去血浆血小板和保存前去白细胞血小板的急性反应率的一项随机对照研究

背景 输血前去除血小板血浆层可有效预防细胞因子引起的急性输血反应。保存前去白细胞血小板中由于去除了白细胞以及细胞因子未积聚在成分中,预防输血反应的效果更好。本研究评估了去血浆以及两种保存前去白细胞预防急性血小板输血反应方法的效果。研究设计和方法 输注血小板的患者为恶性血液病的成人,随机输注以下3种血小板之一:去除血浆层加入血小板保存液的血小板;

去白细胞血小板输注与血小板输注无效的临床分析

目的观察应用白细胞滤器输注血小板的临床效果,提出血小板输注无效的预防措施。方法采用白细胞滤器输注血小板;检测输注前及输注后1h、24h血小板计数,HLA和HPA抗体阳性率及输注血小板无效率。结果观察组320例,有效例258例(80.62%),无效62例(19.38%)。对照组300例,有效103例(34.33%),无效197例(65.77%)。经统计学处理两组有效率、无效率有差异显著性(P<0.05);结论去白细胞血小板输注可提高血小板输注有效率,加强血小板抗体筛查可降低免疫性输注血小板无效发生率。

4℃保存全血制备的去白细胞混合浓缩血小板体外质量评价

目的 探讨全血4℃冷藏条件下保存制备去白细胞混合浓缩血小板的可行性,为成分制备提供理论依据。方法 将采集的400 mL ACD-B抗凝全血随机分两组,分别进行4℃和室温保存,在保存后6 h内分离制备出白膜层,于22℃静置过夜保存,次日将白膜层汇集制备去白细胞混合浓缩血小板,于制备后d1、d3、d5、d7取样,进行血细胞计数及相关参数检测,测定pH、葡萄糖、乳酸含量反映代谢情况,检测血栓弹力图、血小板聚集率及PAC-1、CD62P反映血小板体外功能及活化情况,比较两组血小板差异。结果 随着保存时间的延长,两组去白细胞混合浓缩血小板计数逐渐下降,血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)、大型血小板比例(P-LCR)均逐渐上升,差异无统计学意义(P>0.05)。两组去白细胞混合浓缩血小板pH、葡萄糖含量均逐渐降低,乳酸含量逐渐增高,无显著性差异(P>0.05)。血栓弹力图结果显示,反应血小板功能的MA值保存期内无显著性变化,且两组间无显著性差异(P>0.05)。血小板聚集率随着保存时间的延长而逐渐降低,两组无统计学差异。血小板PAC-1及CD62P表达率随着保存时间的延长而逐渐升高,两组无统计学差异(P>0.05)。结论 全血4℃冷藏保存与室温保存6 h内制备的去白细胞混合浓缩血小板在体外计数、功能、活化方面无统计学差异,4℃冷藏6 h内的全血可考虑作为制备去白细胞混合浓缩血小板的起始血液。

去白细胞单采血小板保存期外泌体形态及蛋白质组学分析

目的探讨去白细胞单采血小板(leukocyte-free apheresis platelet,LFA-Plt)保存期内所释放的外泌体(exosome,EXO)形态及蛋白组学变化,评价血小板保存质量,预测不同保存期血小板EXO功能。方法超速离心法提取EXO,并对其进行电镜、粒径、WB鉴定;4D Label-free定量蛋白质组学技术对EXO进行蛋白定量分析,并对所有鉴定到的蛋白质进行生物信息学分析;对保存d3、d5两组LFA-Plt EXO进行蛋白差异分析并对差异蛋白进行GO功能和KEGG通路显著性富集分析。结果成功获取杯托状、CD9/TSG101富集、Calnexin(-)的EXO;保存d3、d5的LFA-Plt EXO粒径分别为(82.2±19.6)nm、(83.4±19.4)nm;蛋白浓度分别为(0.55±0.13)μg/μL、(0.51±0.08)μg/μL,差异无统计学意义(P>0.05);两组样品中共鉴定到1504个蛋白质,GO功能富集分析显示,LFA-Plt所分泌的EXO蛋白主要集中在细胞膜、胞外区以及蛋白酶体核心复合体,与蛋白、ATP、钙离子及GTP结合能力相关,主要参与氧化还原、蛋白质水解、信号转导等过程;KEGG功能注释显示,EXO蛋白主要参与物质运输、分解代谢及遗传信息的处理,与人类肿瘤及病毒细菌感染密切相关,影响人类免疫系统的代谢;与d3相比,d5 EXO有16个蛋白显著上调;GO富集分析显示16种上调蛋白主要与腺苷同型半胱氨酸活性、6-磷酸果糖激酶活性相关,主要参与有机氮化合物代谢过程;KEGG富集通路分析显示保存末期LFA-Plt EXO上调的蛋白最主要功能是参与孕酮介导的卵母细胞成熟的信号通路。结论本中心LFA-Plt制备、保存条件下血小板质量能够保持相对稳定;不同保存期EXO蛋白质功能有一定差别,可能影响血小板输注效果。

去白细胞混合浓缩血小板制备的质量控制及临床应用效果观察

目的对去白细胞混合浓缩血小板制备质量及临床应用效果进行调查。方法将白膜法制备的去白细胞混合浓缩血小板实验组(40例)的质量及临床应用效果与去白细胞单采血小板对照组(40例)的质量及临床应用效果进行对比。结果经检测实验组和对照组的血小板容量(mL)、血小板计数(×10^(11))、红细胞混入量(×10^(8))和白细胞残留量(×10^(6))分别为278.90±7.92 vs 276.52±8.01、2.66±0.09 vs 2.66±0.83、0.54±0.42 vs 0.83±0.84、0.29±0.54 vs 0.27±0.51,二者之间表现并无显著差别,且细菌培养结果均为阴性,均符合国家相关标准要求;另在临床应用效果评价指标CCI(×10^(3),24h)和PPR(%)上分别为15.11±9.86 vs 14.61±12.55和54.23±18.70 vs 61.41±19.09,二者之间表现亦无显著差别,可达到一定程度的治疗效果。结论去白细胞混合浓缩血小板质量及临床治疗效果与去白细胞单采血小板质量及临床治疗效果一致。

不同血细胞分离机采集去白细胞单采血小板血液质量监测情况分析

目的通过对去白细胞单采血小板的质量监测,评估不同血细胞分离机采集去白细胞单采血小板的血液质量,为各血站在单采献血服务选择机型时提供可靠的参考依据.方法选取2018年1月至2020年12月福建省血液中心监测的3种不同机型血细胞分离机采集的去白细胞单采血小板标本共360份,对去白细胞单采血小板容量、血小板含量、红细胞混入量、白细胞残留量、无菌试验的监测结果进行比对;选取2018年1月至2020年12月福建省血液中心监测的52袋ALT不合格去白细胞单采血小板进行储存期末pH进行对比.结果机型B的容量明显高于机型A和机型C,差异有统计学意义(F=32.09,P<0.01),但是机型A与机型C比较,差异无统计学意义(P>0.05).机型A、B、C的血小板含量之间差异有统计学意义(F=8.58,P<0.01),血小板含量机型C明显高于机型B(P<0.01),也高于机型A(P<0.05),但是机型A与机型B比较,差异无统计学意义(P>0.05).3种机型的红细胞混入量、白细胞残留量对比,差异无统计学意义(P>0.05).无菌试验中无细菌生长.容量、血小板含量、红细胞混入量、白细胞残留量、储存期末pH达标率均大于75%.结论3种血细胞分离机采集的去白细胞单采血小板其采集过程和制备过程受控,血液产品的各项监测指标均能符合去白细胞单采血小板质量监测的要求,能为临床提供合格、有效、安全的血液,各血站可根据实际工作需求选择不同的血细胞分离机.

2种血小板型去白细胞过滤器的滤白效果分析

近年来,我国临床主要应用单采血小板,随着医院用血量的不断增加,单采血小板的供应越来越不能满足临床的需求,血站系统不得不开发思路,寻求利用手工采集全血中血小板资源的方法。传统的手工血小板是将手工采集的单袋全血中的血小板提取出来,制备成单人份手工血小板,由于单人份手工血小板含量低,患者需要输注数袋才能达到血小板的治疗效果,并且需要交叉配血,反复穿刺易污染细菌等。

用BacT／ALERT塑料培养瓶检测去白细胞的全血富血小板血浆（PRP）的血小板

背景对来源于PRP的血小板保存前不能混合作细菌学检测有一定难度。本研究使用9种污染性生物，来验证BacT／ALERT在检测混合的源于PRP的血小板的数据。设计和方法蜡样芽孢杆菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粘氏沙雷氏菌、草绿色链球菌。

混合去白细胞浓缩血小板与单采血小板的质量和临床疗效比较

目的探讨混合去白细胞浓缩血小板的质量和临床输注疗效,为混合去白细胞浓缩血小板临床应用提供依据。方法采用白膜法离心(buffy coat,BC)制备浓缩血小板,利用无菌接管机将7袋浓缩血小板汇集成一袋,用一次性血小板型白细胞过滤输血器材进行过滤,并转移到保存袋内,即制备成混合去白细胞浓缩血小板(容量350~400 mL/袋,血小板含量≥2.5×10^(11)个/袋)。将混合去白细胞浓缩血小板与同期采集的单采血小板进行容量、血小板含量、pH值、红细胞混入量、白细胞混入量及无菌试验等质量指标的比较。同时比较两种血小板制品输注24 h后CCI(校正的血小板计数增加值)、PPR(血小板回收率)、出血症状改善情况和输血不良反应发生率。结果混合去白细胞浓缩血小板与单采血小板在血小板含量、pH值、红细胞混入量及无菌试验比较无统计学意义(P>0.05);混合去白细胞浓缩血小板白细胞混入量少于单采血小板(P<0.05),但容量大于单采血小板(P<0.05)。两种血小板制品在输注24 h后CCI、回收率、出血症状改善和输血不良反应发生率方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用白膜法制备的混合去白细胞浓缩血小板各项质量指标符合国家标准,临床疗效显著,且白细胞含量低,可有效减少输血不良反应。

输注去白细胞血小板防止发热反应的细胞因子分析

血小板输注为当前恶性肿瘤化疗和造血干细胞移植的患者最主要的支持治疗,去除白细胞单采血小板的推广应用,给需要多次输注血小板者,减少由制备与贮存过程中白细胞释放的细胞因子而引起非溶血性发热输血反应（febrile non-hemolytic transfusionreactions,FNHTR）〔1-2〕。本文对输注去白细胞单采血小板后恶性肿瘤化疗和造血干细胞移植患者细胞因子（IL-6、IL-8、TNF-β、sCD62p）的变化分析，探讨这些细胞因子与发热反应的关系，以及对输注去除白细胞单采血小板患者的影响。

去白细胞富血小板血浆联合切开复位内固定术治疗下颌骨正中骨折的疗效分析

目的观察去白细胞富血小板血浆(PRP)联合切开复位内固定术治疗下颌骨正中骨折的疗效。方法选取30例下颌骨正中骨折患者,根据治疗方法将其分为观察组(n=15)和对照组(n=15)。观察组给予去白细胞PRP联合切开复位内固定术治疗,对照组给予切开复位内固定术治疗。比较两组患者的手术时间、术中失血量、术后拆线时间、术后消肿时间、术后满意度,以及术前1 d、术后2 d、术后7 d疼痛视觉模拟量表(VAS)评分。结果两组患者的手术时间、术中失血量差异均无统计学意义(均P>0.05)。观察组术后拆线时间、消肿时间均短于对照组,术后满意度评分高于对照组(均P<0.05)。术后7 d,观察组的疼痛VAS评分低于对照组(P<0.05)。结论去白细胞PRP联合切开复位内固定术治疗下颌骨正中骨折有利于创面愈合,缓解术后疼痛,提高患者满意度,值得临床推广。

去白细胞混合浓缩血小板和单采血小板的临床疗效比较

目的观察去白细胞混合浓缩血小板与单采血小板的临床疗效,为临床科学输注血小板制品提供一定的参考。方法根据输注血小板制品的种类将102名患者分为两组,一组输注单采血小板55例次,另一组输注去白细胞混合浓缩血小板47例次。比较两组患者血小板增加校正指数(CCI)、实际血小板回收率(PPR)及患者出血状况的改善情况。结果输注单采血小板组的CCI>4.5的43例(78.2%),PPR>20%的45例(81.8%),去白细胞混合浓缩血小板组的CCI>4.5的35例(74.5%),PPR>20%的37例(78.7%),两组输注有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。输注单采血小板组的患者出血状况改善或者消失49例(89.1%)与输注去白细胞混合浓缩血小板组的39例(83.0%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论去白细胞混合浓缩血小板与单采血小板在临床应用中都能取得较好的输注疗效。临床应用中应结合各血小板制品的优缺点及患者病情的需要选择合适的血小板制品输注。

单袋浓缩血小板控量对去白细胞混合浓缩血小板质量的影响

目的:探讨单袋浓缩血小板控量对去白细胞混合浓缩血小板质量的影响。方法:选取由300 mL、400 mL全血制备的非控量和控量的1.5 U浓缩血小板96袋、2.0 U浓缩血小板72袋作为研究对象。将其中由非控量下单袋浓缩血小板制备的去白细胞混合浓缩血小板设为对照组,将其中由控量下单袋浓缩血小板制备的去白细胞混合浓缩血小板设为试验组。对比两组去白细胞混合浓缩血小板的各项质量指标。结果:两组去白细胞混合浓缩血小板中血小板的含量、红细胞(RBC)混入量和白细胞(WBC)残留量均符合国家质量标准的要求。两组去白细胞混合浓缩血小板的酸碱度(pH)、血小板含量、RBC混入量及WBC残留量相比,P>0.05。与对照组相比,试验组去白细胞混合浓缩血小板的总容量更少,P<0.05。结论:去白细胞混合浓缩血小板的质量未受到单袋浓缩血小板控量的影响,但对单袋浓缩血小板进行控量可使白细胞混合浓缩血小板的总容量减少。

巨噬细胞与血小板体外抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的增殖

目的体外研究巨噬细胞与去白细胞单采血小板抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)增殖的效率,并初步探讨其作用机制。方法将4×108个/mL MRSA接种至LB培养体系,分为血小板组(每升加入2×10^(11)个去白细胞的单采血小板)、巨噬细胞组(每升加入1×10~9个体外诱导培养的巨噬细胞)、对照组(去白细胞单采血小板和巨噬细胞均不加)。培养不同时间后,检测两组菌液的吸光度值以反映细菌的增殖情况,并在培养2 h时采集菌液,倍比稀释后涂板计数细菌数量;流式细胞术检测血小板对MRSA的捕获,ELISA检测对照组和血小板组中的血小板因子4(PF4)的含量。结果与对照组相比,巨噬细胞组和血小板组均可抑制MRSA增殖,且血小板组的作用更加显著。结论血小板可以在体外抑制MRSA增殖,其抑制效果优于巨噬细胞。

洗涤血小板制备及相关质量功能指标的研究

目的:研究制备满足临床需求的高质量洗涤血小板血液成分。方法:以去白细胞混合浓缩血小板和单采去白细胞血小板为起始血液,通过无菌接驳的方式,采取离心、分离和洗涤,用生理盐水100 mL完成1~2次的静态洗涤,并用200 mL生理盐水对沉淀物进行悬浮、静置、解聚等,并最终制备成洗涤血小板。结果:经质量检测,两种起始血液制备的洗涤血小板在容量、血小板计数、白细胞残留量、红细胞混入量、血浆蛋白质含量、pH值质量指标上均符合国家相关标准要求,在血小板聚集、血小板黏附、血小板氧分压、血小板二氧化碳分压辅助指标的表现上,二者大体一致。结论:在现有标准、技术等框架下,血站行业制备的洗涤血小板质量可靠,可向临床提供洗涤血小板,在适宜条件下可应用于临床治疗。

两种白细胞滤器获取单个核细胞作为实验研究的生物学功能的比较

目的:分析单采血小板去白细胞滤器(apheresis platelet leukoreduction system chambers, LRSCs)和全血去白细胞滤器(whole blood leukoreduction filters, LRFs)所收集的白细胞替代常规人全血白细胞进行实验的相关生物学功能和表型。方法:分别采用直接法和反冲洗获得LRSCs和LRFs白细胞,经人的淋巴细胞分离液进行密度梯度离心,分离出外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)。用CD3激发型抗体和细胞因子白细胞介素2(interleukin, IL-2)体外扩增培养10 d,观察细胞形态、细胞增殖、细胞凋亡,并用流式细胞术(flow cytometry, FCM)进行表型分析,对比两种滤器分离出的白细胞生物学差异。结果:(1)PBMCs镜下观察:LRSCs中细胞较纯,个体大小较均一;LRFs包含部分形态较小的血小板和形态较大的粒细胞。两者细胞活力无差异。(2)LRSCs所分离的PBMCs细胞亚群以淋巴细胞为主,单核细胞次之,含极少量的粒细胞;而LRFs淋巴细胞与粒细胞比例接近,单核细胞较少。初始状态淋巴细胞群体中各细胞亚群表型相似。(3)LRSCsPBMCs细胞,经CD3与IL-2体外刺激后,细胞活化集落大且较均一,而LRFs-PBMCs细胞集落多但分布较散。(4)体外培养第6天、第10天两组滤器间淋巴细胞各亚群表型差异无统计学意义。(5)两种滤器血PBMCs细胞凋亡率类似,且均为早期凋亡细胞比例高于晚期凋亡细胞。(6)经体外扩增培养10d,发现两种滤器血PBMCs细胞增殖速率相当,细胞活力等同。结论:两种滤器所得的白细胞均可用于相关的基础实验研究,且LRFs含有较多的粒细胞,这也为粒细胞的研究工作提供了便利,解决了临床用血与实验用血的需求。

单采血小板制品临床疗效分析与预约模式建立

目的研究不同单采血小板制品的临床用量和疗效,评价向临床提供单采血小板制品预约模式的适宜性。方法分析临床使用冰冻单采血小板与去白细胞单采血小板用量及疗效,探讨向临床提供冰冻单采血小板改为去白细胞单采血小板的做法。结果去白细胞单采血小板疗效要明显优于冰冻单采血小板(P<0.05),支持了建立临床使用去白细胞单采血小板与即约即采预约机制。结论取消冰冻单采血小板,实行并满足临床使用去白细胞单采血小板与即约即采预约机制,是保障临床使用单采血小板制品和疗效的最佳模式。

带蒂骨膜瓣移植与去白细胞富血小板血浆在距骨缺血性坏死手术中的应用

目的总结带血管蒂胫骨远端骨膜瓣移植联合去白细胞富血小板血浆在手术治疗距骨缺血性坏死中应用临床经验。方法回顾性分析自2016-07—2018-06诊治的14例距骨缺血性坏死,术中于胫骨远端前侧切取带血管蒂的骨膜瓣,于胫骨远端前侧凿取骨皮质备用,将松质骨与提取的去白细胞富血小板血浆充分混合后植入骨隧道,再将骨膜瓣转位植入骨隧道并与周围组织缝合固定。结果14例均获得随访,随访时间平均25.8(12~36)个月。切口均一期愈合,未出现感染及神经血管损伤。采用Kenwright标准对术后疗效进行评价:优5例(术前Ficat-Arlet分期:Ⅱ期3例,Ⅲ期2例;症状完全缓解),良8例(术前Ficat-Arlet分期:Ⅱ期3例,Ⅲ期5例;5例症状完全缓解,3例症状部分缓解),可1例(术前Ficat-Arlet分期为Ⅲ期,症状缓解不明显)。结论带血管蒂胫骨远端骨膜瓣移植联合去白细胞富血小板血浆注入手术治疗距骨缺血性坏死临床疗效满意,为手术治疗距骨缺血性坏死提供了一种新的术式选择。

血小板型去白细胞滤器的临床应用

目的血小板抗体是引起血小板输注无效的免疫因素,本研究是通过探讨国产血小板型去白细胞滤器能否降低患者产生血小板抗体的概率和能否推迟患者产生血小板抗体的时间,来评价国产血小板型去白细胞滤器的临床应用价值。方法选取40例近期只输注了3次以上未使用血小板型去白细胞滤器的机采血小板的血液病患者作为非去白细胞组,另选40例近期只输注了3次以上使用血小板型去白细胞滤器的机采血小板的血液病患者作为去白细胞组;2组患者又按血小板不同输注次数均分为a、b、c、d、e 5个组。所有患者均无既往输血史。用固相凝集法分别对每位患者进行血小板抗体筛检。分别计算出非去白细胞组与去白细胞组及其各小组的血小板抗体阳性率。其中,非去白细胞组与去白细胞组的阳性率比较采用χ2检验。结果非去白细胞组有18例患者血小板抗体筛检阳性,阳性率为45.0%(18/40),去白细胞组有5例患者血小板抗体筛检阳性,阳性率为12.5%(5/40);去白细胞组血小板抗体阳性率(12.5%)显著低于非去白细胞组的阳性率(45.0%,χ2=10.31,P<0.05);2组患者血小板抗体阳性率均随着机采血小板输注次数的增加而增加。结论使用国产血小板型去白细胞滤器过滤的机采血小板,能够大大降低患者产生血小板抗体的概率,推迟患者产生血小板抗体的时间,血小板型去白细胞滤器值得临床推广应用。

去白细胞机采血小板的临床疗效分析

目的探讨分析去白细胞机采血小板与单纯机采血小板的临床治疗效果。方法回顾性分析新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市血液中心653例去白细胞机采血小板与单纯机采血小板的治疗效果。结果去白细胞机采血小板组输注总有效率为91.6%,单纯机采血小板组为89.9%;去白细胞机采血小板组发生输血反应及血小板无效输注低于单纯机采血小板组(P<0.05)。结论去白细胞机采血小板输注疗效较手工分离血小板更为安全有效。