月生存率治疗组为 31.0 % ,对照组为 2 2 .2 % ,有显著性差异 (P<0 .0 5 )。在毒副反应方面 ,两组均未出现明显的毒副作用。 结论 :NCTD- P40 7缓释剂局部瘤内注射治疗可高浓度长时间作用于瘤体 ,对较大的中晚期肝癌具有一定疗效 ,且综合疗效优于无水乙醇瘤内注射。

去甲斑蝥素诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡的研究

目的研究新型抗癌药物去甲斑蝥素抑制人肝癌（ＢＥＬ－７４０２）细胞生长的机制。方法从细胞的形态学观察和ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳等方面考察去甲斑蝥素作用人肝癌细胞的特点，并进一步用免疫细胞化学及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ等分析手段研究癌基因蛋白Ｂｃｌ－２在此过程中的表达情况。结果１０ｍｇ／Ｌ去甲斑蝥素作用人肝癌细胞２４ｈ，部分细胞出现固缩、细胞质膜突起、核染色质异常凝集等，并伴有膜包被的凋亡小体的形成。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳显示，处理组部分细胞的ＤＮＡ已降解成以约２００ｂｐ为基数的ＤＮＡ片断，呈现典型的“梯状”带纹。免疫细胞化学及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析显示该过程伴随癌基因蛋白Ｂｃｌ－２表达的减弱。结论新型抗癌药物去甲斑蝥素可以诱导人肝癌细胞发生凋亡。

去甲斑蝥素诱导人黑色素瘤A375S2细胞凋亡

目的:研究去甲斑蝥素(NCTD)诱导人黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的机制。方法:采用MTT法、形态学观察、DNA凝胶电泳及Westernblot检测法。结果:去甲斑蝥素可诱导A375-S2细胞发生凋亡。半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase)-3,-9抑制剂可以部分的抑制NCTD诱导的细胞死亡。细胞凋亡时caspase-3,8,-9酶活力升高,caspase3底物caspase-3激活的DNA酶抑制物(ICAD)蛋白表达下降,同时Bcl2/Bax、BclxL/Bax蛋白表达比率明显降低。结论:去甲斑蝥素通过激活caspase和Bcl-2家族诱导A375-S2细胞凋亡。

去甲斑蝥素对人乳腺癌细胞MCF-7的杀伤效应及其可能机制

用１０μｇ／ｍＬ去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）作用于人乳腺癌细胞，以ＭＴＴ法、流式细胞仪、台盼蓝排斥法和透射电镜等方法分别观察ＮＣＴＤ对癌细胞的增殖抑制作用及对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果表明：ＮＣＴＤ对乳腺癌细胞的杀伤作用有时间和剂量依赖性，药物作用２４ｈ后，Ｇ１期细胞减少，Ｇ２＋Ｍ期细胞明显增多，凋亡细胞百分比升高并可见到凋亡细胞的形态学变化。

去甲斑蝥素与单克隆抗体偶联物治疗肝癌实验研究

用大鼠单克隆抗体３Ａ５与去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）制备偶联物。ＥＬＩＳＡ检测结果表明：３Ａ５ＮＣＴＤ偶联物保持对人肝癌ＢＥＬ７４０２细胞和小鼠肝癌Ｈ２２细胞的免疫反应性。克隆生成法测定结果显示：３Ａ５ＮＣＴＤ具有比ＮＣＴＤ更强的细胞毒性。小鼠腹腔内移植肿瘤，ｉｐ给药，３Ａ５ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）和ＮＣＴＤ的ＩＬＳ值分别为１１１％和３７％。结果说明在对腹腔肿瘤的治疗方面３Ａ５ＮＣＴＤ具有比游离ＮＣＴＤ更强的治疗作用。裸鼠移植ＢＥＬ７４０２人肝癌，ｉｖ给药，ＮＣＴＤ肿瘤抑制率为１５％（Ｐ＞００５），３Ａ５ＮＣＴＤ为６２％（Ｐ＜００１）；ｐｔ给药，ＮＣＴＤ肿瘤抑制率为４７％（Ｐ＜００５），３Ａ５ＮＣＴＤ为７８％（Ｐ＜００１）。与ＮＣＴＤ相比３Ａ５ＮＣＴＤ对裸鼠移植人肝癌具有更强的治疗作用。在给药途径方面，治疗效果ｐｔ强于ｉｖ。以上结果提示单克隆抗体与ＮＣＴＤ偶联物在肿瘤的导向治疗中有较好的疗效。

不同剂型去甲斑蝥素急性肝肾毒性比较实验

目的：比较去甲斑蝥素缓释注射剂型与常规注射液的急性肝肾毒性，为缓释剂型的临床应用提供实验依据。方法：72只小鼠随机分为4组，分别腹腔注射等量去甲斑螫素缓释制剂和常规水剂及药物缓释辅料泊洛沙姆407、生理盐水，术后取小鼠肝肾行肉眼及光镜检查。结果：注射去甲斑蝥素缓制剂组小鼠的肝肾病理变化明显轻于常规注射液组。结论：缓释制剂由于其中的去甲斑蝥素释放缓慢，避免了峰值血药浓度出现，肝肾毒性低于常规注射制剂。

去甲斑蝥素合成工艺的改进

去甲斑蝥素显一种具有升白作用的新型抗肿瘤药物，由呋喃与马来酐按Diels-Alder加成反应后催化氢化制得。本工艺改变反应溶媒、物料配比及催化剂条件后，总收率可达95．8％以上。

去甲斑蝥素对去势骨质疏松症小鼠骨微结构影响的研究

目的观察去甲斑螯素对去势骨质疏松症小鼠骨微结构的影响,探讨其防治骨质疏松症的可行性。方法40只雌性C57BL-6J 2月龄小鼠随机分为低剂量组、高剂量组、假手术组和去卵巢组,每组10只。除假手术组外,其它3组均通过摘除双侧卵巢建立小鼠骨质疏松模型。建模8周后,各组每日对应给予腹腔注射相应浓度的去甲斑螯素溶液或0.9%氯化钠注射液,连续注射4周。处死各组小鼠后用显微CT检查分析小鼠股骨远端骨小梁骨密度、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁间隔(Tb.Sp)。结果去卵巢组骨小梁骨密度、BV/TV、Tb.N、Tb.Th均低于假手术组,Tb.Sp高于假手术组(均P<0.05);低剂量组与高剂量组骨小梁骨密度、BV/TV、Tb.N、Tb.Th均高于去卵巢组,Tb.Sp均低于去卵巢组(均P<0.05)。结论去甲斑螯素能有效减少卵巢摘除引起的骨量丢失,具有剂量依赖性,是一种治疗骨质疏松症的一种潜在选择。

去甲斑蝥素通过Nrf2通路保护新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的机制

目的探究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)预处理介导核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的保护作用。方法60只新生幼鼠分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组12只。用不同剂量NCTD预处理低、中、高剂量组幼鼠,假手术组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃。除假手术组外,其余各组均构建缺氧缺血性脑损伤模型,造模成功后,分别检测各组大鼠神经功能评分、脑积水量、神经细胞凋亡率、氧化应激指标[丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-P_(x))]、炎症因子指标[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]、Nrf2、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)和醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,各组缺氧缺血幼鼠神经功能评分均显著下降(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,幼鼠神经功能评分显著改善(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠脑积水量和神经细胞凋亡率显著增加(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,幼鼠脑积水量和神经细胞凋亡率随之降低(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠氧化应激指标MAD含量显著上升,SOD和GSH-P_(x)含量显著下降(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,MDA含量随之下降,SOD和GSH-P_(x)含量随之上升(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠炎症因子指标IL-6和TNF-α水平显著上升,IL-10水平显著降低(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,IL-6和TNF-α水平随之降低,IL-10水平随之升高(P<0.05),与假手术组相比,各组幼鼠脑组织内Nrf2、HO-1和NQO1蛋白的表达水平显著降低(P<0.05),而与模型组相比,NCTD预处理的低、中和高剂量组幼鼠脑组织内Nrf2、HO-1和NQO1蛋白的表达显著上升,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论NCTD通过激活Nrf2信号通路,抑制炎症反应和氧化应激反应,对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有较好的脑保护作用。

去甲斑蝥素通过双向调控骨吸收和骨形成用于防治骨质疏松症的体外研究

目的 通过观察去甲斑螯素对成骨细胞和破骨细胞的作用,探讨其在防治骨质疏松症中的作用.方法 将小鼠胚胎成骨细胞前体细胞分为对照组、模型组、低剂量组和高剂量组,高、低剂量组分别予以0.1 μmol/L、1 μmol/L 去甲斑蝥素干预.小鼠胚胎成骨细胞前体细胞用成骨培养基诱导,非对照组用脂多糖进行干预,3周后通过茜素红染色、碱性磷酸酶(ALP)染色检验成骨变化.骨髓来源巨噬细胞(BMMs)提取自6周龄的C57BL-6J小鼠,非对照组细胞培养基加入50 ng/ml RANKL向破骨细胞诱导6 d,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、细胞骨架染色观察破骨细胞形态及活性.结果 ALP染色和茜素红染色显示,与模型组比较,去甲斑螯素干预组具有更强的碱性磷酸酶活性和更多的矿化结节,可有效改善脂多糖对成骨分化和矿化的抑制作用,增强成骨细胞活性.通过TRAP染色和细胞骨架染色观察,可见与模型组比较,去甲斑螯素干预后,成熟破骨细胞的数量和面积均显著减少,抑制了破骨细胞分化.结论 去甲斑螯素能通过剂量依赖性可有效增强成骨细胞活性,促进骨形成,并显著抑制破骨细胞生成,是一种治疗骨质疏松的理想药物.

中医药”全程“抗癌方略——访上海市名中医凌昌全教授

正是知天命之年的凌昌全教授，久负盛名。他在中医药防治肿瘤尤其是肝癌领域积累了丰富的临床经验，先后研制出甘枣宁、三石猫胶囊、四生汤口服液和去甲斑螯素缓释剂等抗癌药物，22年立志抗癌。为数以万计的肿瘤患者提高生活质量、延长宝贵的生命付出了自己的智慧和心血。